Parazitologie MUDr. Drahomíra Rottenbornová
Materiál na parazitologické vyšetření Stolice velikosti vlašského ořechu do odběrové nádobky, nemusí být sterilní nelze-li ihned odeslat do laboratoře, uchováváme v chladu, ale nemrazíme odběr opakovat 3x po 24-72 hodinách při pátrání po vegetativních formách (trofozoitech) améb nebo giardií nutno stolici vyšetřit do 30 minut, jinak trofozoiti autolyzují Perianální stěr a anální výtěr při podezření na infekci vyvolanou roupy nebo tasemnicemi 8-12 hodin před vyšetřením neomývat oblast konečníku zvlhčenou Schuffnerovo tyčinkou na podloţní sklo nebo průhlednou lepící páskou pátráme po vajíčkách
Sputum larvy Ascaris lumbricoides, háčky Echinococcus granulosus BAL nebo indukované sputum dg Pneumocystis carinii Sekret uretrální sterilní tampony na drátě, do transportní půdy Sekret vaginální ze zadní klenby poševní, nátěr na 2 skla Gramovo barvení dg bakterií a kvasinek Giemsa dg trichomonád
Krev na mikroskopická vyšetření dg plasmodií tenký krevní roztěr: na odmaštěné podloţní sklíčko kapka periferní krve z bříška prstu a hranou druhého sklíčka rozetřít po celém podloţním sklíčku tlustá kapka: kapku periferní krve na podkoţním sklíčku rohem druhého skla krouţivými pohyby roztáhneme na plochu asi 2 cm Krev na sérologická vyšetření protilátky proti parazitům (toxoplasmóza, Ostatní Moč, mozkomíšní mok, bioptický materiál z tkání, excize, seškraby z kůţe a sliznic duodenální šťáva, punktáty.
Zasílání materiálu Žádanky jako na ostatní mikrobiologická vyšetření nutné navíc některé anamnestické údaje (pobyt v cizině) Malé laboratoře provádí jen dg nejběţnějších parazitů nebo parazitolog. dg neprovádějí vůbec - nutno poslat materiál do větší nebo referenční laboratoře! bezpečný transport!
Laboratorní vyšetření 1. Makroskopicky: zjištění přítomnosti celých červů nebo jejich částí 2. Mikroskopie: a) Nativní mikroskopický preparát: červy, vajíčka, pohyblivá vegetativní stadia prvoků, cysty prvoků (př. vajíčka roupů, tasemnic) b) Tlustý nátěr dle Kato: do kapky destilované vody na podloţním skle rozmíchat malé mnoţství stolice, rozetřít do plochy asi 2x2 cm, překrýt celofánovou fólií namočenou do glycerinu a methylenové zeleně
c) Koncentrační a flotační metody (Faust) pro nahromadění některých stadií střevních prvoků (cysty) i červů (vajíčka, larvy) stolice + hypertonický roztok ZnSO 4, zcentrifuovat Lehčí vajíčka a cysty vyplavou na povrch, ten odebrat kličkou nebo na krycí sklíčko d) barvené preparáty d1) barvení dle Giemsy: průkaz Trichomonas vaginalis d2) barvení Heidenheimovým hematoxylinem: hledání prvoků a jejich cyst (hl. améby, giardie návrat z ciziny) d3) barvení trichromem (dle Gomoriho): zejména dg améb
e) Krevní roztěr viz výše f) Tlustá kapka viz výše 3. Kultivace - na ţivné půdě, tkáňové kultuře či na zvířeti - výjimečně: améby, trichomonády 4. Průkaz antigenů ve vyšetřovaném materiálu 5. Průkaz protilátek - toxoplazmóza
Antiparazitární léčiva
PRVOCI (PROTOZOA) Jednobuněčné organismy, jejichţ buňka obsahuje pravé jádro (eukaryota). U člověka se uplatňují jako parazité: zažívacího traktu (Giardia, střevní měňavky aj.) krevní ((Plasmodie, africké trypanosomy aj.) UG traktu (Trichomonas vaginalis) CNS (Toxoplasma gondii, volně ţijící měňavky) různých orgánů (Toxoplasma gondii aj.)
