strana : 1 z 31 Název dokumentu Laboratorní příručka Oddělení klinické mikrobiologie ON Jičín a.s. Tento dokument je duchovním majetkem Centra klinických laboratoří Oblastní nemocnice Jičín a.s. Podléhá všem náležitostem, které se týkají řízení dokumentace. Kopírování tohoto dokumentu je přípustné pouze se souhlasem Vedoucího Centra klinických laboratoří Oblastní nemocnice Jičín a.s. Zpracoval Schválil Mgr. Jana Kropáčková, Svatava Krejcarová MUDr. Marie Smolíková, Primář OKM Kontroloval Dne 30.09.2013 Svatava Krejcarová, Koordinátor kvality OKM Revize Dne 26.09.2013 ročně
strana : 2 z 31 Obsah Obsah 1 Úvod 2 Zkratky a pojmy 3 Informace o laboratoři 3.1 Identifikace laboratoře a základní informace o laboratoři 3.2 Zaměření laboratoře 3.3 Úroveň a stav akreditace pracoviště 3.4 Organizace laboratoře 3.5 Spektrum nabízených služeb 4 Příručka pro odběry primárních vzorků 4.1 Základní informace 4.2 Žádanky 4.3 Samoplátci 4.4 Požadavky na dodatečná vyšetření 4.5 Označení primárních vzorků 4.6 Používaný odběrový systém 4.7 Příprava pacienta před odběrem vzorku, provedení odběru 4.8 Transport vzorků, stabilita 4.9 Hlavní chyby při odběru a transportu materiálu 4.10 Základní informace k bezpečnosti při práci se vzorky 5 Preanalytické procesy v laboratoři 5.1 Příjem žádanek a primárních vzorků 5.2 Kritéria pro odmítnutí vadných primárních vzorků 5.3 Postup laboratoře při nesprávné identifikaci žádanky a primárního vzorku 5.4 Skladování vyšetřených primárních vzorků 5.5 Vyšetření smluvními a spolupracujícími laboratořemi 6 Vydávání výsledků a komunikace s laboratoří 6.1 Hlášení závažných laboratorních výsledků 6.2 Informace o formách vydávání laboratorních výsledků 6.3 Telefonické hlášení laboratorních výsledků 6.4 Výsledkové listy laboratorních vyšetření 6.5 Opravy (změny) uvolněných laboratorních výsledků 6.6 Způsob řešení stížností 6.7 Konzultační a konsiliární činnost 7 Přehled nabízených vyšetření 7.1 Bakteriologická vyšetření 7.1.1 Hemokultury a stěr kůže před hemokulturou 7.1.2 Mozkomíšní mok 7.1.3 Chirurgické drény, kanyly, katétry a další cizorodé materiály 7.1.4 Hnis, rány a primárně sterilní tekutiny 7.1.5 Oko,ucho 7.1.6 Dýchací trakt 7.1.6.1 Horní cesty dýchací 7.1.6.2 Dolní cesty dýchací 7.1.6.3 Rychlá diagnostika Streptococcus pneumonie 7.1.7 Urogenitální trakt 7.1.7.1 Moč 7.1.7.2 Genitální trakt 7.1.7.3 Mycoplasma hominis a Ureaplasma urealyticum 7.1.7.4 Chlamydia trachomatis 7.1.8 Gastrointestinální trakt
strana : 3 z 31 7.1.8.1 Rektum 7.1.8.2 Rychlá diagnostika střevních patogenů 7.1.9 Veterinární vzorky 7.1.10 Prevence nozokomiálních nákaz 7.1.11 Vyšetření pro Oddělení transfuzní a hematologické ONJC a.s. 7.2 Mykologická vyšetření 7.3 Parazitologická vyšetření 7.4 Sérologická vyšetření 7.4.1 Hepatitis A (anti-hav Total, anti-hav IgM) 7.4.2 Hepatitis B (HBsAg, anti-hbs, konfirmační test HBsAg) 7.4.3 Hepatitis C (Ag/Ab) 7.4.4 HIV 1+2 (Ag/Ab) 7.4.5 Toxoplasmosa (IgG, IgM, avidita IgG) 7.4.6 Cytomegalovirus (IgG, IgM) 7.4.7 Virus Epstein-Barrové (IM test; OCH; anti-ebv VCA IgG/IgM, anti-eb-na-1 IgG) 7.4.8 Herpes simplex virus (anti-hsv 1+ 2 IgG, IgM) 7.4.9 Mycoplasma pneumoniae IgG, IgM 7.4.10 Chlamydia pneumoniae IgG, IgM 7.4.11 Coxiella burnetii IgG, IgM 7.4.12 Legionella pneumophila IgG, IgM 7.4.13 Respirační viry (IgG) RSV, chřipka A,B, parainfluenza 1,2,3 7.4.14 Antistreptolyzin O (ASLO) 7.4.15 Borelióza (Borrelia sp. IgG, IgM metodou EIA; Borrelia afzelii+vlse Westernblot IgG a IgM) 7.4.16 Pertuse a parapertuse (titr protilátek) 7.4.17 Syfilis ( RRR, TPHA, Total protilátky) 7.4.18 Widalova reakce 7.4.19 Yersinia enterocolitica O:3 7.4.20 Francisella tularensis 7.4.21 Celkové IgE 8 Související dokumentace
strana : 4 z 31 1 Úvod Tato laboratorní příručka je vydána Oddělením klinické mikrobiologie Oblastní nemocnice Jičín a.s. za účelem zlepšení komunikace s uživateli laboratorních služeb. Laboratorní příručka obsahuje základní informace o laboratoři, přehled nabízených laboratorních vyšetření s podrobným postupem odběru biologického materiálu a s informacemi o jeho správném transportu a uchovávání až do doby zpracování naší laboratoří. Její součástí jsou návody pro správné vyplňování žádanek o vyšetření, kriteria pro odmítnutí primárního vzorku, informace o způsobu vydávání výsledků a komunikaci s laboratoří, způsob řešení stížností a informace o konzultační činnosti, kterou laboratoř poskytuje. Laboratorní příručka je k dispozici na webových stránkách www.nemjc.cz, kde je pravidelně aktualizována. 2 Zkratky a pojmy OKM - Oddělení klinické mikrobiologie ON Jičín a.s. ONJC - Oblastní nemocnice Jičín a.s. LIS Laboratorní informační systém NIS Nemocniční informační systém KHS HK Krajská hygienická stanice Královéhradeckého kraje se sídlem v Hradci Králové, Územní pracoviště Jičín NRL SZÚ Praha Národní referenční laboratoře Státního zdravotního ústavu Praha VŠ - lékař, zdravotnický pracovník nelékař PZP pomocný zdravotnický personál primární vzorek = biologický materiál žadatel = lékař 3 Informace o laboratoři 3.1 Identifikace laboratoře a základní informace o laboratoři Název organizace: Oblastní nemocnice Jičín a.s. Adresa organizace: Bolzanova 512, 506 43 Jičín telefonní kontakt: 493 582 111 fax: 493 523 514 e-mail: nemjc@nemjc.cz webové stránky: http://www.nemjc.cz Název oddělení: Adresa a umístění: Oddělení klinické mikrobiologie Oblastní nemocnice Jičín a.s., Bolzanova 292, 506 43 Jičín, naproti areálu nemocnice v pavilonu K Primář oddělení: Vedoucí laborantka, koordinátor kvality: MUDr. Marie Smolíková marie.smolikova@nemjc.cz tel. 493 582 516, služební mobil: 732 571 275, zkrácená volba: # 90516 Svatava Krejcarová svatava.krejcarova@nemjc.cz tel. 493 582 511
