Univerzita Karlova v Praze Lékařská fakulta v Plzni Centrální uživatelské zařízení Standardní operační postup č.2 Příjem a evidence zvířat V Plzni dne:.. Vypracoval: Ing. Pavel Klein, Ph.D., vedoucí CUZ. Schválil: Doc. MUDr. Milan Štengl, Ph.D., ředitel Biomedicínského centra. 1
Úvod Tento předpis upravuje podmínky získávání zvířat do CUZ, vč. veterinárních preventivních opatření Obsah 1. Získávání zvířat do CUZ 1.1. Nákup od dodavatele pokusných zvířat 1.2. Získání formou vědecké spolupráce 1.3. Nákup z farmového chovu 2. Příjmová karanténa 3. Kontrola zdravotního stavu zvířat 4. Povinnosti objednatele pokusných zvířat 5. Přejímka zvířat 6. Evidence a značení pokusných zvířat 7. Rezervace kapacit CUZ pro experimenty 1. Získávání zvířat do CUZ 1.1. Nákup od dodavatele pokusných zvířat Způsob získávání zvířat do pokusů ze schválených dodavatelských zařízení by měl být upřednostňován. Zvířata musí být dodána s platným veterinárním osvědčením; zvířata dodaná ze schválených dodavatelských zařízení nemusejí být zařazována do karantény. 1.2. Získání formou vědecké spolupráce Tímto způsobem jsou získávána pouze unikátní zvířata, která není možné získat jiným způsobem. Protože tento způsob získávání zvířat je potenciálně rizikový, určí vedoucí CUZ podmínky pro umístění takových zvířat do CUZ, vč. délky trvání karantény a požadovaných veterinárních vyšetření (není-li určeno v Projektu pokusu). 1.3. Nákup z farmového chovu Tímto způsobem jsou získávána zejména velká zvířata (prasata, ovce, kozy) a případně též králíci. Zvířata mohou být umístěna v CUZ pouze pokud pocházejí z chovů, kde není nepříznivá nákazová situace, a jsou dodána s platným veterinárním osvědčením. 2
2. Příjmová karanténa Pokud nejsou zvířata do CUZ dodána od registrovaného dodavatele pokusných zvířat, musí být umístěna do příjmové karantény. K tomuto účelu slouží vyhrazená chovná místnost 02.2.17. umožňující umístění myší, nebo potkanů, nebo křečků nebo pískomilů nebo morčat nebo králíků. Místnost může být jako karanténní použita vždy pouze pro jednu dodávku jednoho druhu zvířete. Po ukončení karantény jsou chovné nádoby a veškeré vybavení dekontaminovány. S podestýlkou je zacházeno jako s infekčním materiálem (kapitola 1.2. SOP3: Likvidace odpadů). Ošetřující personál vstupující do této místnosti má povinnost používat roušku a vyhrazený plášť. Manipulace se zvířaty je povolena pouze v rukavicích po předchozím ošetření předepsaným desinfekčním roztokem. Délka a podmínky karantény jsou určeny Projektem pokusu nebo rozhodnutím vedoucího CUZ. 3. Kontrola zdravotního stavu zvířat a zásady prevence šíření infekčních onemocnění Zvířata držená v podmínkách CUZ musejí být v maximální možné míře uchráněna před infekčními chorobami. Všechny osoby oprávněné vstupovat do chovných místností jsou povinny dodržovat hygienická opatření stanovená SOP 1: Vstup osob, a používat předepsané desinfekční prostředky dle desinfekčních plánů (přílohy SOP 5: Ochrana před infekčními agens a vnikem škůdců) a veškerá další opatření, která brání zavlečení a rozšíření nebezpečných nákaz v chovu. Malá zvířata (tj. myši, potkani křečci, pískomilové, morčata a králíci) jsou do pokusů přednostně objednávána v kvalitě SPF z chovů, ve kterých je pravidelně sledován zdravotní stav zvířat (bod 1.1. tohoto dokumentu). Vedoucí CUZ je před přijetím zvířat oprávněn požadovat aktuální výsledky laboratorních vyšetření zvířat z příslušného chovu. V případě velkých zvířat (prasata, ovce, kozy a králíci) je vedoucí CUZ oprávněn před umístěním zvířat v CUZ požadovat sérologická vyšetření, vakcinaci, kultivační a parazitologická vyšetření. V případě, že zvířata budou v CUZ zařazena do pokusu, jehož délka přesáhne 6 měsíců a/nebo jehož součástí je produkce potomstva, musí být aplikován program zdravotní kontroly minimálně v tomto rozsahu: 3