Trichomonas vaginalis Parazit: oválný aţ hruškovitý tvar, 4 bičíky, 5. bičík tvoří tzv. undulující membránu netvoří cysty ani jiná odolná stádia. je málo odolný mimo tělo hostitele Rozšíření: kosmopolitní Přenos: pohlavním stykem
Onemocnění: u žen: - asymptomatické nákazy (20-50%) - akutní zánět pochvy event. vulvy, děloţního hrdla, uretry (ţlutozelený sladce páchnoucí výtok, pálení, svědění) u mužů: - asymptomatické nákazy (50-90%) - urethritis, epididymitis, prostatitis Dg: mikroskopická: nativní (pohyb) i barvený preparát /tzv. MOP/ - výtěr z pochvy, u muţe z uretry kultivační (speciální tekuté půdy) Th.: Metronidazol (! Nutno léčit oba sexuální partnery!)
Giardia (Lamblia) intestinalis Parazit: trofozoit - bičíkovec hruštičkovitého tvaru těla, se 2 jádry, 4 páry bičíků, přísavným diskem, který adheruje k povrchu enterocytů horní části tenkého střeva. cysta přeměna trofozoita v čtyřjadernou cystu v dolních částech tenkého střeva. Je vylučována s výkaly. Je značně odolná vůči vlivům zevního prostředí. Rozšíření: kosmopolitní Přenos: alimentární cestou (potraviny, voda kontaminované cystami)
Onemocnění: asymptomatická nákaza průjmy (stolice má mastný vzhled porucha resorbce tuků), pocit slabosti, hubnutí, břišní křeče, nucení ke zvracení Onemocnění můţe samo po několika týdnech vymizet nebo přetrvávat léta. Dg.: mikroskopický nález cyst ve stolici nález trofozoitů v čerstvé stolici nebo v duodenální šťávě průkaz giardiového antigenu ve stolici komerčními soupravami Th.: Metronidazol
G.i.
Entamoeba histolytica Parazit: trofozoit měňavka ţije v tlustém střevě, kde se ţiví bakteriemi cysta - během vývoje ve střevě se mění v kulatou 4 jadernou cystu, která je vylučována stolicí Někdy napadá buňky střevního epitelu poškození, vznik vředů Zanesení krví do dalších orgánů (jater, plic, mozku, sleziny aj.), kde se tvoří druhotné léze obsahující trofozoity. Rozšíření: kosmopolitní, častěji v teplých krajích s nízkou hygienickou úrovní Přenos: potraviny a voda kontaminovaná cystami
Onemocnění: asymtomatická nákaza nepatogenní formou střevní forma mírné GIT potíţe - podobné shigelóze ( silné bolesti břicha, koliky, četné řídké stolice s krví a hlenem; riziko perforace střeva) mimostřevní: - jaterní absces (aţ velikosti pomeranče: bolest v pravém podţebří, zvětšení jater, horečka, hubnutí) - postiţení plic, kůţe, CNS Neléčená amébóza můţe být i smrtelná.
Dg: mikroskopická (průkaz cyst ve stolici, průkaz trofozoitů v čerstvé stolici) kultivace na speciálních půdách průkaz IgG protilátek Th.: metronidazol, chirurgická léčba (abscesy)
E.hartmanni
E.coli
E.nana
Toxoplasma gondii Parazit: prodělává sloţitý vývojový cyklus Definitivního hostitel (kočkovité šelmy) Oocysty- infekční stádia, vznikají v jejich střevě Vylučovány trusem Nákaza mezihostitele (člověk, jiní teplokrevní obratlovci) Sporozoity uvolňovány ve střevě, pronikají do různých tkání nakaţeného jedince a mnoţí se v nich (oko, mozek, svalstvo aj.). Tkáňové cysty - vznikají v postiţených orgánech V nich parazité dlouhodobě přeţívají. Reaktivace - při sníţení imunity (HIV, transplantace) většinou jako toxoplasmová encefalitida.