strana : 5 z 31 Telefonní kontakt na jednotlivé laboratoře: Příjem materiálu: Příjem materiálu 493 582 512 Klinická bakteriologie 493 582 316 Sérologie, virologie 493 582 514 Střevní bakteriologie, respirační nákazy, vyšetření pro alergologii, nozokomiální nákazy, parazitologie, mykologie 493 582 513 Antibiotické středisko 493 582 516 (316) Po Pá 7:00 15:00 So 7:00 12:00 Neděle, svátky dle dohody či požadavků oddělení 3.2 Zaměření laboratoře Oddělení klinické mikrobiologie provádí vyšetření biologického materiálu z důvodů klinických a epidemiologických převážně infekčních onemocnění, včetně testování citlivostí etiologických agens na antimikrobiální látky. Diagnostika patogenů eventuálně jejich toxinů se provádí jednak přímo: mikroskopicky, kultivačně (aerobně, anaerobně) a jednak nepřímo: sérologicko- imunologicky určováním titru protilátek v séru, event. průkazem antigenů. Své služby poskytuje pro lůžková i ambulantní zdravotnická zařízení spádové oblasti Jičínska a Nového Bydžova, eventuálně i dalším klientům mimo tuto oblast, včetně veterinárních služeb. 3.3 Úroveň a stav akreditace pracoviště V rámci celé ONJC pracoviště získalo certifikáty integrovaného systému řízení ČSN EN ISO 9001:2009, ČSN EN ISO 14001:2005, ČSN OHSAS 18001:2008. V současné době se oddělení připravuje na akreditaci NASKL ČSN ISO 15189. 3.4 Organizace laboratoře Oddělení klinické mikrobiologie Oblastní nemocnice Jičín a.s. se člení na několik úseků: příjem materiálu úsek klinické bakteriologie úsek sérologie, virologie úsek střevní bakteriologie, respiračních nákaz, vyšetření pro alergologii, nozokomiálních nákaz, parazitologie a mykologie varna půd antibiotické středisko 3.5 Spektrum nabízených služeb OKM provádí vyšetření v oblasti klinické mikrobiologie, která pokrývají klinickou bakteriologii, virologii, mykologii, parazitologii a infekční imunologii. Seznam a podrobnější informace k vyšetřením, způsobům odběrů a podmínky transportu biologického materiálu jsou uvedeny v kapitole 7 Přehled nabízených vyšetření. Antibiotické středisko poskytuje konzultace v oblasti antibiotické terapie na základě výsledků mikrobiologických vyšetření žadatelům (lékařům) Oblastní nemocnice Jičín a.s., ale i jiných nemocnic a praktikům ve spádové oblasti. Provádí rovněž uvolňování vázaných antibiotik. Laboratoř úzce spolupracuje s KHS HK oddělení epidemiologie, kterému podává povinné hlášení o výskytu epidemiologicky závažných nálezů, dále dle požadavků územního epidemiologa.
4 Příručka pro odběry primárních vzorků OKM - Laboratorní příručka strana : 6 z 31 Pro kvalitní mikrobiologické vyšetření je nutný správně provedený odběr biologického materiálu se snahou zachytit pravděpodobného původce onemocnění a pokud možno vyhnout se kontaminující mikroflóře. Z tohoto důvodu by všichni pracovníci provádějící odběr měli být seznámeni s Laboratorní příručkou OKM, jejíž součástí (kapitola 7 Přehled nabízených vyšetření) je popis řádně provedeného odběru u každého laboratorního vyšetření. 4.1 Základní informace Základní informace o odběrech biologického materiálu pro jednotlivá vyšetření na OKM a o způsobu uchovávání a podmínkách transportu jsou popsány v kapitole 7 Přehled nabízených vyšetření. 4.2 Žádanky Žádanky o vyšetření biologického materiálu jsou uveřejněny na http://www.nemjc.cz/ a jsou Přílohou č. 1 této Laboratorní příručky. Odd. klinické mikrobiologie na požádání zašle nebo vydá požadované žádanky o vyšetření. Dostupné jsou i ve skladu ONJC. O vyšetření biologického materiálu lze požádat i prostřednictvím Nemocničního informačního systému (NIS), kdy po elektronickém zadání požadavku personál ONJC vytiskne odpovídající požadavkový list nahrazující žádanku o vyšetření. Požadavek o vyšetření lze tedy zaslat na jakémkoliv typu žádanky, musí ale obsahovat všechny povinné údaje. Povinné údaje na žádance: příjmení, jméno pacienta rodné číslo pacienta (ev. číslo pojištěnce) věk a pohlaví pacienta, pokud jednoznačně nevyplývají z rodného čísla kód pojišťovny pacienta základní a eventuálně další diagnózy pacienta datum odběru - u materiálu, který je transportován bez kultivačního (transportního) média uvádějte i čas odběru, který je důležitým údajem pro správnou interpretaci laboratorního výsledku a pro kontrolu doby transportu materiálu do laboratoře, u hemokultur a likvoru se uvede kromě data i přesný čas odběru druh biologického materiálu- upřesnit místo odběru identifikace žadatele název zařízení, oddělení, jméno lékaře, IČP, IČZ, odbornost kontakt na žadatele adresa, telefon pokud není na razítku vypsaná nebo zaškrtnutá požadovaná vyšetření (pouze ta, která nabízí naše oddělení) předchozí léčba antibiotiky (je důležitou informací pro správnou interpretaci nálezu a pro případnou konsiliární činnost v oblasti antibiotické terapie) Nepovinné údaje na žádance, které však přispějí k přesnější a rychlejší diagnostice: Na žádance lze uvést doplňující klinické informace týkající se pacienta a vyšetření, které by byly vhodné pro interpretační účely nebo by mohly urychlit diagnostiku (návrat pacienta z exotické země apod.). Za správnost vypsání žádanky odpovídá sestra, za potvrzení správnosti údajů na žádance odpovídá lékař požadující vyšetření. Veškeré údaje musí být vyplněny čitelně, rovněž nalepený identifikační štítek na odběrové soupravě musí být jasně čitelný. Po přezkoumání údajů na žádance, primárním vzorku a po vizuální kontrole jeho kvality, je vzorek převzat a zaevidován pracovníkem laboratoře do LIS, kam systém automaticky zadá datum a čas přijetí vzorku.
