Laboratorní příručka Hematologické a transfuzní oddělení Obsah 1. Identifikace laboratoře a důležité údaje... 2 2. Základní informace o laboratoři... 2 3. Úsek hematologie... 2 Úsek laboratorní...2 Hematologická vyšetření... 3 Imunohematologická laboratoř... 4 Imunohematologie speciální... 5 Úsek hematologické ambulance...5 Resorpční křivka pro Fe... 7 4. Transfúzní úsek... 7 5. Vyšetření a jejich referenční limity... 8 6. Kritické hodnoty laboratorních vyšetření...9 7. Seznam zkratek... 10 8. Seznam zkratek transfuzních přípravků... 12 FN Olomouc...12 KC Ostrava-Poruba... 12 Parametry pro analyzátor XT-1800:... 12 1

1. Identifikace laboratoře a důležité údaje Název oddělení: Hematologické a transfuzní oddělení Vsetínské nemocnice a.s. Umístění pracoviště: budova odborných ambulancí (poliklinika), přízemí Adresa: Nemocniční 955, 755 32 Vsetín Pracovní doba: Úseky HTO: Primář: Vrchní sestra: nepřetržitý provoz úsek hematologie úsek transfuzní MUDr. Karel Srovnalík Marie Rafajová 2. Základní informace o laboratoři Telefonní linky vedoucí oddělení 571 490 600 vedoucí laborant a pracovník zodpovědný za kontrolu a 571 490 602 zabezpečování jakosti vyšetřovna - hematologická ambulance, vyšetřovna dárců krve 571 490 603 a autologních odběrů krevní sklad, laboratoř předtransfuzního a koagulačního 571 490 604 vyšetření hematologická laboratoř 571 490 605 chodba 571 490 606 imunohematologická laboratoř 571 490 607 odběrový box - transfuzní část oddělení 571 490 608 hematologické ambulance - přípravna, pracovna sester 571 490 609 denní místnost, pohotovost 571 490 610 evidence dárců krve - transfuzní část oddělení 571 490 613 3. Úsek hematologie - dělí se na úsek laboratorní a ambulantní Úsek laboratorní Pokyny k provádění odběrů pro hematologická, imunohematologická a koagulační vyšetření prováděná na HTO. Krevní vzorky je nutno odebírat do předem označených zkumavek s jednoznačnou identifikací, vylučující záměnu (jméno, rodné číslo, oddělení, požadavek a u oddělení, které komunikují přes NIS také číslo žádanky v NIS). Žádanka musí obsahovat čitelné jméno, diagnózu, rodné číslo, pojišťovnu, IČZ, u akutních vyšetření napsat rovněž číslo telefonu, kam nahlásit výsledek. Donášková služba dodává vzorky na oddělení v pravidelných intervalech. 2

Hematologická vyšetření provádí hematologická laboratoř 1. Krevní obraz 8 základních parametrů 2. Krevní obraz + 5-populační diferenciál 24 parametrů 3. Krevní obraz + 5-populační diferenciál + vizuální nátěr 39 parametrů 4. Barvení krevních nátěrů, nátěrů sternálních a jiných punkcí 5. Zhotovení a hodnocení krevních nátěrů 6. Stanovení počtu retikulocytů 7. Vyšetření bazofilního tečkování erytrocytů 8. Stanovení počtu trombocytů 9. Vyšetření LE buněk 10. Absolutní počet eosinofilů 11. Vyšetření peritoneálního dialyzátu Odběr krve: žilní nesrážlivá, kapilární Odebraná krev musí být zpracovaná do 2 hodin po odběru, proto je nutné dopravit do laboratoře co nejdříve. Typ vyšetření Krevní obraz KO Retikulocyty Absolutní počet eosinofilů LE buňky Vyšetření peritoneálního dialyzátu Bazofilní tečkování erytrocytů Vlastní odběr zkumavka s K2EDTA odběr jako KO odběr jako KO 5 ml krve do penicilinky s perličkami (dodá laboratoř HTO), 20 minut třepat odběr do sterilní zkumavky odběr jako KO Koagulační vyšetření provádí koagulační laboratoř 1. Quickův test (Tromboplastinový čas) 2. APTT (aktivovaný parciální tromboplastinový test) 3. Stanovení fibrinogenu 4. Stanovení D Dimerů 5. Stanovení AT III 6. Stanovení LMW Heparinu anti Xa 7. Stanovení krvácivosti (na oddělení HTO) Odběr krve: žilní odebraná do citrátu sodného v poměru 1:9 získaná pokud možno atraumatickým odběrem Doprava ke zpracování ihned po odběru, laboratoř musí krevní vzorek zpracovat do 1 hodiny. 3

