European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing

Podobné dokumenty
European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing

European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing

European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing

European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing

European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing

European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing

Návod k odečítání Disková difuzní metoda EUCAST pro vyšetřování antibiotické citlivosti

Návod k odečítání. Disková difuzní metoda EUCAST pro vyšetřování antibiotické citlivosti. Verze 3.0 Duben 2013

INTERPRETACE VÝSLEDKŮ CITLIVOSTI NA ANTIBIOTIKA. Milan Kolář Ústav mikrobiologie Fakultní nemocnice a LF UP v Olomouci

Streptokoky - průkaz fenotypu rezistence k antibiotikům ze skupiny makrolidů, linkosamidů a streptograminub

CVIČENÍ I. STANOVENÍ FENOTYPU REZISTENCE K VYBRANÝM ANTIBIOTIKŮM

Vyšetření citlivosti k antibiotikům. EUCAST disková difuzní metoda

Návod k použití pro tablety NEO-SENSITABS

Vyšetření citlivosti k antibiotikům. EUCAST disková difuzní metoda

Disková difuzní metoda EUCAST pro vyšetřování citlivosti k antibiotikům. Verze 6.0 Leden 2017

Co musí intenzivista vědět o antibiotické rezistenci?

CITLIVOST A REZISTENCE MIKROORGANISMŮ K ANTIBIOTIKŮM

Redefinice kategorií vyšetření citlivosti C, Ia R.

Disková difuzní metoda EUCAST pro vyšetřování citlivosti k antibiotikům. Verze 5.0 Leden 2015

Expertní pravidla EUCAST verze 3.0

Expertní pravidla EUCAST verze 3.1

DOTAZY A ODPOVĚDI Veřejná zakázka: Dodávka hotových médií pro růst mikroorganismů Evid. č. přidělené v IS VZ US:

Funkční vzorek 5454/2017. Set ke stanovení minimálních inhibičních koncentrací antimikrobiálních. látek u Pseudomonas spp.

Funkční vzorek 5452/2017. Set ke stanovení minimálních inhibičních koncentrací antimikrobiálních. látek u gramnegativních bakterií II.

STATISTIKA ANTIBIOTIK ZA ROK 2009

Ověřená technologie 4782/2017

Stav rezistence bakteriálních patogenů v Karlovarském kraji.

Funkční vzorek 5456/2017. Set ke stanovení minimálních inhibičních koncentrací antimikrobiálních. látek u Enterococcus spp.

ROZDĚLENÍ ANTIMIKROBIÁLNÍCH LÁTEK, VYŠETŘOVÁNÍ CITLIVOSTI. M.Hanslianová Antibiotické středisko OKM FN Brno

Stav rezistence bakteriálních patogenů v Karlovarském kraji za rok 2009

RESPIRAČNÍ INFEKCE. Milan Kolář

VÝVOJ REZISTENCE BAKTERIÁLNÍCH PATOGENŮ

Ověřená technologie 4903/2018

Funkční vzorek 4595/2018. Set ke stanovení minimálních inhibičních koncentrací antimikrobiálních. látek u Streptococcus suis

Stav rezistence bakteriálních patogenů v Karlovarském kraji.

PT#M/5-3/2018 (č.1032v) Bakteriologická diagnostika

PT#M/5-4/2018 (č.1045v) Bakteriologická diagnostika

VÝVOJ REZISTENCE BAKTERIÁLNÍCH PATOGENŮ

LABORATORNÍ LISTY Vážené kolegyně a kolegové,

PT#M/5-1/2019 (č. 1059) Bakteriologická diagnostika

Často kladené otázky k dokumentům EUCAST

Ověřená technologie 4797/2017

PT#M/5-1/2018 (č.1004v) Bakteriologická diagnostika

OVĚŘENÁ TECHNOLOGIE. Výroba setu ke stanovení MIC antimikrobiálních látek u bakteriálních původců mastitid

Jak dávkovat antibiotika u CRRT? Chytra I KARIM FN Plzeň, LFUK Plzeň

Průkaz beta-laktamáz širokého spektra (ESBL) a typu AmpC u enterobakterií

ANTIMIKROBNÍ PŘÍPRAVKY

ZLLM0421c Lékařská orální mikrobiologie I, praktická cvičení. Protokol k tématu J05

BETA-LAKTAMOVÁ ANTIBIOTIKA V INTENZIVNÍ PÉČI Z POHLEDU MIKROBIOLOGA

Stanovení citlivosti bakterií k ATB, stanovení koncentrace ATB

Eva Krejčí. Antibiotické středisko, Zdravotní ústav se sídlem v Ostravě Lékařská fakulta Ostravské univerzity