4.3 Samoplátci OKM - Laboratorní příručka strana : 7 z 31 Laboratoř poskytuje své služby i samoplátcům. Při zaslání primárního vzorku na vyšetření samoplátce je nutno na žádanku uvést údaje důležité pro možné vystavení faktury a adresu, kam bude zaslán výsledek laboratorního vyšetření. Cena vyšetření pro samoplátce je dána dle bodové hodnoty vyšetření v platném Seznamu zdravotních výkonů. Informativní cenu vyšetření poskytne laboratoř na požádání. Výsledky samoplátců jsou zasílány poštou na uvedenou adresu nebo se může pacient (samoplátce) dostavit přímo na OKM, kde bude provedena jeho identifikace (občanský průkaz, cestovní pas či jiný identifikačně platný dokument) a po zaplacení faktury v pokladně ONJC samoplátce obdrží na OKM výsledek vyšetření. Oddělení klinické mikrobiologie si vyhrazuje právo hlášení infekčního onemocnění dle Vyhlášky 306/2012 Sb., kterou se novelizuje Vyhláška 195/2005 Sb. 4.4 Požadavky na dodatečná vyšetření Ústní nebo telefonický požadavek na vyšetření (doordinování vyšetření k již zaslanému vzorku) je možný ve výjimečných případech, a to pouze tehdy, pokud je k dispozici ještě vhodný biologický materiál. Ústní nebo telefonický požadavek vyšetření musí být následován písemným požadavkem - řádně vyplněnou žádankou o vyšetření. 4.5 Označení primárních vzorků Primární vzorek musí být doručen vždy s kompletně vyplněnou žádankou a čitelně označen identifikací pacienta. Povinné označení: jméno a příjmení pacienta rodné číslo (číslo pojištěnce) nebo datum narození druh biologického materiálu 4.6 Používaný odběrový systém V kapitole 7 Přehled nabízených vyšetření jsou uvedeny vhodné druhy odběrového materiálu. Při odběrech vzorku na speciální vyšetření doporučujeme kontaktovat laboratoř a domluvit způsob odběru. K odběrům pro vyšetření prováděným na OKM jsou používány sterilní zkumavky či odběrové kontejnery, sterilní odběrové tampony s transportní půdou dle AMIESE či bez ní a hemokultivační lahvičky. Pro některé typy odebíraných biologických materiálů je možné si odběrové nádoby zdarma vyžádat na OKM (telefonní číslo 493 582 512). Laborantka provede o vydání odběrových materiálů záznam do knihy Výdej odběrového materiálu žadatelům (zaznamená datum zaslání odběrového materiálu, žadatele, druh odběrového materiálu a jeho počet). 4.7 Příprava pacienta před odběrem vzorku, provedení odběru Příprava pacienta před odběrem je uvedena (pokud je nutná) vždy u konkrétního vyšetření viz kap. 7 Přehled nabízených vyšetření. Každý primární vzorek je nutné považovat za potenciálně infekční. Žádanky ani vnější strana odběrových souprav nesmí být kontaminovány biologickým materiálem. Odběr musí být proveden ve správnou dobu, ze správného místa a do sterilních odběrových souprav, pokud možno před začátkem ATB léčby, eventuálně uvést stávající antibiotickou terapii. Odběrové nádobky musí být správně a zřetelně označeny. Primární vzorky je třeba co nejrychleji dopravit do laboratoře a zpracovat. Provedení odběru jednotlivých biologických materiálů je popsáno v kapitole 7 Přehled nabízených vyšetření.
4.8 Transport vzorků, stabilita OKM - Laboratorní příručka strana : 8 z 31 Transport primárního vzorku na mikrobiologické vyšetření při dodržení vhodných teplotních podmínek má být co nejrychlejší. Každé zdržení zmenšuje možnost úspěšné diagnostiky, zejména v případě růstově náročných bakterií. Relativně nejlépe vydrží mikroorganismy čas a podmínky transportu v tekutém materiálu a hemokultivačních lahvičkách. Nejméně vhodné pro déletrvající transport je použití vatového tamponu bez transportního média. Podmínky uchovávání a transportu pro jednotlivé druhy biologického materiálu jsou uvedeny v kapitole 7 Přehled nabízených vyšetření. Primární vzorky jsou do laboratoře transportovány z externích zařízení svozovou službou, PZP z jednotlivých oddělení ONJC a nebo samotnými pacienty během celé pracovní doby OKM. 4.9 Hlavní chyby při odběru a transportu materiálu Chyby při odběru, skladování a transportu biologického materiálu nevhodná odběrová souprava nedostatečně označená odběrová souprava odběrová souprava potřísněná biologickým materiálem prodloužení doby mezi odběrem a dodáním do laboratoře biologický materiál byl vystaven přímému slunečnímu světlu, teplu nebo mrazu POZOR na kontaminaci vnitřní části zátky u zkumavek Chyby vedoucí k hemolýze krevního vzorku znečištění jehly nebo pokožky stopami ještě tekutého dezinfekčního roztoku použití příliš úzké jehly, kterou se krev násilně nasává prudké třepání krve ve zkumavce (k tomu dochází i při nešetrném transportu krve ihned po odběru) transport krve při suboptimální teplotě (např. ponechání vzorků na slunci) uskladnění plné krve okamžitě po odběru v lednici nebo transport plné krve na ledu prodloužení doby mezi odběrem a dodáním do laboratoře 4.10 Základní informace k bezpečnosti při práci se vzorky Každý primární vzorek je nutné považovat za potencionálně infekční. Je nutné zabránit zbytečným manipulacím se vzorky, které by mohly vést ke kontaminaci nebo ke vzniku infekčního aerosolu. Obecné zásady bezpečné práce s biologickým materiálem vycházejí z příslušných právních předpisů a směrnic, tj. především z Vyhlášky MZ ČR č. 306/2012 Sb. (která novelizovala Vyhlášku č.195/2005 Sb.), kterou se upravují podmínky předcházení vzniku a šíření infekčních onemocnění a hygienické požadavky na provoz zdravotnických zařízení. Pracovníci laboratoře pracují v souladu s Hygienicko-epidemiologickým řádem OKM.
strana : 9 z 31 5 Preanalytické procesy v laboratoři 5.1 Příjem žádanek a primárních vzorků Příjem primárních vzorků se provádí na OKM. Vzorek musí být správně odebraný, viditelně nepoškozený, nepotřísněný, správně uchovaný a transportovaný, správně označený v souladu se správně vyplněnou a nepotřísněnou žádankou. Vzorky se v laboratoři přijímají průběžně, po celou pracovní dobu. Za přijetí vzorku zodpovídá laborantka, která v případě odmítnutí tohoto vzorku informuje odesílajícího žadatele o vyšetření. Přijaté vzorky se předávají na jednotlivé laboratorní úseky OKM. 5.2 Kritéria pro odmítnutí vadných primárních vzorků Laboratorní vyšetření se neprovede v následujících případech: Primární vzorek je na OKM zaslán omylem (požadované vyšetření OKM nenabízí), laborantka na příjmu zajistí odeslání do příslušné laboratoře. Na žádance ani na primárním vzorku nejsou uvedeny (či jsou nečitelné) údaje důležité pro identifikaci primárního vzorku a pro styk se zdravotní pojišťovnou (číslo pojištěnce, příjmení a jméno, typ zdravotní pojišťovny, IČZ odesílajícího lékaře, základní diagnóza) a není možné získat údaje o žadateli a alespoň základní identifikaci pacienta. K označenému primárnímu vzorku není dodána příslušná žádanka. K vyplněné žádance není dodán primární vzorek nebo není označen. Zásadním způsobem je porušen či znehodnocen odebraný primární vzorek. Nesouhlasí identifikace pacienta na odebraném primárním vzorku se žádankou. Biologický materiál je dodán v nesprávné odběrové nádobce vzhledem k požadovanému vyšetření (viz kapitola 7 Přehled nabízených vyšetření). Pokud je to možné, laborantka telefonicky upozorní žadatele na nemožnost provést požadované laboratorní vyšetření, doporučí nový odběr s novou žádankou. Provede záznam na stávající žádanku a zaznamená neshodu do knihy Evidence neshod a nápravná opatření na OKM, kam založí žádanku a primární vzorek je na konci pracovního dne zlikvidován běžným způsobem. V případě překročení lhůty transportu u požadovaného vyšetření stanovené v kapitole 7 Přehled nabízených vyšetření se zaznamená do LIS skutečný datum dodání do laboratoře. Laborantka zkontroluje i vhodnost odebraného materiálu vzhledem k diagnóze, v případě nejasností konzultuje tuto skutečnost se žadatelem. OKM vede řádnou evidenci odmítnutých primárních vzorků, včetně způsobu řešení takto vzniklých neshod (kniha Evidence neshod a nápravná opatření na OKM).