Onemocnění: A - získaná toxoplasmóza: asymptomatický průběh tzv. chřipkové příznaky, zduření uzlin postiţení různých orgánů: zejména u inunokompromitovaných pacientů) encefalitida, meningitida pneumonie hepatitida, myokarditida vyráţka postiţení očí aj.
B- vrozená toxoplasmóza: nákaza embrya či plodu intrauterinně po primoinfekci matky v graviditě potrat porod dítěte s různým stupněm poškození (kalcifikace mozku, hydrocefalus, poruchy zraku, malformace, poruchy duševního vývoje) při nákaze v posledním trimestru se rodí děti obvykle nepoškozené, ale později se u nich můţe objevit zejména postiţení očí Včasná léčba matky během těhotenství významně sníţí moţnost poškození plodu.
Dg: sérologie: KFR, ELISA (IgM a IgG, IgA protilátky) (izolace parazita) Th.: kombinace ATB dlouhodobě (pyrimethamin /Daraprim/, sulfadiazin, spiramycin) Prevence: hygiena při kontaktu s materiály kontaminovanými kočičími fekáliemi potravní hygiena (nejíst nedostatečně tepelně upravené maso, vejce, nepasterizované mléko) sérologické vyšetření těhotných ţen
Plasmodium Parazit: 4 druhy plasmodií: Pl. vivax, Pl. ovale - způsobují třídenní malárii (terciánu) Pl. malariae - způsobuje čtyřdenní malárii (kvartánu) Pl. falciparum - způsobuje tropickou maligní malárii Jednotlivé druhy se liší morfologicky (vyuţíváme při diagnostice). Výskyt: po celém světě aţ po 45 severní šířky, ve vlhkých krajích kde ţijí komáři rodu Anopheles Parazit je schopen v nich ukončit vývoj za předpokladu, ţe po určitou dobu teplota vzduchu nepoklesne pod určitou hodnotu. Přenos: sáním nakaţeného komára, krevní transfúzí ID: 10-14 dnů po poštípání komárem
Složitý vývojový cyklus: nepohlavní vývoj - probíhá u člověka (mezihostitele) po štípnutí komárem extraerytrocytární stádium (játra) několik rozmnoţovacích cyklů erytrocytární stádium: další rozmnoţovací cykly erytrocyty naplněné parazity praskají ( provázeno horečkou, třesavkou = malarický záchvat, děje se periodicky větš. po 3-4 dnech) po několika proběhlých nepohlavních cyklech v těle člověka vznikají samčí a samičí pohlavní buňky. Těmito buňkami je infikován komár při štípnutí nemocného člověka. pohlavní vývoj - probíhá v těle komára (definitivního hostitele): splynutím samčí a samičí buňky vzniká oocysta, která se dělí na sporozoity (nepohlavní stadia), těmi je infikován zdravý člověk při štípnutí komárem.
Onemocnění - malárie: Patří mezi nejčastější infekční onemocnění na světě Prodromy: bolesti hlavy, fotofobie, bolesti ve svalech, nevolnost, zvracení Malarický záchvat : náhlá zimnice, třesavka, následně teplota přes 40 C, která trvá 2-6 i více hodin. Můţe dojít aţ k poruše vědomí. Po odeznění záchvatu se pacient cítí zdráv aţ do dalšího záchvatu. Podle druhu plasmodia se záchvaty opakují kaţdý 3. nebo 4. den (odpovídá rozpadu erytrocytů). Bez léčení se záchvaty opakují pravidelně po dobu několika týdnů aţ měsíců s postupně slábnoucí intenzitou. Dochází ale k anemii. U jinak zdravých lidí jsou nákazy vyvolané většinou plasmodií relativně benigní.