Tabulka 1: program zdravotní kontroly zvíře Bakteriologie Parazitologie Patologie Serologie místo odběru vyšetřované agens Myš průdušnice,plíce Pasteurella sp. Mycoplasma sp. Salmonella sp. kolon cervikální mízní uzliny vzestupný kolon Citrobacter sp. Streptobacillus moniliformis Helicobacter sp. Potkan průdušnice, plíce Bordetella sp. Pasteurella sp. Mycoplasma sp. cervikální mízní uzliny Corynebacterium kutscheri + další Salmonella sp. (Moč.měchýř) Trichosomoide s crassicauda morče průdušnice, plíce, konchy Bordetella sp. Pasteurella sp. cervikální mízní uzliny Corynebacterium kutscheri + další vagina/prepucium Salmonella sp. Pasteurella sp. křeček průdušnice, plíce Pasteurella sp. jejunum Campylobacter sp. Salmonella sp Králík průdušnice, plíce, konchy, spojivka ileocekální spoj. Bordetella sp. Pasteurella sp. Staphylococcus sp. Salmonella sp E. coli (O103) hlavních orgánů (srdce, plíce, játra, slezina, ledviny) kůže ( léze ) Dermatophyta 4
Tabulka 2: Sérologické profily (malé) Myš SEND, MVM, PVM, GDVII, REO-3, MHV, EDIM, MPV 1+2, NS-1, MPUL, MNV Potkan SEND, PVM, RCV / SDA, KRV, H-1, RPV1,RMV, NS-1, REO-3, GDVII, MPUL Křeček SEND, SV-5, PVM, REO-3, LCMV Králík SEND, PVM, SV-5, ROTA Vysvětlivky: SEND Sendai virus PVM - Pneumonia virus of mice GDVII - Theiler's murine encephalomyelitis Virus REO-3 - Reo virus type 3 MHV Mouse hepatitis virus EDIM- Epizootic diarrhea of infant mice (Rota virus) MPV 1+2 - Mouse parvovirus (1+2) NS 1 - Mouse parvovirus / Rat parvovirus NS-1 MPUL - Mycoplasma pulmonis MNV Murine norovirus RCV/SDA - Rat corona virus / Sialodacryoadenitis virus KRV - Kilham rat virus H-1 - Toolan's H-1 virus RPV1 - Rat parvovirus 1 RMV - Rat minute virus SV-5 - Simian virus 5 LCMV - Lymphocytic choriomeningitis virus ROTA - Rabbit Rota virus 5
4. Povinnosti objednatele pokusných zvířat Řešitelé jednotlivých experimentů smí objednávat zvířata pouze, pokud je pro daný experiment schválený Projekt pokusů. Při objednávání zvířat a způsobu přepravy jsou řešitelé povinni dodržovat podmínky Zákona na ochranu zvířat (246/1992 Sb.) a podmínky schváleného Projektu pokusu. Objednávání zvířat do pokusu je možné pouze se souhlasem vedoucího CUZ a po předchozím projednání podmínek, za kterých budou zvířata do CUZ dodána, převzata a umístěna. Každý plánovaný pokus musí být v předstihu projednán s vedoucím CUZ a musí být specifikovány veškeré požadavky experimentátora. Z každého projednání pokusů bude vytvořen zápis, který bude uvádět rozsah odpovědnosti členů výzkumných týmů a pracovníků CUZ. 5. Přejímka zvířat Osoba určená k přejímce zásilky zvířat je povinna zkontrolovat, zda zvířata byla dodána v souladu s objednávkou, zda souhlasí veškerá dokumentace a zda dodávka byla předána v pořádku a v nepoškozeném obalu, případně zda zvířata nejeví známky poruchy zdravotního stavu. V případě zjištění neshody je příjemce zásilky povinen bez zbytečného odkladu informovat vedoucího CUZ a dodávku zvířat řádně reklamovat v souladu s dohodnutými obchodními podmínkami. Přepravka s dodávkou malých laboratorních zvířat smí být otevřena pouze v karanténní