SP 003 LABORATORNÍ PŘÍRUČKA. Oddělení imunologie Praha

Transkript

1 Strana č. 1 SP 003 LABORATORNÍ PŘÍRUČKA Zdravotní ústav se sídlem v Ústí nad Labem ÚVOD Laboratorní příručka Zdravotního ústavu se sídlem v Ústí nad Labem poskytuje informace o činnosti ddělení. Obsahuje nabídku služeb, které pracoviště poskytuje v oblasti laboratorního vyšetření a diagnostiky především v oblasti imunologie, alergologie a infekční sérologie. ZÁKLADNÍ INFORMACE je organizační složkou ZÚ se sídlem v Ústí nad Labem. Hlavním cílem pracoviště je poskytovat kvalitní a spolehlivé laboratorní vyšetření, včetně interpretační a konzultační činnosti. Na pracuje tým zkušených a odborně kvalifikovaných pracovníků. Jejich znalosti jsou využívány při práci s moderními analyzátory a při zavádění nových vyšetřovacích metod. Pracoviště se zabývá vyšetřováním parametrů imunitního systému, včetně vyšetření alergologických a specifických protilátek proti některým infekčním agens. Všechna vyšetření jsou hrazena zdravotními pojišťovnami, nebo jsou poskytována za přímou úhradu dle platného ceníku. Pracoviště má uzavřené smlouvy se všemi zdravotními pojišťovnami. Pravidelně se účastní cyklů externích kontrol kvality (např. pořádaných firmou SEKK a SZÚ). Akreditace - pracoviště bylo od roku 2006 akreditováno ČIA o.p.s. pod č dle ČSN EN ISO V únoru 2014 splnilo pracoviště podmínky Auditu II NASKL pro odbornost 813.

2 Strana č. 2 KONTAKTY A PROVOZNÍ INFORMACE Dittrichova Praha 2 KONTAKTY: Jméno Telefon Poznámka Mgr. Ledvinková Jana jana.ledvinkova@zuusti.cz Tolarová Lenka lenka.tolarova@zuusti.cz Mičínová Jana jana.micinova@zuusti.cz Příjem materiálu Laboratoř imunologie Laboratoř sérologie Vedoucí oddělení Vedoucí laborantka Manažer kvality oddělení PŘÍJEM MATERIÁLU: 7:00 14:30 PROVOZNÍ DOBA: 7:00 16:00

3 Strana č. 3 ODBĚRY Pokyny k odběrům krve: odpoledne a večer před odběrem je vhodné vynechat tučné jídlo. Ráno před odběrem je vhodné se napít (1/4 l čaje, vody). Odběr by měl být nejlépe ráno nalačno za aseptických podmínek. TYP ODBĚROVÉHO MATERIÁLU Srážlivá žilní krev BD VACUTEINER PLASTIC žlutý uzávěr PŘÍKLAD POUŽITÍ Vhodné pro většinu vyšetřovaných analytů včetně ECP Plastová zkumavka se separačními granulemi Sarstedt bílý uzávěr Vhodné pro běžná vyšetření k identifikaci protilátek Plastová zkumavka s aktivátorem srážení BD VACUTEINER červený uzávěr Nesrážlivá žilní krev Plastová zkumavka + K 3 EDTA Sarstedt červený uzávěr BD VACUTEINER fialový uzávěr Buněčná imunita Stolice Plastový kontejnerek (zkumavka) Antigen Helicobacter pylori, Kalprotektin Požadavky na odběry pro další vyšetření jsou uvedeny u jednotlivých vyšetření. Doporučené množství krve při primárním odběru: Množství odebrané krve záleží na počtu požadovaných vyšetření. Většinou je to cca na 5 vyšetření cca 5ml sražené krve. Pokud množství materiálu nestačí na požadovaná vyšetření, konzultuje laboratoř s lékařem stanovení preferencí. Pokud není lékař přítomen, stanoví toto pořadí kompetentní VŠ pracovník laboratoře.

