SP 003 LABORATORNÍ PŘÍRUČKA. Oddělení imunologie Praha

Transkript

1 Strana č. 1 SP 003 LABORATORNÍ PŘÍRUČKA Zdravotní ústav se sídlem v Ústí nad Labem ÚVOD Laboratorní příručka Zdravotního ústavu se sídlem v Ústí nad Labem poskytuje informace o činnosti oddělení. Obsahuje nabídku služeb, které pracoviště poskytuje v oblasti laboratorního vyšetření a diagnostiky především v oblasti imunologie, alergologie a infekční sérologie. ZÁKLADNÍ INFORMACE je organizační složkou ZÚ se sídlem v Ústí nad Labem. Hlavním cílem pracoviště je poskytovat kvalitní a spolehlivé laboratorní vyšetření, včetně interpretační a konzultační činnosti. Na pracuje tým zkušených a odborně kvalifikovaných pracovníků. Jejich znalosti jsou využívány při práci s moderními analyzátory a při zavádění nových vyšetřovacích metod. Pracoviště se zabývá vyšetřováním parametrů imunitního systému, včetně vyšetření alergologických a specifických protilátek proti některým infekčním agens. Všechna vyšetření jsou hrazena zdravotními pojišťovnami, nebo jsou poskytována za přímou úhradu dle platného ceníku. Pracoviště má uzavřené smlouvy se všemi zdravotními pojišťovnami. Pravidelně se účastní cyklů externích kontrol kvality (např. pořádaných firmou SEKK a SZÚ). Akreditace - pracoviště bylo od roku 2006 akreditováno ČIA o.p.s. pod č dle ČSN EN ISO V únoru 2014 splnilo pracoviště podmínky Auditu II NASKL pro odbornost 813.

2 Strana č. 2 KONTAKTY A PROVOZNÍ INFORMACE Dittrichova Praha 2 KONTAKTY: Jméno Telefon Poznámka Mgr. Ledvinková Jana jana.ledvinkova@zuusti.cz Tolarová Lenka lenka.tolarova@zuusti.cz Mičínová Jana jana.micinova@zuusti.cz Příjem materiálu Laboratoř imunologie Laboratoř sérologie Vedoucí oddělení Vedoucí laborantka Manažer kvality oddělení PŘÍJEM MATERIÁLU : 7:00 14:30 PROVOZNÍ DOBA : 7:00 16:00 ODBĚRY Pokyny k odběrům krve: odpoledne a večer před odběrem je vhodné vynechat tučné jídlo. Ráno před odběrem je vhodné se napít (1/4 l čaje, vody). Odběr by měl být nejlépe ráno nalačno za aseptických podmínek.

3 Strana č. 3 Srážlivá žilní krev Srážlivá žilní krev TYP ODBĚROVÉHO MATERIÁLU Plastová zkumavka se separačním gelem BD VACUTEINER PLASTIC žlutý uzávěr Plastová zkumavka se separačními granulemi Sarstedt bílý uzávěr Plastová zkumavka s aktivátorem srážení BD VACUTEINER červený uzávěr PŘÍKLAD POUŽITÍ Vhodné pro většinu vyšetřovaných analytů včetně ECP Vhodné pro běžná vyšetření k identifikaci protilátek Nesrážlivá žilní krev ( EDTA ) Plastová zkumavka + K EDTA Sarstedt červený uzávěr BD VACUTEINER fialový uzávěr buněčná imunita Odběr stolice Plastový kontejnerek (zkumavka) Antigen Helicobacter pylori, calprotektin Požadavky na odběry dalších vyšetření jsou uvedeny u jednotlivých vyšetření. Doporučené množství krve při primárním odběru: Množství odebrané krve záleží na počtu požadovaných vyšetření. Většinou je to cca na 5 vyšetření cca 5ml sražené krve. Pokud množství materiálu nestačí na požadovaná vyšetření, konzultuje laboratoř s lékařem stanovení preferencí. Pokud není lékař přítomen, stanoví toto pořadí kompetentní VŠ pracovník laboratoře.