OVĚŘENÁ TECHNOLOGIE. Výroba setu ke stanovení MIC antimikrobiálních látek u bakteriálních patogenů psů a koček

Přehledy citlivostí k antibiotikům r

Funkční vzorek 5474/2017

CERTIFIKOVANÁ METODIKA

SROVNÁNÍ KLINICKÉ A MIKROBIOLOGICKÉ ÚČINNOSTI KONTINUÁLNĚ A INTERMITENTNĚ APLIKOVANÉHO MEROPENEMU U KRITICKY NEMOCNÝCH předběžné výsledky

PT#M/5-3/2016 (č.941) Bakteriologická diagnostika

EHK 544 Bakteriologická diagnostika-vyhodnocení

Příprava půd pro diskovou difuzní metodu EUCAST a pro vyšetření hodnot MIC bujonovou mikrodiluční metodou. Změny proti předchozí verzi (v. 4.

PT#M/5-4/2018 (č. 1045) Bakteriologická diagnostika

NOVÉ CEFALOSPORINY A INHIBITORY BETA LAKTAMÁZ. Otakar Nyč Ústav lékařské mikrobiologie FN Motol Praha

BAKTERIE A VNĚJŠÍ PROSTŘEDÍ

LABORATOŘE EUROMEDIC s.r.o. Oddělení klinické mikrobiologie a autovakcín

Jak léčím infekce vyvolané multi- rezistentními bakteriemi

ANTIBIOTICKÁ LÉČBA OFF-LABEL Z POHLEDU MIKROBIOLOGA. Milan Kolář Ústav mikrobiologie FNOL a LF UP v Olomouci

Urbánek K, Kolá M, ekanová L. Pharmacy World and Science. 2005, 27:

Racionální terapie komplikovaných infekcí z pohledu mikrobiologa. V. Adámková KM ATB ÚKBLD VFN

NÁRODNÍ PROGRAM SLEDOVÁNÍ REZISTENCÍ K ANTIMIKROBIKŮM U VETERINÁRNĚ VÝZNAMNÝCH PATOGENŮ

BD Mueller Hinton Fastidious Agar (MH-F)

EUCAST Expert Rules v 3.2 Staphylococcus Červen 2019

Odbor ochrany zdraví a pohody zvířat. Národní program sledování rezistencí k antimikrobikům u veterinárně významných patogenů

Léčba infekcí vyvolaných multiresistentními (MDR) patogeny

SOUHRN ÚDAJŮ O PŘÍPRAVKU

PT#M/5-4/2016 (č.954) Bakteriologická diagnostika

M KR K O R BI B OLO L GA

Viviana Fuchsová, Kamila Zdeňková, Martina Boháčová, Kateřina Demnerová

Využití antibakteriálních testů v textilním průmyslu Mgr. Irena Šlamborová, Ph.D.

Hlavní mechanismy rezistence. In vitro testování citlivosti a rezistence. Základy antimikrobiální terapie VSAT081 Týden 4 Ondřej Zahradníček

ANTIBIOTICKÉ DISKY Antibiotické disky pro testování citlivosti

POTŘEBUJEME NOVÁ ANTIBIOTIKA V INTENZIVNÍ PÉČI? Milan Kolář Ústav mikrobiologie FNOL a LF UP v Olomouci

M. Laichmanová NOVINKY V NABÍDCE KONTROLNÍCH KMENŮ ČESKÉ SBÍRKY MIKROORGANISMŮ

Citlivost a rezistence mikroorganismů na antimikrobiální léčiva

kontaminovaných operačních výkonů, ale i u čistých operací, při kterých dochází k aplikaci

UNIVERZITA OBRANY BRNO FAKULTA VOJENSKÉHO ZDRAVOTNICTVÍ HRADEC KRÁLOVÉ

NÁRODNÍ PROGRAM SLEDOVÁNÍ REZISTENCÍ K ANTIMIKROBIKŮM U VETERINÁRNĚ VÝZNAMNÝCH PATOGENŮ. část I. za rok 2017

D E T E K C E G E N Ů R E Z I S T E N C E N A A N T I B I O T I K A V K A L E C H Z Č O V

STRATEGIE TERAPEUTICKÉHO MONITOROVÁNÍ ANTIBIOTIK

POH O L H E L D E U D U M

DISKY PRO TESTOVÁNÍ CITLIVOSTI K ANTIBIOTIKŮM ZÁSOBNÍK PRO 50 DISKŮ

TIGECYKLIN. Milan Kolář, Miroslava Htoutou Sedláková Ústav mikrobiologie, FNOL a LF UP

KARLOVA UNIVERZITA V PRAZE FARMACEUTICKÁ FAKULTA HRADEC KRÁLOVÉ

Stav rezistence bakteriálních patogenů v Karlovarském kraji.