4 Strana č. 4 Zvláštní požadavky na odběr, skladování a transport: Odběr na vyšetření buněčné imunity (stanovení počtů T a B lymfocytů, NK buněk) a na vyšetření HLA B-27 Odběr cca 2 ml krve do zkumavky (stříkačky) s K 3 EDTA. Obsah několikrát jemně převrátit, aby došlo k promíchání krve s protisrážlivým činidlem. Vyšetření musí být provedeno nejpozději do 24 hodin po odběru. Vzorek je nutné skladovat a transportovat při pokojové teplotě. Odběr stolice Helicobacter pylori, Kalprotektin Odběr velikosti lískového oříšku. Plastovou lopatičkou se odebere po defekaci stolice velikosti lískového oříšku a uzavře se do plastového kontejneru. Materiál se dopraví do laboratoře, pokud se tak nestane ihned je nutné jej uchovat v lednici. Helicobacter Ag: při zpracování do 72 hodin může být uchovávána v chladničce při teplotě 2-8 C. Calprotectin: 5 dní je možné skladovat v chladničce při teplotě 2-8 C, potom je nutné vzorek zpracovat. Odběr na vyšetření CIK(PEG) Vyšetření musí být provedeno nejpozději do 24 hodin po odběru. V případě pozdějšího transportu je nutné krev stočit a sérum zamrazit. TRANSPORT VZORKU DO LABORATOŘE Svoz biologického materiálu zajišťujeme denně, dle domluveného časového harmonogramu vlastní dopravní službou, případně si zdravotnické zařízení zajišťuje transport samo. Laboratoř uchovává séra po dobu jednoho měsíce, poté je likviduje. Do jednoho měsíce od příjmu séra lze opakovat vyšetření z původního materiálu. Poté je třeba k opakovanému vyšetření odeslat nové sérum. ŽÁDANKY Ke každému vzorku musí být přiložena žádanka o vyšetření, která obsahuje informace postačující pro identifikaci pacienta a oprávněného žadatele a musí poskytovat odpovídající klinické údaje.

5 Strana č. 5 Žádanky obsahují nabídku prováděných vyšetření. V případě telefonického doobjednání vyšetření je nutné dodat do laboratoře žádanku novou se všemi identifikačními údaji. Zaslaná žádanka je považována za smlouvu mezi lékařem a laboratoří s požadavkem provést označené vyšetření. Pro laboratoř je základním dokumentem pro prokázání požadované zdravotní péče zdravotním pojišťovnám. Proto Vás žádáme o pečlivé a čitelné vyplnění žádanek Základní identifikační znaky povinně uváděné na žádance Příjmení a jméno pacienta Rodné číslo pacienta/ číslo pojištěnce Pojišťovna stačí číselný kód Diagnóza Pohlaví Datum a čas odběru Druh primárního vzorku Identifikace objednavatele (jméno lékaře, IČZ, odbornost) Kontakt na objednavatele adresa, telefon Požadovaná vyšetření Žádanky jsou ke stažení na je možné je zaslat svozem či poštou po telefonickém požádání. DISTRIBUCE VÝSLEDKŮ Výsledky jsou vydávány v tištěné podobě pravidelným svozem nebo poštou. Vedle tištěných výsledků nabízíme i možnost jejich stahování v elektronické podobě. Pro informace kontaktujte Ing Charváta: vaclav.charvat@zuusti.cz. Hlášení výsledků v kritických intervalech Výrazně patologické výsledky jsou neprodleně sděleny ošetřujícímu lékaři. Tabulka kritických hodnot: CRP ANCA myeloperoxidáza ANCA proteináza 3 GBM >200 mg/l při pozitivitě u nefrologických diagnóz při pozitivitě u nefrologických diagnóz při pozitivitě