strana : 10 z 31 5.3 Postup laboratoře při nesprávné identifikaci žádanky a primárního vzorku Postup při nesprávné identifikaci žádanky Pokud na žádance chybí některé z údajů, laborantka OKM, která neshodu zjistí, si vyžádá doplňující údaje telefonicky (pokud je to možné) a doplní je do žádanky. Není-li k dispozici údaj o žadateli, primární vzorek k vyšetření je odmítnut. Postup při nesprávné identifikaci primárního vzorku Při nedostatečné identifikaci primárního vzorku lze vyšetření provést, pokud tato nedostatečná identifikace nemůže vést k záměně vzorku za primární vzorek jiného pacienta. V opačném případě je vzorek k vyšetření odmítnut. Neshody při nesprávné identifikaci žádanky či primárního vzorku zaznamená laborantka do knihy Evidence neshod a nápravná opatření na OKM. 5.4 Skladování vyšetřených primárních vzorků Primární vzorky, které nejsou při zpracování znehodnoceny, se uchovávají do ukončení výsledku (např. sérologie, s výjimkou vzorků zasílaných na konfirmační vyšetření) a jejich uchování a likvidace se řídí Hygienickoepidemiologickým řádem OKM, vycházející ze směrnice Oblastní nemocnice Jičín a.s. 5.5 Vyšetření smluvními a spolupracujícími laboratořemi V odůvodněných a zákonnými normami daných případech odesílá OKM reaktivní vzorky na dourčení či konfirmaci do NRL SZÚ Praha. V takovém případě je odesílajícímu subjektu vydán předběžný výsledek, na němž je o této skutečnosti informován. OKM slouží jako sběrné místo primárních vzorků pro spolupracující laboratoře v případech, kdy požadované vyšetření OKM neprovádí. Za výsledky včetně jejich vydání odpovídají spolupracující laboratoře. 6 Vydávání výsledků a komunikace s laboratoří 6.1 Hlášení závažných laboratorních výsledků Závažné laboratorní výsledky se neprodleně telefonicky sdělují žadateli o vyšetření. Některé nálezy se současně hlásí i na KHS HK oddělení epidemiologie. Seznam výsledků vyšetření, o kterých se žadatelé neprodleně informují, je uveden v tabulce. Materiál Nález Hlásit komu, poznámka Likvor mikroskopie, pozitivní kultivace žadateli Krev - hemokultura pozitivní kultivace všechna nemocniční lůžková oddělení Moč pozitivní pneumokokový antigen všechna nemocniční lůžková oddělení Mikroskopický průkaz acidorezistentních bakterií pozitivní výsledek mikroskopie žadateli
strana : 11 z 31 Materiál Nález Hlásit komu, poznámka Výtěr z rekta Stolice Výtěr z krku Ostatní Salmonella sp. Shigella sp. Yersinia sp. Vibrio sp. Campylobacter sp. enteropatogenní Escherichia coli (EPEC) Escherichia coli O157:H7 Cl. difficile produkující toxin A/B Helicobacter pylori adenoviry rotaviry noroviry Haemophilus influenzae typ b Methicilin rezistentní Staphylococcus aureus, ESBL pozitivní kmeny Klebsiella sp., patogenní mykologické a parazitologické nálezy první pozitivní výsledek pacienta hlásit na: -všechna nemocniční lůžková oddělení -KHS HK oddělení epidemiologie všechna nemocniční lůžková oddělení pozitivní výsledek, na dětské oddělení hlásit i negativní výsledek vyšetření KHS HK oddělení epidemiologie první pozitivní výsledek první pozitivní výsledek pacienta hlásit na: -dětské lůžkové oddělení -KHS HK oddělení epidemiologie první pozitivní výsledek pacienta hlásit na: -všechna nemocniční lůžková oddělení -KHS HK oddělení epidemiologie Krev- sérologie HAV IgM, HBV KHS HK oddělení epidemiologie pertuse, parapertuse (významný vzestup titru protilátek ve dvou následujících KHS HK oddělení epidemiologie odběrech) Syfilis, HIV, HCV po potvrzení pozitivity KHS HK oddělení epidemiologie referenčními laboratořemi Legionella pneumophila protilátky IgM KHS HK oddělení epidemiologie
strana : 12 z 31 6.2 Informace o formách vydávání laboratorních výsledků Oddělení klinické mikrobiologie vydává výsledky konečné a předběžné. Konečné výsledky vydává těmito způsoby: v tištěné podobě v elektronické podobě export konečného výsledku do NIS na základě žádosti externích žadatelů zasílání výsledků pomocí systému MISE firmou Stapro a Compek Medical Services s.r.o. Medidata hlášení telefonem - viz kapitola 6.1 a 6.3 Telefonicky je možné sdělit tzv. předběžný výsledek. Tento výsledek ještě není ukončen nebo není ještě uvolněn oprávněným VŠ OKM. Ohlášení předběžného výsledku je zaznamenáno v LIS (kdo a komu výsledek sdělil). Uvolněné výsledky jsou tištěny v den ukončení vyšetření. Pověření pracovníci (VŠ, laboranti) informují o všech kritických a sporných výsledcích VŠ, který je odpovědný za uvolňování výsledků. Výsledek může být vydán ve vytištěné nebo elektronické formě nebo ústně sdělen přímo pacientovi, jinému než požadujícímu lékaři nebo jinému žadateli pouze v těchto případech: pacient samoplátce si vyšetření sám objednal pacient (předoperační vyšetření, návštěva dalšího odborného lékaře a další) po předložení dokladů totožnosti žadatel uvedl na žádanku, že výsledek má být vydán pacientovi nebo jeho zákonnému zástupci (např. rodičům) žadatel uvedl na žádanku, že výsledek má být vydán jinému žadateli V jiných případech nesmí být laboratorní výsledek vydán nebo sdělen pacientovi nebo třetí osobě a to ani na základě jejich ústní (osobní nebo telefonické) nebo písemné žádosti. Výsledek sděluje oprávněný pracovník, a to až po uvolnění výsledku. 6.3 Telefonické hlášení laboratorních výsledků Laboratorní výsledky lze telefonicky sdělovat pouze žadatelům a těm, kteří se podílejí na ošetřování daného pacienta. Po telefonickém sdělení výsledku provede oprávněná osoba laboratoře záznam do LIS, komu byl výsledek ohlášen. Systém automaticky zaznamená čas a kdo výsledek ohlásil. Výsledky se telefonicky nesdělují žádným jiným zdravotnickým ani nezdravotnickým pracovníkům (uklízečky, civilní služba, sanitárky) ani pacientům. Pověření pracovníci laboratoře sami hlásí laboratorní výsledky v následujících situacích: Výsledky vyšetření v urgentním režimu (pozitivní kultivace likvoru a jeho mikroskopie, pozitivní hemokultury) viz kapitola 6.1. povinné hlášení epidemiologicky závažných kmenů na KHS HK oddělení epidemiologie, u hospitalizovaných pacientů na příslušná oddělení nemocnice (viz kapitola 6.1): rotaviry, adenoviry, noroviry, Salmonella sp., Shigella sp., Yersinia sp., Campylobacter sp., E.coli O157:H7, enteropatogenní E.coli (EPEC), Haemophilus influenzae b, invazivní patogeny z likvoru, methicillin rezistentní Staphylococcus aureus, kmeny Klebsiella pneumoniae (event. i dalších zástupců čeledi Enterobacteriaceae), u nichž je prokázána produkce širokospektrých beta-laktamáz (ESBL), Clostridium difficile+toxiny, patogenní parazitologické a mykologické nálezy, nově zjištěné hepatitidy, pertuse a parapertuse, sexuálně přenosné nákazy po konfirmaci (NRL SZÚ Praha), event. další dle požadavků epidemiologie