Využití molekulárně-biologických postupů a multimarkerových strategií v intenzívní péči. Marek Protuš

Využití molekulárně-biologických postupů a multimarkerových strategií v intenzívní péči. Marek Protuš

Tamara Bergerová Ústav mikrobiologie FN Plzeň. Kongres ČSIM Hradec Králové 1

Stanovení citlivosti k antibiotikům. Stanovení koncentrace antibiotik.

ROZDĚLENÍ ANTIMIKROBIÁLNÍCH LÁTEK, VYŠETŘOVÁNÍ CITLIVOSTI. M.Hanslianová Antibiotické středisko OKM FN Brno

Úskalí ATB léčby v těhotenství/šestinedělí. V. Adámková Klinická mikrobiologie a ATB centrum ÚLBLD 1. LF UK a VFN Praha

ANTIMIKROBNÍ PŘÍPRAVKY

BBL Sensi-Disc Antimicrobial Susceptibility Test Discs

Transkript:

European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing Breakpointy průměrů zón pro rychlé vyšetření antimikrobní citlivosti přímo z hemokultivačních lahviček (RAST) Verze 1.1, platná od 2.5.2019 Tento dokument se doporučuje citovat takto: "The European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing. Zone diameter breakpoints for rapid antimicrobial susceptibility testing (RAST) directly from blood culture bottles. Version 1.1, 2019. http://www.eucast.org." Obsah Strana Další informace Poznámky 2 Informace o technické nejistotě 3 Změny 4 Návod ke čtení Tabulek breakpointů RAST 5 Kontrola kvality 6 Escherichia coli 8 Klebsiela pneumoniae 9 Pseudomonas aeruginosa 10 Acinetobacter baumannii 11 Staphylococcus aureus 12 Enterococcus faecalis 13 Enterococcus faecium 14 Streptococcus pneumoniae 15 1

European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing Breakpointy průměrů zón pro rychlé vyšetření antimikrobní citlivosti přímo z hemokultivačních lahviček (RAST) Verze 1.10, platná od 2.5.2019 1. Pro interpretaci průměrů zón získaných metodou RAST se používají Tabulky breakpointů pro rychlé testování antimikrobní citlivosti (RAST). 2. Breakpointy jsou specifické pro každý druh a čas inkubace a nemohou být použity pro druhy a inkubační časy, které tabulky neuvádí. 3. Breakpointy RAST zařazují výsledky do tří kategorií citlivosti: C - Citlivý, standardní dávkovací režim: mikroorganizmus je kategorizován jako citlivý při standardním dávkovacím režimu, je-li úroveň aktivity antimikrobního přípravku podávaného ve standardním dávkování spojená s vysokou pravděpodobností léčebného úspěchu. R - Rezistentní: Mikroorganizmus je definován jako rezistentní, je-li úroveň aktivity antimikrobního přípravku spojená s vysokou pravděpodobností selhání léčby i při zvýšené expozici. RAST používá kategorii I (citlivý při zvýšené expozici) pouze zařadí-li se do kategorie I mikroorganizmy divokého typu. V takovém případě se použije arbitrární breakpoint pro C > 50 mm. Izoláty s většími průměry zón než je rozmezí ATU by měly být hlášeny jako "Citlivý, zvýšená expozice". 4. U všech kombinací bakterie-antibiotikum je oblast, v níž po kratší době inkubace je nesnadné oddělit citlivé a rezistentní izoláty a interpretace výsledků je nejistá. tuto oblast označuje jako technickou nejistotu (ATU-Area of Technical Uncertainity). Jedná se o rozmezí inhibičních zón, kde je kategorizace pochybná. Další informace o ATU a o způsobu řešení ATU pomocí metody RAST uvádí tabulka na samostatné stránce. 2