4 Strana č. 4 Zvláštní požadavky na odběry u některých vyšetření: Odběr krve a příprava séra na vyšetření ECP. Srážení představuje první inkubaci při stanovení ECP vylučovaného eosinofily. Odběrové zkumavky, doba koagulace a teplota musejí být pod kontrolou, protože ovlivňují koncentraci uvolněného ECP v séru. Firma Pharmacia doporučuje použít k odběru zkumavky Vacutainer hemogard SST 2,5 ml firmy Becton Dickinson (na vyžádání možno dodat naším pracovištěm). 1. Odeberte krev, naplňte celou zkumavku -2,5 ml. 2. Po odebrání jemně 6x obraťte. 3. Krev v tomto stavu je nutné dopravit co nejrychleji do laboratoře. Pokud to není možné, lze postupovat následujícím způsobem při napojení na laboratoř, která vyšetření neprovádí) 4. Uvolněte ECP srážením 30 minut při pokojové teplotě C. 5. Centrifugujte při g 10 minut při pokojové teplotě. 6. Slijte sérum do nové zkumavky. 7. Sérum může být ponecháno 24 hodin při pokojové teplotě pro účely přepravy. Pozn. Plazma ani hemolytické sérum nemohou být použity. Odběr na vyšetření buněčné imunity (stanovení počtů T a B lymfocytů, NK buněk) a na vyšetření HLA B-27. Odběr cca 2 ml krve do zkumavky (stříkačky) s K 3 EDTA. Obsah několikrát jemně převrátit, aby došlo k promíchání krve s protisrážlivým činidlem. Vyšetření musí být provedeno nejpozději do 24 hodin po odběru. Odběr stolice Helicobacter pylori, calprotectin Odběr velikosti lískového oříšku. Plastovou lopatičkou se odebere po defekaci stolice velikosti lískového oříšku a uzavře se do plastového kontejneru. Materiál se dopraví do laboratoře, pokud se tak nestane ihned uchovává se v lednici.

5 Strana č. 5 SKLADOVÁNÍ MATERIÁLU Sérum - při zpracování do týdne je uchováváno v chladničce při teplotě 2-8 C. Pokud není zpracováno do této doby, je uchováváno v mrazícím boxu Stolice Helicobacter Ag: při zpracování do 72 hodin je uchovávána v chladničce při teplotě 2-8 C. - Calprotectin: 5 dní je možné skladovat v chladničce při teplotě 2-8 C, potom je nutné vzorek zpracovat. Plazma - okamžité zpracování nebo hluboké zamrazení -20 C Laboratoř uchovává séra po dobu jednoho měsíce, poté je likviduje. Do jednoho měsíce od příjmu séra lze opakovat vyšetření z původního materiálu. Poté je třeba k opakovanému vyšetření odeslat nové sérum. ŽÁDANKY Ke každému vzorku musí být přiložena žádanka o vyšetření, která obsahuje informace postačující pro identifikaci pacienta a oprávněného žadatele a musí poskytovat odpovídající klinické údaje. Žádanky obsahují nabídku prováděných vyšetření. Zaslaná žádanka je považována za smlouvu mezi lékařem a laboratoří s požadavkem provést označené vyšetření. Pro laboratoř je základním dokumentem pro prokázání požadované zdravotní péče zdravotním pojišťovnám. Proto Vás žádáme o pečlivé a čitelné vyplnění žádanek Základní identifikační znaky povinně uváděné na žádance Příjmení a jméno pacienta Rodné číslo pacienta/ číslo pojištěnce Pojišťovna stačí číselný kód Diagnóza Datum a čas odběru Identifikace objednavatele (jméno lékaře, IČZ, odbornost) Kontakt na objednavatele adresa,telefon Požadovaná vyšetření Žádanky jsou ke stažení na je možné je zaslat svozem, poštou po telefonickém požádání

