OPVK CZ.1.07/2.2.00/

Transkript

1 OPVK CZ.1.07/2.2.00/

2 Parazitologie OCH/PAR ing. Kamil Kořistek, Ph.D. LS 2012/2013

3 Použitá literatura a zdroje Břetislav Koudela: Parazitologie potravin a parazitologické laboratorní metody, Ústav parazitologie FVL, Veterinární a farmaceutická univerzita Brno www: wikipedia.org. Zimmer C.: Vládce parazit, 2005 (Paseka) Volf P., Horák P. a kol.: Paraziti a jejich biologie Gelnár: Základy humánní parazitologie-soubor přednášek

4 Africké trypanosomy u domácích zvířat

5 AMERICKÁ TRYPANOSOMÓZA-Chagasova choroba Původce: Trypanosoma cruzinejdůležitější sterkorární Tr. Mimo člověka infikuje víc než sto druhů divokých i domácích zvířat, koluje tedy nezávisle na člověku Výskyt: mírné, subtropické a tropické pásmo Jižní a Střední Ameriky od severní Argentiny až po Texas Přenos: kontaminativní - prostřednictvím krvesajících ploštic "barbieros" (Triatoma sp., čeleď Reduviidae), které v noci vylézají, lezou po obličeji, sají a defekují na kůži, prvoci vetřeni škrabáním při svědění do ranky po bodnutí, aktivní přenos kůží

6

7

8 PLOŠTICE Žijí ve skulinách chudých obydlí (zdi,dřevo)

9 Vývojový cyklus cyklus Tr.cruzi Parazit se ve střevě ploštice množí v podobě epimastigotů. Ty se v rektu mění na infekční trypomastigoty Metacykličtí trypomastigoti vnikají do tělních buněk-tam se množí jako amastigoti Po několika děleních buňka praskne a trypomastigoti se uvolní do krevního oběhu-nedělí se-nákaza se šíří do dalších buněk a infikují při sání ploštice

10 Vývojový cyklus cyklus Tr.cruzi

11 Vývojový cyklus cyklus Tr.cruzi

12 Chagasova choroba inkubační doba: akutní infekce (u dětí): 1-2 týdny latentní infekce: až 20 let onemocnění: probíhá akutně (zejména u dětí do 12 let) nebo latentně s příznaky: lokální reakce v místě vniku, horečka, rychlé ubývání sil, otoky víček (Romaňův syndrom), lymfadenitis (zduření mízních uzlin), hepatosplenomegalie, meningoencefalitida, endokarditida (selhání srdeční svaloviny), může končit i smrtelně

13 1.Akutní fáze (klinické projevy po 1-4 měsících) Průběh onemocnění mírný, u dětí může dojít k akutnímu zánětu srdeční nitroblány (endokarditida)-končí smrtí -lokální zánět v místě průniku trypanosom (chagoma) Klinické příznaky: -žádné -vážné (malé děti): horečka, nechutenství, slabost, akutní myokarditida, 10% případů smrtelných, akutní encefalitida

14 2.Chronická fáze (klinické projevy až i po letech) a) Chronická kardiomyopatie-onemocnění srdečního svalu (myokardu), které vedou k poruše funkce srdce -srdeční dilatace levé komory, apikální aneurysma, 30% nemocných

15 b) Dilatace trávícího traktu -megakolon -megaesofagus (zbytnění jícnu) -demence 6% nemocných

16 Diagnostika Laboratorní diagnostika trypanosom: 1) přímý mikroskopický průkaz v barveném (Giemsou) preparátu z krve (krevní roztěr), tekutin, punktátu z mízních uzlin 2) izolace na laboratorních zvířatech a kultivace na krevních agarech 3) sérologický průkaz protilátek (nespolehlivé) IFAT (imunofluorescence), ELISA 4) xenodiagnostika-nepřímá metoda průkazu původce onemocnění člověka v krevsajícím členovci přenašeči. Po nasátí krve nemocného člověka se v členovci zárodky původce onemocnění pomnoží takovou měrou, že je lze snadněji prokázat. (ploštice Triatoma nebo Rhodnius)

