European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing

European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing Rutinní a rozšířená kontrola kvality doporučená EUCAST Verze 6., platná od 0. 03. 06 Tento dokument se doporučuje citovat takto: "The European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing. Routine and extended internal quality control as recommended by EUCAST Version 6., 06. http://www.eucast.org." Obecné Strana Poznámky Změny Rutinní kontrola kvality Strana Escherichia coli ATCC 59 4 Pseudomonas aeruginosa ATCC 7853 6 Staphylococcus aureus ATCC 93 7 Enterococcus faecalis ATCC 9 9 Streptococcus pneumoniae ATCC 4969 0 Haemophilus influenzae ATCC 49766 Campylobacter jejuni ATCC 33560 3 Kontrola složky inhibitoru v disku s kombinací β-laktam-inhibitor β -laktamázy 4 Rozšířená kontrola kvality pro detekci mechanizmů rezistence Strana diskovou difuzní metodou Produkce ESBL u Enterobacteriaceae 6 Rezistence Staphylococcus aureus k methicilinu 6 Rezistence enterokoků ke glykopeptidům zprostředkovaná Van-B 6 Vysoký stupeň rezistence enterokoků k aminoglykosidům 6 Snížená citlivost Haemophilus influenzae k b-laktamům způsobená mutacemi 7 PBP

Poznámky. V tabulkách pro kontrolu kvality (QC) EUCAST jsou seznamy rozmezí a cílových hodnot (targets). Doporučená rozmezí vyplývají z náhodně distribuovaných hodnot jednotlivých MIC antibiotik a průměrů inhibičních zón, které jsou získány opakovaným testováním kontrolních kmenů. Je-li počet testů 0, pak hodnota, která se v daném souboru dat vyskytuje nejčastěji (mode), je cílová hodnota (target) MIC a střední průměr zón (mean) by měl být blízko cílové hodnoty.. Standardní dokumenty ISO, viz http://www.eucast.org/documents/external_documents/. 3. Při rutinní QC se kmeny pro QC EUCAST používají pro monitorování prováděných testů. Kontrolní testy by měly být nastaveny a kontrolovány denně alespoň u antibiotik, která jsou součástí běžných sestav. Pro analýzu výsledků testů QC, viz EUCAST Disk Diffusion, česky http://www.szu.cz/diskova-difuzni-metoda-eucast. 4. Ke kontrole složky inhibitoru v discích obsahujících kombinaci β-laktamů s inhibitory β-laktamáz se doporučuje používat specifické kmeny produkující β-laktamázu. Tento postup by měl být součástí rutinní QC. Aktivní složka se kontroluje standardními kmeny pro QC. 5. Kontrola kvality EUCAST s kmeny pro rozšířenou QC jsou určeny k doplnění rutinní kontroly kvality kmeny EUCAST. Tyto kmeny jsou vhodné pro detekci specifických mechanismů rezistence (ESBL, MRSA, VRE, HLGR a mutací PBP) a slouží ke kontrole správné kategorizace C, I a R při rutinním testování citlivosti. Rozšířená QC by měla být prováděna při jakékoli změně v systému testů citlivosti (s každou novou řadu disků nebo půd) anebo měsíčně. Změny proti předchozím verzím Verze 6.. 3. 06 ATCC 59 ATCC 7853 Kontrolní kmeny pro detekci mechanizmů rezistence Změny Buňky obsahující změnu nebo doplnění proti tabulkám pro rutinní kontrolu kvality (QC) v. 6.0 jsou označeny modře. Aktualizované rozmezí QC: Meropenem (průměr zóny). Rozmezí je aktualizováno ve spolupráci s CLSI. Aktualizované rozmezí QC: Cefepim (průměr zóny). Rozmezí je aktualizováno ve spolupráci s CLSI. Přidáni rozmezí QC: Streptomycin u E. faecalis ATCC 599.