6 Strana č. 6 TRANSPORT VZORKU DO LABORATOŘE Svoz biologického materiálu zajišťujeme denně, dle domluveného časového harmonogramu vlastní dopravní službou Plná krev se může skladovat před doručením do laboratoře nejdéle 24 hodin při pokojové teplotě nebo 72 hodin při teplotě o C. Nelze-li dodržet tuto podmínku, je nutno po sražení krve oddělit sérum od krevního koláče a do laboratoře zaslat jen oddělené sérum. Sérum je možno skladovat při teplotě o C max. 5 dní. Sérum je možno před transportem zamrazit a dlouhodobě skladovat při teplotě -20 o C ± 5 o C. Tato teplota musí být dodržována až do vyšetření vzorku. Požadavky na transport vzorků na další speciální vyšetření jsou uvedeny výše. Distribuce výsledků Výsledky jsou vydávány v tištěné podobě pravidelným svozem nebo poštou. Vedle tištěných výsledků nabízíme i možnost stahování výsledků laboratorního vyšetření v elektronické podobě. Informace, návod a kontakt na odpovědného pracovníka jsou na www. zuusti. cz. Hlášení výsledků v kritických intervalech Výrazně patologické výsledky jsou neprodleně sděleny ošetřujícímu lékaři. Tabulka kritických hodnot: CRP ANCA myeloperoxidáza ANCA proteináza 3 GBM >200 mg/l při pozitivitě u nefrologických diagnóz při pozitivitě u nefrologických diagnóz při pozitivitě PŘEHLED VYŠETŘENÍ PROVÁDĚNÝCH NA ODDĚLENÍ IMUNOLOGIE Imunoglobuliny Komplement Autoprotilátky Serologická vyšetření Další stanovení (Potravinové intolerance, Proteiny akutní fáze, Alergologická vyš.) Buněčná imunita

7 Strana č. 7 Vysvětlivky k tabulkám Název / Zkratka - název vyšetření a zkratka, pod kterou je vyšetření uváděno na žádance, v LIS a na protokolu o výsledku imunologického vyšetření Odběr / Materiál - druh odebíraného / zpracovávaného materiálu: S sérum P plazma ST stolice SK - srážlivá krev NKE - nesrážlivá krev s EDTA Metoda - způsob provedení vyšetření uvedený zkratkou: - enzymová imunoanalýza NEF - nefelometrie PC - průtoková cytometrie NIF - nepřímá imunofluorescence PEG-IKEM - precipitace s polyetylénglykolem Imunoblot Aglutinace aglutinační reakce FEIA - enzymová imunoanalýza s fluorescenční detekcí (vysokoafinitní fluoroenzymoimunoanalýza) IA imunoanalýza ICHG - imunochromatografie Provádí se - orientační informace o časovém intervalu, kdy se dané vyšetření provádí (např. denně, 1x týdně) Výsledek do - informace o době nutné pro vlastní provedení vyšetření od zahájení laboratorního zpracování do získání výsledku Referenční rozmezí hodnot - základní informace pro posouzení výsledku

8 Strana č. 8 1.Imunoglobuliny Název / Zkratka Metoda Odběr / Provádí Materiál se Imunoglobulin G / IgG Imunoglobulin A / IgA Imunoglobulin M / IgM Imunoglobulin D / IgD* Imunoglobulin E / IgE IgG Podtřídy* Výsledek do NEF denně 3 dnů NEF denně 3 dnů NEF denně 3 dnů FEIA Referenční rozmezí hodnot 7,51-15,6 g/l pro děti viz příloha č.1 0,82-4,53 g/l pro děti viz příloha č.1 0,46-3,04 g/l pro děti viz příloha č IU/ml Příloha č. 1: Referenční rozmezí koncentrací imunoglobulinů v séru pro stanovení NEF metodou u dětí Věk IgG g/l IgA g/l IgM g/l novorozenci 7,0-16 neprokazatelné 0,1-0,3 1-3 měsíce 2,5-7,5 0,05-0,5 0,1-0,7 4-6 měsíců 1,8-8,0 0,08-0,8 0,2-1, měsíců 3,0-10 0,3-1,4 0,3-1,0 2 roky 3,5-10 0,3-1,2 0,4-1,4 3-5 roků 5,0-13 0,4-1,8 0,4-1,8 6-9 roků 6,0-13 0,6-2,2 0,4-1, roků 7,0-14 0,7-2,3 0,4-1,5