Typ vyšetření Quickův test APTT Fibrinogen LMW Heparin anti Xa D-Dimery AT III Krvácivost Vlastní odběr odběr z ucha Imunohematologická laboratoř - provádí níže uvedená vyšetření 1. Krevní skupina, + Rh faktor 2. Krevní skupina + Rh faktor u novorozence (žilní, pupečníková) 3. Prevence anti D 4. Du varianta (slabé D) u novorozenců 5. Nepřímý antiglobulinový test (NAT) 6. Přímý antiglobulinový test (PAT) 7. Osmotická rezistence erytrocytů 8. Chladové protilátky 9. Předtransfúzní vyšetření metodou sloupcové aglutinace: a) vyšetření antierytrocytárních protilátek u příjemce b) vyšetření kompatibility krevního přípravku (křížová zkouška) 10. Separace séra a plazmy 11. Sklad a výdej transfúzních přípravků Odběr krve: žilní nesrážlivá, event. srážlivá Typ vyšetření Vyšetření krevní skupiny, vyšetření podskupiny Křížové zkoušky Vyšetření protilátek PAT NAT Osmotická rezistence erytrocytů Chladové protilátky Vlastní odběr odběr jako KO odběr do předehřáté zkumavky na 37 C, ponechat v termostatu při 37 C až do úplného oddělení krevního séra od krevního koagulantu 4

Imunohematologie speciální - provádí níže uvedená vyšetření 1. Krevní skupiny + Rh faktor, Du variantu, u gravidních žen 2. Screening antierytrocytárních protilátek u gravidních žen 3. Volné protilátky u novorozenců 4. Přímý antiglobulinový test (PAT) 5. Nepřímý antiglobulinový test (NAT) 6. LAF alkalická fosfatáza v leukocytech 7. Diferencování krevních nátěrů, stanovení počtu retikulocytů 8. Diferencování sternálních punkcí 9. Hodnocení nátěrů vyšetření na LE buňky Odběr krve: žilní nesrážlivá, event. srážlivá Typ vyšetření vyšetření krevní skupiny, vyšetření podskupiny vyšetření protilátek PAT NAT volné protilátky LAF Vlastní odběr pouze kapilární krev, po domluvě s HTO Úsek hematologické ambulance Ordinační hodiny Pondělí Úterý Středa Čtvrtek Pátek 6.30-9.30 koagulační vyšetření, po 10. hodině hematologická poradna autologní odběry, po 10. hodině hematologická poradna odběry dárců krve, po 10. hodině hematologická poradna hematologická poradna 6.30-9.30 koagulační vyšetření, po 10. hodině hematologická poradna Hematologická ambulance provádí: cíleně zaměřené vyšetření klinickým hematologem komplexní vyšetření klinickým hematologem kontrolní vyšetření klinickým hematologem odběry venózní kapilární odběry odolnost krevních kapilár Rumppel-Leed terapeutické venepunkce sternální punkce hodnocení nátěrů kostní dřeně punkce uzlin cytologická vyšetření punktátu odběr LE buněk ambulantní transfúze 5