17 Terapie Chagasovy choroby úspěšná léčba v akutní fázi - benzidazol nebo nifurtimox, amfotericin B

18 Terapie Chagasovy choroby

19 Terapie Chagasovy choroby léčba v chronické fázi-neúčinná, léčí se pouze způsobené komplikace (srdeční, zažívací trakt)

20 Trypanosomy ryb a obojživelníků Je přenášena pijavkami Trypanosoma carassii - častý parazit kaprovitých ryb Trypanosoma rotatorium v krvi skokanů

21 LEISHMANIÓZA Rod Leishmania organismy cirkulující mezi obratlovci a přenašeči, kterými jsou flebotomové (Diptera) Dva druhy: Phlebotomus (Starý svět) Lutzomyia (Nový svět)

22 velikost 1,5 3 mm Vývoj Plebotomus spp. (koutulovití) nejsou vázáni vývojem na vodní prostředí samičky několik desítek vajíček do rozmanitých vlhkých organických substrátů (např. do nor hlodavců) délka vývoje závisí především na teplotě larva se 4 svléká létají za soumraku, v noci a v časných ranních hodinách. špatní letci nevzdalující se obvykle od svých líhnišť samičky hledající hostitele jsou lákány světlem a dostávají se běžně okny do stájí a lidských obydlí. díky malé velikosti prolézají sítěmi a moskytiérami v chladnějších oblastech přezimují larvy IV. stadia

23 Leishmania spp. Velké množství morfologicky nerozlišitelných druhů Rozlišení L. podle: hostitelů klinického obrazu vyvolaného onemocnění geografického rozšíření Exaktněji biochemicky a molekulárně-biologicky (typizace pomocí izoenzymových vzorců-dna sondy)

24 Vývojový cyklus Leishmania spp.

25 Vývojový cyklus Leishmania spp.

26

27 Interakce promastigotů leishmanií s makrofágy L. přitahuje molekuly komplementu, ty se nalepí na její povrch a lákají makrofágy, aby P. zahubily. L. umí zabránit komplementu, aby se do ní zavrtal, ale nezničí jeho molekuly. Nechá ho dělat co umí-signální věž. M. obchází kolem, nahmatá komplement a L. pohltí. přichycení na povrch makrofágů transformace promastigotů na amastigoty přežívání a množení ve fago-lysozomu Amastigoti odolní proti zničení ve fagolysozomu: Enzymaticky inhibují tvorbu radikálů kyslíku inhibice hydroláz

28 Leishmania a imunitní systém L. nepřemění pouze makrofág, ale mění celý imunitní systém H. Když se mladé lymfocyty T poprvé potkají s antigeny a naváží se na ně, mohou se z nich stát pomocné lymfocyty T: Zánět stimulující Lymfocyty T pomáhající lymfocytům B vytvářet protilátky Oba druhy lymfocytů na sebe působí a na základě určitých signálů v těle převáží jeden druh lymfocytů a ty pak zahájí vlastní způsob boje proti P. L. umí ovlivnit tento souboj lymfocytů ve svůj prospěch. Místo zánět stimulujících nutí makrofág vysílat signály, po nichž se imunitní systém přikloní k lymfocytům T pomáhajícím vytvářet protilátky. Ty L. ale neuškodí

29 Leshmanie v obratlovcích jako drobní amastigoti v makrofázích, v trávícím systému přenašečů jako promastigoti amastigoti 2,5-5 1,5-2 m promastigot amastigot promastigoti ,5-3,5 m

