TSKgel G8 Variant HSi 1/14 TSKgel G8 Variant HSi 2/14 Tosoh Automated Glycohemoglobin Analyzer HLC-723G8 Rev. DC012030 Bezpečnostní opatření K vaší ochraně anebo k ochraně vašeho majetku před možným poškozením a k zajištění osobní bezpečnosti si před použitím výrobku přečtěte prosím tento návod k použití. [Upozornění použitá v textu] Upozornění Vysvětlení Označuje nebezpečí s nízkým stupněm rizika, které pokud se ho POZOR nevyvarujete, může způsobit menší nebo středně těžké poranění. Návod k použití TSKgel G8 Variant HSi POZOR Používejte pouze v dobře větraných prostorách Při nedostatečném větrání mohou hořlavá a toxická rozpouštědla způsobit požár, výbuch nebo otravu. První pomoc Zasažení pokožky Zasažené místo omyjte vydatně vodou a mýdlem. Zasažení očí Co nejvíce otevřete oči a alespoň 15 minut vyplachujte čistou vodou. Bez prodlení vyhledejte lékaře. Požití Vypláchněte si vydatně ústa a bez prodlení vyhledejte lékaře. Dbejte, aby nedošlo k rozlití rozpouštědel Rozlité či unikající roztoky mohou být příčinou požáru, úrazu elektrickým proudem, otravy, zranění nebo koroze. Při úklidu rozlitého roztoku používejte náležitý ochranný oděv. Používejte ochranu očí a ochranné rukavice Organická rozpouštědla a kyseliny jsou zdraví škodlivé a nesmí přijít do přímého styku s pokožkou. S balením manipulujte opatrně Nesprávnou manipulací může dojít k porušení obalu anebo rozlití roztoku. Tento výrobek užívejte pouze k určenému účelu Tento výrobek je určen pro diagnostické použití in vitro k měření HbA 1c v krevních vzorcích. Správné znehodnocení Likvidujte v souladu s místními zákony a předpisy. Upozornění: Tento návod k použití je v souladu se směrnicí IVD 98/79/ES a je určen pro zákazníky z členských států Evropské unie. POZNÁMKA Tento návod k použití uchovávejte s výrobkem pro možné budoucí reference.
TSKgel G8 Variant HSi 3/14 TSKgel G8 Variant HSi 4/14 OBSAH 1. Úvod Revidováno 12/2009 1. Úvod... 4 2. Před použitím... 4 3. Varování a bezpečnostní opatření... 5 4. Obsah... 5 5. Názvy součástí... 5 6. Související složky... 5 7. Skladování a stabilita... 5 8. Vzorky... 5 9. Princip analýzy... 6 10. Instalace a kalibrace... 6 11. Postup analýzy... 7 12. Bezpečnostní opatření při používání... 8 13. Referenční data (z příkladů analýz z G8)... 8 14. Hodnoty měření... 9 15. Hodnocení výsledků... 9 16. Očekávané hodnoty... 9 17. Výkonnostní charakteristiky... 9 18. Přesnost... 11 19. Interference... 11 20. Pořizování a manipulace se vzorky... 