Amyloid a amyloidosa. Eva Honsová Pracoviště klinické a transplantační patologie IKEM

Rozměr: px

Začít zobrazení ze stránky:

Download "Amyloid a amyloidosa. Eva Honsová Pracoviště klinické a transplantační patologie IKEM"

Miloš Pospíšil
před 7 lety
Počet zobrazení:

1 Amyloid a amyloidosa Eva Honsová Pracoviště klinické a transplantační patologie IKEM eva.honsova@ikem.cz

2 Amyloid poprvé popsal Rokitanský (1842) pojmenováno Virchowem amyloid amylon=škrob bílkovinný materiál - stejný morfologický vzhled, tinkční vlastnosti a fyzikální strukturu rozdílné bílkoviny (chemicky heterogenní), více než 20 proteinů změna uspořádání: rozpustné bílkoviny změní své uspořádání a ukládají se extracelulárně ve tkáních v nerozpustné formě

3 Amyloid= konformační změna z rozpustné bílkoviny: nerozpustné, špatně degradovatelné fibrily (ve struktuře β skládaného listu s afinitou pro Kongo červeň), nevětvené fibrily (7,5-10nm) ELMI

4 Amyloid= konformační změna Uložení poškozuje tkáně a vede ke změnám funkce Fibrilární depozita váží proteoglykany, glykosaminoglykany (heparan sulfát), plasmatické proteiny (SAP) Způsobuje problémy s detekcí Špatně poskládané proteiny jsou nestabilní, domino efekt

5 Amyloid: morfologie a detekce uložení (depozita) extracelulárně mikro: je hyalinní glykoproteinový materiál, který se pozitivně barví Kongo červení (a vykazuje dvojlom v polarizovaném světle)

6 Jak se z proteinu stane amyloid??? V experimentu lze z každého proteinu vytvořit amyloid V přirozeném stavu: jen některé proteiny (cca 20)

7 LEFT: GLOMERULI EXTRACTED FROM RENAL CORTEX RIGHT: CULTURE OF MESANGIAL CELLS (Zapůjčeno: Guillermo A. Herrera)

8 MESANGIAL CELLS GROWN ON MATRIGEL AND COVERSLIPS AND INCUBATED WITH LIGHT CHAINS PURIFIED FROM THE URINE OF PATIENTS WITH RENAL BIOPSY-PROVEN AL-AMYLOIDOSIS (slide: G. Herrera) MESANGIAL CELLS INCUBATED ON MATRIGEL WITH AMYLOIDOGENIC LIGHT CHAIN Tagouri et al, mid 1990s Congo red stain HEMATOXYLIN AND EOSIN STAINS A,B AND C CONGO RED (E) POLARIZATION (D)

9 Jak se z proteinu (lehké řetězce) stane amyloid??? MESANGIAL CELLS INCUBATED WITH AMYLOIDOGENIC LIGHT CHAIN A. INITIAL SURFACE INTERACTIONS (15 MINS) B. IN MATURE LYSOSOMES (6 HOURS) Zapůjčeno: Guillermo A. Herrera

10 Glomerular amyloid fibrils in mesangium WT mouse after daily injections of AmLC for 7 days 1 μm 1 μm 10 μm 10 μm

11 Formace amyloidu

12 Amyloid: morfologie

13 Diagnosa???

14 Amyloidosa termín pro skupinu onemocnění charakterizovaných extracelulárním ukládáním amyloidu amyloid = různé proteiny Amyloidosy = různá onemocnění Klasifikace podle uloženého proteinu podle manifestace a závažnosti

15 Amyloidosa Značení amyloidos: A (amyloid) L (light chains): AL Nejčastěji ukládané proteiny: 1. Lehké řetězce (Ig, produkce plasmocyty) (AL) 2. SAA: serum amyloid associated protein, protein produkovaný během zánětu v játrech (AA) 3. Transthyretin (TTR): serový protein, který váže a transportuje thyroxin a retinol (ATTR) 4. β2 mikroglobulin: dialyzování pacienti (Aβ2m) 5. Hormony: procalcitonin, inzulin

16 Amyloidosy (podle typu amyloidu) 1. AL prekursor: variabilní část lehkého řetězce imunoglobulinu, častěji lambda. Tvořeno plasmatickými buňkami, manifestace: systémová amyloidosa 2. AA prekursor SAA, během zánětu jsou v játrech syntetizovány proteiny akutní fáze, včetně SAA- v séru fagocytován a štěpen makrofagickými bb, manifestace: systémová amyloidosa

17 Amyloidosy (podle typu amyloidu) 3. ATTR prekursor: transthyretin tj. transportní protein pro thyroxin a retinol), a) Hereditární - mutace: více než 60 různých mutací (srdce, polyneuropatie), 4% černošské populace v US jsou nositeli mutace b) bez mutace (wild type): stařecká senilní amyloidosa (srdce) Manifestace: systémová i lokalizovaná (myokard)

18 Amyloidosy (podle typu amyloidu) 4. hereditární a) Středozemní horečka (AA), gen: pyrin nadprodukce zánětlivých cytokinů (IL-1) přetrvávající zánět Morfologie stejná jako AA amyloid b) Mutace TTR (jde o bod a) ve skupině 3. c) Fibrinogen Aα

19 Amyloidosy (podle typu amyloidu) 5. AE amyloid (endokrinní) prekursor: různé peptidy(calcitonin, peptid ostrůvků pankreatu) medulární ca štítné žlázy, DM 2.typu Manifestace: lokalizovaná 6. β2 mikroglobulin (amyloidosa dialysovaných), manifestace: klouby, šlachy