Verze 6.0.. 06 Obecné ATCC 59 ATCC 358 ATCC 7853 ATCC 93 ATCC 9 ATCC 4969 Změny Buňky obsahující změnu nebo doplnění proti tabulkám pro rutinní kontrolu kvality (QC) v. 5.0 jsou označeny žlutě. Zřetelnější rozlišení tabulek pro rutinní a rozšířenou QC. Nový formát pro rozšířené tabulky QC. Cílové hodnoty (targety) u některých průměrů zón jsou vyjádřeny dvěma hodnotami, např. při rozmezí 9-6 mm je target -3 mm (nikoli jako dříve jen 3 mm). Přidané rozmezí QC: Ceftobiprol (průměr zóny) a ceftolozantazobaktam (průměr zóny). Nový komentář:komentář 9. Revidované komentáře:komentář 0. Tabulka přesunuta do "Kontrola složky inhibitoru v kombinaci disků s inhibitorem". Přidané rozmezí QC: Ceftolozan-tazobaktam (MIC a průměr zóny). Nové komentáře:komentáře 5 a 7. Revidované komentáře:komentář 6. Přidané rozmezí QC: Dalbavancin, oritavancin a tedizolid (MIC). Ceftobiprol (průměr zóny). Revidované komentáře:komentáře 5-7. Přidané rozmezí QC: Streptomycin (průměr zóny). Nové komentáře:komentáře 5-6. Přidané rozmezí QC: Dalbavancin, oritavancin a tedizolid (MIC). Revidované rozmezí QC: Ceftarolin a ceftobiprol (průměr zóny změněn z IP na "-").Trimethoprim-sulfamethoxazol (průměr zóny). Revidované komentáře: Komentáře 5-7. NCTC 8468 Od 06 vyřazen. Pro rutinní kontrolu kvality se doporučuje H. influenzae ATCC 49766. ATCC 49766 Přidané rozmezí QC: Ceftibuten, ceftriaxon, ciprofloxacin, levofloxacin, moxifloxacin and ofloxacin (průměr zóny). Revidované rozmezí QC: Amoxicilin-klavulanová kyselina (průměr zóny). Nový komentář:komentář 4. Kontrola složky inhibitoru v disku obsahujícím kombinaci s inhibitorem Kmeny pro kontrolu kvality pro detekci mechanizmů rezistence Nová tabulka. Přidány kmeny: K. pneumoniae ATCC 700603 a S. aureus ATCC 93. Přidané rozmezí QC: Ceftolozan-tazobaktam (MIC a průměr zóny). Nový formát. Přidané rozmezí QC: Streptomycin (target pro citlivost) u E. faecalis ATCC 59.

Rutinní kontrola kvality 3

Escherichia coli ATCC 59 (CNCTC 576, CCM 3954) (NCTC 4, CIP 76.4, DSM 03, CCUG 760, CECT 434) Disková difuzní metoda: Mueller-Hinton agar, McFarland 0,5, normální atmosféra, 35±ºC, 8±h. Průměr inhibiční zóny od okrajů nevykazujících růst se měří v odraženém světle na spodní straně misky, umístěné na tmavém pozadí. MIC (mg/l) Průměr inhibiční zóny Target Rozmezí (µg) Target Rozmezí 3 Amikacin - 0.5-4 30-3 9-6 Amoxicilin 4-8 - - - Amoxicilin-klavulanová kys. 4,5 4-8 0-0 8-4 6 Ampicilin 4-8 0 8-9 5-6 Ampicilin-sulbactam 5,7-4 0-0 - 9-4 6 Aztreonam 0.5 0.06-0.5 30 3 8-36 Cefadroxil - - 30 7 4-0 Cefalexin 8 4-6 30 8 5- Cefepim 0.03-0.06 0.06-0.5 30 34 3-37 Cefixim 0.5 0.5-5 5 3-7 Cefotaxim 0.06 0.03-0.5 5 8 5-3 Cefoxitin 4-8 30 6 3-9 Cefpodoxim 0.5 0.5-0 5-6 3-8 Ceftarolin 0.06 0.03-0.5 3 5 7 4-30 Ceftazidim 0.5-0.5 0.06-0.5 0 6 3-9 Ceftibuten 0.5 0.5-0.5 30 3 7-35 Ceftobiprol 0.06 0.03-0.5 3 5 8 5-3 Ceftolozane-tazobaktam 8,9 0.5 0.5-0.5 3 30-0 8 4-3 Ceftriaxon 0.06 0.03-0.5 30 3 9-35 Cefuroxim 4-8 30 3 0-6 Chloramfenikol 4-8 30 4-7 Ciprofloxacin 0.008 0.004-0.06 5 35 30-40 Kolistin 0.5-0.5- - - - Doripenem 0.03 0.06-0.06 0 3 7-35 Ertapenem 0.008 0.004-0.06 0 3-33 9-36 Fosfomycin 0 0.5-3 - - - Gentamicin 0.5 0.5-0 -3 9-6 Imipenem 0.5 0.06-0.5 0 9 6-3 Levofloxacin 0.06-0.03 0.008-0.06 5 33 9-37 Mecilinam 0.06-0.5 0.03-0.5 0 7 4-30 Meropenem 0.06-0.03 0.008-0.06 0 3-3 8-35 Moxifloxacin 0.06-0.03 0.008-0.06 5 3-3 8-35 Nalidixová kys. -4 30 5-8 Netilmicin - 0.5-0 8-4 Nitrofurantoin 8 4-6 00 0 7-3 Norfloxacin 0.06 0.03-0.5 0 3 8-35 Ofloxacin 0.03-0.06 0.06-0.5 5 3-3 9-33 Pefloxacin - - 5 9 6-3 Piperacilin -4 30 4-7 Piperacilin-tazobaktam 5,8-4 30-6 4-7 Tikarcilin 8 4-6 75 7 4-30 Tikarcilin-klavulanová kys. 4,5 8 4-6 75-0 7 4-30 Tigecyklin 0.5 0.03-0.5 5 3-4 0-7 Tobramycin 0.5 0.5-0 8-6 Trimetoprim 0.5-5 4-5 -8 Trimetoprim-sulfametoxazol 0.5 -.5-3.75 6 3-9 4