13 TSKgel G8 Variant HSi je určený výhradně pro použití s Tosoh Automated Glycohemoglobin Analyzer HLC-723G8 (v návodu k použití zmiňovaný pouze jako G8), pracujícím na principu vysoce výkonnostní kapalinové chromatografické analýzy. Není určený pro jiné systémy a nesmí se s jinými systémy používat. TSKgel G8 Variant HSi je určený pro diagnostické použití in vitro k měření hemoglobinu A 1c (HbA 1c ) v krevních vzorcích. Glykovaný hemoglobin (GHb) je obecný název pro komplexy, kde glukóza plné krve není enzymaticky vázána na α nebo β řetězce lidského hemoglobinu. Mezi těmito komplexy je HbA 1c, což je complex glukózy a N-konce β-řetězce, nejčastější. HbA 1c je neenzymaticky syntetizovaný ve dvou krocích. Krok 1: Aldehydová skupina glukózy reaguje s volnou amino skupinou valinu a kompromituje N- konec β-řetězce, aby vytvořila Schiffovu bázi (labilní HbA 1c (L-A 1c )). Krok 2: Stabilní ketoamin (stabilní HbA 1c (s-a 1c )) vzniká reakcí známou jako Amadoriho přeskupení. Protože se L-A 1c (meziprodukt této reakce) rychle mění v závislosti na změnách koncentrací glukózy v plné krvi, je nyní s-a 1c obecně používán k měření HbA 1c. Poskytuje nejlepší indikaci průměrných hladin glukózy v průběhu posledního 1 až 3 měsíců, protože nekolísá v závislosti na fyziologických faktorech. V minulosti bylo obtížné dosáhnout rychlé separace L-A 1c a s-a 1c ve sloupci, proto je před analýzou s-a 1c nutné před ošetřením odstranit L-A 1c. G8 obsahuje rychlou separaci L-A 1c a s-a 1c ve sloupci (1,6 minut) a tak eliminuje potřebu pro ošetření při analýze s-a 1c. Hemoglobin nacházející se u normálního dospělého člověka je hemoglobin A, který tvoří přibližně 97 % celkového hemoglobinu. Na druhou stranu byly v různých oblastech hlášeny různé abnormality hemoglobinu, zejména v oblastech s velkou populací imigrantů. Abnormální hemoglobiny nebo odlišné hemoglobiny jsou vymývány společně s jinými složkami hemoglobinu a mohou vést k chybné interpretaci. TSKgel G8 Variant HSi a G8 Variant Elution Buffer HSi separují nejčastější odlišné hemoglobinové frakce v přístroji G8. 2. Před použitím Před použitím nejprve zkontrolujte, zda obal a vnější povrch lahvičky nejeví známky poškození. Pokud jsou viditelná jakákoli poškození, obraťte se na místního prodejního zástupce společnosti Tosoh. Zkontrolujte, zda průvodní dokumentace balení obsahuje: Návod k použití 1 kopie Inspekční zpráva glyko sloupce 1 kopie
TSKgel G8 Variant HSi 5/14 TSKgel G8 Variant HSi 6/14 3. Varování a bezpečnostní opatření 1) Tento výrobek je určen pouze pro diagnostické použití in vitro. 2) Tento výrobek je určen pro použití na Tosoh Automated Glycohemoglobin Analyzer HLC-723G8 pouze v režimu analýzy variant. 4. Obsah Katalogové č. Popis Obsah balení 0021848 TSKgel G8 Variant HSi 1 ks 9. Princip analýzy G8 funguje na principu vysoce výkonnostní kapalinové chromatografické analýzy (HPLC). Sloupce výměny kationtů využívají rozdíly iontových interakcí mezi složkami hemoglobinu, aby je oddělily v rozmezí 1,6 minut. Stupňovitě vzrůstající vymývání se užívá k separaci HbF, s-a 1c, celkového A 1 a hemoglobinových variant s třemi typy G8 Variant Elution Buffer HSi (G8 Variant Elution Buffer HSi No. 1, 2, a 3 (S)) solí různých koncentrací. 