prezentace OKMP 1

Transkript

1 prezentace OKMP 1

2 Zasílání vzorků na mikrobiologické vyšetření Zásady,chyby a využití MVDr.Petr Ježek

3 Organizační členění OKMP. OKMP MVDr.Petr Ježek ATB středisko MUDr.Romana Filová Lab.klinická a močové infekce l.1572 Lab.vzdušných a střevních nákaz l.1538 Laboratoř TBC a mykobakterióz l.1633 Parazitlogie l.1633 Serologická laboratoř l.1523 Lab.molekulární bakteriologie l prezentace OKMP 3

4 Obecné zásady Výsledek mikrobiologického vyšetření závisí z velké části na kvalitě odběru materiálu!!! Dodržení zásad aseptického odběru Odběr z místa předpokládaného výskytu patogenů Použít vhodnou odběrovou soupravu Nekontaminovat vnější povrch a žádanku-pevně uzavírat Žádanku ukládat mimo zasílaný vzorek Správně a úplně vyplnit žádanku Včas dodat do laboratoře prezentace OKMP 4

5 Klasická bakteriologie Anaeroby x aeroby Při odběru a transportu používat metody zajišťující anaerobní prostředí Na anaeroby pokud lze,vždy tekutý materiál! Označit na průvodce žádost o anaerobní kultivaci Vyplnit nejen hlavní dg, ale i dg související s důvodem kultivace Vyplňovat vždy ATB terapii Včas dodat do laboratoře Aktinomyces israelii Původce aktinomykózy prezentace OKMP 5

6 Močové infekce URIKULT Poučit pacienta o odběru Možno uchovávat i při pokojové teplote Nepoužívat expirovanésoupravy-vyschlé kult. půdy Odběr do zkumavky Méně komfortní způsob odběru Po odběru co nejdříve dodat do laboratoře-kvantita! Nutno uchovávat při 4 C-jen nouzově prezentace OKMP 6

7 Vzdušné nákazy VK+VN není adekvátní vyšetření sinusitidy STPN,HAIN,MOCA-nejsou uznávanými primárními patogeny v těchto lokalitách STAU nosičství Při včasném dodání není nutná transportní půda Sterptococcus pyogenes Staphylococcus aureus prezentace OKMP 7

8 Střevní nákazy Vždy na transportní půdě nebo vlhký výtěrový tampon! Stolice na susp. toxigenní inf. nutno označit na průvodce Kultivaci na yersinie nutno označit na žádance K vyš. na virologii odebírat dostatečné množství stolice cca 2ccm Salmonella enteritidis prezentace OKMP 8

9 Parazitologie Vyšetření stolice není určeno k vyšetření enterobiózu ani taeniázu Na stěry dle Grahama používat výhradně transparentní lepící pásky Vždy uvádět cestovatelskou anamnézu Ascaris lumbricoides-škrkavka prezentace OKMP 9

10 TBC a mykobakteriózy Mykobakterióza Odebírat dostatečné množství materiálu (+ 3 sputa) Řádně označit požadované vyšetření- BK nebo TBC kultivace Jiné mykobakteriózy 1. Infekce akvaristů - M.marinum 2. Infekce - M.kansasii 3. Lymfadenitidy dětí - M.hemophilum Kdy pamatovat na mykobakteriózy: 1. Běžná ATB léčba nezabírá 2. Imunokompromitovaní pacienti 3. Aplikace kortikosteriodů-dlouhodobě 4. Anamnéza-akvarista,rybář. 5. Kožní projevy bez efektu ATB léčby i imunokompetentní pacient Infekce akvaristy M.marinum prezentace OKMP 10

11 Serologická vyšetření Obecně: 1. Určeno zejména pro pozdější fáze onemocnění 2. Detekovatelné množství protilátek za 2-4týdny 3. Dříve=zavádějící výsledky 4. Srážlivá krev (sérum) 5. Nekontaminovat povrch odběrové zkumavky a žádanky! Detekce ASD prezentace OKMP 11