strana : 13 z 31 Pověření pracovníci laboratoře odpovídají na telefonickou žádost o výsledek vyšetření v následujících případech: žadatel o telefonický výsledek vyšetření musí uvést pracoviště, odkud volá a své jméno pokud je pracovník laboratoře odpovídající na dotaz v pochybnostech o identifikaci volaného a jedná se o závažný laboratorní údaj, vyžádá si telefonní číslo oddělení, odkud je vznášen požadavek, spojí se s uvedeným žadatelem opětovně a oznámí požadované údaje, v případě jakýchkoliv nejasností může požadovat k telefonu jinou kompetentní osobu. 6.4 Výsledkové listy laboratorních vyšetření Výsledkový list z LIS obsahuje: název a adresu laboratoře, která výsledek vydala jednoznačnou identifikaci pacienta (jméno, příjmení, rodné číslo) údaje o žadateli - název oddělení a jméno lékaře požadujícího vyšetření, IČP či IČZ žadatele datum a čas přijetí primárního vzorku do LIS datum a čas uvolnění výsledku vyšetření nezaměnitelnou identifikaci laboratorního vyšetření a laboratorní číslo laboratorní výsledek vyšetření či jednotek měření v případě potřeby textovou interpretaci výsledků jiné poznámky (texty ke kvalitě nebo dostatečnosti primárního vzorku, které mohou nežádoucím způsobem ovlivnit výsledek, atd.) identifikaci osoby, která autorizovala uvolnění nálezu Intervaly dodání laboratorních výsledků žadateli se liší podle druhu vyšetření. Podrobné časové údaje k jednotlivým laboratorním vyšetřením jsou uvedeny v kapitole 7 Přehled nabízených vyšetření. 6.5 Opravy (změny) uvolněných laboratorních výsledků Přes veškerá opatření systému řízení kvality nelze zcela vyloučit vznik nahodilých chyb a omylů. Jsou způsobeny poruchami techniky nebo selháním lidského faktoru. Oprava identifikační části oprava rodného čísla, změna pojišťovny, změna příjmení pacienta např. po odmítnutí vyúčtování zdravotní pojišťovnou, změna žadatele. Změnu provede pracovník laboratoře s kompetencí (přístupová práva) zásahu do archivu výsledků LIS a zaznamená do Knihy oprav (změn) v LIS. V LIS se archivuje opravený formát žádanky. Oprava výsledkové části výsledkovou část nelze v archivu vyšetření změnit. K chybnému výsledku je připojena poznámka, kde je uveden správný výsledek. Změnu provede pracovník laboratoře s kompetencí (přístupová práva) zásahu do archivu výsledků LIS. O chybném výsledku musí být informován žadatel (provede se záznam o nahlášení opravy výsledku). Opravený výsledek je vytištěn a zaslán žadateli s upozorněním, že se jedná o opravený výsledek. Kopie chybného a opraveného laboratorního výsledku je založena do Knihy oprav (změn) v LIS. 6.6 Způsob řešení stížností Řešení stížností je v kompetenci vedení laboratoře, pouze drobné připomínky k práci řeší pracovník, který stížnost přijal. Stížnosti a reklamace jsou neodkladně předány vedení laboratoře, které rozhodne o jejich oprávněnosti, zvolí způsob řešení a navrhne další opatření. Provede zápis do Knihy stížností na OKM.
6.7 Konzultační a konsiliární činnost OKM - Laboratorní příručka strana : 14 z 31 O konzultaci lze požádat na všech laboratorních úsecích. Příslušnou informaci podá vždy kompetentní zdravotnický pracovník OKM pro danou problematiku (laborant, VŠ). Lékař OKM poskytuje doporučení optimální antibiotické terapie na základě výsledků mikrobiologických vyšetření, dále provádí uvolňování vázaných antibiotik podepsáním příslušné žádanky lůžkového oddělení ONJC. O konzultacích jsou vedeny záznamy v LIS. 7 Přehled nabízených vyšetření Souhrnná stručná tabulka pro odběr a transport primárního vzorku s časovými údaji o vydání výsledků Příručka k odběru biologického materiálu pro vyšetření prováděná na OKM je Přílohou č. 2 této Laboratorní příručky. 7.1 Bakteriologická vyšetření mikroskopické vyšetření kultivační vyšetření včetně pomnožení stanovení citlivosti na antibiotika metodou diskového difúzního testu, po dohodě s ordinujícím lékařem i stanovení minimální inhibiční koncentrace (MIC) U vyšetření je u údaje udávána průměrná doba vydání pozitivního výsledku (PV) a nejkratší termín pro sdělení negativního výsledku (NV). Mikrobiologie je biologická disciplína, ne exaktní věda, proto nelze jednoznačně určit časový interval odezvy. Jsou uvedeny běžné doby, které se mohou prodloužit z různých důvodů (např. pomalý růst, kontaminace, smíšená kultura). Materiál odeberte před zahájením ATB léčby, pokud je to možné, v případě zahájení terapie ji uveďte na žádanku. Při odběru na speciální vyšetření doporučujeme kontaktovat laboratoř a domluvit způsob odběru. Pokojová teplota = 15 30 C Chladničková teplota = 2 8 C
7.1.1 Hemokultury a stěr kůže před hemokulturou OKM - Laboratorní příručka strana : 15 z 31 krev (ideálně 3 párové odběry do aerobní a anaerobní hemokultivační lahvičky) stěr kůže před hemokulturou hemokultury kultivace lahviček v automatickém systému 7 dnů mikroskopie barvení dle Grama stěr z kůže před hemokulturou kultivace aerobní Krev na hemokultivaci odebírejte dle klinického stavu pacienta nejlépe při vzestupu teplot nebo na začátku třesavky, optimálně třikrát během jednoho dne. Nejprve proveďte dezinfekci kůže v místě vpichu, po zaschnutí dezinfekčního přípravku proveďte stěr z kůže k vyloučení případné kožní kontaminace. Poté přísně asepticky venepunkcí (standardní odběr), či odběrem z cévního katétru odeberte vždy nejméně 2 hemokultury po max. 5 ml (ideálně 3 párové odběry po 5 ml u dospělých/lahvičku), u dětí přiměřeně méně (nejméně 0,5 ml krve/lahvičku) do speciálních kultivačních lahviček. Odstraňte plastový uzávěr na lahvičce a gumový uzávěr vydezinfikujte. Jako první inokulujte krev do anaerobní a poté do aerobní lahvičky. První odběr provádějte před nasazením antibiotik, popřípadě jej načasujte těsně před aplikací další dávky. Pokud dojde k odběru hemokultury až po podání ATB, je nutné uvést tuto skutečnost na žádanku. Vícenásobný odběr snižuje pravděpodobnost falešně negativních výsledků. U endokarditid se doporučuje odebrat několik vzorků v krátkém časovém intervalu. U dětí, zvláště kojenců, obvykle dostačuje jeden odběr vzhledem k vyššímu stupni bakterémie. Používaný odběrový systém: krev: hemokultivační lahvičky: VersaTrek REDOX 1 aerobní fialová lahvička, VersaTrek REDOX 2 anaerobní červená lahvička stěr z kůže před odběrem hemokultury: sterilní tampon vložte do transportní půdy dle AMIESE Lahvičky a výtěrovku polepte štítkem s informací o pacientovi. Nelepte štítky na čárové kódy na lahvičce ani je jinak nepopisujte. Na žádanku uveďte vždy časy jednotlivých odběrů! Lahvičky a výtěrovku transportujte do 2 h po odběru při pokojové teplotě do laboratoře. hemokultury PV 2-10 dnů, NV 7 dnů stěr z kůže před hemokulturou PV 2 4 dny, NV 2-4 dny