10. Instalace a kalibrace Režim analýzy: Použitelné analyzátory: Režim analýzy variant Tosoh Automated Glycohemoglobin Analyzer HLC-723G8 Ujistěte se, že si přečtete návod k použití přiložený k uživatelské příručce TSKgel G8 Variant HSi, Hemoglobin A1c Calibrator Set, Hemoglobin A1c Control, G8 Variant Elution Buffer HSi, HSi Hemolysis & Wash Solution a také G8. 5. Názvy součástí Názvy různých součástí tvořící TSKgel G8 Variant HSi jsou uvedeny níže. Koncovka Štítek s názvem Koncová zátka <Schéma kolona> 6. Související složky Instalace G8 Variant Elution Buffer HSi 1) Stiskněte klávesu STOP na ovládacím panelu systému G8, abyste umožnili pohotovostní stav (STAND-BY). 2) Otevřete uzávěr balení elučního pufru. 3) Ujistěte se, že jste vložili hadičku shodné barvy s obalem instalovaného elučního pufru. 4) Jemným zmáčknutím vytlačte z obalu elučního pufru veškerý nadbytečný vzduch a pevně uzávěr zavřete, aby vzniklo vakuum, které zabrání vniknutí vzduchu v průběhu provozu. 5) Stiskněte klávesu MAINTE a poté klávesu REAGENT CHANGE. 6) Na obrazovce REAGENT CHANGE stiskněte klávesy činidel, která mají být vyměněna. 7) Stiskněte klávesu CHANGE. Na displeji se zobrazí potvrzující zpráva. Pokud je vše v pořádku, stiskněte klávesu OK. 7. Skladování Hemoglobin A1c Calibrator Set Hemoglobin A1c Control G8 Variant Elution Buffer HSi No. 1 (S) G8 Variant Elution Buffer HSi No. 2 (S) G8 Variant Elution Buffer HSi No. 3 (S) HSi Hemolysis & Wash Solution (L) HSi Hemolysis & Wash Solution (LL) Katalogové č. 0018767 0019405 0021849 0021850 0021851 0018431 0019550 Instalace HSi Hemolysis & Wash Solution (hemolyzační a promývací roztok) 1) Stiskněte klávesu STOP na ovládacím panelu systému G8, abyste umožnili pohotovostní stav (STAND-BY). 2) Sejměte uzávěr láhve Hemolysis & Wash Solution (hemolyzačního a promývacího roztoku). 3) Vsuňte hadičku do nové lahvičky a našroubujte uzávěr zpět. 4) Stiskněte klávesu MAINTE a poté klávesu REAGENT CHANGE. 5) Stiskněte klávesu H/W na obrazovce REAGENT CHANGE. 6) Stiskněte klávesu CHANGE. Na displeji se zobrazí potvrzující zpráva. Pokud je vše v pořádku, stiskněte klávesu OK. Skladujte při teplotě 4 až 15 C na chladném a temném místě. 8. Vzorky Vzorky plné krve v primárních zkumavkách obsahující EDTA, NaF, heparin nebo kyselinu citrónovou. TSKgel G8 Variant HSi 1) Vyjměte kolona z obalu a odstraňte koncové uzávěry z obou konců. Uzávěry bezpečně uložte, protože budou potřebné pro uložení kolona. 2) Ověřte, že byla před otevřením termostatu se sloupci k odpojení hadiček ukončena eluční dodávka systému analyzátoru (na hlavní obrazovce (první obrazovce) se zobrazí STAND-BY). Poté vyjměte použitý kolona.