European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing Breakpointy průměrů zón pro rychlé vyšetření antimikrobní citlivosti přímo z hemokultivačních lahviček (RAST) Verze 1.1, platná od 2.5.2019 Jak zvládnout technickou nejistotu v RAST přímo z hemokultivačních lahviček. Oblast technické nejistoty (ATU) je typicky uvedena jako průměr inhibičních zón v rozmezí 1-3 mm. Při použití metody RAST se vyskytují ATU u všech kombinací bakterie-antibiotikum. V oblasti ATU je nesnadné rozlišit kategorie citlivosti (C, I a R). Chyby v interpretacích C, I a R se v této oblasti dramaticky zvyšují a proto se nedoporučuje interpretovat kategorie citlivosti. Obecně platí, že čím je doba inkubace kratší, tím vyšší je počet výsledků označených jako ATU. Výsledky C a R získané metodou RAST jsou spolehlivé a lze je hlásit. Co dělat při zjištění ATU? Hodnoty naměřené v ATU se neinterpretují. Hlášeny mohou být pouze výsledky, které spadají do kategorie C nebo R. Pokud po 4 hodinách průměr inhibiční zóny u daného antibiotika 1) nelze spolehlivě odečíst nebo 2) je v oblasti ATU, výsledek se neodečítá. Plotny se do 10 minut reinkubují a znovu se odečítají po 6 hodinách, a je-li nutno po 8 hodinách (od začátku inkubace). Pokud ani po 8 hodinách nelze výsledek uzavřít, vyšetří se citlivost standardní diskovou difúzní metodou. doporučuje laboratořím, aby do výsledků pozitivních hemokultivací zahrnuly komentář, který vysvětluje, proč některé výsledky někdy nelze hlásit. Komentář by mohl znít takto: "Při vyšetření antimikrobní citlivosti přímo z pozitivních hemokultivačních lahviček, kdy se výsledky odečítají po 4, 6 nebo 8 hodinách, lze hlásit pouze spolehlivé výsledky. Neúplný výsledek vyšetření citlivosti získaný po krátké inkubaci může být později doplněn dalšími výsledky". 3

European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing Breakpointy průměrů zón pro rychlé vyšetření antimikrobní citlivosti přímo z hemokultivačních lahviček (RAST) Verze 1.1, platná od 2.5.2019 Tento domument by měl být citován takto: "European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing. Zone diameter breakpoints for rapid antimicrobial susceptibility testing (RAST) directly from blood culture bottles. Version 1.1, 2019. http://www.eucast.org." Verze 1.1, 02-05-2019 Poznámky Změny (buňky obsahující změny, odstranění nebo přidání) proti v. 1.0 jsou označeny žlutě. Změněné komentáře jsou podtrženy. Poznámka 3: Přidána informace : "I - Citlivý, zvýšená expozice". QC Přidána informace o typu krve použité pro RAST. Opravena tisková chyba o množství přidaných bakterií. E. coli Komentář 1 revidován. Přidána informace o screeningu cefotaximu a ceftazidimu. K. pneumoniae Komentář 2 revidován. Přidána informace o screeningu meropenemu. A. baumannii Nová tabulka. S. aureus Komentář 1 revidován. Přidána informace o screeningu cefoxitinu. Komentář 2 revidován. Přidána informace o screeningu norfloxacinu. Komentář 3 revidován. Přidána informace o indukované rezistenci ke klindamycinu. E. faecalis Komentář 2 revidován. Přidána informace o screeningu gentamicinu. E. faecium Komentář 2 revidován. Přidána informace o screeningu gentamicinu. S. pneumoniae Komentář 1 revidován. Přidána informace o screeningu oxacilinu. Komentář 2 revidován. Přidána informace o screeningu norfloxacinu. Komentář 2 revidován. Přidána informace o o indukované rezistenci ke klindamycinu. 4

Jak používat tabulku breakpointů RAST Druh Každý druh se stanovenými breakpointy pro 4, 6 a 8 h inkubace je uveden v samostatné tabulce Průměry zón pro odečítání ploten a interpretaci po 4, 6 a 8 h Tabulka breakpointů v.1.1, RAST platná od 2.5.2019 RAST Půda: Inokulum: Inkubace: Délka inkubace: Odečítání: Kontrola kvality RAST pro implementaci metody RAST: Standardní kontrola kvality: Metoda a kontrola kvality RAST Obsah disku C ATU R < C ATU R < C ATU R < A 30-6 17 12-16 12 18 14-17 14 18 14-17 14 B 5 15 13-14 13 16 14-15 14 17 15-16 15 C 10 15 12-14 12 16 14-15 14 17 15-16 15 D 10 14 13-15 14-16 15 - E 10 18 15-17 15 17 15-16 15 17 15-16 15 F 5-10 10-10 10-10 10 G 30 15 13-14 13 15 13-14 13 15 13-14 13 H 10 14 12-13 12 14 12-13 12 14 12-13 12 I 10 14 12-13 12 15 13-14 13 15 13-14 13 ATU-oblast technické nejistoty bez kategorizace citlivosti, ve výsledku se nechá prázdné pole Žádné breakpointy, citlivost nelze spolehlivě hlásit Žádné breakpointy, rezistenci nelze spolehlivě hlásit 5