6 Strana č. 6 PŘEHLED VYŠETŘENÍ PROVÁDĚNÝCH NA ODDĚLENÍ IMUNOLOGIE Vyšetření buněčné imunity (T a B lymfocyty, NK buňky) HLA-B27 Vyšetření humorální imunity (imunoglobuliny, komplement, cirkulující imunokomplexy, autoprotilátky, protilátky proti infekčním agens, specifické IgE) Autoimunita (základní spektrum-ana, ANA blot, ds-dna, ENA, ANCA, ACLA, beta-2-glycoprotein I, APLA, AMA, SMA, LKM, PCA, GBM) ANCA combi Gastroenterologie (jaterní bloty, AMA, SMA, LKM, SLA/LP, LC-1, PCA, VF, ASCA), calprotectin ve stolici Revmatologie (RF, CCP, MCV) Endokrinologie (TG, TPO) Neurologie (ASMA) Potravinové intolerance (gliadin, EmA, ttg, kravské mléko) Sérologická vyšetření ASLO, LATEX, CRP, IM test : tetanu, Helicobacteru, Bordetella pertussis a parapertussis Alergologická vyšetření (spec. IgE, široké spektrum alergenů profesní, roztoči, zvířecí, potravinové, traviny, prach, hmyz, plísně, léky, stromy, byliny, včetně rekombinantních; atopický, potravinový a pediatrický blot) SMLUVNÍ LABORATOŘE Vyšetření označená hvězdičkami (*/**) přeposíláme do smluvních laboratoří. Za vydávání výsledků odpovídá smluvní laboratoř. O přeposlání vyšetření do smluvní laboratoře je lékař informován na Výsledkovém protokolu.

7 Strana č. 7 Vysvětlivky k tabulkám Název / Zkratka / Kód ZP - název vyšetření a zkratka, pod kterou je vyšetření uváděno na žádance, v LIS a na protokolu o výsledku imunologického vyšetření - kód, pod kterým je vyšetření vykazováno ZP Odběr / Materiál - druh odebíraného / zpracovávaného materiálu: S sérum P plazma ST stolice SK - srážlivá krev NKE - nesrážlivá krev s EDTA Metoda - způsob provedení vyšetření uvedený zkratkou: - enzymová imunoanalýza NEF - nefelometrie PC - průtoková cytometrie NIF - nepřímá imunofluorescence PEG-IKEM - precipitace s polyetylénglykolem Imunoblot Aglutinace aglutinační reakce FEIA - enzymová imunoanalýza s fluorescenční detekcí (vysokoafinitní fluoroenzymoimunoanalýza) IA imunoanalýza ICHG - imunochromatografie Provádí se - orientační informace o časovém intervalu, jak často se dané vyšetření provádí (např. denně, 1x týdně) Výsledek do - informace o době nutné pro vlastní provedení vyšetření od zahájení laboratorního zpracování do získání výsledku Referenční interval biologické rozmezí hodnot u zdravých jedinců

8 Strana č Imunoglobuliny Název / Zkratka / Kód ZP Imunoglobulin G / IgG Imunoglobulin A / IgA Imunoglobulin M / IgM Imunoglobulin D / IgD* Imunoglobulin E / IgE IgG Podtřídy* Metoda Odběr / Provádí Materiál se Výsledek do NEF denně 3 dnů NEF denně 3 dnů NEF denně 3 dnů FEIA Referenční interval 7,0 16,0 g/l pro děti viz příloha č.1 0,7-4,0 g/l pro děti viz příloha č.1 0,4 2,3 g/l pro děti viz příloha č IU/ml Příloha č. 1: Referenční intervaly koncentrací imunoglobulinů v séru pro stanovení NEF metodou u dětí Věk IgG g/l IgA g/l IgM g/l novorozenci 7,0-16 neprokazatelné 0,1-0,3 1-3 měsíce 2,5-7,5 0,05-0,5 0,1-0,7 4-6 měsíců 1,8-8,0 0,08-0,8 0,2-1, měsíců 3,0-10 0,3-1,4 0,3-1,0 2 roky 3,5-10 0,3-1,2 0,4-1,4 3-5 roků 5,0-13 0,4-1,8 0,4-1,8 6-9 roků 6,0-13 0,6-2,2 0,4-1, roků 7,0-14 0,7-2,3 0,4-1,5

9 Strana č Komplement Název / Zkratka/ Kód ZP C3 složka komplementu / C C4 složka komplementu / C C1- inhibitor / C1-INH* Metoda Odběr/ Materiál Provádí se Výsledek do Referenční interval NEF denně 3 dnů 0,9-1,8 g/l NEF denně 3 dnů 0,1-0,4 g/l 3. Autoprotilátky Název / Zkratka/ Kód ZP antinukleární / ANA ds-dna screen/ ds-dna IgG, IgM, IgA Metoda NIF Odběr/ Materiál Provádí se Výsledek do 2x týdně 5 dnů Referenční interval negativní/pozitivní (při pozitivitě třída Ig, intenzita a typ fluorescence s komentářem) screen: 25 U/ml pozitivní roztestování do tříd: 20 U/ml pozitivní ENA screen 1,0 pozitivní ANA blot (nrnp/sm, Sm, RNP 70-A,-C, SS-A, Ro-52, SS-B, Scl 70, PM-Scl, Jo-1, CENP B, PCNA, nukleosomy, ds-dna, histony, Imunoblot Semikvantitativní hodnocení pomocí skeneru Rib. P-protein, AMA-M2) Revmatoidní faktory IgG, IgA, IgM / RF 91287,91289, U/ml pozitivní