30 Leishmania spp. - amastigotní stádia makrofág téměř zaplněn amastigoty Amastigoti opouštějí protržený makrofág

31 Onemocnění vyvolaná Leishmaniemi- Leishmaniózy Po malárii druhou nejvážnější smrtonosnou nemocí vyvolanou parazitem. Ročně na ni umírá infikovaných osob. Lidské leishmaniózy většinou zoonózy, výjimečně antroponózy Infekce vždy začíná v kůži: kožní leishmaniózy - po celou dobu onemocnění v kůži kožně-slizniční (muko-kutánní) přestup do sliznic útrobní (viscerální) po krátké kožní fázi invaze vnitřních orgánů Lokalizace onemocnění dána: vlastnostmi parazita aktivitou imunitního systému hostitele genetickou výbavou hostitele

32

33 Lidské Leishmaniózy

34

35 Kožní leishmaniózy Starého světa

36 Leishmania tropica Původce suchého vředu Výskyt: jižní Evropa, severní Afrika, Blízký východ, střední Asie přenašeč: Phlebotomus sergenti Většinou antroponóza, ale nověji nalezeny i zvířecí rezervoáry ( damani v Izraeli) inkubační doba 2-8 měsíců Spontánní zhojení vředu po asi měsících, trvalá jizva

37 Leishmania tropica

38 Vlhký vřed Leishmania major Výskyt: Afrika, Asie, Blízký a střední Východ, polopouště přenašeč: Phlebotomus duboscai, papatasi Rezervoár: drobní hlodavci (př. pískomilové), v jejichž norách se flebotomové vyvíjí Spontánní zhojení mokvajícího vředu za 3-6 měsíců, trvalá jizva

39 Leishmania aethiopica suchý vřed často mukokutaní leishmanióza rezervoár: damani (Hyracoidea) rozšíření: Ethiopie, Keňa

40 Leishmania aethiopica chronický pomalý průběh (3 roky) edematózní neulcerující (netvoří vředy) léze kožní, mukokutánní, difúzní leishmanióza

41 Kožní leishmaniózy Střední Ameriky Leishmania mexicana Komplex druhů Původce kožní leishmaniózy Rezervoár: lesní hlodavci přenos: Lutzomiya longipalpis

42 Leishmania mexicana mexicana na ušním boltci, metastáze v přilehlých chrupavkách

43 Leishmania mexicana amazonensis difúzní kožní leishmanióza

44 Leishmania mexicana peruviana mírná lokalizovaná kožní leishmanióza Uta rozšíření: aridní oblasti And rezervoár: pes

45 Leishmania braziliensis Komplex druhů Kožní a kožně-slizniční leishmaniózy Jižní Amerika L.b.braziliensis (lesy v povodí Amazonky) -nejtěžší formu mukokutánní l. začíná kožním vředem, rozsev do nosohltanu,ústních sliznic a přilehlých chrupavčitých tkání obličeje Může končit smrtelně Rezervoár: hlodavci

46 Leishmania braziliensis braziliensis

47 Leishmania b. quyanensis sekundární léze, šíření podél lymfatických drah - difúzní leishmanióza slabá reakce velké množství parazitů v lézích

48 Leishmania donovani Komplex příbuzných druhů Působí viscerální (útrobní) l. Dva hlavní: L.d. infantum a L.d. donovani L. chagasi = L. d.infantum zavlečená do J.Ameriky

49 Leishmania donovani infantum dětská viscerální l. ve středomoří, mohou i dospělí Klinické příznaky: anemie, horečky, zduření sleziny (splenomegalie) Rezervoár: psovité šelmy, člověk náhodným hostitelem zoonóza v ČR import ze Středomoří William Leishman a Charles Donovan spatřili amastigoty uvnitř makrofágů lidí s Kala-azar