European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing RAST directly from blood culture bottles Kritéria pro kontrolu kvality metody RAST při použití hemokultivačních lahviček naočkovaných kmeny pro kontrolu kvality. doporučuje provádět denně standardní rutinní kontrolu kvality materiálů a postupů používaných při vyšetřování AST standardní metodou diskové difúze. Tři kontrolní kmeny uvedené v příslušných tabulkách níže slouží pro kontrolu metody RAST - inokulaci ploten pro diskovou difúzní metodu přímo z hemokultivačních lahvičekpo inkubaci 4, 6 a 8 hodin. Tato kontrola kvality je relevantní při zavádění metody v laboratoři, při školení nových zaměstnanců nebo při změně systému hemokultivace nebo jiných změnách v systému. Do hemokultivačních lahviček se očkuje příslušný kmen pro kontrolu kvality v objemu 1 ml roztoku obsahujícího 100-200 CFU/ml* a 5 ml sterilní koňské nebo ovčí krve. Inokulované lahvičky se inkubují v zařízení pro hemokultivaci a po pozitivním signálu se zpracují podle metodologie RAST. * 100-200 CFU/ml = suspenze upravená na zákal 0,5 McFarlanda se ředí 1: 1 000 000 E. coli ATCC 25922 Obsah disku Rozmezí Cíl Rozmezí Cíl Rozmezí Cíl Piperacilin-tazobaktam 30-6 13-18 15-16 15-20 17-18 15-21 18 Cefotaxim 5 14-20 17 17-23 20 17-23 20 Ceftazidim 10 13-19 16 15-21 18 16-22 19 Meropenem 10 14-20 17 18-24 21 19-25 22 Ciprofloxacin 5 19-25 22 22-28 25 23-29 26 Amikacin 30 13-18 15-16 14-20 17 15-21 18 Gentamicin 10 13-18 15-16 14-20 17 15-21 18 Tobramycin 10 13-18 15-16 14-20 17 14-20 17 6

Kritéria pro kontrolu kvality metody RAST při použití hemokultivačních lahviček naočkovaných kmeny pro kontrolu kvality. S. aureus ATCC 29213 Obsah disku Rozmezí Cíl Rozmezí Cíl Rozmezí Cíl Cefoxitin 30 15-19 17 17-22 19-20 9-24 21-22 Norfloxacin 10 13-17 15 14-19 16-17 15-20 17-18 Gentamicin 10 14-19 16-17 15-21 18 15-21 18 Erytromycin 15 15-20 17-18 18-24 21 18-24 21 Klindamycin 2 15-20 17-18 17-23 20 18-24 21 S. pneumoniae ATCC 49619 Obsah disku Rozmezí Cíl Rozmezí Cíl Rozmezí Cíl Oxacilin 1 8-12 10 9-13 11 9-14 11-12 Norfloxacin 10 12-17 14-15 13-18 15-16 13-19 16 Erytromycin 15 16-22 19 18-24 21 19-25 22 Klindamycin 2 15-20 17-18 16-21 18-19 16-22 19 Trimetoprim-sulfamethoxazol 1,25-23,75 13-19 16 14-20 17 14-20 17 7

Tabulka breakpointů RAST v. 1.1, platná od 2.5.2019 Escherichia coli Půda: Mueler-Hinton (MH) agar Inokulum: 125 ± 25 l přímo z pozitivní hemokultivační lahvičky Inkubace: 35±1ºC, aerobně Délka inkubace: 4, 6 a 8 hodin odraženém světle proti tmavému pozadí. C ATU R < C ATU R < C ATU R < Piperacilin-tazobaktam 30-6 17 12-16 12 18 14-17 14 18 14-17 14 Cefotaxim 1 5 15 13-14 13 16 14-15 14 17 15-16 15 Ceftazidim 1 10 15 12-14 12 16 14-15 14 17 15-16 15 Meropenem 2 10 18 15-17 15 17 15-16 15 17 15-16 15 Ciprofloxacin 5 17 14-16 14 20 17-19 17 20 17-19 17 Amikacin 30 15 13-14 13 15 13-14 13 15 13-14 13 Gentamicin 10 14 12-13 12 14 12-13 12 14 12-13 12 Tobramycin 10 14 12-13 12 15 13-14 13 15 13-14 13 Poznámka: 1. Breakpointy cefalosporinů pro E. coli detekují všechny klinicky významné mechanizmy rezistence. Přítomnost nebo absence ESBL sama o sobě nemá vliv na kategorii citlivosti. Pro účely veřejného zdravotnictví a kontrolu infekcí se nicméně doporučuje ESBL detekovat a charakterizovat. Viz dokument screening mechanizmů rezistence RAST (link dokumentu) pro screening předělů (cut-off). 2. Breakpointy karbapenemů pro E. coli detekují všechny klinicky významné mechanizmy rezistence. Přítomnost nebo absence karbapenemázy sama o sobě nemá vliv na kategorii citlivosti. Pro účely veřejného zdravotnictví a kontrolu infekcí se nicméně doporučuje karbapenemázy detekovat a charakterizovat. Viz dokument screening mechanizmů rezistence RAST (link dokumentu) pro screening předělů (cut-off). 8