místnosti, případně v chovné místnosti, ve které budou zvířata následně umístěna. V případě, že zvířata budou umístěna v mikroizolátorech, smí být přepravka otevřena pouze v laminárním boxu, kde budou zvířata i přemístěna do chovných nádob. Před otevřením přepravky (s výjimkou přepravek pro králíky) musí být její povrch ošetřen desinfekčním prostředkem. Při manipulaci s nově přijímanými zvířaty platí povinnost používat ochranné pomůcky: vyhrazené oblečení, roušku, čepici a rukavice. Rukavice musí být povrchově desinfikovány přípravky s obsahem 70-80% ethanolu nebo isopropanolu. Osoba pověřená přejímkou velkých zvířat je povinna zajistit bezpečné naskladnění zvířat do ustájovacích prostor. zvířata smí být naskladňována pouze vchodem vedoucím z atria do zádveří 02.1.23 po předchozím zajištění prostor kolem nákladního vozu mobilními zábranami. Manipulace se zvířaty musí být šetrná, aby byla minimalizována rizika poranění zvířat a manipulujícího personálu; povrchy podlahy, kde hrozí uklouznutí zvířat, musí být překryty protiskluzovými podložkami a pomocí mobilních zábran je vytvořen koridor, kterým jsou zvířata přiháněna, případně je zvíře bezpečně převezeno ve fixační kleci. Odpovědní řešitelé odpovídají za to, že zvířata přijatá do CUZ jsou ustájena v souladu s přílohou č. 8 Vyhlášky č. 419/2012 Sb., o ochraně pokusných zvířat. Výjimka je možná, pouze pokud je součástí schváleného Projektu pokusů. Dodržování těchto podmínek kontroluje Osoba odpovědná za péči o pokusná zvířata. 6
6. Evidence a značení pokusných zvířat Zvířata zařazená do pokusu musí být řádně označena v souladu s Projektem pokusů. Způsob značení zvířat není předepsán, ze záznamů však musí být možné dohledat konkrétního jedince, případně vrh mláďat. Odpovědní řešitelé jsou povinni v případě malých zvířat označovat chovné nádoby či klece štítkem, který obsahuje následující údaje: 1) Genotyp zvířete (v případě myší, potkanů, králíků a křečků) 2) Označení zvířete v pokusu 3) Číslo projektu pokusů 4) Jméno odpovědného řešitele, vč. kontaktního telefonu 5) Datum zařazení zvířete do experimentu 6) Datum ukončení experimentu (je-li známo) V případě, že předmětem experimentu je produkce potomstva, jsou odpovědní řešitelé povinni vést záznamy o připařování zvířat a evidenci živě narozených mláďat. Kopie těchto záznamů jsou archivovány na sekretariátu CUZ. Na dvířkách kotců pro velká zvířata jsou umístěny průhledné desky určené pro ukládání individuálních záznamů o zvířeti a komunikaci experimentátora s personálem CUZ. Na čelním listu jsou povinně uvedeny tyto údaje: 1) Označení zvířete v pokusu 2) Číslo projektu pokusů 3) Jméno odpovědného řešitele, vč. kontaktního telefonu 4) Datum zařazení zvířete do experimentu 5) Datum ukončení experimentu (je-li známo) Na čelní list rovněž musí experimentátoři čitelně uvádět veškeré požadavky na personál CUZ týkající se péče o zvířata (restrikce krmení před operací, medikace krmiva, požadavky na přemístění zvířete apod.), případně požadavky na ošetřujícího veterinárního lékaře. Experimentátoři jsou povinni na vyžádání předložit vedoucímu CUZ nebo jím pověřenému pracovníkovi veškeré záznamy o počtu použitých zvířat. 7. Rezervace kapacit CUZ pro experimenty V případě, že budou kapacity CUZ omezeny, sestaví vedoucí CUZ na základě projednání podmínek pokusů (bod 2 tohoto dokumentu) plán realizace experimentů v jednotlivých chovných místnostech a/nebo operačních sálech. Tento plán bude schvalován ředitelem BC. 7