50 Leishmania donovani infantum Rezervoár: psovité šelmy (psí l.)

51 Leishmaniózy v rezervoáru (psi)

52 Leishmaniózy v rezervoáru (psi) Kožní léze, deformace drápů, pelichání, hubnutí

53

54 Leishmania donovani donovani Původce nejtěžší formy viscerální leishmaniózy kala-azar (černá nemoc-v jazyce hindi), Dum dum fever Nemocným tmavne kůže Výskyt: Indie (Bangladéš. Bihár), střední a východní Afrika antroponóza (Indie) zoonóza (východní Afrika)-rezervoár cibetky a kočkovité šelmy Klinické příznaky: anémie, zvýšená teplota, mohutné zvětšení sleziny a jater (hepatosplenomegalie) Neléčená- většinou smrt kachexií (patologické zhubnutí a silná celková sešlost )během měsíců až let

55 Leishmania donovani donovani

56 Diagnostika leishmaniózy 1) odběr materiálu podle lokalizace: viscerální leishmanióza: krevní nátěr (tlustá kapka) sternální punkce, biopsie sleziny, jater či mízních uzlin kožní leishmanióza: materiál odebraný z okraje a spodiny vředu 2) přímý mikroskopický průkaz parazita 3) sérologický průkaz protilátek- NFR (nepřímá fluorescence), ELISA 4) experiment na zvířeti

57 Terapie Leishmaniózy Meglumin antimonát (Glucantime), i.m. Pentadimidin

58 Terapie Leishmaniózy Amfotercin B Zabránit poštípání flebotomy-obtížné, bodají v noci a prochází běžnými moskytiérami

59 Kmen Ciliophora (nálevníci)-balantidióza Cilie (řasinky, brvy) Původce balantidiózy: Balantidium coli

60 Balantidium coli -Balantidióza Vejčitá buňka ( µm) tvoří cysty(50-70 µm) V cystě jeden jedinec s potravními vakuolami Výskyt: tlusté střevo prasat a člověka B.coli se normálně živí střevním obsahem, někdy nálevníci vnikají do střevní sliznice (vylučují hyaluronidázu) a působí zde hluboké vředy, které mohou prasknout Projevy balantidiózy: Krvavé hlenovité průjmy Může dojít k rozsevu parazita do jater, plic, těžké nákazy-smrt Poměrně vzácná, častěji tam, kde žijí lidé s prasaty nebo ve špatných hygienických podmínkách

61 Diagnostika: Balantidióza Mikroskopický nález nálevníků nebo cyst v nativním preparátu z čerstvé stolice nebo v barveném nátěru ze stolice Terapie: tetracyklin, metronidazol

62 Kmen APICOMPLEXA (výtrusovci) Apicomplexa- 4 velké skupiny (třídy): Gregariny (Gregarinea) Kryptosporidie (Cryptosporidea)-kryptosporidióza Kokcidie (Coccidea)-kokcidióza, toxoplasmóza Hemosporidie (Hematozoea)-malárie

63 Apicomplexa-popis Jeden z největších kmenů parazitických protist Obsahuje závažné parazity Všichni adaptováni na život uvnitř, méně na povrchu buněk H. Název od apikálního komplexu: -soubor organel na předním pólu těch stádií, která vnikají do buněk H. (zoiti: sporozoiti,merozoiti). AK tvořen: konoid-válcovitý ze spirálně vinutých fibril polární prstenec-mikrotubuly, vyztužují buňku prvoka -sekreční žlázky: kyjovité Rhoptrie (2-4), vláskovité Mikronémy V buňce je ještě denzní granula

64

65 Apicomplexa-Apikoplast Buňka většiny zástupců A. obsahuje kromě jádra, mitochondrie a GA.. ještě Apikoplast (AP): zbytek plastidu získaného kdysi pohlcením červené řasy. Eugregariny a kryptosporidie AP nemají AP nezbytný pro život (syntéza lipidů membrán) AP zbytek fotosyntetického organismu citlivý na herbicidy (blokují dělení AP) cíl terapie? Zoiti klouzavý pohyb beze změny tvaru, pomocí aktin myozinového komplexu, svázaného se substrátem. -aktivně vyhledávají cílové buňky H. Po nalezení se zanoří do buňky modifikace vchlípené membrány vložením proteinů z rhoptrií a denzních granul. Tím se mění její biochemické a antigenní vlastnosti