9 Strana č Komplement Název / Zkratka C3 složka komplementu / C3 C4 složka komplementu / C4 C1- inhibitor / C1-INH* Metoda Odběr/ Materiál Provádí se Výsledek do Referenční rozmezí hodnot NEF denně 3 dnů 0,79-1,52 g/l NEF denně 3 dnů 0,16-0,38 g/l 3.Autoprotilátky Název / Zkratka antinukleární / ANA ds-dna screen/ ds-dna IgG, IgM, IgA ENA screen ANA blot Metoda NIF Imunoblot Odběr/ Materiál Provádí se Výsledek do 1x týdně 7 dnů Referenční rozmezí hodnot negativní/pozitivní (při pozitivitě třída Ig, titr a typ fluorescence s komentářem screen: 25 U/ml pozitivní roztestování do tříd: 20 U/ml pozitivní 1,0 pozitivní Semikvantitativní hodnocení pomocí skeneru Revmatoidní faktory IgG, IgA, IgM / RF 20 U/ml pozitivní Cyklický citrulinovaný peptid / CCP IgG, IgA Mutovaný citrulinovaný vimentin / MCV 1x týdně 7 dnů < 18 U/ml negativní U/ml hraniční > 22 U/ml pozitivní < 20 U/ml negativní 20 U/ml pozitivní Myeloperoxidáza a Proteináza 3 / ANCA (MPO, PR3) 5 U/ml pozitivní

10 Strana č. 10 ANCA Combi (PR3,MPO,BPI, Elastasa,Cathepsin G,Lysozym,Lactoferrin) Bazální membrána glomerulů / GBM Bazální membrána tubulů / TBM 1 pozitivní 20 U/ml pozitivní negativní/pozitivní Kardiolipin / ACLA < 10 U/ml negativní 10 U/ml pozitivní Fosfolipidy / APLA IgG, IgM < 10 U/ml negativní 10 U/ml pozitivní Beta-2-Glycoprotein I IgG, IgM < 5 U/ml negativní 5-8 U/ml hraniční > 8 U/ml pozitivní gastroparietální /PCA 10 U/ml pozitivní Intrinsic Factor / IF 6 U/ml pozitivní Endomyzium IgA,IgG NIF negativní/pozitivní Tkáňová transglutamináza / 10 U/ml pozitivní ttg IgA, IgG Retikulin IgA 1x týdně 7 dnů negativní/pozitivní Calprotektin (ve stolici) Saccharomyces cerevisiae / ASCA IgG, IgA Pankreas* IA ST denně 3 dnů 40 ug/g negativní 60 ug/g pozitivní 10 U/ml pozitivní anti mitochondriální / AMA NIF hladký sval / SMA NIF mikrosomy jater a NIF ledvin / LKM negativní/pozitivní negativní/pozitivní negativní/pozitivní solubilní jaterní antigen / SLA Viz. Jaterní blot 1

11 Strana č. 11 Jaterní blot 1 (M2,LKM1,LC1,SLA, F-Actin) Jaterní blot 2 (AMA-M2, SP-100, PML, gp210, M2-3E synonymum BPO), LKM1,LC1,SLA/LP,Ro-52) Tyrozinfosfatáza (ostrůvky pankreatu) / IA-2* Dekarboxyláza kys. glutamové / GAD* Imunoblot Imunoblot Thyreoglobulin / TG Thyreoperoxidáza / TPO Nadledvinky* Ovaria* Testes* Neurony (Hu, Yo, Ri) IgG Imunoblot Gangliosidy* Myelin /MAG* Epidermální bazální membrána IgA/ EBM* Intercelulární substance IgA / ICS* Příčně pruhovaný sval / ASMA Myokard / MYO* Systémová skleróza blot 1x týdně 7 dnů 3x týdně 4dnů 1x týdně 7 dnů kvalitativní hodnocení imunologem Semikvantitativní hodnocení pomocí skeneru < 100 U/ml negativní U/ml hraniční > 150 U/ml pozitivní < 50 U/ml negativní U/ml hraniční > 75 U/ml pozitivní Semikvantitativní hodnocení pomocí skeneru NIF negativní/pozitivní Imunoblot 1x týdně 7 dnů Semikvantitativní hodnocení pomocí skeneru