dispenzarizace pacientů s veškerými hematologickými onemocněními (poruchy krvetvorby, poruchy koagulace,.) provádí odběry pro speciální vyšetření (nutné dohodnout s hematologickou ambulancí) viz níže Speciální vyšetření Typ vyšetření Vlastní odběr Typizace lymfocytů 2 zkumavky s K 2 EDTA - po horní rysku, žádanka dvojmo,telefonicky domluvit přes HTO,které objedná vyšetření, vyšetřuje FN Olomouc- Hemato-onkologická klinika Imunologická laboratoř, výsledek je za 2-3 týdny, telefonicky do tří dnů. Trombofilní markery kompletně 2 zkumavky nesrážlivé krve odběr do koagulačních zkumavek s citrátem sodným odeslat na HTO spolu s žádankou-zamrazí se, vyšetřuje FN Olomouc Hematoonkologická klinika - koagulační laboratoř.výsledek je za tři týdny. Protein C a protein S 2 zkumavky nesrážlivé krve odběr do koagulačních zkumavek s citrátem sodným odeslat na HTO spolu s žádankou-zamrazí se, vyšetřuje FN Olomouc Hematoonkologická klinika - koagulační laboratoř. Výsledek je za tři týdny. Molekulárně genetické vyšetření trombofilních 1 zkumavka nesrážlivé krve - odběr do koagulační markerů zkumavky s citrátem sodným - ihned odeslat FV-R/Q 506 LEIDEN nemrazit!! vyšetřuje FN Olomouc - MTHFR:A/V 223 Hematoonkologická klinika - koagulační laboratoř. FII : 20210 G/A Naordinováno u pozitivní APC rezistence. Výsledek je za tři týdny. Protilátky proti Tr-metoda MAIPA 1 zkumavka srážlivé krve a 3 zkumavky nesrážlivé krve s K 2 EDTA - po horní rysku. Ihned odeslat žádanka na protilátky proti Tr- MAIPA + žádanka na KO. FN Olomouc Ústav imunologie. Výsledek je za 4 týdny. Protilátky proti erytrocytům, leukocytům, trombocytům 2 zkumavky srážlivé krve, telefonicky domluvit přes HTO, vyšetřuje Krevní centrum Ostrava- Poruba. Žádanky dvojmo. Výsledek je za dva týdny. Erytropoetin 1 zkumavka srážlivé krve, vyšetřuje FN Olomouc Oddělení klinické biochemie a imunogenetiky výsledek je za dva týdny. Celkový objem erytrocytů HTO telefonicky objedná vyšetření ve FN Olomouc - v ambulanci nukleární medicíny, poštou zašle dvě žádanky. Ambulance nukleární medicíny poté kontaktuje pacienta a domluví s ním vyšetření. Haptoglobin 1 zkumavka srážlivé krve, vyšetřuje FN Olomouc - Oddělení klinické biochemie a imunogenetiky vyšetření provádí denně, výsledek je za tři dny. 6

Kontakty: Fakultní nemocnice Olomouc Krevní centrum I.P.Pavlova 6 Fakultní nemocnice Ostrava 775 20 Olomouc 17.listopadu 1790 708 52 Ostrava - Poruba Telefonní čísla: FN Olomouc Oddělení klinické biochemie a imunogenetiky: 585 854 234 Nukleární medicína ambulance: 588 444 287 Ústav imunologie: 588 443 379 Hematoonkologická klinika: imunologická laboratoř tel. 588 443 192 koagulační laboratoř tel. 588 443 293 KC Ostrava Poruba Laboratoř Protilátky tel. 597 374 430 Resorpční křivka pro Fe Resorpční křivka pro Fe slouží k posouzení vstřebávání železa v organismu. Odběr žilní krve na Fe nalačno a za 1 a za 3 hod. po perorálním podání 20 ml suspenze Ferronatu. Vzhledem k nízké frekvenci tohoto vyšetření doporučujeme konzultovat postup při vyšetření s hematologickou ambulancí. 4. Transfúzní úsek Tento úsek plní úkoly vyplývající z náplně činnosti transfúzní služby. Zdejší oddělení pracuje v režimu odběrového střediska. Jsou zde prováděny tyto odběry: plné krve od bezplatných dárců - každá středa kromě sanitárních dnů autologní odběry - každé úterý Každý potenciální dárce obdrží podrobnější informace k samotnému odběru přímo na HTO nebo telefonicky na tel. č. 571 490 606 nebo na webových stránkách nemocnice. Další zpracování na krevní přípravky provádí zpracovatelské centrum - TO FN Olomouc, na základě příslušné smlouvy. 7

