Projekt: Příjemce: Digitální učební materiály ve škole, registrační číslo projektu CZ.1.07/1.5.00/34.0527 Střední zdravotnická škola a Vyšší odborná škola zdravotnická, Husova 3, 371 60 České Budějovice Název materiálu: Autor materiálu: Mikrobiologická diagnostika MUDr. Zdeňka Kasková Datum (období) vytvoření: 23. 2. 2013 Zařazení materiálu: Šablona: Inovace a zkvalitnění výuky prostřednictvím ICT (III/2) Sada: OZ1 Předmět: Číslo DUM: Ochrana veřejného zdraví, 2. ročník 3 Tematická oblast: Ochrana veřejného zdraví Ověření materiálu ve výuce: Datum ověření: Ověřující učitel: Třída: 24. 9. 2013 Mgr. Hana Rybáková ZDA 2.B Popis způsobu použití materiálu ve výuce: Výuková elektronická prezentace, která je určena pro seznámení žáků s významem a základními principy mikrobiologické diagnostiky. Materiál může sloužit jako názorná pomůcka doplňující výklad učitele, ale také je vhodný pro domácí přípravu žáků (např. zpřístupněním formou e-learningu). Materiál obsahuje zpětnou vazbu ověřující pochopení látky v podobě závěru s otázkami k tématu. Tento výukový materiál je spolufinancován Evropským sociálním fondem a státním rozpočtem České republiky.
Mikrobiologická diagnostika MUDr. Zdeňka Kasková 2. ročník
Mikrobiologická diagnostika Umožňuje stanovení etiologické diagnózy. Je zaměřená na: průkaz, izolaci a identifikaci původce onemocnění citlivost mikroba na antibiotika nebo chemoterapeutika průkaz imunologické odpovědi pacienta
Odběr biologického materiálu Zásady pro správný odběr: dostatečné množství vzorku z místa infekčního procesu ve vhodném období onemocnění stanoveným postupem za sterilních podmínek před zahájením antimikrobiální léčby správně poučenému pacientovi šetrně opakovaně
Odběr biologického materiálu Biologický materiál musí být: zřetelně označený se správně vyplněným průvodním listem zabezpečený před poškozením transportovaný a skladovaný za podmínek umožňujících přežití mikroba Každý biologický materiál se musí považovat za infekční!
Odběr biologického materiálu K mikrobiologickému vyšetření se zasílají různé druhy vzorků, nejčastěji: krev moč mozkomíšní mok respirační sekrety stolice a rektální výtěry hnis cervikální sekret exsudáty a transudáty Odběr likvoru lumbální punkcí [1]
Mikrobiologické vyšetření Je předpokladem pro zahájení kauzální terapie a pro zamezení dalšího šíření nákazy. Provádí se pro: určení původce onemocnění vyhledávání a kontrolu bacilonosičů kontrolu potravin, vody, ovzduší kontrolu sterility
Mikrobiologické vyšetření Pro zpracování vzorků materiálu se užívá několik vyšetřovacích metod: 1) mikroskopické vyšetření 2) kultivační vyšetření 3) pokus na zvířeti 4) sérologické vyšetření
Mikroskopické vyšetření Užívá se pro přímé vyšetření infekčního materiálu. Vyšetření světelným mikroskopem pozorují se preparáty: a) nativní (živé) význam orientační (pohyb a dělení mikrobů) b) fixované (usmrcené teplem nebo chemicky) a barvené význam diagnostický Vyšetření elektronovým mikroskopem pozorují se viry a jemnější buněčné struktury
Mikroskopické vyšetření [2] Světelný mikroskop [3] Elektronový mikroskop
Kultivační vyšetření Kultivace je pomnožování mikrobů v umělém prostředí, které splňuje podmínky nutné pro jejich metabolismus a růst. Podmínkou je správný výběr kultivačního média a izolace původce v čisté kultuře. Tkáňové kultury nebo kuřecí embrya jsou kultivační média pro viry, ty poškozují buňky cytopatický efekt
Kultivační vyšetření Půdy jsou kultivační média pro bakterie, houby a prvoky a) tekuté nejčastěji bujón nebo játrový bujón, mikroorganismy na nich rostou v zákalu, v sedimentu nebo jako povrchová blanka; využívají se především pro pomnožování b) tuhé - nejčastěji obyčejný nebo krevní agar, mikroorganismy na nich rostou v koloniích, podle jejich charakteru, vzhledu, pachu je možné rozlišovat jednotlivé druhy
Kultivační vyšetření [4] Tuhá půda s rostoucími koloniemi bakterií
Kultivační vyšetření Postup nanášení materiálu do tekuté a tuhé půdy [5] [7] Růstová křivka bakterií v kolonii [6]
Sérologické vyšetření Je to vyšetření nepřímé založené na průkazu tvorby protilátek v krevním séru nebo jiných tělních tekutinách. Je nutné odebrat nejméně dva vzorky v rozmezí dvou až tří týdnů sleduje se dynamika změn hladiny protilátek: několikanásobné zvýšení právě probíhající onemocnění stejná nebo nižší hladina infekce prodělaná v minulosti
Otázky a úkoly 1. Jaká je hlavní zásada pro zacházení s biologickým materiálem? 2. Které mikroorganismy není možné pozorovat světelným mikroskopem? 3. Co je podstatou kultivačního vyšetření? 4. Jaký význam má pozorování nativních preparátů? 5. Na čem je založeno sérologické vyšetření?
Seznam použité literatury a pramenů Použitá literatura: GÖPFERTOVÁ, Dana. Mikrobiologie,Imunologie,epidemiologie,hygiena - Teoretická učebnice. 3.,dopl. vyd. Praha: Triton, 2011. ISBN: 80-7254-223-0. PODSTATOVÁ, Dana. Mikrobiologie,Imunologie,hygiena - Teoretická učebnice. 1.vyd. Olomouc: Epava, 2001. ISBN: 80-86297-07-1. V prezentaci byly dále použity obrázky z následujících zdrojů: 1. Brainhell.[cit. 2013-02-23]. soubor dostupný pod licencí Creative Commons na WWW: http://cs.wikipedia.org/wiki/soubor:wikipedian_getting_a_lumbar_puncture_(2006).jpg 2. Moisey.[cit. 2013-02-23]. soubor dostupný pod licencí Creative Commons na WWW:http://cs.wikipedia.org/wiki/Soubor:Optical_microscope_nikon_alphaphot_%2B.jpg 3. Stahlkocher.[cit. 2013-02-23]. soubor dostupný pod licencí Creative Commons na WWW:http://cs.wikipedia.org/wiki/Soubor:Elektronenmikroskop.jpg 4. Bill Branson.[cit. 2013-02-23]. soubor dostupný pod licencí Creative Commons na WWW:http://cs.wikipedia.org/wiki/Soubor:Agarplate_redbloodcells_edit.jpg 5. Jan Přáda.[cit. 2013-02-23]. soubor dostupný pod licencí Creative Commons na WWW:wikiskripta.eu/index.php/Soubor:Postup_nanášení_2.png 6. Jan Přáda.[cit. 2013-02-23]. soubor dostupný pod licencí Creative Commons na WWW:wikiskripta.eu/index.php/Soubor:Postup_nanášení.png 7. Michal Komorniczak.[cit. 2013-02-23]. soubor dostupný pod licencí Creative Commons na WWW:http://commons.wikimedia.org/wiki/File:Bacterial_growth_cs.svg