12 Strana č Serologická vyšetření Název / Zkratka Antistreptolysin O / ASLO Revmatoidní faktor / LATEX C-reaktivní protein / CRP Metoda Odběr / Materiál Provádí se Výsledek do NEF denně 3 dnů NEF NEF denně 3 dnů Referenční rozmezí hodnot od 200 IU/ml pozitivní od 20 IU/ml pozitivní denně 3 dnů od 8 mg/l pozitivní IM test Aglutinace denně 3 dnů negativní/pozitivní Widalova reakce* protilátky proti Brucella abortus* Francisella tularensis* Yersinia enterocolitica antigen O3* Yersiniím IgG,IgA,IgM* Campylobacter IgG, IgA* Listeria monocytogenes O-I, II* Bordetella parapertussis Bordetella pertussis toxin IgG, IgA, IgM Rickettsiím screen** Rickettsia conori IgG, IgM** NIF 2x týdně 2x týdně 5 dnů 5 dnů negativní/pozitivní (při pozitivitě titr s komentářem) < 9VE negativní 9 11VE hraniční > 11VE pozitivní

13 Strana č. 13 Helicobacter pylori IgG, IgA, IgM* Helicobacter pylori* (blot CagA/VacA) Helicobacter pylori Ag (vyšetření antigenu ve stolici) IgG protilátky proti tetanickému toxoidu IgG protilátky proti difterickému toxoidu* IgG protilátky proti klíšťové encephalitis** IgG protilátky proti Haemophilus influenzae typ B* IgG protilátky proti Streptococcus Pneumoniae* Bartonella (quintana+henselae) IgG,IgM** ICHG ST denně 3 dnů negativní/pozitivní 1x týdně 7 dnů viz příloha č.2 Příloha č. 2: Interpretace výsledků Tetanu IU/ml Hodnocení/následná doporučení Žádná ochrana < 0,01 Podle anamnézy je doporučeno provést základní očkování nebo přeočkování, serologická kontrola po 4-8 týdnech Nejistá ochrana 0,01-0,1 Přeočkování, serologická kontrola po 4-8 týdnech Krátkodobá ochrana 0,11-0,5 Přeočkování vede k dlouhodobé ochraně Ochrana dostatečná Přeočkování nebo serologická kontrola po 3 letech 0,51-1,0 Upozornění: očkování u koncentrace protilátek >0,5 IU/ml může vést k nežádoucím reakcím po očkování!