5. Vyšetření a jejich referenční limity Normální referenční rozmezí pro stanovení parametrů krevního obrazu a diferenciálního počtu leukocytů Laboratorní vyšetření ženy 15-100 let muži 15-100 let děti 12-15 let jednotky WBC 4,00 10,00 4,00 10,00 4,00 13,50 x 10 9 / l RBC 3,8 5,2 4,0 6,0 4,0 5,50 x 10 12 / l HGB 120-160 135-175 120-168 g / l HCT 0,35 0,47 0,40 0,50 0,35 0,52 poměr MCV 82-98 82-98 78-99 fl MCH 28-34 28-34 25 35 pg MCHC 320-360 320-360 310-370 g /l Laboratorní vyšetření ženy 15-100 let muži 15-100 let děti 12-15 let jednotky RDW fl RDW 10,00 15,00 10,00 15,00 10,00 16,00 % PLT 150-400 150-400 130-450 x 10 9 / l MPV 7,8-11 7,8-11 7,4 13,00 fl PDW 9,00 17,00 fl PDW 12,0 18,0 12,00 18,00 12,00 18,00 % PCT 0,12 0,35 0,12 0,35 0,12 0,43 poměr Ne% 45,0 70,0 45,0 70,0 35-75 % Ly% 20,0 45,0 20,0 45,0 20-53 % Mo% 2,0 12,0 2,0 12,0 2,0 12,0 % Eo% 0,0 5,0 0,0 5,0 0,0 5,0 % Ba% 0,0 2,0 0,0 2,0 0,0 2,0 % Ne# 2,0 7,0 2,0 7,0 1,8 8,0 x 10 9 / l Ly# 0,8 4,0 0,8 4,0 0,8 5,3 x 10 9 / l Mo# 0,08 1,20 0,08 1,20 0,1 4,0 x 10 9 / l Eo# 0,0 0,5 0,0 0,5 0,01 0,7 x 10 9 / l Ba# 0,0 0,2 0,0 0,2 0,00 0,25 x 10 9 / l Manuální jednotky ženy muži děti diferenciál Ne segmenty % % 47-70 47-70 45-58 Tyč% % 0-4 0-4 0-3 Ly% % 20-45 20-45 27-41 Mo% % 2 10 2 10 2-8 Eo% % 0-5 0-5 1-4 Ba% % 0-1 0-1 0-1 8