10 Strana č. 10 Cyklický citrulinovaný peptid / CCP IgG, IgA Mutovaný citrulinovaný vimentin / MCV Myeloperoxidáza a Proteináza 3 / ANCA (MPO, PR3) 91277,91279 ANCA Combi (PR3,MPO,BPI, Elastasa,Cathepsin G,Lysozym,Lactoferrin) 7x Bazální membrána glomerulů / GBM Bazální membrána tubulů / TBM Kardiolipin / ACLA IgG, IgM Fosfolipidy / APLA IgG, IgM Beta-2-Glycoprotein I IgG, IgM gastroparietální /PCA Intrinsic Factor / IF Endomyzium IgA,IgG Tkáňová transglutamináza / ttg IgA, IgG Retikulin IgA NIF < 18 U/ml negativní U/ml hraniční > 22 U/ml pozitivní < 20 U/ml negativní 20 U/ml pozitivní denně 3 dnů 5 U/ml pozitivní 1 pozitivní denně 3 dnů 20 U/ml pozitivní 1x týdně 5 dnů 2x týdně 5 dnů negativní/pozitivní < 10 GPL-U/ml negativní 10 GPL-U/ml pozitivní < 7 MPL-U/ml negativní 7 MPL-U/ml pozitivní < 10 GPL-U/ml negativní 10 GPL-U/ml pozitivní < 5 U/ml negativní 5-8 U/ml hraniční > 8 U/ml pozitivní 10 U/ml pozitivní 6 U/ml pozitivní negativní/pozitivní 10 U/ml pozitivní negativní/pozitivní

11 Strana č. 11 Calprotektin (ve stolici) Saccharomyces cerevisiae / ASCA IgG, IgA/ Pankreas* IA ST denně 3 dnů 40 ug/g negativní 60 ug/g pozitivní 10 U/ml pozitivní anti mitochondriální / AMA hladký sval / SMA mikrosomy jater a ledvin / LKM solubilní jaterní antigen / SLA NIF NIF NIF Viz. Jaterní blot 1 2x týdně 5 dnů 2x týdně 5 dnů 2x týdně 5 dnů negativní/pozitivní negativní/pozitivní negativní/pozitivní Jaterní blot 1 (M2,LKM1,LC1,SLA, F-Actin) Jaterní blot 2 (AMA-M2, SP-100, PML, gp210, M2-3E synonymum BPO), LKM1,LC1,SLA/LP,Ro-52) Tyrozinfosfatáza (ostrůvky pankreatu) / IA-2* Dekarboxyláza kys. glutamové / GAD* Thyreoglobulin / TG Thyreoperoxidáza / TPO Nadledvinky* Ovaria* Testes* Imunoblot 2x týdně 5 dnů kvalitativní hodnocení imunologem Imunoblot 3x týdně 4dnů Semikvantitativní hodnocení pomocí skeneru < 100 U/ml negativní U/ml hraniční > 150 U/ml pozitivní < 50 U/ml negativní U/ml hraniční > 75 U/ml pozitivní

12 Strana č. 12 Neurony (Hu, Yo, Ri) IgG* Gangliosidy* Myelin /MAG* Epidermální bazální membrána IgA/ EBM* Intercelulární substance IgA / ICS* Příčně pruhovaný sval / ASMA Myokard / MYO* Systémová skleróza blot (Scl 70, CENP A, CENP B, RP 11, RP 155, fibrilarin, NOR 90, Th/To, PM-Scl 100, PM-Scl 75, Ku, PDGFR, Ro 52) NIF 2x týdně 5 dnů negativní/pozitivní Imunoblot Semikvantitativní hodnocení pomocí skeneru 4. Serologická vyšetření Název / Zkratka/ Kód ZP Antistreptolysin O / ASLO Revmatoidní faktor / LATEX C-reaktivní protein / CRP IM test Widalova reakce* protilátky proti Brucella abortus* Francisella tularensis* Metoda Odběr / Materiál Provádí se Výsledek do Referenční interval NEF denně 3 dnů od 214 IU/ml pozitivní NEF NEF denně 3 dnů od 15,9 IU/ml pozitivní denně 3 dnů od 10 mg/l pozitivní Aglutinace denně 3 dnů negativní/pozitivní