Escherichia coli ATCC 59 (CNCTC 576, CCM 3954) (NCTC 4, CIP 76.4, DSM 03, CCUG 760, CECT 434) Kalkulace EUCAST. International Standards Organisation, ISO 0776-: 006 (s aktualizací podle posledního dokumentu CLSI), s výjimkou rozmezí ustanovených EUCAST, vyznačených kurzívou/tučně. 3 Clinical and Laboratory Standards Institute, M00-S6, 06, s výjimkou rozmezí ustanovených EUCAST, vyznačených kurzívou/tučně. Všechna rozmezí byla validována EUCAST. 4 Pro vyšetření MIC je použita fixní koncentrace mg/l klavulanové kyseliny. 5 Ke kontrole inhibitoru se používá E. coli ATCC 358 (producent TEM- β-laktamázy). (Viz Rutinní kontrola kvality složky inhibitoru v disku obsahujícím kombinaci s inhibitorem). 6 Růst ve formě úzké vnitřní zóny na některých šaržích Mueller-Hinton agaru se ignoruje. 7 Pro vyšetření MIC je použita fixní koncentrace 4 mg/l sulbaktamu. 8 Pro vyšetření MIC je použita fixní koncentrace 4 mg/l tazobaktamu. 9 Ke kontrole inhibitoru lze použít E. coli ATCC 358 nebo K. pneumoniae ATCC 700603 (viz Rutinní kontrola kvality složky inhibitoru v disku obsahujícím kombinaci s inhibitorem). 0 Pro vyšetření MIC fosfomycinu musí půda obsahovat glukózo-6-fosfát (5 mg/l v půdě pro agarovou i bujónovou diluční metodu). U komerčních systémů je nutno dodržovat pokyny výrobce. Pro vyšetření MIC tigecyklinu bujónovou mikrodilucí musí být použita čerstvá půda v den přípravy. Trimetoprim:sulfametoxazol v poměru :9. Hodnoty MIC jsou vyjádřeny jako koncentrace trimetoprimu. 5

Pseudomonas aeruginosa ATCC 7853 (CNCTC 548, CCM 3955) (NCTC 903, CIP 76.0, DSM 7, CCUG 769, CECT 08) Disková difuzní metoda: Mueller-Hinton agar, McFarland 0,5, normální atmosféra, 35±ºC, 8±h. Průměr inhibiční zóny od okrajů nevykazujících růst se měří v odraženém světle na spodní straně misky, umístěné na tmavém pozadí. MIC (mg/l) Průměr inhibiční zóny Target Rozmezí (µg) Target Rozmezí 3 Amikacin -4 30 8-6 Aztreonam 4-8 30 6 3-9 Cefepim - 0.5-4 30 8 5-3 Ceftazidim -4 0 4-7 Ceftolozan-tazobaktam 4,5 0.5 0.5-3 30-0 8 5-3 Ciprofloxacin 0.5 0.5-5 9 5-33 Kolistin - 0.5-4 - - - Doripenem 0.5 0.5-0.5 0 3-3 8-35 Fosfomycin 6 4-8 3 - - - Gentamicin 0.5-0 0 7-3 Imipenem -4 0 4 0-8 Levofloxacin - 0.5-4 5-3 9-6 Meropenem 0.5 0.5-0 30 7-33 Netilmicin 0.5-8 0 8 5- Piperacilin -4-8 - - - Piperacilin-tazobaktam 4,7-4 -8 30-6 6 3-9 Tikarcilin 6 8-3 - - - Tikarcilin-klavulanová kys. 7,8 6 8-3 75-0 4 0-8 Tobramycin 0.5 0.5-0 3 0-6 Kalkulace EUCAST. International Standards Organisation, ISO 0776-: 006 (s aktualizací podle posledního dokumentu CLSI), s výjimkou rozmezí ustanovených EUCAST, vyznačených kurzívou/tučně. 3 Clinical and Laboratory Standards Institute, M00-S6, 06, s výjimkou rozmezí ustanovených EUCAST, vyznačených kurzívou/tučně. Všechna rozmezí byla validována EUCAST. 4 Pro vyšetření MIC je použita fixní koncentrace 4 mg/l tazobaktamu. 5 Ke kontrole inhibitoru lze použít E. coli ATCC 358 nebo K. pneumoniae ATCC 700603 (viz Rutinní kontrola kvality složky inhibitoru v disku obsahujícím kombinaci s inhibitorem). 6 Pro vyšetření MIC fosfomycinu musí půda obsahovat glukózo-6-fosfát (5 mg/l v půdě pro agarovou i bujónovou diluční metodu). U komerčních systémů je nutno dodržovat pokyny výrobce. 7 Ke kontrole inhibitoru se používá E. coli ATCC 358 (producent TEM- β-laktamázy). (Viz Rutinní kontrola kvality složky inhibitoru v disku obsahujícím kombinaci s inhibitorem). 8 Pro vyšetření MIC je použita fixní koncentrace mg/l klavulanové kyseliny. 6