Tabulka breakpointů RAST v.1.1, platná od 2.5.2019 Klebsiella pneumoniae Půda: Mueler-Hinton (MH) agar Inokulum: 125 ± 25 l přímo z pozitivní hemokultivační lahvičky Inkubace: 35±1ºC, aerobně Délka inkubace: 4, 6 a 8 hodin odraženém světle proti tmavému pozadí. C ATU R < C ATU R < C ATU R < Piperacilin-tazobaktam 30-6 15 12-14 12 16 13-15 13 16 13-15 13 Cefotaxim 1 5 15 12-14 12 18 15-17 15 18 15-17 15 Ceftazidim 1 10 15 13-14 13 16 14-15 14 16 14-15 14 Meropenem 2 10 15 13-14 13 17 15-16 15 17 15-16 15 Ciprofloxacin 5 18 15-17 15 18 15-17 15 19 16-18 16 Amikacin 30 15 13-14 13 14 12-13 12 15 13-14 13 Gentamicin 10 14 12-13 12 14 12-13 12 13 11-12 11 Tobramycin 10 14 12-13 12 13 11-12 11 13 11-12 11 Poznámka: 1. Breakpointy cefalosporinů pro K. pneumoniae detekují všechny klinicky významné mechanizmy rezistence. Přítomnost nebo absence ESBL sama o sobě nemá vliv na kategorii citlivosti. Pro účely veřejného zdravotnictví a kontrolu infekcí se nicméně doporučuje ESBL detekovat a charakterizovat. Viz dokument screening mechanizmů rezistence RAST (link dokumentu) pro screening předělů (cut-off). 2. Breakpointy karbapenemů pro K. pneumoniae detekují všechny klinicky významné mechanizmy rezistence. Přítomnost nebo absence karbapenemázy sama o sobě nemá vliv na kategorii citlivosti. Pro účely veřejného zdravotnictví a kontrolu infekcí se nicméně doporučuje karbapenemázy detekovat a charakterizovat. Viz dokument screening mechanizmů rezistence RAST (link dokumentu) pro screening předělů (cut-off).. 9

Pseudomonas aeruginosa Tabulka breakpointů RAST 1.1, platná od 2.5.2019 Půda: Mueler-Hinton (MH) agar Inokulum: 125 ± 25 l přímo z pozitivní hemokultivační lahvičky Inkubace: 35±1ºC, aerobně Délka inkubace: 6 a 8 hodin odraženém světle proti tmavému pozadí. 6 hodin 8 hodin C ATU R < C ATU R < Piperacilin-tazobaktam 30-6 16 13-15 13 17 14-16 14 Ceftazidim 10 15 12-14 12 16 13-15 13 Imipenem 10 17 15-16 15 17 15-16 15 Meropenem 10 16 14-15 14 16 14-15 14 Ciprofloxacin 5 19 17-18 17 22 20-21 20 Gentamicin 10 14 12-13 12 15 13-14 13 Tobramycin 10 15 13-14 13 16 14-15 14 10

Tabulka breakpointů RAST v. 1.1, platná od 2.5.2019 Acinetobacter baumannii Půda: Mueler-Hinton (MH) agar Inokulum: 125 ± 25 l přímo z pozitivní hemokultivační lahvičky Inkubace: 35±1ºC, aerobně Délka inkubace: 4, 6 a 8 hodin odraženém světle proti tmavému pozadí. C ATU R < C ATU R < C ATU R < Imipenem 10 18 16-17 10 19 17-18 17 19 17-18 17 Meropenem 10 15 12-14 12 17 15-16 15 18 16-17 16 Ciprofloxacin 5 50 1 14-15 14 50 1 15-16 15 50 1 16-17 16 Levofloxacin 5 17 15-16 15 18 16-17 16 19 17-18 17 Amikacin 30-13 13 15 13-14 13 15 13-14 13 Gentamicin 10 14 12-13 12 14 12-13 12 15 13-14 13 Tobramycin 10 14 12-13 12 14 12-13 12 14 12-13 12 Trimetoprim-sulfametoxazol 2 1,25-23,75 13 2 12-13 2 10-12 2 10 2 13 2 10-12 2 10 2 Poznámka: 1. Breakpoint průměru zóny > 50 mm je arbitrární předěl k prevenci označení izolátu jako "citlivý". Izoláty s průměry zón většími než rozmezí ATU by měly být hlášeny jako " Citlivý, zvýšená expozice". 2. Odečítá se vnější okraj zóny a růst uvnitř zóny se přehlíží. 11