20 Klinicky významné systémové amyloidosy 1. AL (primární, plasma cell dyscrasie, myelom) 2. AA (sekundární, doprovázejí chron. zánětlivá onem.: tbc, osteomyelitidu, revmatoidní artritidu. Nyní Crohnovu chorobu, ankylosující spondylitidu) část pacientů (10%) nemá zánětlivé onem., mají zánětlivý stav (DM) 3. AF Amyloid (familiární)

21 Klinicky významné systémové amyloidosy

22 Amyloidosa: postižení orgánů Extracelulárně, afinita k cévám, kapiláry, arterioly Ledviny Slezina Srdce Játra GIT Periferní nervy Šlachy, klouby

23 Amyloidosa: postižení orgánů: ledviny

24 Amyloidosa: postižení orgánů: ledviny Klinické projevy: Poruchy filtrační bariery: proteinurie (často nefrotická) Komplikace z velkých ztrát bílkovin: otoky poruchy srážlivosti infekční komplikace hyperlipidemie, lipidurie

25 Amyloidosa: postižení orgánů: myokard

26 Amyloidosa: postižení orgánů: myokard Klinické projevy: 40% případů se systémovou amyloidosou umírá na kardiální symptomatologii Restriktivní kardiomyopatie Poruchy rytmu Posturální hypotenze

27 Amyloidosa: postižení orgánů: játra

28 Amyloidosa: postižení orgánů: GIT

29 Amyloidosa: postižení orgánů: tuk, nervy

30 Diagnosa???

31 Diagnosa??? Klíčem k léčbě je určení typu amyloidu Proč???

32 Diagnosa??? Klíčem k léčbě je určení typu amyloidu AL amyloid léčba chemoterapie, transplantace kmenových buněk AA amyloid: kontrola zánětu Transthyretin (a jiné hereditární): transplantace jater

33 Diagnosa amyloidu v biopsii typ určí imunoflourescenční vyšetření (90%) vzorek bez fixace tj. bez formolu

34 Diagnosa amyloidu v biopsii Možnosti určení typu amyloidu Imunofluorescence (90-95%) Imunohistochemie Hmotnostní spektrometrie (objemná depozita) Imuno ELMI

35 60 letá žena trpí 20 let deformující artritidou drobných kloubů. Artritida postihuje ruční klouby. RF je pozitivní ve vysokém titru. Antinukleární protilátky jsou negativní. V rektální biopsii má eosinofilní amorfní materiál, který se pozitivně barví Kongo červení.. Který z následujících precursorových proteinů dává vznik depozitům v tomto případě? A. Lehké řetězce lambda B. Sérový amyloid-associated protein C. Transthyretin D. Cystatin C E. Beta-2-microglobulin

36 pacientka trpí chronickým zánětlivým onemocněním (deformující artritidou drobných kloubů). B. Sérový amyloid-associated protein je správná odpověď pacientka má AA amyloidosu

37 Můžu se nakazit amyloidosou? Velmi pravděpodobně ano Westermark GT, Westermark P. Serum amyloid A and protein AA: molecular mechanisms of a transmissible amyloidosis. FEBS Lett. 2009;583: Amyloidosa je přenosná v experimentu u myší i mezidruhově vývoj AA amyloidosy v myších modelech: fáze predispozice fáze ukládání (enhancing factor - extrakt z tkání obsahujících amyloid) Amyloidosa může být indukována potravou AA amyloid je součástí lidské stravy experiment s paštikou: myši krmené 5 dní extraktem z husí paštiky měly amyloidózu ve všech vyšetřovaných orgánech již po 8 týdnech

38 Můžu se nakazit amyloidosou? Velmi pravděpodobně ano Epidemiologická hrozba: k přenosu stačí extrémně nízké množství látky (15 picogramů proteinu/na myš). Extrakt z 1 myši stačí na vyvolání AA u milionu dalších monocyty se účastní na přenosu AA amyloidosy u myší (reservoár ve slezině) Rizika: krevní transfuze nanotechnologiefibrilar scaffold)

39 Můžu jako klinik ovlivnit dg. typu systémové amyloidózy? Zcela zásadně; vždy nejdříve domluvit druh fixace a transportu

40 K zapamatování Amyloidosa je charakterizována extraceluláními depozity fibril špatně poskládaných proteinů Prekursory jsou rozpustné Amyloidosy jsou lokalizované nebo systémové systémové amyloidosy (AL, AA) AL: z lehkých řetězců u nemocí plasmatických buněk AA: doprovází chronické záněty Dg. je bioptická: depozita Kongo červeň pozitivní se zeleným dvojlomem v polarizovaném světle Součástí dg. je určení typu amyloidu

41 K zapamatování V klinice: 1. nefrotická proteinurie (otoky) 2. slabost, únava, úbytek na váze, kolapsy, srdeční selhání, kardiomyopatie 3. hepatomegalie 4. idiopatická periferní neuropatie (parestezie) 5. celkové chátrání (GIT)

Podobné dokumenty

Typizace amyloidóz pomocí laserové mikrodisekce a hmotnostní spektrometrie

Typizace amyloidóz pomocí laserové mikrodisekce a hmotnostní spektrometrie Dušan Holub Laboratoř experimentální medicíny, Ústav molekulární a translační medicíny Lékařské fakulty Univerzity Palackého v