14 Strana č. 14 Dlouholetá ochrana 1, 1-5,0 Přeočkování nebo serologická kontrola po uplynutí 5 let Dlouholetá ochrana 5,1-10,0 Přeočkování nebo serologická kontrola nejdříve po uplynutí 8 let >10,0 Dlouholetá ochrana Přeočkování nebo serologická kontrola nejdříve po 10 letech 5. Další stanovení Název / Zkratka Metoda Odběr / Materiál Cirkulující imunokomplexy (PEG) / CIK (PEG) PEG-IKEM Provádí se Výsledek do Referenční rozmezí hodnot < 0,9 negativní 0,9-1,1 hraniční > 1,1 pozitivní Cirkulující imunokomplexy (C1q) / CIK (C1q)* IMUNOFIXACE* Transferin / TRF NEF denně 3 dnů 2,02-3,36 g/l Ceruloplasmin /CPL NEF denně 3 dnů 0,22 0,58 g/l Orosomukoid / ORO NEF denně 3 dnů 0,51-1,17 g/l Prealbumin / PREA NEF denně 3 dnů 0,18-0,38 g/l Alfa-1-antitrypsin / NEF denně 3 dnů 0,88-1,74 g/l A1AT Alfa-2-makroglobulin NEF denně 3 dnů 1,02-2,59 g/l / A2M Haptoglobin / HAPT NEF denně 3 dnů 0,36-1,95 g/l Alfa-fetoprotein / AFP 1x týdně 7 dnů 0-10 ng/ml Beta-2-mikroglobulin NEF 1x týdně 7 dnů 0,7-1,8 mg/l / B2M gliadinu IgG, IgA (anti DGP ) 10 U/ml pozitivní bílkovině kravského mléka IgG, IgA < 0,9 negativní 0,9-1,1 hraniční > 1,1 pozitivní Specifické IgE (viz žádanka) FEIA viz příloha č.3

15 Strana č. 15 Pediatrický blot (viz žádanka) Potravinový blot (viz žádanka) Atopický blot (viz žádanka) Eosinofilní katonický protein / ECP Immunoblot Immunoblot Immunoblot FEIA Kvantitativní hodnocení pomocí skeneru Kvantitativní hodnocení pomocí skeneru Kvantitativní hodnocení pomocí skeneru 2,0-18 µg/l Příloha č.3: Interpretace výsledků sige: IU/ml < 0,1 0,1 0,5 0, > 50 Hladina IgE nedetekovatelná velmi nízká nízká střední vysoká velmi vysoká Vztah k sympt. nepravděpodobný málo běžný nízký běžný vysoký velmi vysoký 6. Buněčná imunita Název / Zkratka Metoda Buněčná imunita panel Průtoková (CD3,4,8,19,NK,IRI) cytometrie B lymfocyty/cd19+ Průtoková cytometrie T lymfocyty /CD3+ Průtoková cytometrie T pomocné lymfocyty / Průtoková CD4+ cytometrie Cytotoxické lymfocyty / Průtoková CD8+ cytometrie NK buňky (Přirození Průtoková zabíječi) / CD cytometrie HLA B-27 Průtoková cytometrie Odběr / Materiál Provádí se Výsledek do Referenční rozmezí hodnot NKE denně 24 hodin viz příloha č.4 NKE denně 24 hodin viz příloha č.4 NKE denně 24 hodin viz příloha č.4 NKE denně 24 hodin viz příloha č.4 NKE denně 24 hodin viz příloha č.4 NKE denně 24 hodin viz příloha č.4 NKE denně 24 hodin negativní/pozitivní

16 Strana č. 16 Příloha č.4: Referenční meze buněčné imunity: 0-1 rok 2-6 let 7-17 let dospělí CD19+ 0,5-1,5 0,7-1,3 0,3-0,5 0,2-0,4 [x10 3 buněk/µl] CD19+ % ,4-22,6 CD3+ 1,7-3,6 1,8-3,0 1,4-2 1,1-1,7 [x10 3 buněk/µl] CD3+ % ,4-84,6 CD4+ 1,7-2,0 1,0-1,9 0,7-1,1 0,7-1,1 [x10 3 buněk/µl] CD4+ % ,5-60,5 CD8+ 0,8-1,2 0,8-1,5 0,6-0,9 0,5-0,9 [x10 3 buněk/µl] CD8+ % ,1-38,3 IRI 1,5-2,9 1-1,6 1,1-1,4 0,9-3,6 NK 0,3-0,7 0,2-0,6 0,2-0,3 0,2-0,4 [x10 3 buněk/µl] NK % ,6-30,9 * vyšetření přeposlána na Odbor laboratorní imunologie Ústí nad Labem Na Kabátě 229, ústí nad Labem, , tel.: ** vyšetření přeposlána na Oddělení virologie Praha Jasmínová 2905/37, Praha 10, , tel.: ; ,617