Tabulka breakpointů RAST v. 1.1, platná od 2.5.2019 Staphylococcus aureus Půda: Mueler-Hinton (MH) agar Inokulum: 125 ± 25 l přímo z pozitivní hemokultivační lahvičky Inkubace: 35±1ºC, aerobně Délka inkubace: 4, 6 a 8 hodin odraženém světle proti tmavému pozadí. C ATU R < C ATU R < C ATU R < Cefoxitin (screening) 1 30 16 15 15 18 17 17 19 18 18 Norfloxacin (screening) 2 10 13 12-14 13 13 15 14 14 Gentamicin 10 14 12-13 12 15 13-14 13 16 14-15 14 Klindamycin 3 2 16 15-19 16-18 16 19 16-18 16 Poznámky 1. Izoláty citlivé k cefoxitinu jsou citlivé ke všem beta-laktamům u nichž jsou uvedeny breakpointy (včetně těch u nichž je Poznámka) v Tabulce klinických breakpointů (standardní metodologie). Izoláty rezistentní k cefoxitinu jsou pravděpodobně rezistentní k meticilinu a tudíž ke všem beta-laktamům s výjimkou ceftarolinu a ceftobiprolu. 2. Diskový difuzní test s norfloxacinem lze použít pro screening rezistence k fluorochinolonům. Izoláty kategorizované jako citlivé k norfloxacinu lze hlásit citlivé k ciprofloxacinu, levofloxacinu, moxifloxacinu a ofloxacinu. Izoláty kategorizované jako ne-citlivé by měly být testovány standardní metodologií na citlivost k jednotlivým fluorochinolonům. 3. Test na indukovanou rezistenci ke klindamycinu: disky s klindamycinem a erytromycinem se umístí ve vzdálenosti 6-12 mm od sebe (od okrajů disků). Po 6 a 8 hodinách se odečítá, zda se vytvořil fenomén D. Pozitivní test je spolehlivý, negativní výsledek však nezaručuje nepřítomnost indukované rezistence. Poznámka: Pro standardní vyšetření citlivosti ke klindamycinu se použije samostatný disk klindamycinu (aktivita erytromycinového disku může interferovat s odečtem standardní citlivosti ke klindamycinu). 12

Enterococcus faecalis Tabulka breakpointů RAST v. 1.1, platná od 2.5.2019 Půda: Mueler-Hinton (MH) agar Inokulum: 125 ± 25 ul přímo z pozitivní hemokultivační lahvičky Inkubace: 35±1ºC, aerobně Délka inkubace: 4, 6 a 8 hodin odraženém světle proti tmavému pozadí. 4 hodiny 6 hodin 8 hodin C ATU R < C ATU R < C ATU R < Ampicilin 1 2 9 8-9 8-9 8 - Imipenem 10 14 13-15 14-16 15 - Gentamicin (test pro vysokou - HL-rezistenci ke gentamicinu) 2 30 16 14-15 14 16 14-15 14 16 14-15 14 Vankomycin 3 5-10 10-10 10-10 10 Linezolid 10 17 14-16 14 17 14-16 14 17 14-16 14 Poznámky 1. Rezistence k ampicilinu u E. faecalis je vzácná a měla by být ověřena vyšetřením MIC. Citlivost k ampicilinu, amoxicilinu a piperacilinu s inhibitorem beta-laktamázy a bez něj lze odvodit od ampicilinu. 2. Pro screnning vysokého stupně rezistence k aminoglykosidům (HLAR) lze použít gentamicin. Negativní test: izolát je divokého typu a je rezistentní v nízkém stupni. Lze očekávat synergický účinek s peniciliny nebo s glykopeptidy. Pozitivní test: izolát je rezistentní ve vysokém stupni ke gentamicinu a k aminoglykosidům, pravděpodobně s výjimkou streptomycinu (který musí být případně testován samostatně, viz standardní tabulka breakpointů ). Synergii s peniciliny nebo s glykopeptidy nelze očekávat. 3. Metodou RAST nelze rozlišit mezi ostrým a rozmazaným okrajem zóny. Rezistenci k vankomycinu způsobenou genem vana lze detekovat pomocí RAST a uvedených breakpointů, avšak rezistence zprostředkovaná vanb nemusí být vždy odhalena. 13