Referenční limity dalších laboratorních vyšetření Laboratorní vyšetření Věk Referenční limit Retikulocyty všichni 0,005-0,025 Quickův test všichni 80-120%; INR 0,8-1,2 APTT všichni 25-35 s Fibrinogen všichni 2,0-4,5 g/l LMW Heparin anti Xa všichni Dle nastavení léčby D-Dimery všichni 0-0,5 mg/l Antitrombin všichni 75-125% Krvácivost všichni 120-300 s Osmotická rezistence všichni - min 0,40-0,44 Chladové aglutininy všichni - max 0,30-0,34 - ALP v neutrofilech všichni 20 100 bodů LE buňky všichni - Krevní skup.pacienta všichni - Protilátky-zkum.test všichni - AB0 Rh(D) všichni - Kompatibilita -sloupcová aglut. všichni - Protilátky sloupcová aglut. všichni - Přímý Coombsův test-pat všichni - Nepřímý Coombs test - NAT všichni - Poznámka: U hodnot, kde nejsou uvedeny referenční limity, se hodnocení provádí kvalitativně ( +; -; pozitivní; negativní; hraniční; reaktivní, ). 6. Kritické hodnoty laboratorních vyšetření Vyšetření Hemoglobin Leukocyty Trombocyty APTT Protrombinový čas (QUICK) D Dimer Dospělí Děti do 10 let Pod Nad Pod Nad 60-60 - 1,0 30,0 2,0 25,0 30-30 - 120 sec. INR 5 nad 50 mg/l AT III Pod 40% Fbg pod 1,0 g/l, nad 8,0 g/l Jednotka g/l 109/l 109/l Poznámka: Laborantka nebo jiná pověřená osoba nahlásí telefonicky nebo ústně odesílajícímu pracovišti (přednostně lékaři, případně ošetřující zdravotní sestře) tuto kritickou hodnotu. Na žádanku a na výsledkový list napíše jméno osoby, které byl výsledek nahlášen, čas hlášení a kdo hlásil. Laborantka zároveň vyzve oddělení k odběru nového vzorku, aby byl výsledek ověřen. Významné a život ohrožující výsledky se také hlásí vedoucímu oddělení HTO. Všechny ostatní nejasné laboratorní nálezy se řeší stejným postupem jako hodnoty kritické. O hlášení je veden záznam. 9

7. Seznam zkratek ALT alaninaminotransferáza APTT aktivovaný parciální tromboplastinový test AT autologní odběr ATIII stanovení antithrombinu BD běžní dárci B12 vitamin B12 CT computerová tomografie CV variační koeficient DD stanovení D-Dimerů DM1 překročení vnitřní meze DM2 překročení vnější meze EAR erytrocyty z aferézy resuspendované EARD erytrocyty z aferézy resuspendované deleukotizované EBR erytrocyty bez buffy-coatu resuspendované EBR-AT erytrocyty bez buffy-coatu resuspendované pro autotransfúzi EBRD erytrocyty bez buffy-coatu resuspendované deleukotizované EBRD-AT erytrocyty bez buffy-coatu resuspendované deleukotizované pro autotransfúzi EBRP erytrocyty bez buffy-coatu resuspendované promyté EGT ethanolgelifikační test EHK externí hodnocení kvality ER erytrocyty resuspendované ERD erytrocyty resuspendované deleukotizované ERD-AT erytrocyty resuspendované deleukotizované pro autotrasfúzi ERDP erytrocyty resuspendované deleukotizované promyté Fibr. stanovení fibrinogenu FNsP Fakultní nemocnice s poliklinikou HBsAg průkaz antigenů viru hepatitidy B H vydávání výsledků-vysoká hodnota (odchylka od referenční meze) HCT hematokrit, pravé relativní procento erythrocytárního objemu HCV stanovení protilátek proti antigenům hepatitis mimo HBV a HIV a protilátek třídy IgM proti HBV a HIV (elisa) HGB koncentrace hemoglobinu HIV stanovení protilátek IgG proti antigenům HIV HM1 překročení vnitřní meze HM2 překročení vnější meze HTO hematologicko-transfuzní oddělení INFOLAB program pro organizaci oddělení klinické biochemie a hematologie IS informační systém KO krevní obraz KO+dif krevní obraz +diferenciál KS krevní skupina KS+Rh krevní skupina+rh faktor L vydávání výsledků - nízká hodnota (odchylka od referenční meze) LAF alkalická fosfatáza v leukocytech LISS-NAT nepřímý antiglobulinový test v LISS roztoku LYMPH% poměr malých leukocytů, procento lymfocytů 10