Pro cestovatele je nejvíce nebezpečná tropická malárie (Pl. falciparum) infikované erytrocyty mají tendenci adherovat ke stěnám kapilár vnitřních orgánů dochází k poruchám prokrvení některých orgánů (zejména mozek, ledviny) Malarické recidivy: vznikají aktivací přeţívajících jaterních stádií nebo reaktivací dlouhodobé, velice nízké parazitémie aţ po 10-20 letech
Dg.: mikroskopický nález plasmodií v krevním roztěru nebo v tlusté kapce (barveno Giemsou); nutno několikrát opakovat, krev se odebírá na vrcholu horeček Th: různá chemoterapeutika (dle předpokládaného druhu plasmodia) (chlorochin, chinin sulfát, pyrimethamin /Daraprim/, meflochin /Lariam/), Primachin Prevence: chemoprofylaxe osob z neendemických oblastí (problémem je rychle se šířící rezistence plasmodií) ochrana před poštípáním komáry (spát pod moskytierami, pouţívat repelenty, insekticidy)
Pl.falciparum
Pl. malariae
Pl. ovale
Pl. vivax
mnohobuněční ţivočichové. onemocnění - helmintózy. ČERVI (Helmintes) Protoţe červy většinou diagnostikujeme podle jejich vajíček mikroskopických rozměrů, vyučují se v rámci mikrobiologie. Dělení červů: - ploštěnci - motolice - tasemnice - oblovci - hlístice Patogenita červů je dána: - toxickými produkty metabolismu - mechanickým působením - alergizací - vyčerpáním ţivin Onemocnění: málo charakteristické příznaky, chronický průběh
Enterobius vermicularis (Roup dětský) Parazit: tenký bělavý červ, 12 mm dlouhý, odděleného pohlaví ţije v tlustém a slepém střevě v noci vylézá oplozená samička z konečníku ven a klade do jeho okolí mnoho vajíček vajíčka ve vnějším prostředí rychle dozrávají (vyvine se v nich larva, stávají se infekčními) Rozšíření: kosmopolitní, u nás běţný výskyt, zejména v dětských kolektivech Přenos: pozřením infekčních vajíček (obsahují ţivou larvu) - kontaminované ruce nebo potrava
Onemocnění: enterobióza asymtomatický průběh silné svědění v oblasti konečníku, bolesti břicha, průjmy, nechutenství, nespavost u děvčátek moţný vaginální výtok Dg: stěry z okolí konečníku Schüfnerovou tyčinkou nebo lepicí páskou (před vyšetřením nemýt, nekoupat!) mikroskopický průkaz vajíček nález vajíček nebo celých červů ve stolici nález červů v okolí análního otvoru Th: sirup Pyrvinium, mebendazol (Vermox), albendazol (Zentel) aj. Léčba celého kolektivu Dekontaminace domácnosti a osobních věcí (aby nedocházelo k reinfekci)
Enterobius vermicularis
Ascaris lubmbricoides (Škrkavka dětská) Parazit: Červ o velikosti 10-30 cm, naţloutlé nebo narůţovělé barvy. Ţije v tenkém střevě. Samička po oplození klade vajíčka, které odcházejí se stolicí do vnějšího prostředí. Zde se za 2-3 týdny vyvine ve vajíčku larva a tím se stane vajíčko infekční. Po pozření se z vajíček ve střevě larva uvolní. Proniká střevní stěnou a krevním a lymfatickým oběhem se dostává do plic. Z plic se dostává při kašli do proximálnějších partií dýchacích cest tracheou do hrtanu, hltanu, z něj polknutím opět do tenkého střeva, kde dospívá v dospělého červa. Rozšíření: kosmopolitní, více v tropech a subtropech