TSKgel G8 Variant HSi 7/14 TSKgel G8 Variant HSi 8/14 3) Stiskem klávesy se šipkou vpravo dole na hlavní (první) obrazovce přejděte na hlavní (druhou) obrazovku. Stiskněte klávesu čerpadla na hlavní (druhé) obrazovce, abyste spustili čerpadlo a zkontrolujte, zda eluční roztok proudí hadičkou odpojenou od sloupce. Poté stiskněte klávesu čerpadla, abyste čerpadlo zastavili. Předem si připravte papírovou utěrku a dbejte zvláštní opatrnosti, aby eluční roztok z hadičky nevytekl na jednotku analyzátoru. 4) Zkontrolujte správný směr proudění elučního roztoku (podle šipky zobrazené na štítku sloupce) a připojte hadičku na vstup sloupce. Spusťte čerpadlo a zkontrolujte, zda eluční roztok protéká sloupcem. Poté vypněte čerpadlo a připojte hadičku na výstup sloupce. 5) Opět stiskněte klávesu čerpadla, abyste spustili čerpadlo. Zkontrolujte, zda se správně rychle zvýší tlak a zda ve spojích hadiček nedochází k úniku roztoku. Poté vypněte čerpadlo. 6) Stiskněte klávesu MAINTE a poté klávesu REAGENT CHANGE. Stisknutím klávesy COL. RESET vynulujte počítadlo sloupce. Hemoglobin A1c Calibrator Set 1) Sejměte uzávěr z lahvičky s kalibrátorem. 2) Rozřeďte kalibrátory 1 a 2 přidáním 4 ml destilované vody do každé lahvičky a důkladně promíchejte jemným otáčením nahoru a dolů. 3) Naředěné kalibrátory uchovávejte při teplotě 2 až 8 C a spotřebujte do jednoho týdne. 4) Podrobné pokyny naleznete v návodu k použití Hemoglobin A1c Calibrator Set. Kalibrace 1) Naředěné kalibrátory 1 a 2 rozdělte po 400 μl do určených kelímků na vzorky. 2) Kalibrátory 1 a 2 umístěte do pozice 1 a 2 prvního stojanu. 3) Stiskněte klávesu CALIB na hlavní (první) obrazovce. 4) Klávesa se rozsvítí a na vstupní obrazovce se zobrazí přiřazená hodnota kalibrátoru. Zobrazí se seznam přiřazených hodnot pro kalibrátory 1 a 2. 5) Stiskněte record (záznam) pro kalibrátor 1, aby se na vstupní obrazovce objevilo číslo. Zadejte přiřazenou hodnotu a obrazovku zavřete. 6) Zadejte také přiřazenou hodnotu pro kalibrátor 2. 7) Zkontrolujte správnost zadaných hodnot. 8) Zavřete seznam. 9) Stisknutím klávesy START spustíte automatickou kalibraci. 12. Bezpečnostní opatření při používání 1) Pečlivě si přečtěte pokyny obsažené v návodu k použití a související pokyny pro použití uvedené v G8 Variant Elution Buffer HSi, Hemoglobin A1c Calibrator Set, Hemoglobin A1c Control a HSi Hemolysis & Wash Solution. 2) TSKgel G8 Variant HSi je určený výhradně pro použití v kombinaci se systémem analyzátoru G8, G8 Variant Elution Buffer HSi a HSi Hemolysis & Wash Solution uvedených níže a nikdy v žádné jiné kombinaci. Tosoh Automated Glycohemoglobin Analyzer HLC-723G8 G8 Variant Elution Buffer HSi (No. 1, 2 and 3 (S)) HSi Hemolysis & Wash Solution (L), (LL) 3) Při výměně sloupce proveďte analýzu fiktivního vzorku a zkontrolujte chromatografické výsledky. 4) TSKgel G8 Variant HSi užívejte vždy v kombinaci s G8 Variant Elution Buffer HSi stejného čísla šarže. Číslo šarže sloupce je vyznačeno jedním velkým písmenem (A, B atd.) na obalu sloupce. Štítek elučního pufru zobrazuje písmeno odpovídající číslu šarže sloupce, jak je uvedeno níže: 5) Je třeba pozorně zkontrolovat, zda roztoky proudí směrem označeným šipkou na štítku sloupce. 6) Pokud kolona nemá být použitý déle než týden, vyjměte kolona z jednotky analyzátoru, připojte opět koncové zátky proti vysychání a uložte ho na chladném a temném místě s teplotou 4 až 15 C. 7) Se sloupcem zacházejte opatrně. Kolona neupusťte ani s ním netřepejte. 8) Pokud je tlak o více než 4 MPa vyšší než tlak vyznačený v inspekční zprávě sloupce, vyměňte filtr. Pokud tlak neklesá, obraťte se na místního zástupce společnosti. 13. Referenční data (z příkladů analýz z G8) Formát 0 Kontrola Všimněte si, že kalibrace bude opět provedena, pokud se dojde k některým z následujících výsledků. Rozdíl mezi 2. a 3. hodnotou s-a 1c (%) přesáhne 0,3 %. Rozdíl mezi 4. a 5. hodnotou s-a 1c (%) přesáhne 0,3 %. Jakýkoli ze čtyř výsledků kalibrátoru se liší od jeho přiřazené hodnoty o 30 % nebo více. Podrobné pokyny naleznete v uživatelské příručce G8. 11. Postup analýzy Podrobné pokyny naleznete v uživatelské příručce G8.