LYMPH= počet malých leukocytů, lymfocytů MEDISOFT počítačová síť a programové vybavení pro transfuzní stanici MCV střední objem erytrocytu MCH střední obsah hemoglobinu v erytrocytu MCHC střední koncentrace hemoglobinu v erytrocytu MPV střední objem krevní destičky MR magnetická rezonance MXD% poměr středních leukocytů, procento smíšených buněk MXD= počet středních leukocytů, počet smíšených buněk MZ ČR Ministerstvo zdravotnictví České republiky NAT nepřímý antiglobulinový test náměstek OP náměstek ředitele pro odbornou péči NEUT% poměr velkých leukocytů, procento neutrofilů NEUT= počet velkých leukocytů, počet neutrofilů NIS nemocniční informační systém OHS Okresní hygienická stanice, resp.zdravotní ústav Zlín OKB Oddělení klinické biochemie OP občanský průkaz P plazma pro klinické použití - zmrazená čerstvá plazma, z plné krve PA plazma pro klinické použití z aferézy - zmrazená čerstvá plazma P-AT plazma z plné krve pro autotransfúzi PAT přímý antiglobulinový test PC počítač PD plazma z plné krve deleukotizovaná poj. pojišťovna PDW distribuční šíře krevních destiček- trombocytů PK plná krev PKAUT plná krev pro autologní odběr P-AT autologní odběr - plazma z plné krve P-LCR poměr velkých krevních destiček PLT počet krevních destiček PZT prostředek zdravotnické techniky Quick Quickův test - tromboplastinový test RBC počet červených krvinek, erytrocytů RČ rodné číslo RDW-CV distribuční šíře erytrocytů, selektovatelná RTG rentgenové vyšetření SEKK systém externí kontroly kvality SLP správná laboratorní práce SOP standardní operační postup SPYco teplotní čidlo SÚKL Státní ústav pro kontrolu léčiv TA trombocyty z aferézy TAD trombocyty z aferézy deleukotizované TAD-T trombocyty z aferézy deleukotizované resuspendované v T-SOL TK tlak krve TO transfuzní oddělení TO FN transfuzní oddělení Fakultní nemocnice TP transfuzní přípravek 11

TRANSNET VŠ WBC ZP síť transfuzních stanic-obsahuje část pro elektronickou poštu a Národní registr dárců vysokoškolské vzdělání počet bílých krvinek, leukocytů zdravotnický prostředek 8. Seznam zkratek transfuzních přípravků FN Olomouc EBR ER ERD EBRD P PA EBR-AT P-AT erytrocyty bez buffy-coatu, resuspendované erytrocyty resuspendované erytrocyty resuspendované deleukotizované erytrocyty resuspendované deleukotizované plazma pro klinické použití - zmrazená čerstvá plazma plazma pro klinické použití z aferézy - zmrazená čerstvá plazma autologní odběr - erytrocyty bez buffy-coatu, resuspendované autologní odběr - plazma z plné krve KC Ostrava-Poruba EBR-AUT P-AUT BD AT autologní odběr - erytrocyty bez buffy-coatu, resuspendované autologní odběr - plazma z plné krve běžní dárci autologní odběr Parametry pro analyzátor XT-1800: WBC RBC HGB HCT MCV MCH MCHC PLT NEUT LY MON EO BA NEU# LY# MO# EO# BA# RDW-SD RDW-CV počet bílých krvinek, leukocytů počet červených krvinek, erytrocytů koncentrace hemoglobinu hematokrit, pravé relativní procento erytrocytárního objemu střední objem erytrocytu střední obsah hemoglobinu v erytrocytu střední koncentrace hemoglobinu v erytrocytu počet krevních destiček počet neutrofilů počet lymfocytů počet monocytů počet eosinofilů počet basofilů absolutní počet neutrofilů absolutní počet lymfocytů absolutní počet monocytů absolutní počet eosinofilů absolutní počet basofilů směrodatná odchylka, distribuční šíře erytrocytů (údaj pro hodnocení anisocytozy) variační koeficient (údaj pro hodnocení anisocytozy) 12

PDW MPV P-LCR PCTrom. distribuční šíře krevních destiček trombocytů střední objem krevní destičky poměr velkých krevních destiček větších než 12fl. hematokrit trombocytů 13