13 Strana č. 13 Yersinia enterocolitica antigen O3* Yersiniím IgG,IgA,IgM* Campylobacter IgG, IgA* Listeria monocytogenes O-I, II* Bordetella parapertussis Bordetella pertussis toxin IgG, IgA, IgM Rickettsiím screen** Rickettsia conori IgG, IgM** Helicobacter pylori IgG, IgA, IgM* Helicobacter pylori* (blot CagA/VacA) Helicobacter pylori Ag (vyšetření antigenu ve stolici) IgG protilátky proti tetanickému toxoidu IgG protilátky proti difterickému toxoidu* IgG protilátky proti klíšťové encephalitis** IgG protilátky proti Haemophilus NIF 1x týdně 1x týdně 7 dnů 7 dnů negativní/pozitivní (při pozitivitě titr s komentářem) < 9VE negativní 9 11VE hraniční > 11VE pozitivní viz příloha č.5 ICHG ST denně 3 dnů negativní/pozitivní viz příloha č.2

14 Strana č. 14 influenzae typ B* IgG protilátky proti Streptococcus Pneumoniae* Bartonella (quintana+henselae) IgG,IgM** Příloha č. 2: Interpretace výsledků Tetanu IU/ml Hodnocení/následná doporučení Žádná ochrana < 0,01 Podle anamnézy je doporučeno provést základní očkování nebo přeočkování, serologická kontrola po 4-8 týdnech Nejistá ochrana 0,01-0,1 Přeočkování, serologická kontrola po 4-8 týdnech Krátkodobá ochrana 0,11-0,5 Přeočkování vede k dlouhodobé ochraně Ochrana dostatečná Přeočkování nebo serologická kontrola po 3 letech 0,51-1,0 Upozornění: očkování u koncentrace protilátek >0,5 IU/ml může vést k nežádoucím reakcím po očkování! Dlouholetá ochrana 1, 1-5,0 Přeočkování nebo serologická kontrola po uplynutí 5 let Dlouholetá ochrana 5,1-10,0 Přeočkování nebo serologická kontrola nejdříve po uplynutí 8 let Dlouholetá ochrana >10,0 Přeočkování nebo serologická kontrola nejdříve po 10 letech 5. Další stanovení Název / Zkratka/ Kód ZP Cirkulující imunokomplexy (PEG) / CIK (PEG) Metoda Odběr / Materiál PEG-IKEM Provádí se Výsledek do Referenční interval < 0,9 negativní 0,9-1,1 hraniční > 1,1 pozitivní

15 Strana č. 15 Cirkulující imunokomplexy (C1q) / CIK (C1q)* IMUNOFIXACE* Transferin / TRF* Ceruloplasmin /CPL* Orosomukoid / ORO* Prealbumin / PREA* Alfa-1-antitrypsin / A1AT* Alfa-2-makroglobulin / A2M* Haptoglobin / HAPT* Alfa-fetoprotein / AFP* Beta-2-mikroglobulin / B2M* deaminovanému gliadinu IgG, IgA (anti DGP ) 91199,91211 bílkovině kravského mléka IgG, IgA 91199,91211 Specifické IgE (viz žádanka) 91219,91237 Pediatrický blot (viz žádanka) Potravinový blot (viz žádanka) Atopický blot (viz žádanka) FEIA Immunoblot Immunoblot Immunoblot 10 U/ml pozitivní < 0,9 negativní 0,9-1,1 hraniční > 1,1 pozitivní viz příloha č.3/a Kvantitativní hodnocení pomocí skeneru viz příloha č.3/b Kvantitativní hodnocení pomocí skeneru viz příloha č.3/b Kvantitativní hodnocení pomocí skeneru viz příloha č.3/b