Tabulka breakpointů RAST v. 1.1, platná od 2.5.2019 Enterococcus faecium Půda: Mueler-Hinton (MH) agar Inokulum: 125 ± 25 l přímo z pozitivní hemokultivační lahvičky Inkubace: 35±1ºC, aerobně Délka inkubace: 4, 6 a 8 hodin odraženém světle proti tmavému pozadí. C ATU R < C ATU R < C ATU R < Ampicilin 1 2 10 8-9 8 10 8-9 8 10 8-9 8 Imipenem 10-18 18-18 18-18 18 Gentamicin (test pro vysokou - 2 HL-rezistenci ke gentamicinu) 30 13 11-12 11 13 11-12 11 14 12-13 12 Vankomycin 3 5-12 12-13 13-13 13 Linezolid 10 - - - 20 17-19 17 19 17-18 17 Poznámky 1. Pro interpretaci, viz komentář screeningového testu v poslední verzi Tabulek klinických breakpointů (standardní metoda). 2. Pro screnning vysokého stupně rezistence k aminoglykosidům (HLAR) lze použít gentamicin. Negativní test: izolát je divokého typu a je rezistentní v nízkém stupni. Lze očekávat synergický účinek s peniciliny nebo s glykopeptidy. Pozitivní test: izolát je rezistentní ve vysokém stupni ke gentamicinu a k aminoglykosidům, pravděpodobně s výjimkou streptomycinu (který musí být případně testován samostatně, viz standardní tabulka breakpointů ). Synergii s peniciliny nebo s glykopeptidy nelze očekávat. 3. Metodou RAST nelze rozlišit mezi ostrým a rozmazaným okrajem zóny. Rezistenci k vankomycinu způsobenou genem vana lze detekovat pomocí RAST a uvedených breakpointů, avšak rezistence zprostředkovaná vanb nemusí být vždy odhalena. 14

Streptococcus pneumoniae Tabulka breakpointů RAST v. 1.1, platná od 2.5.2019 Půda: Mueler-Hinton agar pro náročné bakterie (MH-F) Inokulum: 125 ± 25 l přímo z pozitivní hemokultivační lahvičky Inkubace: 35±1ºC, CO 2 Délka inkubace: 4, 6 a 8 hodin odraženém světle. C ATU R < C ATU R < C ATU R < Oxacilin (screening) 1 1 16 14-15 14 19 17-18 17 20 18-19 18 Norfloxacin (screening) 2 10 11 9-10 9 12 10-11 10 12 10-11 10 Erytromycin 15 19 17-18 17 19 17-18 17 19 17-18 17 Klindamycin 3 2 17 15-16 15 17 15-16 15 17 15-16 15 Trimetoprim-sulfamethoxazol 1,25-23,75 12 10-11 10 12 10-11 10 12 10-11 10 Poznámky: 1. Izoláty citlivé k oxacilinu se hlásí jako citlivé ke všem beta-laktamům, u nichž jsou ve standardních Tabulkách klinických breakpointů uvedeny breakpointy (včetně těch, u nichž je Poznámka). Izoláty rezistentní k oxacilinu se u meningitidy hlásí jako rezistentní. Pokud je průměr zóny kolem oxacilinu 8 mm (breakpoint shodný pro 4, 6 a 8 hodin), izolát se hlásí jako citlivý k ampicilinu, amoxicilinu a piperacilinu (bez ohledu na přítomnost inhibitoru beta-laktamázy), k cefotaximu, ceftriaxonu, ceftarolinu, ceftobiprolu a cefepimu. V opačném případě lze provést standardní test s příslušným antibiotikem. 2. Diskový difuzní test s norfloxacinem lze použít pro screening rezistence k fluorochinolonům. Izoláty kategorizované jako citlivé k norfloxacinu lze hlásit citlivé k levofloxacinu a moxifloxacinu. Izoláty kategorizované jako ne-citlivé by měly být testovány standardní metodologiií na citlivost k jednotlivým fluorochinolonům. 3. 3. Test na indukovanou rezistenci ke klindamycinu: disky s klindamycinem a erytromycinem se umístí ve vzdálenosti 6-12 mm od sebe (od okrajů disků). Po 6 a 8 hodinách se odečítá, zda se vytvořil fenomén D. Pozitivní test je spolehlivý, negativní výsledek však nezaručuje nepřítomnost indukované rezistence. Poznámka: Pro standardní vyšetření citlivosti ke klindamycinu se použije samostatný disk klindamycinu (aktivita erytromycinového disku může interferovat s odečtem standardní citlivosti ke klindamycinu). 15