Přenos: nákaza vajíčky škrkavek alimentární cestou (kontaminované ovoce a zeleninou, vodou) Vajíčka mohou zůstávat mimo tělo hostitele infekčními i několik měsíců. Onemocnění: askaridóza příznaky střevní: bolesti břicha, koliky, při silnějších infekcích ucpání vývodů ţlučovodu, pankreatu, slepého střeva, zánět ţlučovodu, ţlučníku, appendixu příznaky způsobené migrující larvou: kašel, bolest na hrudi, bolesti hlavy, kopřivka, zvýšená teplota vzácněji napadení jiného orgánu neţ plic (mozek, ledviny, oko aj.) Lab.dg.: nález celého červa ve stolici (šedé barvy) nález vajíček ve stolici Th: mebendazol (Vermox), levamizol (Decaris), piperazin (Helmirazin)
Ascaris lumbricoides
Tasemnice (Cestoda) mají dlouhé, ploché, článkované tělo dospělé tasemnice parazitují v tenkém střevě obratlovců, na jehoţ sliznici se přichycují přední částí těla, hlavičkou, opatřenou přísavnými rýhami, přísavkami nebo háčky kaţdý článek obsahuje kompletní sadu pohlavních orgánů (tj. tasemnice jsou hermafrodité), proto stačí přítomnost jediné tasemnice k tvorbě vajíček články postupně dozrávají a vajíčka v nich obsaţená se uvolňují buď ještě ve střevě nebo po odchodu článků ze střeva vajíčka jsou pozřena dalším hostitelem (mezihostitelem), v jehoţ těle se z nich vyvíjí larvy
Taenia solium (Tasemnice dlouhočlenná) Parazit: dospělá tasemnice je dlouhá 2-3 m. Hlavička 1 mm, články 10 mm. specifickým mezihostitelem je vepř: pozře vajíčko, ze kterého se v trávicím traktu vyvine larva střevní stěnou se larva dostane do krevního oběhu usadí se ve svalech, kde vytvoří boubel (= cysticerkus ) - 4 mm velký váček Nákaza člověka: 1) pozřením boubele spolu s nedostatečně tepelně upraveným masem mezihostitele, z boubele se u člověka vyvine dospělá tasemnice 2) pozřením vajíček; pak u člověka můţe proběhnout stejný vývoj jako u vepře vývoj larvy a boubele v různých orgánech (svaly, mozek, mícha, oko, plíce, srdce, podkoţí aj.)
Taenia
Rozšíření: kosmopolitní, u nás v současnosti pouze jako importovaná nákaza Onemocnění: 1) parazit ve střevě (taenióza): asymptomatický průběh nebo gastrointestinální potíţe (nechutenství, bolesti břicha, průjmy, zácpa, hubnutí /odčerpávají ţiviny/, mechanické ucpání střeva, alergické projevy) 2) boubel v orgánech (cysticerkóza): asymptomatická nebo podle lokalizace boubele; váţnou prognózu má mozková cysticerkóza
Dg: taenióza: mikroskopický nález článků nebo vajíček ve stolici, perianální stěry cysticerkóza: - rtg, sono, CT - sérologie Terapie: niklosamid (Yomesan), praziquantel u cysticerkózy event. chirurgická léčba, kortikoidy (zmenšení zánětlivé reakce po smrti parazita)
Tasemnice bezbranná (Taenia saginata) Parazit: dospělá tasemnice je dlouhá 3-10 m. Specifickým mezihostitelem je skot, v jehoţ svalovině se vytvářejí boubele. Rozšíření: kosmopolitní, u nás ojedinělé nákazy Přenos: nákaza člověka nedostatečně tepelně zpracovaným hovězím masem Onemocnění: taenióza; příznaky stejné jako u T. solium Dg: - nález celého červa nebo jeho článků ve stolici, - mikroskopický průkaz vajíček (stěry) Th: jako u T. solium Prevence onemocnění tasemnicemi: dostatečná tepelná úprava masa
ČLENOVCI ( Arthropoda) Na člověku parazitují a přenášejí na člověka různá onemocnění zástupci 2 skupin: pavoukovci (roztoči, klíšťáci, klíšťata) hmyz (vši, blechy, ploštice, komáři, ovádi, mouchy aj.) Hmyz: tělo členěné na hlavu, hruď, zadeček a 3 páry nohou Roztoči: tělo srostlé v jediný článek a 4 páry nohou Vývoj: vajíčko, larva, kukla, dospělý jedinec. ( někdy stádium kukly chybí ) Škodlivost členovců pro člověka: 1. prostí trapiči ( obtěţují bodání, sáním krve ) 2. přenašeči infekce
Sarcoptes scabiei