7.1.2 Mozkomíšní mok mozkomíšní mok mikroskopie po obarvení dle Grama OKM - Laboratorní příručka strana : 16 z 31 kultivace - aerobní a mikroaerofilní, event. kultivace v automatickém systému (při dostatečném množství materiálu) Co nejdříve při podezření na infekci CNS. Lumbální punkcí přísně asepticky odeberte 2-3 ml likvoru do injekční stříkačky a poté do sterilní zkumavky s pevným uzávěrem (při dostatečném množství materiálu inokulujte aerobní a anaerobní kultivační lahvičku pro kultivaci v automatickém systému). Na žádanku zaznamenejte vždy čas odběru! Při urgentním vyšetření vzorek nechlaďte a neprodleně dodejte do laboratoře. Pokud není možné materiál ihned do laboratoře dopravit, uchovejte jej při pokojové teplotě max. 24 hodin. Likvor transportujte při pokojové teplotě. mikroskopie do 30 minut po přijetí do laboratoře konečný výsledek kultivace PV 2 4 dny, NV 2 5 dnů kultivace v automatickém systému PV 2 10 dnů, NV 7 dnů 7.1.3 Chirurgické drény, kanyly, katétry a další cizorodé materiály drény katétry kanyly další cizorodé materiály kultivace - aerobní, anaerobní, příp. mikroaerofilní Sterilně odstřihněte asi 5 cm špičky vyjmutého materiálu a nasucho odešlete ve sterilním kontejneru s pevným uzávěrem. Na žádanku vždy označte, z jakého systému (traktu) odebraný materiál pochází. Pokud je nasazená ATB léčba, uveďte na žádanku Uchovejte při chladničkové teplotě a transportujte poslem (PZP) nebo svozem. PV 2-6 dnů, NV 2-4 dny
7.1.4 Hnis, rány a primárně sterilní tekutiny OKM - Laboratorní příručka strana : 17 z 31 absces* dialyzát ložisko* sekret* ascites furunkl* mateřské mléko stěr ze slinné žlázy atherom* hnis* panaricium tkáň* bércový vřed* incize* popálenina* výpotek* bursa* kloubní výpotek* punktát* žaludeční obsah defekt* kost* pupek žluč dekubit* kožní cysta* rána* jiné* *na žádanku uveďte lokalizaci odběru mikroskopie kultivace - aerobní, anaerobní, mikroaerofilní, kultivace v automatickém systému Tekutiny, tkáň - Odběr tekutiny proveďte nejlépe pomocí sterilní injekční stříkačky (1-5 ml), ve které se odebraný vzorek může i transportovat. Je nutné vytěsnit vzduch a vyměněnou sterilní jehlu zabodnout do sterilní gumové zátky. Odběr lze provést i do hemokultivačních lahviček (5 ml). Tkáně odeberte do sterilních zkumavek či sterilních plastových kontejnerů s pevným uzávěrem. Doporučuje se odebrat vzorek z rozhraní zdravé tkáně a nekrózy, která může obsahovat již mrtvé organismy. Výtěr Pokud je možné provést jen výtěr (tekutiny je příliš málo), doporučuje se odebrat vzorek na sterilní tampon ze spodiny při periferii rány (střed by mohl obsahovat již mrtvé organismy). Vzorek odeberte před zahájením ATB léčby, pokud je to možné, v případě zahájené terapie ji uveďte na žádanku. Materiál před transportem do laboratoře nenechávejte chladit. Pokud není transport ihned možný, uchovejte 24 h při pokojové teplotě. Výtěry dopravte ihned nebo uchovejte v transportní půdě při pokojové teplotě a dopravte nejlépe do 48 hodin. Každé prodlení vede ke sníženému záchytu patogenů, především anaerobních. klasická kultivace PV 2-10 dnů, NV 2-7 dnů kultivace v automatickém systému PV 2 10 dnů, NV 7 dnů
7.1.5 Oko,ucho oko střední ucho spojivky zvukovod OKM - Laboratorní příručka strana : 18 z 31 kultivace aerobní, mikroaerofilní, v některých případech i anaerobní Sterilním tamponem odeberte biologický materiál, tampon umístěte do transportní půdy AMIES. Výtěr ze zevního zvukovodu - Mírným tahem za ušní lalůček se usnadní vstup do zevního zvukovodu a následně proveďte sterilním tamponem šroubovitým pohybem výtěr. Tekutina ze středouší Získává se punkcí nebo po paracentéze, odběr na tampon, možnost kontaminace odběru bakteriální flórou zevního zvukovodu. Výtěr ze spojivkového vaku - Zvlhčeným tamponem (sterilní fyziologický roztok nebo sterilní destilovaná voda) po odchlípení víčka se odebírá sekret ze spojivkového vaku od vnějšího koutku směrem k vnitřnímu, stěr z vřídků nebo jiných chorobných změn na okraji víček, spojivce nebo rohovce. Odběr k mikroskopickému průkazu Chlamydia trachomatis ve výtěru ze spojivkového vaku kap. 7.1.7.4 Vzorek odeberte před zahájením ATB léčby, pokud je to možné, v případě zahájené terapie ji uveďte na žádanku. Materiál v transportní půdě dopravte do laboratoře co nejdříve. Jestliže dojde ke zpoždění, uchovejte vzorek při pokojové teplotě 24 hodin. Transportujte při pokojové teplotě. PV 2-6 dnů, NV 2-4 dny
strana : 19 z 31 7.1.6 Dýchací trakt 7.1.6.1 Horní cesty dýchací dutina ústní nos jazyk nosohltan krk vedlejší dutiny nosní laryng kultivace - aerobní a mikroaerofilní, v některých případech i anaerobní K provedení většiny výtěrů používejte sterilní vatové tampony na plastové tyčince nebo na drátku s vhodnou transportní půdou AMIES. Prostý tampon (bez transportní půdy) před použitím zvlhčete sterilním fyziologickým roztokem nebo sterilní destilovanou vodou. Výtěr z krku (tonzil) - Sterilním tamponem šroubovitým pohybem otřete povrch obou mandlí, případně špičkou tamponu hnis z ložisek. Nejvhodnější odběr je nalačno. Kultivační průkaz Neisseria meningitidis z výtěru z krku Proveďte jako běžný výtěr z tonzil, event. patrových oblouků a s příslušnou diagnózou uveďte na žádance, zda se jedná o onemocnění či pouze kontakt. Výtěr z nosu Sterilním tamponem šroubovitým pohybem setřete sliznice obou dolních částí nosních průduchů. Výtěr z nosohltanu - Sterilním tamponem na drátku zahnutým v úhlu 90-100 po stlačení kořene jazyka sterilní ústní lopatkou proveďte stěr sliznice v zadní klenbě nosohltanu. Je důležité vyhnout se tonzilám. Pacient by měl být nalačno, nepít, nekouřit, vynechat hygienu dutiny ústní. V případě nutnosti proveďte odběr až za 2 hodiny po jídle. Výtěr z hrtanu (laryngu) Proveďte sterilním tamponem na drátku zahnutým v úhlu 100-140, pacient vyplázne jazyk a přidrží si jej sterilním čtverečkem mulu. Po zavedení tamponu, bez dotyku ústních sliznic, pacient zakašle. Tampon se opatrně vyjme, drát narovná a zasune do zkumavky s transportním médiem. Punktát vedlejších dutin nosních Punktát odebírejte sterilně punkcí nebo odsátím pomocí sterilní stříkačky. Je nutné vytěsnit vzduch a vyměněnou sterilní jehlu zabodnout do sterilní gumové zátky. Stěr jazyka, stěr dutiny ústní Sterilním tamponem setřete povrch jazyka či sliznice dutiny ústní. Vzorky by měly být dopraveny do laboratoře co nejdříve, pokud to není možné nejpozději do 24 hodin. Jestliže dojde ke zpoždění, uchovejte vzorek při pokojové teplotě. Transportujte při pokojové teplotě. Zpoždění ve zpracování vzorku delší než 1-2 dnů může vést ke snížení záchytu etiologického agens a k přerůstání gramnegativními tyčinkami. PV 2 6 dnů, NV 2 4 dny