66 Průnik zoitů do hostitelské buňky

67 Průnik zoitů do hostitelské buňky

68 Apicomplexa-vývojové cykly složité, tři rozmnožovací fáze: merogonie, gamogonie, sporogonie Sporozoit vyhledá H.buňku, vnikne, roste v parazitoforní vakuole a stane se merontem-jeho jádro se dělí. Během merogonie dochází k asexuálnímu množení-mnohojaderný meront se dělí na jednojaderné merozoity-ty vnikají do dalších buněk H. Merogonie se může několikrát opakovat i v různých tkáních odlišní merozoiti. Během gamogonie se vnitrob. stadia, vzniklá merogoniálním množením, nejdříve mění v nezralá sexuální stadia-samčí a samičí gametocyty a potom ve zralá samčí mikrogamety a samičí makrogamety Mikrogamety: 1-3 bičíky

69 Apicomplexa-vývojové cykly Sporogonie začíná kopulací gamet. Zygota se obaluje a mění se v oocystu. Uvnitř ní se někdy tvoří další obal sporocysta. Uvnitř oocysty-meióza a buněčné dělení sporozoiti opouští oocystu v trávícím traktu nového hostitele.

70 Oocysty

71 Třída Gregarinea (gregariny-hromadinky) Tři řády: 1) Archigregarinida: primitivní g., paraziti trávící trubice mořských bezobratlých 2) Eugregarinida: nejpočetnější, paraziti kroužkovců (Annelida) a členovců (Anthropoda) Výživa osmotrofně a pinocytózou Neexistuje merogonie veškeré rozmnožování soustředěno do gamogonie a sporogonie Gregarina cuneata- ve střevě larev potemníka moučného Cizopasník v dešťovkách

72 Eugregarinida

73 Gregariny 3) Neogregarinida: existuje merogonie Epicelulární (na povrchu buněk) paraziti tělních dutin, střev Intracelulární paraziti v tukovém tělese hmyzu -moučný mol, zavíječ paprikový Vzhledem k patogenitě se zvažovalo použití jako biocidů skladištních škůdců

74 Třída Cryptosporidea (kryptosporidie) monoxenní vývoj na povrchu sliznice obratlovců epicelulárně oocysta se 4 sporozoity (není však vytvořena sporocysta) rozdílný počet samčích a samičích gamet = anisogamní různá hostitelská specifita silnostěnné-odolné oocysty pro vnější prostředí a MH přenos a tenkostěnné oocysty-excystují v H.-autoinfekce přes 20 druhů rodu Cryptosporidium žaludeční/střevní druhy Zdroj:

75 Druhy kryptosporidií

76

77 Cryptosporidium-životní cyklus

78 Cryptosporidium parvum V zóně mikroklků tenkého a tlustého střeva myší, morčat, ovcí a skotu (hl. telata) Příležitostně člověk-kryptosporidióza Cryptosporidium hominis V zóně mikroklků tenkého a tlustého střeva člověka a prasat Hlavní původce lidské kryptosporidiózy Některé kryptosporidie na povrchu žaludečního epitelu (C.muris)

79 Přichycení kryptosporidií stádium gametogonie

80 Morfologie kryptosporidií výsev vývojových stádií kryptosporidií na střevní sliznici uvolňování merozoitů

81 Kryptosporidióza zdroj: nemocný člověk, volně žijící i domácí zvířata (hovězí dobytek) - přenos: fekálně-orální znečištěnými prsty voda, potraviny kontaminované oocystami - inkubační doba: 5 dnů

82 Možnosti (zdroje) infekce kryptosporidiemi přímý kontakt chovatelé, veterináři, pracovníci jatek ekologické farmy úroveň zoohygieny kontaminované potraviny při porážce na jatkách při zpracování mléka kontaminované ovoce a zelenina kontaminovaná voda splachy z pastvin hnojení odpadní vody z jatek poruchy čističek vody, kanalizace vodáren

