Bp1252 Biochemie. #8 Metabolismus živin

Transkript

1 Bp1252 Biochemie #8 Metabolismus živin

2 Chemické reakce probíhající v organismu Katabolické reakce přeměna složitějších látek na jednoduché, jsou většinou exergonické. Anabolické reakce syntéza složitějších látek z jednoduchých, jsou většinou endergonické. 2

3 Uchovávání energie makroergické sloučeniny ATP (adenosin trifosfát): ATP ADP + P i 7,0 kcal/mol Podobně jako ATP někdy slouží i GTP (guanosin trifosfát). Acetylkoenzym A: hydrolýzou acetylové skupiny získáme 8,2 kcal/mol Koenzym A: zde se váže acetylová skupina 3

4 Redoxní děje NAD + (nikotinamid adenin dinukleotid) NAD + NADH NADP + (nikotinamid adenin dinukleotid fosfát) NADP + NADPH FAD (flavin adenin dinukleotid) FAD FADH 2 FMN (flavin mononukleotid) FMN FMNH 2 4

5 Nikotinamid adenin dinukleotid (NAD + ) 5

6 FMN (flavin mononukleotid) a FAD (flavin adenin dinukleotid) 6

7 FAD a FADH 2 7

8 Tři katabolické stupně 1. Hydrolýza makromolekulárních kondenzátů (hydrolázy) 2. Degradace štěpů (monosacharidů, mast. kyselin, glycerolu a aminokyselin) na acetylkoenzym A 3. Acetylkoenzym A vstupuje do citrátového cyklu, kde se produkují donory elektronů; ty pak končí v dýchacím řetězci. 8

9 Tři katabolické stupně 9

10 Metabolismus sacharidů Amylasa štěpí škrob na kratší molekuly (dextriny) a poté až na maltosu, glukosu Disacharidy pak štěpí disacharidasy Katabolický proces štěpení glukosy = glykolýza Glykolýza probíhá v cytosolu. 10

11 Glykolýza 11

12 Glykolýza 12

13 Glykolýza - bilance GLUKOSA + 2 NAD + + 2P i + 2 ADP 2 PYRUVÁT + 2 ATP + 2NADH + 2H H 2 O 13

14 Co s pyruvátem? 14

15 Anaerobní podmínky Laktát je dopravován do jater a přeměňován na pyruvát a pak na glukosu. Břemeno se tak přenáší na další orgány. 15

16 Glukoneogeneze Možnost syntézy glukosy z pyruvátu, laktátu, glycerolu a některých aminokyselin Průběh podobný jako u glykolýzy, 3 reakce je nutné obejít a probíhají jiným mechanismem: -fosfoenolpyruvát vzniká z pyruvátu přes oxalacetát -fruktosa-6-fosfát vzniká hydrolýzou z fruktosa- 1,6-bisfosfátu -glukosa vzniká hydrolýzou glukosa-6-fosfátu Na 1 mol glukosy z pyruvátu je třeba 12 mol ATP 16

17 Glukoneogeneze od pyruvátu k fosfoenolpyruvátu 17

18 Aerobní podmínky: od pyruvátu k acetylkoenzymu A Multienzymový komplex -thiaminpyrofosfát (viz vitamin B 1 thiamin) -kyselina lipoová -koenzym A -FAD -NAD + 18

19 Tvorba acetylkoenzymu A 19

20 Složitý proces, ve kterém je glukosa-6-fosfát přeměňován na ribulosa-6-fosfát. Během probíhajících reakcí se získává NADPH. Vznikající pentosa může být použita pro syntézu nukleotidů nebo je převedena zpět na hexosu. Pentosový cyklus 20

21 Glykogen jako zdroj glukosy Přebytečná glukosa se ukládá ve formě glykogenu Při štěpení glykogenu vzniká glukosa-1-fosfát; reakce se účastní anorganický fosfát, není spotřebováno ATP! Glukosa-1-fosfát pak přechází na glukosa-6- fosfát. 21

22 Metabolismus galaktosy Přeměňuje se na glukosa-6-fosfát Nezbytná přítomnost dvou enzymů Pokud nejsou přítomny, hromadí se galaktosa v krvi (galaktosemie) a moči (galaktosurie). 22

23 Metabolismus fruktosy 23

24 Metabolismus tuků Hydrolýza katalyzovaná lipasami Produkty: glycerol, mastné kyseliny, anorg. fosfát, cholin... Glycerol vstupuje do glykolýzy Mastné kyseliny se odbourávají β-oxidací v mitochondriích 24