7.1.6.2 Dolní cesty dýchací aspirát sputum bronchoalveolární laváž výtěr z tracheostomie OKM - Laboratorní příručka strana : 20 z 31 mikroskopie tekutých materiálů (barvení Gram, Ziehl-Neelsen při požadavku na mikroskopický průkaz acidorezistentních bakterií) kultivace - aerobní a mikroaerofilní, v některých případech také anaerobní Sputum - K odběru slouží široké sterilní plastové kontejnery s pevným uzávěrem. Po event. vypláchnutí dutiny ústní vlažnou pitnou vodou se pacient zhluboka nadechne a vykašle sekret z dolních cest dýchacích. V případě nedostatečné expektorace je možný laryngeální výtěr. Sputum je vazký sekret často hnisavého charakteru - nesmí být zaměněno za sliny! Endotracheální aspirát Odsajte z intubace nebo tracheostomie do sterilního plastového kontejneru s pevným uzávěrem. Bronchiální aspirát Aspirát z bronchů získaný bronchoskopicky, odeberte do sterilního plastového kontejneru s pevným uzávěrem. BAL - Zasílejte 10 ml vzorku ve sterilním plastovém kontejneru Výtěr z tracheostomie Zasílejte na sterilním tamponu s transportní půdou AMIES. Mikroskopický průkaz acidorezistentních bakterií Zasílejte sputum získané vykašláním za kontroly lékaře nebo sestry ve sterilních plastových kontejnerech. Vzorky by měly být dopraveny a zpracovány co nejdříve. Jakékoliv zpoždění může mít za následek přerůstání gramnegativními bakteriemi a etiologické agens je těžko průkazné. Vzorek uchovávejte při chladničkové teplotě 24 h, transportujte při pokojové teplotě. mikroskopický průkaz acidorezistentních bakterií PV i NV 2 hodiny ostatní PV 2-6 dní, NV 2 4 dny 7.1.6.3 Rychlá diagnostika Streptococcus pneumonie moč imunochromatografické stanovení antigenů S. pneumoniae Před odběrem je nezbytné důkladné omytí genitálu a zevního ústí močové roury vodou a mýdlem, popřípadě otření ústí vhodným antiseptikem, při močení se odebírá střední proud moče do sterilní nádobky. Vakcína proti Str. pneumoniae může způsobit falešně pozitivní výsledek testu moči, pokud je test proveden do 48 h po vakcinaci. Materiál zašlete co nejdříve do laboratoře. Pokud to není možné, lze moč uchovat při pokojové teplotě 24 h, při 2 8 C až 14 dní. PV i NV 3 hodiny po dodání do laboratoře
strana : 21 z 31 7.1.7 Urogenitální trakt 7.1.7.1 Moč moč střední proud moč z permanentního katétru moč cévkovaná kultivace- aerobní Před odběrem je nezbytné důkladné omytí genitálu a zevního ústí močové roury vodou a mýdlem, zachytit střední proud moče. U uretritidy počáteční proud moče, u prostatitidy a postižení ledvin konečný proud moče. Další možností jsou katetrizace močového měchýře (nutno uvést na žádance) nebo vzácně odběr suprapubickou punkcí. Moč má být odebrána v množství cca 5ml (minimálně 1 ml) do sterilních plastových kontejnerů (zkumavek) s pevným uzávěrem. Moč je nutné odebírat do prokazatelně sterilních odběrovek, je možné si odběrové nádobky objednat v laboratoři OKM. Nevhodný je odběr ze sběrných sáčků často kontaminované. Uricult víčko s médii se vyšroubuje (při odběru držet ve vzduchu), středním proudem moči se naplní odběrová nádobka Uricultu do 3/4 (přímo nebo přelitím ze sterilní nádobky), destička s kultivačními médii se ponoří na několik sekund do nádobky, poté se vyjme a přebytek moči nechá stéci. Moč z nádobky se vylije, prudce odstříkne zbytek a víčko s médii se opět zašroubuje. Moč je nutné zpracovat do 4 hodin po odběru, jinak ji uchovejte v lednici a do 24 hodin dopravte do laboratoře. Pokud je v ordinaci či na oddělení termostat, je možné v něm Uricult uchovat do druhého dne před transportem do laboratoře. PV 2 6 dnů, NV 1-2 dny
7.1.7.2 Genitální trakt OKM - Laboratorní příručka strana : 22 z 31 Douglasův prostor pochva ejakulát hrdlo děložní sekret z Bartholinské žlázy penis intrauterinní tělísko tekutiny z adnex prostatický sekret očistky uretra scrotum mikroskopie kultivace aerobní, mikroaerofilní a anaerobní Pochva, hrdlo děložní Výtěr se provádí za kontroly poševním zrcadlem. Sterilním vatovým tamponem se setře povrch děložního čípku, případně zadní klenba poševní nebo sekret z děložního hrdla. Na bakteriologické vyšetření se používá transportní půda. Při vyšetření na gonokoky je vhodné použít speciální kultivační půdy a doplnit výtěrem z uretry a rekta. Použité kultivační půdy by měly být předehřáté na 37 C, protože původce kapavky je enormně citlivý na nižší teploty. Pro zhotovení mikroskopického preparátu se odebere samostatný vzorek, provede se nátěr na podložní sklo a nechá se zaschnout. Bez fixace se zasílá do laboratoře. Sekret z Bartholinské žlázy, tekutiny z adnex, materiál z Douglasova prostoru odeberte tekutinu z Bartholinské žlázy získanou punkcí, tekutinu z adnex získanou při invazivním výkonu v malé pánvi, materiál z Douglasova prostoru do sterilní injekční stříkačky (5ml) s nasazenou jehlou zapíchnutou do sterilní gumové zátky. Očistky Tkáň odeberte sterilně do sterilního kontejneru. Intrauterinní tělísko Vložte nasucho do sterilního kontejneru s pevným uzávěrem. Výtěr z uretry, prostatický sekret Proveďte hluboký výtěr z uretry tamponem s transportní půdou AMIES, při vyšetření prostatického sekretu se doporučuje výtěr z uretry po masáži prostaty per rectum. Ideální je 3-4 hodiny před odběrem nemočit. Ejakulát K vyšetření zasílejte ejakulát získaný masturbací odebraný do sterilní zkumavky s pevným uzávěrem. Stěr z penisu, scrota- Sterilním vatovým tamponem s transportní půdou AMIES setřete povrch penisu, scrota. Vzorek uchovejte v transportní půdě při pokojové teplotě a dopravte při pokojové teplotě co nejdříve do laboratoře, nejdéle do 24 hodin. PV 2-10 d, NV 2 7 d