TSKgel G8 Variant HSi 9/14 TSKgel G8 Variant HSi 10/14 Formát 0 Vzorek 14. Hodnoty měření Hodnoty měření (%) představují procento každého vrcholu hodnot ve vztahu k celkové ploše (s výjimkou předního vrcholu (FP)). Všimněte si, že nejmenší zobrazovaná jednotka měření je 0,1 %. 15. Hodnocení výsledků Kontrola kvality Jako prostředek sledování a hodnocení přesnosti a analytické výkonnosti se doporučuje provádět každodenní analýzy kontrolních vzorků. Pokud se objeví jedna nebo více hodnot kontrolního vzorku mimo přípustné rozmezí, je třeba před ohlášením výsledků pacienta prověřit validitu kalibrační křivky. V souladu s nejpřísnějšími předpisy regulačního úřadu, pod nímž laboratoř působí, je třeba dodržovat standardní laboratorní postupy. 16. Očekávané hodnoty Referenční rozmezí (nediabetik): HbA 1c 4,0-6,0 % (průměr 5,0 %, SO 0,5 %) Viz: Americká společnost pro diabetes. Standardní lékařská péče o pacienty s diabetem mellitus. Diabetes Care 2000; 23 (Suppl. 1), S32-42. Hodnoty uvedené v tomto dokumentu byly stanoveny metodami ověřenými NGSP (Národní standardizační program pro glykovaný hemoglobin). Je známo, že vztah mezi výsledky HbA 1c ze sítě NGSP (%) a sítě IFCC (Mezinárodní federace pro klinickou biochemii a laboratorní medicínu) (mmol/mol) je vyjádřen pomocí následující rovnice (viz http://www.ifcchba1c.net/ifcc 08.asp): NGSP=0,09148 IFCC+2,152 Celková plocha s-a1c (%) 403,07 10,4 658,02 10,6 894,64 10,6 1 144,30 10,6 1 889,65 10,6 2 164,26 10,7 2 581,77 10,7 3 091,13 10,7 3 545,38 10,7 4 046,78 10,7 2) Výtěžnost Níže uvedená tabulka ukazuje poměry výtěžnosti pro dva typy vzorků smíchaných v různých procentuálních faktorech. Vysoký vzorek (poměr) Nízký vzorek (poměr) Hodnota měření s-a 1c (%) Teoretická hodnota s-a 1c (%) Výtěžnost (%) 0 10 5,3 - - 1 9 5,8 5,9 98,3 2 8 6,4 6,4 100,0 3 7 6,9 6,9 100,0 4 6 7,4 7,4 100,0 5 5 7,9 7,9 100,0 6 4 8,4 8,4 100,0 7 3 8,9 9,0 98,9 8 2 9,4 9,5 98,9 9 1 10,0 10,0 100,0 10 0 10,5 - - 3) Korelace Korelace mezi hodnotami s-a 1c (%) pro G8 a analyzátory HLC-723G7 a pro G8 a analyzátory HLC-723GHbV A1c2.2 jsou zobrazeny v níže uvedeném grafu. Tyto metody jsou ověřeny Národní standardizačním programem pro glykovaný hemoglobin (NGSP). Korelace mezi s-a 1c (%) pro analyzátory HLC-723G8 a HLC-723G7. 17. Výkonnostní charakteristiky 1) Linearita ředění Byly prováděny testy s Hemoglobin A1c Control naředěným různými procentuálními faktory ke stanovení účinku na hodnotu s-a 1c (%). Byla zjištěna linearita pro celkovou plochu v rozsahu 500 až 4 000 a měření v rozsahu 700 až 3 000 se doporučují, protože dávají spolehlivější výsledky.