83 Kryptosporidióza u imunokompetentních - dospělých: asymptomatická forma - dětí: manifestní forma - příznaky: 14 dnů trvající vodnaté průjmy, zvracení, teplota, bolesti břicha - po ukončení vývojového cyklu prvoka spontánní uzdravení u imunodeficientních pacientů (zejména AIDS) představuje jednu z oportunních parazitóz - příznaky: chronické, život ohrožující těžké vodnaté průjmy, horečka, bolesti břicha, hubnutí, někdy průnik do plic - plicní komplikace Kontaminace pitné vody oocystami C.hominis vede až k masovým epidemiím. Účinná léčba kryptosporidiózy dosud neexistuje

84 Epidemie kryptosporidiózy - Milwaukee 1993 This abnormal condition at the plant lasted from March 23 through April 8, after which, the plant was shut down. Over the span of approximately two weeks, 403,000 of an estimated 1.61 million residents in the Milwaukee area (of which 880,000 were served by the malfunctioning treatment plant) became ill with the stomach cramps, fever, diarrhoea and dehydration caused by the pathogen. Over 100 deaths were attributed to this outbreak, mostly among the elderly and immunocompromised people, such as AIDS patients.

85 Cryptosporidium potenciální biologická zbraň snadno dostupné infekční agens nízká infekční dávka (ID 50 pro Homo - 9 oocyst) vysoká odolnost výrazné klinické příznaky není terapie snadná aplikace do pitné vody nebo potravin doposud nestandardní metody detekce

86 Diagnostika kryptosporidiózy(kryptosporidií) flotační metody barvené roztěry imunologické metody genetické metody nativ

87 Kryptosporidióza a voda

88 Třída Coccidea (kokcidie)-kokcidióza Přítomny všechny 3 fáze rozmnožování: merogonie, gamogonie a sporogonie Řád Adeleida: většina parazituje v bezobratlích (stonožky,kroužkovci) a hmyz Adelina tribolii-v trávícím traktu potemníka Hepatozoon canis: přenašeč klíště. DH-pes horečky, hubnutí, anemie, zvětšení jater psů V ČR vzácně u psů po pobytu v zahraničí

89 Kokcidie Řád Eimeriida Velké množství zástupců, většinou u obratlovců Některé veterinárně i zdravotnicky významné Dělení do rodů podle: - počtu sporocyst v oocystě - počtu sporozoitů ve sporocystách - morfologie oocyst a sporocyst - typu hostitele a vývojového cyklu - tkáňové a orgánové specifity

90 Oocysty kokcidií rodu Eimeria

91 Řád Eimeriida: čeleď Eimeriidae Rod: Eimeria+Isospora+Cyclospora čeleď Toxoplasmatidae čeleď Sarcocystidae

92 Eimerie kura domácího 9 druhů, vysoký rozmnožovací potenciál Jedna pozřená oocysta až 1 milion oocyst E.tenella-vysoce patogenní, tři merogoniální generace v epitelu a submukóze slepých střev.působí krvavý zánět slepých střev a úhyn. V ČR vakcína Livacox. Morfologie oocyst rodu Eimeria

93

94 Eimerie Eimerie králíků (Eimeria stedai) 13 druhů Parazitují v různých částech střev Příčinou hromadného hynutí králíčat po odstavu Eimerie prasat (E. debliecki) 11 druhů V epitelu tenkého, tlustého i slepého střeva Eimerie skotu (E. zuernii) V epitelu tenkého, tlustého i slepého střeva Zvláště patogenní

95 Jaterní kokcidióza-králík

96 Rod Cyclospora Cyclospora cayetanensis Lidská kokcidie Vyvíjí se uvnitř epitelových buněk tenkého střeva Oocysty vycházejí stolicí nevysporulované V teplých oblastech se špatnou hygienou hojná V mírném pásmu dovezeným ovocem a zeleninou kontaminovaným fekáliemi průjmy