Staphylococcus aureus ATCC 93 (CNCTC 5480, CCM 43) (NCTC 973, CIP 0349, DSM 569, CCUG 595, CECT 794) Slabý producent β-laktamázy Disková difuzní metoda: Mueller-Hinton agar, McFarland 0,5, normální atmosféra, 35±ºC, 8±h. Průměr inhibiční zóny od okrajů nevykazujících růst se měří v odraženém světle na spodní straně misky, umístěné na tmavém pozadí. MIC (mg/l) Průměr inhibiční zóny Target Rozmezí (µg) Target Rozmezí 3 Amikacin -4 30 8-4 Ampicilin - - 8 5- Azitromycin 0.5- - - - Benzylpenicilin 0.5-0.5- J 5-8 Cefoxitin -4 30 7 4-30 Ceftarolin 0.5 0.5-0.5 4 5 7 4-30 Ceftobiprol 0.5-0.5 0.5-4 5 5-8 Chloramfenikol 4-8 -6 30 4 0-8 Ciprofloxacin 0.5 0.5-0.5 5 4-7 Klaritromycin 0.5 0.5-0.5 - - - Klindamycin 0.5 0.06-0.5 6 3-9 Dalbavancin 5 0.06 0.03-0.5 4 - - - Daptomycin 6 0.5-0.5 0.5- - - - Doxycyklin 0.5 0.5-0.5 - - - Erytromycin 0.5 0.5-5 6 3-9 Fosfomycin 7-0.5-4 4 - - - Fusidová kys. 0.5 0.06-0.5 0 9 6-3 Gentamicin 0.5-0.5 0.5-0 9-5 Levofloxacin 0.5-0.5 0.06-0.5 5 6 3-9 Linezolid -4 0 4-7 Minocyklin 0.5-0.5 0.06-0.5 30 6 3-9 Moxifloxacin 0.03-0.06 0.06-0.5 5 8 5-3 Mupirocin 0.5 0.06-0.5 00 34 3-37 Netilmicin 0.5-0 3 0-6 Nitrofurantoin 6 8-3 00 0 7-3 Norfloxacin 0.5-0 8-4 Ofloxacin 0.5-0.5 0.5-5 4-7 Oritavancin 5 0.03-0.06 0.06-0.5 4 - - - Quinupristin-dalfopristin 0.5 0.5-5 4-7 Rifampicin 0.008 0.004-0.06 5 33 30-36 Tedizolid 0.5 0.5-4 - - - Teikoplanin 0.5 0.5- - - - Telavancin 5 0.06 0.03-0.5 - - - Tetracyklin 0.5-0.5 0.5-30 7 3-3 Tigecyklin 8 0.06-0.5 0.03-0.5 5 9-5 Tobramycin 0.5-0.5 0.5-0 3 0-6 Trimetoprim -4 5 5-8 Trimetoprim-sulfametoxazol 9 0.5 -.5-3.75 9 6-3 Vankomycin 0.5- - - - 7

Staphylococcus aureus ATCC 93* (CNCTC 5480, CCM 43) (NCTC 973, CIP 0349, DSM 569, CCUG 595, CECT 794) * Slabý producent β-laktamázy Kalkulace EUCAST. International Standards Organisation, ISO 0776-: 006 (s aktualizací podle posledního dokumentu CLSI). 3 Stanoveno a validováno EUCAST. 4 Clinical and Laboratory Standards Institute, M00-S6, 06, a validace EUCAST. 5 Pro vyšetření MIC musí půda obsahovat polysorbát-80 (0,00 % pro bujónovou diluci, agarová diluce není validována). U komerčních systémů je nutno dodržovat pokyny výrobce. 6 Pro vyšetření MIC daptomycinu musí půda obsahovat Ca + (50 mg/l pro bujónovou diluci, agarová diluce není validována). U komerčních systémů je nutno dodržovat pokyny výrobce. 7 Pro vyšetření MIC fosfomycinu musí půda obsahovat glukózo-6-fosfát (5 mg/l v půdě pro agarovou i bujónovou diluční metodu). U komerčních systémů je nutno dodržovat pokyny výrobce. 8 Pro vyšetření MIC tigecyklinu bujónovou mikrodilucí musí být použita čerstvá půda v den přípravy. 9 Trimetoprim:sulfametoxazol v poměru :9. Hodnoty MIC jsou vyjádřeny jako koncentrace trimetoprimu. 8