7.1.7.3 Mycoplasma hominis a Ureaplasma urealyticum moč urogenitální výtěry OKM - Laboratorní příručka strana : 23 z 31 stanovení biochemické aktivity M.hominis, U.urealyticum Moč - odeberte první porci moče v množství cca 5ml do sterilních plastových kontejnerů (zkumavek) s pevným uzávěrem. Urogenitální výtěry - Jelikož mykoplasmata adherují k buňkám, odeberte vzorek seškrábnutím sliznice, tampon vytřepejte do suspenzního média (k dispozici na vyžádání na OKM), které zašlete do laboratoře. Vzorky v suspenzním médiu mohou být do přepravy uchovávány: 48 hodin při pokojové teplotě, 72 hodin při 2 8 C. Moč uchovejte v lednici a do 24 hodin dopravte do laboratoře. PV, NV 2 dny 7.1.7.4 Chlamydia trachomatis cervix oko uretra mužská (EIA) uretra (IF) moč mužská (EIA) imunofluorescence (IF) enzymoimunoanalýza (EIA) Imunoflorescence - Výtěr z děložního hrdla, uretry, oka s abrazí buněk sliznice se natře na podložní sklo a bez fixace se nechá zaschnout. Enzymoimunoanalýza Moč - odeberte moč v množství cca 5ml do sterilních plastových kontejnerů (zkumavek) s pevným uzávěrem. Výtěr z děložního hrdla, uretry mužské, spojivkového vaku - k odběru se používá speciální odběrový tampon i transportní médium (dostupné na vyžádání na OKM) Podložní sklo, moč nebo transportní médium zasílejte do laboratoře do 24 hodin při pokojové teplotě. Imunoflorescence - PV, NV 2 dny Enzymoimunoanalýza - PV, NV 7 dní
strana : 24 z 31 7.1.8 Gastrointestinální trakt 7.1.8.1 Rektum výtěr z rekta U všech pacientů aerobní kultivace základních střevních patogenů, u dětí do 3 let navíc kultivace a identifikace E. coli (EPEC, E. coli O157:H7). Anaerobní kultivace při podezření na Cl.difficile. Pro bakteriologické vyšetření se používá rektální výtěr. Pacient stojí (klečí) a opírá se o ruce (lokty) nebo leží. Pacienta vyzvěte, aby zatlačil do konečníku a oddálil hýždě od sebe, následně zaveďte asi do hloubky 5 cm zvlhčený tampon ster. fyziologickým roztokem nebo ster. destilovanou vodou a pootočte jím. Po odběru se vloží do transportní půdy AMIES (nezbytné pro záchyt kampylobakterů). U cíleného kultivačního průkazu patogenních vibrií a Listeria monocytogenes ze stolice je nutné vyznačit požadavek na žádanku. Při kontrolním vyšetření na salmonelózu či kampylobakteriózu, vč. kontaktů uveďte tuto skutečnost na žádanku. Vzorek v transportním médiu na kultivaci běžných střevních patogenů zašlete co nejdříve na oddělení, případně ho uchovejte při pokojové teplotě a transportujte nejlépe do 24 h, nejdéle do 48 hodin při pokojové teplotě. Pro záchyt Shigella sp. je nutné vzorek stolice dopravit do laboratoře nejlépe do 30 minut, maximálně do 2 hodin. PV 3-6 dní, NV 4 dny 7.1.8.2 Rychlá diagnostika střevních patogenů stolice imunochromatografické stanovení virů (rotaviry, adenoviry, noroviry) antigenu a toxinu A/B Clostridium difficile Helicobacter pylori Odeberte kousek stolice (zhruba velikosti lískového ořechu) umělohmotnou lopatičkou, která je součástí speciálního plastového kontejneru nebo tekutou stolici (v množství asi 2 ml). Výtěr z rekta je pro vyšetření nevhodný. Vzorek zašlete co nejdříve do laboratoře, případně ho uchovejte při chladničkové teplotě a transportujte při pokojové teplotě do 24 hodin. PV, NV do 3 h po přijetí do laboratoře
7.1.9 Veterinární vzorky Veterinární vzorky mohou být jakéhokoliv charakteru viz kapitoly 7.1.1 7.1.8. OKM - Laboratorní příručka strana : 25 z 31 Biologický materiál odeberte do sterilní zkumavky nebo na sterilní vatový tampon v transportní půdě AMIES a posílejte podle výše popsaného postupu. Na žádance udejte druh biologického materiálu a místo odběru. viz jednotlivé kapitoly 7.1.1 7.1.8 7.1.10 Prevence nozokomiálních nákaz nesterilní stěry z prostředí stěry z rukou zdravotnického personálu prevence MRSA (nos, krk, perineum) kultivace aerobní Proveďte stěr sterilním tamponem v transportním médiu AMIES (nebo na suchém odběrovém tamponu). Stěry z prostředí po domluvě s laboratoří provede pověřený pracovník OKM. Materiál odebraný zdravotnickým personálem uchovávejte a transportujte do 24 hodin při pokojové teplotě. stěry z prostředí PV 10-12 dnů, NV 9 dnů stěry - prevence MRSA PV 2-6 dnů, NV 2-4 dny 7.1.11 Vyšetření pro Oddělení transfuzní a hematologické ONJC a.s. stěry z kůže dárce obsah vaků - krev, plazma, trombokoncentrát, potransfúzní reakce atd. stěry z prostředí stěry aerobní kultivace obsah vaků - kultivace v automatickém systému Proveďte stěr z kůže dárce po dezinfekci před venepunkcí nebo stěr z prostředí sterilním tamponem v transportním médiu AMIES (nebo na suchém odběrovém tamponu). Vzorek krve, trombokoncentrátu, plazmy a potransfuzní reakce dodávejte v originálním odběrovém vaku. Materiál uchovávejte při pokojové teplotě a dopravte do 24 h do laboratoře. stěry z kůže dárce PV 2 6 dny, NV 2-4 dny stěry z prostředí obsah vaků PV 10-12 dnů, NV 9 dnů PV 2 10 dnů, NV 7 dnů
strana : 26 z 31 7.2 Mykologická vyšetření nehtová drť sputum šupiny kůže stěry z kůže, ze sliznic vlasy, vousy výtěry dutin atd. mikroskopie (louhový preparát, preparát s Parkerovým inkoustem) kultivace při 27 C, 3 týdny kožní šupiny, nehtová drť, vlasy kultivace při 27 C (1 týden) a 37 C (48 h) ostatní materiál zaslaný na mykologické vyšetření Kožní šupiny -Místo odběru dezinfikujte 70% alkoholem, vzorky odebírejte po důkladném zaschnutí dezinfekce výhradně z okrajové části ložiska, odběr se provádí seškrabáváním jemných šupinek kůže sterilním skalpelem nebo ostrou lžičkou, zasílejte nasucho ve sterilní zkumavce v dostatečném množství. Vlasy, chlupy, vousy Odeberte úlomky postižených vlasů a vousů, zasílejte nasucho ve sterilní zkumavce. Nehty - Po dezinfekci 70% alkoholem a po jejím důkladném zaschnutí seškrabte materiál z nehtu a podnehtového detritu, zasílejte nasucho ve sterilní zkumavce. Ostatní - ostatní odběry pro mykologická vyšetření (výtěry dutin, stěry z kůže, ze sliznic, sputum, moč, hnis, punktáty, výtěr zevního zvukovodu apod.) proveďte stejnou technikou jako pro bakteriologické vyšetření a na žádanku vyznačte požadavek mykologické kultivace. Pokud byla v době před odběrem aplikována lokální antimykotika, je nutné vyčkat v odběru nejméně 10 dní. V případě, že vyčkat není možné, uveďte tuto skutečnost na žádanku. Vzorky uchovávejte a transportujte do 24 hodin při pokojové teplotě. PV 1 4 týdny, NV 3 4 týdny