12 Nejčastější chyby v indikaci serologických vyšetření LB: 1. Příliš časné odběry 2. KO po léčbě-nevhodné 3. Sazebník výkonů WB pouze 1x ročně/pac. H.pylori 1. Serologie nepodá validní informaci o aktuální stavu 2. Nevhodné jako kontrola po léčbě 3. Vhodnější je vyšetření Ag ze stolice prezentace OKMP 12

13 Nejčastější chyby v indikaci serologických vyšetření Chlamydiové infekce Neznalost etiologie a patogeneze Indikovat vyš. dle klin.stavu a diagnozy pacienta 1. Chl.pneumoniae-infekce respiračního traktu 2. Chl.trachomatis-gynekolog.dg,STD,kloubní postižení 3. Chl.psittaci pouze susp. ornitóza nebo psittakóza Nemá význam u akutních infekcí v příliš časné fázi od vzniku onemocnění nejdříve za 14 dní! V časné fázi doporučejeme PCR prezentace OKMP 13

14 Nejčastější chyby v indikaci serologických vyšetření Herpetické viry- EBV,CMV,HSV Často zkřížené reaktivity = problematické vyhodnocení Ovlivňují výsledky dalších serolog.vyšetření- např. EBV+,HAV+,toxoplasma+ Velké % populace = latentní infekce = IgG+, Někteří pac. nemusí při reaktivaci vytvářet IgM=mohou uniknout serologické pozornosti V akutní fázi = doporučeno PCR prezentace OKMP 14

15 Nejčastější chyby v indikaci serologických vyšetření EBV OCH test (Ericson)=heterofilní protil.,jsou velmi specifické x jen krátkou dobu u primoinfekce! Negativní výsledek nevylučuje onemocnění EBV CMV 10% příp. mononukleózy HSV1+2 Serologie vhodná u dlouhodobých obtíží či chron. onemocnění V akutních případech do 14 dní od vzniku onemocnění je vhodnější indikovat PCR-např.sliny,gynekol.výtěry Serologie-vhodná u případů,kde nelze odebrat adekvátní vzorek prezentace OKMP 15

16 Serologické metody a jejich praktické využití Pomalá aglutinace: Nejjednodušší serologická metoda Velmi spolehlivá Kvantitativní-hladina protilátek v titrech V časné fázi onemocnění = negativní Zoonózy: yersinióza, listerióza, tularemie Pomalá aglutinace prezentace OKMP 16

17 Serologické metody a jejich praktické využití Hemaglutinačně inhibiční test Jen detekce ASLO Latexaglutinační testy Většinou jen screeningově jako vyhledávací reakce Možnost využít semikvantitativně Malá citlivost Hemaglutinačně-inhibiční test prezentace OKMP 17

18 Serologické metody a jejich praktické využití Chromatografické metody 1. Detekce Ag i Ab 2. Nízká citlivost x relativně dobrá specifita Ag- pnemokok,legionela v moči Ag-střevní viry - rotaviry - adenoviry - noroviry (Norwalk like) - astroviry - enteroviry -význam zejména první 3 dny onemocnění, potom rychle klesá virová nálož ve stolici! Imunochromatografický test prezentace OKMP 18

19 Serologické metody a jejich praktické využití ELISA (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay) 1. Velmi citlivá metoda 2. Časté nespecifity 3. V časné fázi onemocnění může být negativní 4. Většina vyšetřovaných infekcí,trváli onemocnění alespoň 2-3týdny ELISA prezentace OKMP 19

20 Serologické metody a jejich praktické využití Western blot 1. Citlivá metoda 2. Málo nespecifických reaktivit 3. Zejména konfirmační test (ale nejen) 4. V časné fázi onemocnění může být negativní 5. Většina vyšetřovaných infekcí trvá-li onemocnění alespoň 2-4 týdny Western blot prezentace OKMP 20

21 Polymerase Chain Reaction (PCR) Obecně Vhodná v časných fázích onemocnění při prvním kontaktu s pacientem a tam kde lze odebrat adekvátní materiál s předpokládaným patogenem. Výsledek=DNA prokazovaného patogena prokázána nebo neprokázána Princip PCR prezentace OKMP 21

22 Příjem materiálu Po Pá So Ne+svátek před prac.dnem prezentace OKMP 22

23 prezentace OKMP 23