Enterococcus faecalis ATCC 9 (CNCTC 5483, CCM 44) (NCTC 697, CIP 034, DSM 570, CCUG 9997, CECT 795) Disková difuzní metoda: Mueller-Hinton agar, McFarland 0,5, normální atmosféra, 35±ºC, 8±h. Průměr inhibiční zóny od okrajů nevykazujících růst se měří v odraženém světle na spodní straně misky,umístěné na tmavém pozadí. MIC (mg/l) Průměr inhibiční zóny Target Rozmezí (µg) Target Rozmezí 3 Ampicilin 0.5-8 5- Ciprofloxacin 0.5-0.5-5 9-5 Gentamicin 8 4-6 30 4 5-8 Imipenem 0.5-0 7 4-30 Levofloxacin 0.5-0.5-5 9-5 Linezolid -4 0 9-5 Nitrofurantoin 8 4-6 00 8-4 Norfloxacin 4-8 0 9 6- Quinupristin-dalfopristin 4-8 5 4-7 Streptomycin Poznámka 5 Poznámka 5 300 6 7 4-0 8 Teikoplanin 0.5 0.5-30 8 5- Tigecyklin 7 0.06 0.03-0.5 5 3 0-6 Trimetoprim 0.5 0.5-0.5 6 5 8 4-3 Trimetoprim-sulfametoxazol 9 0.5 -.5-3.75 30 6-34 Vankomycin -4 5 3 0-6 Kalkulace EUCAST. International Standards Organisation, ISO 0776-: 006 (s aktualizací podle posledního dokumentu CLSI). 3 Stanoveno a validováno EUCAST. 4 Disk pro skrínink vysokého stupně rezistence enterokoků k aminoglykosidům. 5 V současné době není k dispozici rozmezí pro E. faecalis 9 a disk s obsahem 300 µg streptomycinu. 6 Disk pro skrínink vysokého stupně rezistence enterokoků k streptomycinu. 7 Pro vyšetření MIC tigecyklinu bujónovou mikrodilucí musí být použita čerstvá půda v den přípravy. 8 Clinical and Laboratory Standards Institute, M00-S6, 06. 9 Trimetoprim:sulfametoxazol v poměru :9. Hodnoty MIC jsou vyjádřeny jako koncentrace trimetoprimu. 9

Streptococcus pneumoniae ATCC 4969* (CNCTC 5043, CCM 450) (NCTC 977, CIP 04340, DSM 967, CCUG 33638) Kmen se sníženou citlivostí k benzylpenicilinu * Okraje zón S. pneumoniae na MH-F jsou často lemovány α-hemolýzou. Hodnotí se inhibice růstu, nikoli inhibice hemolýzy. Odlišení růstu od hemolýzy usnadní naklonění plotny. Růst obvykle zasahuje celou oblast hemolýzy, na některých půdách MH-F je však pozorována další hemolýza bez růstu. Disková difuzní metoda: Mueller-Hinton agar + 5 % koňské krve a 0 mg/l β-nad, McFarland 0,5, 5 % CO, 35±ºC, 8±h. V misce s odkrytým víčkem se při pohledu zpředu v odraženém světle změří průměr mezi okraji inhibičních zón nevykazujícími žádný růst. MIC Průměr inhibiční zóny (mg/l) (m (µg Target Rozmezí ) Target Rozmezí 3 Amoxicilin 0.06 0.03-0.5 - - - Ampicilin 0.5 0.06-0.5 8 5-3 Azitromycin 0.5 0.06-0.5 - - - Benzylpenicilin 0.5 0.5- J 9 6- Cefaclor -4 30 8 5-3 Cefepim 0.06-0.5 0.03-0.5 30 34 3-37 Cefotaxim 0.06 0.03-0.5 5 3 8-34 Cefpodoxim 0.06 0.03-0.5 0 3 9-35 Ceftarolin 0.06 0.008-0.03 4 - - - Ceftobiprol 0.06 0.004-0.03 4 - - - Ceftriaxon 0.06 0.03-0.5 30 35 3-38 Cefuroxim 0.5 0.5-30 3 8-34 Chloramfenikol 4-8 30 7 4-30 Ciprofloxacin - - 5 5-8 Klaritromycin 0.06 0.03-0.5 - - - Klindamycin 0.06 0.03-0.5 5-8 Dalbavancin 5 0.06 0.008-0.03 4 - - - Daptomycin 6 0.5-0.5 0.06-0.5 - - - Doripenem 0.06 0.03-0.5 0 34 3-37 Doxycyklin 0.03-0.06 0.06-0.5 - - - Ertapenem 0.06-0.5 0.03-0.5 0 3 8-34 Erytromycin 0.06 0.03-0.5 5 9 6-3 Imipenem 0.06 0.03-0.5 0 38 34-4 Levofloxacin 0.5-5 4-7 Linezolid 0.5-0.5-0 6 3-9 Meropenem 0.5 0.06-0.5 0 34 30-38 Minocyklin - - 30 8 5-3 Moxifloxacin 0.5 0.06-0.5 5 7 4-30 Nitrofurantoin 8 4-6 00 8 5-3 Norfloxacin 4-8 0 8-4 Ofloxacin -4 5 8-4 Oritavancin 5 0.00 0.00-0.004 4 - - - Oxacilin 7 - - 8-4 6 Rifampicin 0.03 0.06-0.06 5 9 6-3 Tedizolid 0.5 0.5-0.5 4 - - - Teikoplanin - - 30 8-4 Telithromycin 0.008-0.06 0.004-0.03 5 30 7-33 Tetracyklin 0.5-0.5 0.06-0.5 30 3 8-34 Tigecyklin 8 0.03-0.06 0.06-0.5 5 7 4-30 Trimetoprim-sulfametoxazol 9 0.5-0.5 0.5-.5-3.75 8-6 Vankomycin 0.5 0.5-0.5 5 0 7-3 0

Streptococcus pneumoniae ATCC 4969* (CNCTC 5043, CCM 450) (NCTC 977, CIP 04340, DSM 967, CCUG 33638) Kmen se sníženou citlivostí k benzylpenicilinu Kalkulace EUCAST. International Standards Organisation, ISO 0776-: 006 (s aktualizací podle posledního dokumentu CLSI). 3 Stanoveno a validováno EUCAST. 4 Clinical and Laboratory Standards Institute, M00-S6, 06, a validace EUCAST. 5 Pro vyšetření MIC musí půda obsahovat polysorbát-80 (0,00 % pro bujónovou diluci, agarová diluce není validována). U komerčních systémů je nutno dodržovat pokyny výrobce. 6 Pro vyšetření MIC daptomycinu musí půda obsahovat Ca + (50 mg/l pro bujónovou diluci, agarová diluce není validována). U komerčních systémů je nutno dodržovat pokyny výrobce. 7 S. aureus ATCC 93 lze použít pro kontrolu kvality disku s µg oxacilinu, target mm a rozmezí 9-5 mm (podle.metodologie diskové difuzní metody pro S. aureus). 8 Pro vyšetření MIC tigecyklinu bujónovou mikrodilucí musí být použita čerstvá půda v den přípravy. 9 Trimetoprim:sulfametoxazol v poměru :9. Hodnoty MIC jsou vyjádřeny jako koncentrace trimetoprimu.

Haemophilus influenzae ATCC 49766 (CNCTC 505, CCM 4457) (NCTC 975, CIP 03570, DSM 970, CCUG 9539) Disková difuzní metoda: Mueller-Hinton agar + 5 % koňské krve a 0 mg/l β-nad, McFarland 0,5, 5% CO, 35±ºC, 8±h. V misce s odkrytým víčkem se při pohledu zpředu v odraženém světle změří průměr mezi okraji inhibiční zóny nevykazujícími žádný růst. MIC (mg/l) Průměr inhibiční zóny Target Rozmezí (µg) Target Rozmezí Amoxicilin-klavulanová kys 3,4 0.5 0.5-0.5-0 7-3 Amoxicilin 0.5 0.5-0.5 - - - Ampicilin 0.5 0.06-0.5 9-5 Ampicilin-sulbactam 5 0.5 0.06-0.5 - - - Azitromycin 0.5- - - - Benzylpenicilin - - J 8 5- Cefepim 0.06 0.03-0.5 30 33 30-36 Cefixim 0.03 0.06-0.06 5 3 9-35 Cefotaxim 0.008 0.004-0.06 5 33 9-37 Cefpodoxim 0.06 0.03-0.5 0 33 30-36 Ceftarolin 0.008 0.004-0.06 5 - - Ceftibuten 0.03 0.06-0.06 30 34 3-37 Ceftriaxon 0.004 0.00-0.008 30 38 34-4 Cefuroxim 0.5 0.5-6 30 30 6-34 Chloramfenikol 0.5 0.5-30 34 3-37 Ciprofloxacin 0.008 0.004-0.06 5 36 3-40 Klaritromycin 8 4-6 - - - Doripenem 0.5 0.06-0.5 6 0 9 6-3 Doxycyline 0.5 0.5- - - - Ertapenem 0.03 0.06-0.06 6 0 30 7-33 Erytromycin 4-8 5 3 0-6 Imipenem 0.5 0.5-6 0 7 4-30 Levofloxacin 0.06 0.008-0.03 5 35 3-39 Meropenem 0.06 0.03-0.5 5 0 3 7-35 Minocyklin 0.5 0.5-0.5 30 9 6-3 Moxifloxacin 0.06 0.008-0.03 5 33 30-36 Nalidixová kys. - - 30 30 7-33 Ofloxacin 0.03 0.06-0.06 5 34 3-37 Rifampicin 0.5 0.5-5 4-7 Roxithromycin 8 4-6 - - - Telithromycin -4 5 7 4-0 Tetracyklin 0.5 0.5-30 3 8-34 Trimetoprim-sulfametoxazol 7 0.03 0.06-0.06.5-3.75 3 7-35 Kalkulace EUCAST. Stanoveno a validováno EUCAST. 3 Pro vyšetření MIC je použita fixní koncentrace mg/l klavulanové kys. 4 Ke kontrole složky inhibitoru je použit S. aureus ATCC 93 (producent β-laktamázy). (viz Rutinní kontrola kvality složky inhibitoru v disku obsahujícím kombinaci s inhibitorem). 5 Pro vyšetření MIC je použita fixní koncentrace 4 mg/l sulbaktamu. 6 Clinical and Laboratory Standards Institute, M00-S6, 06, a validace EUCAST. 7 Trimetoprim:sulfametoxazol v poměru :9. Hodnoty MIC jsou vyjádřeny jako koncentrace trimetoprimu.

Campylobacter jejuni ATCC 33560 (CNCTC 7365, CCM 64) (NCTC 35, CIP 70, DSM 4688, CCUG 84) Disková difuzní metoda: Mueller-Hinton agar + 5 % koňské krve a 0 mg/l β-nad, McFarland 0,5, mikroaerofilní prostředí, 4±ºC, 4h. V misce s odkrytým víčkem se při pohledu zpředu v odraženém světle změří průměr mezi okraji inhibiční zóny nevykazujícími žádný růst. K potlačení plazivých kolonií by se před inokulací měly plotny MH-F sušit (přes noc při 0-5 C, nebo s odkrytým víčkem 5 min. při 35 C). Obsah Průměry inhibičních zón MIC (mg/l) disku target rozmezí (µg) target rozmezí Ciprofloxacin IP IP 5 38 34-4 Erytromycin IP IP 5 3 7-35 Tetracyklin IP IP 30 34 30-38 Kalkulace EUCAST. Ustanoveno a validováno EUCAST. IP = V přípravě. 3

Kontrola složky inhibitoru v disku s kombinací β-laktam-inhibitor β-laktamázy Disková difuzní metoda: Mueller-Hinton agar, McFarland 0,5, normální atmosféra, 35±ºC, 8±h. Průměr inhibiční zóny od okrajů nevykazujících růst se měří v odraženém světle na spodní straně misky, umístěné na tmavém pozadí. Escherichia coli ATCC 358 (CNCTC 53, CCM 45) (NCTC 954, CIP 08, DSM 593, CCUG 30600, CECT 943) Producent TEM- β-laktamázy (ne-esbl), používaný ke kontrole kvality složky inhibitoru v disku obsahujícím kombinaci penicilinu s inhibitorem. MIC Průměr inhibiční zóny (mg/l) (µg) Target Rozmezí Target Rozmezí Amoxicilin-klavulanová kys. 3 8-6 4-3 0-0 9-0 7-4 Ampicilin-sulbaktam 5 3-64 6-8 0-0 6 3-9 4 Ceftolozan-tazobaktam 6,7 0.5 0.06-0.5 30-0 8 5-3 Piperacilin-tazobaktam 6 0.5-30-6 4-7 Tikarcilin-klavulanová kys. 3 6 8-3 75-0 3-5 Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 (CNCTC 7439, CCM 4985) (NCTC 3368, CCUG 454, CECT 7787) Producent ESBL SHV-8 MIC (mg/l) Průměr inhibiční zóny (µg) Target Rozmezí Target Rozmezí Ceftolozan-tazobaktam 6,7 0.5-30-0 7-5 Staphylococcus aureus ATCC 93 (CNCTC 5480, CCM 43) (NCTC 973, CIP 0349, DSM 569, CCUG 595, CECT 794) Slabý producent β-laktamázy MIC (mg/l) Průměr inhibiční zóny (µg) Target Rozmezí Target Rozmezí Amoxicillin-klavulanová kys. 3 Poznámka 8 Poznámka 8-9-5 Kalkulace EUCAST. Clinical and Laboratory Standards Institute, M00-S6, 06, s výjimkou rozmezí ustanovených EUCAST, vyznačených kurzívou/tučně. Všechna rozmezí byla validována EUCAST. 3 Pro vyšetření MIC je použita fixní koncentrace mg/l klavulanové kys. 4 Růst ve formě úzké vnitřní zóny na některých šaržích Mueller-Hinton agaru se ignoruje 5 Pro vyšetření MIC je použita fixní koncentrace 4 mg/l sulbaktamu. 6 Pro vyšetření MIC je použita fixní koncentrace 4 mg/l tazobaktamu. 7 Ke kontrole složky inhibitoru lze použít E. coli ATCC 358 nebo K. pneumoniae ATCC 700603. 8 Ke kontrole složky inhibitoru se používá E. coli ATCC 358. 4

Rozšířená kontrola kvality pro detekci mechanizmů rezistence diskovou difuzní metodou 5

Kmeny pro kontrolu kvality pro detekci mechanizmů rezistence diskovou difuzní metodou na agaru Mueller-Hinton Disková difuzní metoda: Mueller-Hinton agar, McFarland 0,5, normální atmosféra, 35±ºC, 8±h. Průměr inhibiční zóny od okrajů nevykazujících růst se měří v odraženém světle na spodní straně misky, umístěné na tmavém pozadí. Produkce ESBL u Enterobacteriaceae Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 (CNCTC 7439, CCM 4985) (NCTC 3368, CCUG 454, CECT 7787) Producent ESBL SHV-8 (µg) Target Rozmezí citlivosti Komentáře Aztreonam 30 R 9-7 Cefotaxim 5 I nebo R -8 Cefpodoxim 0 R 9-6 Ceftazidim 0 I nebo R 6- Ceftriaxon 30 I nebo R 6- Rezistence Staphylococcus aureus k methicilinu Staphylococcus aureus NCTC 493 (CNCTC 7443) (DSMZ 746) Methicilin-rezistentní (MRSA), meca pozitivní (µg) Target Rozmezí citlivosti Komentáře Cefoxitin 30 R 4-0 Rezistence enterokoků ke glykopeptidům zprostředkovaná Van-B Enterococcus faecalis ATCC 599 (CNCTC 5530, CCM 4647) (NCTC 3379, CIP 04676, DSM 956, CCUG 3489) (µg) Target Rozmezí citlivosti Komentáře Teikoplanin 30 C 6-0 Vankomycin 5 R 6- Okraj zóny se prohlíží v procházejícím světle (plotna se drží proti světlu). Inhibiční zóny s neostrými okraji se interpretují jako rezistentní, bez ohledu na to, že průměr zóny je nad breakpointem pro citlivost. Vysoký stupeň rezistence enterokoků k aminoglykosidům Enterococcus faecalis ATCC 599 (NCTC 3379,CIP 04676, DSM 956, CCUG 3489) Vysoký stupeň rezistence ke gentamicinu a ke streptomycinu (µg) Target Rozmezí citlivosti Komentáře Gentamicin 30 R 6 Streptomycin 300 R 6 Cílové hodnoty jsou v souladu s klinickými breakpointy EUCAST a jsou nastaveny tak, aby správně detekovaly mechanizmy rezistence podle klinických breakpointů EUCAST: C=Citlivý, I=Intermediární, R=Rezistentní. Clinical and Laboratory Standards Institute, M00-S6, 06, s výjimkou rozmezí ustanovených EUCAST, vyznačených kurzívou/tučně. Všechna rozmezí byla validována EUCAST. IP = v přípravě 6

Kmeny pro kontrolu kvality pro detekci mechanizmů rezistence diskovou difuzí na agaru Mueller-Hinton pro náročné bakterie (MH-F) Snížená citlivost k β-laktamovým antibiotikům v důsledku mutací PBP u Haemophilus influenzae Haemophilus influenzae ATCC 4947 (CNCTC 5063, CCM 4456) (NCTC 699, CIP 04604, DSM 9999, CCUG 64) Disková difuzní metoda: Mueller-Hinton agar + 5 % koňské krve a 0 mg/l β-nad, McFarland 0,5, 5% CO, 35±ºC, 8±h. V misce s odkrytým víčkem se při pohledu zpředu v odraženém světle změří průměr mezi okraji inhibiční zóny nevykazujícími žádný růst. (µg) Target Rozmezí citlivosti Komentáře Na průměry inhibičních zón má značný vliv složení půdy, inokulum a podmínky inkubace. Růst drobných kolonií uvnitř inhibiční zóny se interpretuje jako 6 mm (žádná zóna). Ampicilin R 6- Benzylpenicilin J R 6-9 Cílové hodnoty jsou v souladu s klinickými breakpointy EUCAST a jsou nastaveny tak, aby správně detekovaly mechanizmy rezistence podle klinických breakpointů EUCAST: C=Citlivý, I=Intermediární, R=Rezistentní. Stanoveno a validováno opakovaným vyšetřením EUCAST. 7