Nudné, ale nutné Sinice a řasy v praxi Přírodovědecká fakulta UK, 19.-21.4.2013 Petr Pumann,
Předpisy Zákon přijímá parlament Vyhláška vydat jako prováděcí předpis k zákonu ústřední orgán státní správy (například ministerstvo) nebo i jiný úřad, který k tomu zákon zmocní). seznam ukazatelů, limity, požadavky na četnost sledování apod. Norma obvykle technické detaily (např. laboratorní nebo odběrové metodiky)
jak provést stanovení (odkaz na metodickou normu) vyhláška jak hodnotit výsledky (v textu a přílohách vyhlášky
Příklad koupací vody zákon o ochraně veřejného zdraví (258/2000Sb.) mimo jiné říká, že požadavky na kvalitu vody a četnost v přírodních koupalištích stanoví prováděcí právní předpis tím je vyhláška č. 238/2011 Sb. obsahuje řadu ukazatelů a jejich limitních hodnot apod. např. u sinic odkazuje na metodickou normu ČSN 75 7717 ČSN 75 7717 obsahuje metodiku jak stanovit sinice
Ale... u chemických analýz vyhláška (pro pitnou vodu) většinou neuvádí přesnou metodu, ale jen požadavky na mez stanovitelnosti, přesnost a správnost mikrobiologické metody jsou však vždy uzanční (odkaz na konkrétní normu/normy)
Legislativa EU pro pitnou i koupací vody existují směrnice nutno převzít do národních legislativ požadavky na národní úrovni možno zvyšovat, ale ne zmírňovat překlady do všech jazyků EU
Organizace - hygiena Ministerstvo zdravotnictví Krajské hygienické stanice (KHS) komunální hygiena (zabývá se mimo jiné vodou) OHS už nejsou (pobočky KHS nebo zrušeny) Zdravotní y bývalé laboratoře KHS (poslední dobou silná redukce) je něco jiného
Akreditace laboratoří
Akreditace je velmi otravný proces, při kterém je nutné vytvořit hladu dokumentace, kterou s větší části nikdy nevyužijete (i když člověk nikdy neví...) řada věcí se v chodu laboratoře přípravou na akreditaci zlepší NUTNÁ (pro laboratoře poskytující služby externím zákazníkům)
www.cia.cz
Norma ČSN EN ISO/IEC 17025 Všeobecné požadavky na způsobilost zkušebních a kalibračních laboratoří posuzuje se, zda laboratoř pracuje v souladu s touto normou o řasách ani sinicích se v ní bohužel nepíše
Důležité pojmy z akreditace příručka kvality základní dokument laboratoře hodně obecných pindů, ale nutnost manažer kvality důležitější než vedoucí :) standardní operační postup (SOP) konkrétní postup ke každé metodě akreditace, dozorová návštěva, reakreditace
Dokumentace, dokumentace, dokumentace, dokumentace a dokumentace ptákoviny i užitečné věci
A kde jsou řasy a sinice?
Mezilaboratorní porovnávání
Mezilaboratorní provnávání organizátor připraví vzorky pokud možno homogenní jednotlivé laboratoře je zpracují a pošlou organizátorovi výsledky samostatně zpracují!!! organizátor je vyhodnotí
Důležité pojmy Kruhové vzorky (používají na kliničtí mikrobiologové, ale spíš hovorově) EHK (externí hodnocení kvality - používají na kliničtí mikrobiologové) Okružní rozbory (OR) hovorově okružáky MPZ (mezilaboratorní porovnávání zkoušek nebo porovnávací zkoušky) PZZ (programy zkoušení způsobilosti) PT (proficiency testing) round robin
Organizátoři MPZ - voda ASLAB (na Výzkumném u vodohospodářském) CS-Lab (soukromá firma)
Jak vypadá jedno kolo MPZ (příklad pro rozbor sinic v podzimu 2008)
Příprava vzorků Předem vytipování lokalit Vzorek 1A Planktothrix agardhii Vyžlovka 16.9.2008 silně oživené Vzorek 1B Microcystis spp., Woronichinia, příměs vláknitých sinic Koryto v Dobříši 15.9.2008 před plněním filtrace přes gázu k odstranění největších kolonií
Vzorky 1 - zajištění homogenity promícháno v 5 litrovém barelu se spodním výpustním kohoutek celkem připraveno 21 vzorků SZU zpracování vzorků 1, 8, 15, 21
sinice (buňky/ml) Kontrola homogenity 900000 800000 700000 600000 500000 400000 300000 200000 100000 0 1 8 14 21 pořadí přípravy vzorku
Stanovení vztažných hodnot z výsledků terčových laboratoří předem vybráno 5 terčových laboratoří, které dodávaly dobré výsledky během předchozích kol + osobní zkušenost s lidmi, kteří stanovení provádějí z-skore úspěšná účast
Vztažné hodnoty Vzorek 1A vztažná hodnota: 710 000 buněk/ml vztažná odchylka: směrodatná odchylka z výsledků terčových laboratoří správné hodnoty: 457 992 962 008 buněk/ml Vzorek 1B vztažná hodnota: 239 411 buněk/ml vztažná odchylka: směrodatná odchylka z výsledků terčových laboratoří správné hodnoty: 53 311 425 511 buněk/ml
sinice (buňky/ml) Kvantifikace sinic vz.1a - vláknité 1400000 Kvantifikace - buňky/ml - vzorek 1A Terčové laboratoře světlé sloupce 1200000 1000000 800000 600000 400000 200000 0 837 943 24 95 847 117 903 832 631 596 619 824 944 745 731 96
sinice (buňky/ml) Kvantifikace sinic vz.1b - kokální 400000 350000 300000 250000 200000 150000 100000 50000 Kvantifikace - buňky/ml - vzorek 1A Terčové laboratoře světlé sloupce 0 847 95 24 832 824 117 943 596 837 745 619 903 96 731 631
Microcystis aeruginosa 2A Microcystis viridis Microcystis viridis Microcystis aeruginosa Microcystis wesenbergii Microcystis aeruginosa