25 L-Karnitin a jeho funkce OH N + COO - Mastná kyselina reaguje s HS-CoA za účasti ATP za vzniku Acyl-CoA Ten je v rovnováze s esterem mastné kyseliny s L-karnitinem; ester prochází mitochondriální membránou V mitochondrii se z esteru s L-karnitinem přenese acyl opět na koenzym A. 25

26 L-Karnitin a jeho funkce 26

27 β-oxidace 27

28 β-oxidace - bilance CH 3 (CH 2 CH 2 ) n COOH + ATP + (n+1) HS-CoA + n NAD + + n FAD + n H 2 O (n+1) CH 3 COS-CoA + AMP + PP i + n NADH + n FADH 2 + n H + 28

29 β-oxidace Mastné kyseliny s lichým počtem uhlíkových atomů Produktem je propionyl-coa, z něj vzniká karboxylací methylmalonyl-coa a následně sukcinyl-coa, jeho hydrolýzou pak vzniká sukcinát, který se odbourává v citrátovém cyklu. 29

30 β-oxidace Transformace propionylkoenzymu A na sukcinylkoenzym A 30

31 β-oxidace Nenasycené mastné kyseliny 31

32 Syntéza tuků Syntéza mastných kyselin Výchozí látkou je acetylkoenzym A K prodloužení o 2 uhlíkové atomy je třeba 2 molekul NADPH a 1 molekuly ATP. Nenasycené kyseliny se tvoří specifickými enzymy destaurasami a některé nenasycené mastné kys. jsou proto esenciální. Syntéza triacylglycerolů Z glycerol-3-fosfátu a acylkoenzymu A 32

33 Metabolismus bílkovin Štěpení na nižší peptidy a aminokyseliny Proteinasy (pepsin, trypsin) štěpí na peptidy Peptidasy pak štěpí získané peptidy až na volné aminokyseliny. 33

34 Metabolismus aminokyselin Transaminace Přenos aminoskupiny aminokyseliny na 2- oxokyselinu (většinou 2-oxoglutarát). Produktem je 2-oxokyselina a kyselina glutamová. Proces je katalyzován transaminasami obsahujícími pyridoxalfosfát jako prostetickou O skupinu (z vitaminu B 6 ) O - O HO O N Pyridoxalfosfát P O - 34

35 Ještě k reaktivitě karbonylových sloučenin: Schiffovy báze (iminy) O + H2 N H + N Benzaldehyd Propylamin Schiffova báze 35

36 Metabolismus aminokyselin Transaminace Pyridoxalfosfát vázaný na lysin 36

37 Metabolismus aminokyselin Transaminace 37

38 Metabolismus aminokyselin Transaminace Transaminací je možné i syntetizovat aminokyseliny z odpovídajích ketokyselin. Aminokyseliny, pro které neexistuje žádný vhodný prekurzor jsou esenciální aminokyseliny. 38

39 Metabolismus aminokyselin Deaminace Druhá možná cesta vedoucí k 2-oxokyselinám. R COO - NH 2 ox. R COO - NH H 2 O Enzym glutamátdehydrogenasa katalyzuje tuto reakci: Glutamát + NAD + + H 2 O 2-oxoglutarát + NADH + H + + NH 4 + Enzym je přítomen v mitochondriích a má velký význam. Transaminací vznikající glutamát se pomocí tohoto enzymu převádí zpět na 2- oxoglutarát. R COO - + O NH 3 39

40 Metabolismus aminokyselin 40

41 Ornithinový (močovinový) cyklus Slouží k odbourání toxického amoniaku Endergonický proces, spotřebuje 3 mol ATP na 1 mol močoviny 41

42 Ornithinový (močovinový) cyklus MITOCHONDRIE karbamoylfosfát citrullin ornithin arginin kys. asparagová močovina argininosukcinát fumarát 42

43 Metabolismus aminokyseliny osud Aminokyseliny glykogenní uhlíkaté kostry Tvoří se z nich sukcinát, fumarát a oxaloacetát nebo pyruvát. Z nich se můžou tvořit sacharidy. ketogenní Tvoří se z nich kyselina acetoctová, její redukcí vzniká 3-hydroxybutyrát, dekarboxylací pak aceton. OH O O O -CO 2 O O - O - 43