16 Strana č. 16 Eosinofilní katonický protein / ECP* Příloha č.3/a: Interpretace výsledků sige metodou FEIA: IU/ml < 0,1 0,1-0,5 0, > 50 Hladina IgE nedetekovatelná velmi nízká nizká střední vysoká velmi vysoká Vztah k sympt. nepravděpodobný málo běžný nízký běžný vysoký velmi vysoký Příloha č.3/b: Interpretace výsledků sige metodou Immunoblot: Třída RAST ku/ml < 0,35 0,35-0,7 0,7-3,5 3,5-17,5 17, > 100 Hladina IgE nedetekovatelná velmi nízká nizká významná vysoká velmi vysoká velmi vysoká 6. Buněčná imunita Název / Zkratka Metoda Buněčná imunita panel Průtoková (CD3,4,8,19,NK,IRI) cytometrie B lymfocyty/cd19+ Průtoková cytometrie T lymfocyty /CD3+ Průtoková cytometrie T pomocné lymfocyty / Průtoková CD4+ cytometrie Cytotoxické lymfocyty / Průtoková CD8+ cytometrie NK buňky (Přirození zabíječi) / CD HLA B Průtoková cytometrie Průtoková cytometrie Odběr / Materiál Provádí se Výsledek do Referenční interval NKE denně 24 hodin viz příloha č.4 NKE denně 24 hodin viz příloha č.4 NKE denně 24 hodin viz příloha č.4 NKE denně 24 hodin viz příloha č.4 NKE denně 24 hodin viz příloha č.4 NKE denně 24 hodin viz příloha č.4 NKE denně 24 hodin negativní/pozitivní

17 Strana č. 17 Příloha č.4: Referenční intervaly buněčné imunity: 0-1 rok 2-6 let 7-17 let dospělí CD19+ 0,5-1,5 0,7-1,3 0,3-0,5 0,2-0,4 [x10 3 buněk/µl] CD19+ % ,4-22,6 CD3+ 1,7-3,6 1,8-3,0 1,4-2 1,1-1,7 [x10 3 buněk/µl] CD3+ % ,4-84,6 CD4+ 1,7-2,0 1,0-1,9 0,7-1,1 0,7-1,1 [x10 3 buněk/µl] CD4+ % ,5-60,5 CD8+ 0,8-1,2 0,8-1,5 0,6-0,9 0,5-0,9 [x10 3 buněk/µl] CD8+ % ,1-38,3 IRI 1,5-2,9 1-1,6 1,1-1,4 0,9-3,6 NK 0,3-0,7 0,2-0,6 0,2-0,3 0,2-0,4 [x10 3 buněk/µl] NK % ,6-30,9 Příloha č.5: Vyhodnocení vyšetření anti-bortdetella pertussis toxin: IgG VE FDA- Protilátky IgG interpretace U/ml <9,0 negativní Nezvýšený titr protilátek proti toxinu černého kašle: Není podezření na infekci Bordetella pertussis Při existenci klinických symptomů vyžádat průběžnou kontrolu nebo stav vyjasnit diferenciální diagnostikou hraniční hodnoty Zvýšený titr protilátek proti toxinu černého kašle: persistující protilátky minulé infekce protilátky začínající odpovědi protilátky vzniklé v důsledku očkování >11,0 pozitivní Signifikantně vyšší titr protilátek proti toxinu černého kašle: důkaz čerstvé nebo nedávno prodělané infekce detekce protilátek vzniklých v důsledku očkování

18 Strana č. 18 >18,0 >125 infekce Signifikantně vyšší titr protilátek proti toxinu černého kašle, který svědčí o akutní infekci, pokud poslední očkování bylo provedeno před více než 12 měsíci IgA VE protilátky <9,0 negativní 9,0 11,0 hraniční hodnoty >11,0 pozitivní IgM VE protilátky <9,0 negativní 9,0 11,0 hraniční hodnoty >11,0 pozitivní * vyšetření přeposlána na Odbor laboratorní imunologie Ústí nad Labem Na Kabátě 229, Ústí nad Labem , tel.: ** vyšetření přeposlána na Oddělení virologie Praha Nemocnice Na Bulovce pavilon 8, Budínova 2, Praha , tel.: