MUDr. Wezdenková Kateřina Laboratoře Mikrochem a.s., Šumperk
Základní rozvaha indikace mikrobiologického vyšetření ano ne Co odebrat? (klinické příznaky, fáze onemocnění, charakter patogena) Jak odebrat? (forma odběru) Jak uchovat a transportovat?
Výběr vhodného odběru
Mikrobiální patogeny 1) typu Streptococcus pyogenes neznáme patogena, známe místo, přímý průkaz, běžně kultivovatelné bakterie 2) typu Mycobacterium tuberculosis přímý průkaz, nutné speciální vyšetření 3) typu Toxoplazma gondii známe patogena, obtížně kultivovatelné, není nutné znát místo, nepřímý průkaz
Způsob odběru tekuté a kusové vzorky (tělní tekutiny, krev, výplachy, tkáně, stolice) - sterilní nádobky se zátkou stěry a výtěry - tampon na špejli, drátku či plastové tyčince (suché, v transportní půdě, ve speciálním transportním médiu) ostatní vzorky - urikulty, nátěry na podložní sklíčka Přednost tekutých vzorků před stěry!
Zásady odběru odebírat v akutním stádiu infekce, bez ATB léčby, z nejvíce postižené části tkáně používat odběrové soupravy a nádobky s neprošlou lhůtou exspirace minimalizovat riziko kontaminace zachovávat aseptické podmínky odběru vzorek označit štítkem, vyplnit správně průvodní list co nejdříve odeslat do laboratoře
Žádanka o vyšetření význam právní, ekonomický a medicínský čas odběru popis vzorku (lokalizace stěru z rány) diagnóza, která souvisí s vyšetřením ATB terapie, příp. alergie cestovatelská anamnéza, pracovní anamnéza
Uchovávání a transport materiálu vzorky v transportních odběrových soupravách na bakteriologické vyšetření uchovat při pokojové teplotě, chránit před slunečním zářením vzorky stěrů bez transportní půdy, tekuté/kusové vzorky (moč, sputum, BAL, stolice), vzorky na virologické a PCR vyšetření uchovávat při teplotě 2-8 C výjimkou je krev na hemokultivaci a tekuté vzorky nekontaminované slizniční a kožní flórou (hnis, punktát, exsudát, likvor, ejakulát) ponechat při pokojové teplotě! zasílat uzavřené, co nejdříve po odběru, max. doba transportu je 24 hod., u moče nejlépe do 2 hod. zasílat v boxech (v létě s chladicí vložkou, v zimě nesmí zmrznout), optimální transportní teplota 15-25 C
Dýchací cesty stěr z tonzil, nosohltanu, nosu - tampon na drátku či plastové tyčince v transportní půdě sputum, indukované sputum, aspirát, bronchoalveolární laváž (BAL) - 2-5ml, sterilní kontejner, ne sliny! laryngeální výtěr tamponem na drátku, reflexně může dojít k obstrukci dýchacích cest, lépe odběr hemokultury, kontraindikován při susp. epiglotitis hemokultura - do speciálních odběrových nádobek, při podezření na pneumonii
Dýchací cesty- nazofaryngeální odběr Tampon jemně zasunout přes nosní průduch až k zadní stěně nazofaryngu. Zde ponechat několik sekund za současného otáčení tak, aby co nejvíce nasákl slizničním sekretem. Je důležité zachovat horizontální směr, ne vertikální. Vzdálenost zavedení tampónu se měří od ušního lalůčku po vchod nosu a vydělí se dvěma. Vzdálenost zasunutí tampónu je dobré měřit zvláště u malých dětí. při podezření na pertusi den předem informovat laboratoř
Trávící cesty výtěr z konečníku - tampon na plastové tyčince v transportní půdě, bakteriologická kultivace stolice - velikosti lískového oříšku, nesterilní plastová nádobka, transport do 2 hod. (max. 48 hod.) průkaz toxinů Clostridium difficile průkaz antigenu Helicobacter pylori průkaz calprotectinu
Močové cesty moč - suprapubická punkce, katetrizace, permanentní katétr (nově zavedený), střední proud, u infekcí močové trubice první porce moče, u infekcí prostaty poslední porce moče sterilní plastová nádobka, min. 10 ml, uchovávat při 2-8 C urikult - předpoklad delší doby transportu (>6 hod.) výtěr z uretry - uchovávat při pokojové teplotě tampon (tenčí) na plastové tyčince v transportní půdě tampon se speciálním transportním mediem (mykoplasmata, ureaplasmata) nátěr na sklíčko potažené teflonem nepřímá imunofluorescence (Chlamydia trachomatis) speciální odběrová souprava metoda DNA hybridizace (Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoae)
Pohlavní orgány výtěr z uretry, penisu, vaginy, cervixu, vulvy tampon na plastové tyčince v transportní půdě bakteriologická kultivace včetně anaerobní screening Streptoccocus agalactiae (GBS) vyšetření na Neisseria gonorrhoeae transportně kultivační souprava C.A.T. Swab (kultivace kvasinek a trichomonád) speciální odběrová souprava - metoda DNA hybridizace, výtěry z cervixu a uretry (Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae, papilomaviry) tampon se speciálním transportním mediem, výtěry z uretry, cervixu a vaginy (mykoplasmata, ureaplasmata) nátěry na sklíčko (potažené teflonem) MOP, z uretry a cervixu ejakulát odebírat nejlépe po sexuální abstinenci (3-4 dny) do prezervativu, přelít do sterilní zkumavky (i mykoplasmata a ureaplasmata) prostatický exprimát odebírat po masáži prostaty do sterilní zkumavky
Pohlavní orgány - vyšetření na Neisseria gonorrhoeae výtěr z orofaryngu, tonzil, rekta, uretry, cervixu, spojivkového vaku - přímý odběr na půdy tampon na plastové tyčince v transportní půdě (u výtěrů z uretry a cervixu lépe i nátěr na sklíčko) speciální odběrová souprava metoda DNA hybridizace, jen uretra, cervix a spojivkový vak Nutné doručit co nejdříve do laboratoře!!!
Odběr vzorků z oka stěry ze spojivkového vaku, rohovky, víčka - tampon na plastové tyčince v transportní půdě stěry ze spojivkového vaku - speciální odběrová souprava, metoda DNA hybridizace (Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoae) natěr na sklíčko potažené teflonem nepřímá imunofluorescence (Chlamydia trachomatis)
Hnisavé infekce, infekce ran a pohybového systému hnis, exsudát nebo jiný materiál odebíraný punkcí, likvor - ve stříkačce po odejmutí či zajištění jehly, sterilní zkumavka, uchováváme při pokojové teplotě stěr - tampon na plastové tyčince v transportní půdě (možná anaerobní kultivace), z hloubky a ne z povrchu, spíše z okraje rány, ne však z okolní neporušené kůže katétry, drény - ve sterilní zkumavce hemokultura - vždy při projevech celkové sepse serózní tekutina s viditelnými granulemi, stěr z léze v transportní půdě, nátěr na sterilním podložním sklíčku - průkaz aktinomycet
Mycobakteriologické vyšetření (TBC) sputum, indukované sputum i při podezření na mimoplicní TBC, ve 3 po sobě následujících dnech aspirát, bronchoalveolární laváž (BAL), pleurální výpotek, punktát, žaludeční výplach, likvor, menstruační krev, stolice, bioptický a sekční materiál - sterilní plastová nádobka laryngální výtěr, krev - výjimečně moč - střední proud, min. 30 ml, min. 3 dny po sobě stěry z píštělí a hnisavých ran - preferuje se tekutý vzorek před stěry (na minimálně 3 tampony zvlhčené SDV či FR, bez transportní půdy) Uchovávát při 2-8 C, transport do max. 72 hod.! Samostatná odběrová nádobka!
Virologické vyšetření výtěry z nosu, nosohltanu, stěr z postižení - nádobka se speciálním odběrovým médiem sputum, indukované sputum, aspirát, bronchoalveolární laváž (BAL), moč, mok, výpotek - sterilní nádobka stolice - velikosti lískového oříšku do nesterilní plastové nádobky, imunochromatografický test (astroviry, noroviry, rotaviry, adenoviry) odběr srážlivé krve 5 ml, průkaz protilátek
Odběr vzorků pro PCR srážlivá krev, nesrážlivá krev, moč, likvor, BAL, punktát, aspirát, biopsie, pitevní materiál - sterilní plastová nádobka stěr z lézí, stěr z čípku, nazofaryngeální výtěr či aspirát - sterilní tampon (ne vatový) ve sterilní plastové nádobce bez transportní půdy nebo speciální odběrová souprava s tekutým médiem Uchovávat při 2-8 C! Samostatná odběrová nádobka! Transport co nejdříve v den odběru, ve speciální odběrové soupravě i 5 dní!
Parazitologické vyšetření stolice - velikosti lískového oříšku do nádoby z umělé hmoty s lopatičkou v zátce, uchovávat při teplotě 2-8 C, při negativním výsledku se odběr se opakuje v intervalu 24 72 hod. 2x čerstvá stolice na amébózu (vzorek se nesmí chladit) perianální otisk - lepící páska nalepená na podložním skle výtěry z pochvy a uretry - transportně kultivační souprava C.A.T. Swab (Trichomonas vaginalis), uchovávat při pokojové teplotě krevní nátěr, tlustá kapka - periferní krev z bříška prstů (Plasmodium sp., Trypanosoma sp., Filárie)
Mykologické vyšetření stěry z ložisek, sputum, moč, punktát, krev, hnis - odběr i transport je obdobný jako u vzorků, které jsou zasílány na bakteriologické vyšetření, není nutný samostatný odběr nehty, kožní šupiny - dezinfekce 70% alkoholem před odběrem, uchovávat při teplotě 2-8 C vlasy, chlupy - do sterilních plastových nádobek, uchovávat při teplotě 2-8 C z okrajové části ložiska nesmí být ložisko ošetřeno 10 14 dní lokálními antimykotiky při užívání celkových antimykotik počkáme s odběry 6 týdnů
Odběr vzorků pro imunologická a sérologická vyšetření srážlivá krev - krevní zkumavky se separačními granuly a akcelerátorem koagulace, lze ji uchovat i 3 dny v ledničce vyšetření ECP - transport do 2 hod. při teplotě 18-25 C k okamžité separaci séra, nesmí dojít k hemolýze vyšetření protilátek proti Bordetella pertussis/parapertussis aglutinační metodou - první vzorek se odebere při podezření na onemocnění, druhý vzorek se odebere za 2-4 týdny (hodnotí se čtyřnásobný vzestup nebo pokles protilátek) při testování alergie na léky a hmyzí jedy je nutné odebrat krev v období od 2 týdnů do 6 měsíců po expozici daným alergenem nesrážlivá krev - odběrové soupravy s nesrážlivým činidlem K3EDTA, odběrové soupravy pro krevní obraz (buněčná imunita, HLA B27), uchovat při pokojové teplotě, dopravit v den odběru
Důvody odmítnutí vzorku neoznačený či nečitelně označený vzorek neúplná data (razítko, podpis a IČP lékaře, zdravotní pojišťovna) hemolytická a chylózní séra neshoda mezi žádankou a vzorkem riziko kontaminace vzorku - poškozená nádoba doba mezi odběrem a dodáním přesahuje maximální dobu transportu nevhodná odběrová nádobka
Závěr pro správnou a úspěšnou diagnostiku je důležitý správně odebraný materiál v odpovídající fázi onemocnění podrobné informace najdete na našich webových stránkách http://www.michem.cz/laboratorniprirucka.htm