44 Ketonické látky Acetoacetát, 3-hydroxybutyrát a aceton označujeme jako ketonické látky. Acetoacetát vzniká zejména při odbourávání tuků, to je zvýšeno při hladovění a diabetes mellitus, kdy se odbourává velké množství tuku a vzniká přebytek acetylkoenzymu A. Dvě molekuly acetyl-coa se spojují za vzniku acetoacetyl-coa a z něj pak acetoacetát. 44

45 Citrátový cyklus Probíhá v matrix mitochondrií Vstupuje do něj acetylkoenzym A Z něj vznikají 2 molekuly CO 2 Produkují se redukované formy koenzymů NADH a FADH 2 45

46 Citrátový cyklus 46

47 Citrátový cyklus - bilance Acetylkoenzym A je oxidován na 2 molekuly CO 2 ; dále vznikají 3 molekuly NADH, 1 molekula FADH 2 a 1 molekula GTP. NADH a FADH 2 pak vsupují do dýchacího řetězce. Zde se z nich vytvoří oxidativní fosforylací 12 molekul ATP. 47

48 Dýchací řetězec Řetězec reakcí při nichž jsou elektrony ze substrátu přeneseny až na kyslík, ze kterého vzniká voda. Těmito substráty jsou NADH a FADH 2. Kofaktory oxidoredukčních enzymů dýchacího řetězce jsou ve vnitřní mitochondriální membráně. 48

49 Mitochondrie Fotografie pořízená elektronovým mikroskopem: 49

50 50

51 Dýchací řetězec Skládá se ze čtyř havních multiproteinových komplexů: Komplex I až IV (viz následující snímek). Navazuje komplex V ATP synthasa. Ta využívá protonový gradient k syntéze ATP. 51

52 Dýchací řetězec I. NADH:ubichinon-oxidoreduktasa (flavoprotein, nehemové železo, ubichinon) II. Sukcinát:ubichinon-oxidoreduktasa (flavoprotein sukcinátdehydrogenasa, nehemové železo, cytochrom b) G Glycerol-3-fosfát dehydrogenasa F AcylCoA dehydrogenasa III. ubihydrochinon:cytochrom c-oxidoreduktasa (cytochrom b a c 1, nehemové železo) IV. Cytochrom c: O 2 -oxidoreduktasa (=cytochromoxidasa) (cytochrom a-a 3, protein obsahující měď) Oxidativní fosforylace UCP (uncoupling protein) význam pro tvorbu tepla 52

53 Dýchací řetězec - flavoproteiny Obsahují flavinmononukleotid (FMN) nebo flavinadenin dinukleotid (FAD) jako prostetickou skupinu nebo koenzym. Konkrétní flavoproteiny z dýchacího řetězce: NADH dehydrogenasa Přebírá vodík od NADH a předává jej ubichinonu. Sukcinátdehydrogenasa Flavoprotein, působí přímo bez nikotinamidových koenzymů. Enzym tvoří důležité spojení citrátového cyklu a dýchacího řetězce. 53

54 Dýchací řetězec koenzym Q10 (ubichinon) H 3 CO O red. H 3 CO OH H 3 CO O R ox. H 3 CO OH R ubichinon ubihydrochinon Mezi flavoproteiny a cytochromy je jako přenašeč elektronů vřazen ubichinon. 54

55 Dýchací řetězec - cytochromy Hemoproteiny přenášející elektrony v redoxních řetězcích Podle struktury a UV spekter rozlišujeme tři skupiny: Cytochrom b Úzce spojen s flavoproteiny a chinony Cytochrom c Cytochromy a a a 3 (cytochromoxidasa) Obsahuje atom mědi, koncová oxidasa dýchacího řetězce, reaguje s kyslíkem. 55

56 Železo vázané v hemu cytochromu c a a V průběhu přenosu elektronů se železo redukuje z Fe III na Fe II a zpět. Srovnejte si s železem v hemoglobinu a myoglobinu!!!! 56

57 Inhibitory dýchacího řetězce Ionty CN -, N 3 - a oxid uhelnatý jsou inhibitory komplexu IV CN - a CO se současně vážou na hemoglobin Působěním těchto látek se tak zastavuje syntéza ATP případně i transport kyslíku hemoglobinem 57

58 Oxidativní fosforylace Zpětný tok H + je využit ATP-synthasou ke tvorbě ATP ADP + P i ATP 58

59 Rozpojovače oxidativní fosforylace Porušují ph gradient nezbytný pro proces oxidativní fosforylace Typicky jde o hydrofobní sloučeniny, které jsou slabými kyselinami nebo bázemi Př. 2,4-dinitrofenol, p-kresol OH NO 2 OH NO 2 CH 3 Jsou to jedy. 59