TSKgel G8 Variant HSi 11/14 TSKgel G8 Variant HSi 12/14 Korelace mezi s-a 1c (%) pro analyzátory HLC-723G8 a HLC-723GHbV A1c2.2. Glukóza Kyanatan sodný 18. Přesnost 1) V rámci analýzy (n=10) Faktory pro přesnost v rámci analýzy (n=10) s-a 1c (%) pro tři typy kontrolních vzorků jsou uvedeny níže. Nízký Střední Vysoký Průměr 5,26 7,75 10,47 SO 0,03 0,02 0,02 CV % 0,6 0,3 0,2 2) Mezi analýzami (n=10) Faktory přesnosti mezi analýzami (n=10) A 1c (%) měřenými jednou za 10 dnů pro dva typy kontrolních vzorků jsou uvedeny níže. Acetaldehyd Nízký Vysoký Průměr 5,31 10,51 SO 0,03 0,04 CV % 0,6 0,4 19. Interference Látka je považována za interferující, pokud výtěžnost známého vzorku spadá mimo 10% rozmezí přijatelnosti. Koncentrace interferujících látek v tomto návodu k použití jsou vyjádřeny v jednotkách g/l. Konverzi na jednotky mg/dl lze provést pomocí následující rovnice. mg/dl = g/l 100 1) Pro glukózu nebyl pozorován žádný vliv pod 10 g/l, pro kyanatan sodný pod 0,25 g/l a pro acetaldehyd pod 0,25 g/l. 2) Pro následující látky nebyl zjištěn žádný vliv do koncentrací uvedených v tabulce.
TSKgel G8 Variant HSi 13/14 TSKgel G8 Variant HSi 14/14 Volný bilirubin Konjugovaný bilirubin Žluč Aspirin až 0,2 g/l až 0,2 g/l do 2100 hustoty formazinu až 0,5 g/l 3) Přítomnost HbD, HbS ani HbC neinterferuje s analýzou. Vysoké hodnoty HbF mohou s analýzou interferovat. 4) V přítomnosti HbE může být na vrcholu HbA 0 patrné rameno. 5) V interpretaci výsledků je třeba brát v úvahu celosvětově pozorovaný vysoký počet variant Hb. Označení určitého názvu nevyloučí přítomnost jiných variant. 6) Nízké koncentrace hemoglobinu mohou způsobit, že celková plocha chromatogramu bude nižší než 500. 7) Snížené koncentrace HbA 1c lze zjistit u pacientů s omezenou životností červených krvinek; klinické výsledky interpretujte opatrně. 8) Hemolýza neinterferuje s výsledky analýzy HbA 1c. 20. Pořizování a manipulace se vzorky Pro analýzu je potřebný vzorek plné krve. Není nutná žádná zvláštní příprava. Vzorek žilní krve je odebrán asepticky. Vzorky krve v primárních zkumavkách, které obsahují EDTA, NaF, heparin a kyselinu citrónovou, mohou být před analýzou uloženy 24 hodin při 25 C nebo 14 dnů při 4 C. Symboly na štítcích výrobku TOSOH CORPORATION BIOSCIENCE DIVISION Shiba-Koen First Bldg. 3-8-2, Shiba, Minato-ku, Tokyo 105-8623, Japonsko Telefon: +81354275181 Fax: +81 3 5427 5220 TOSOH EUROPE N.V. Transportstraat 4 B-3980 Tessenderlo, Belgie Telefon: +32 13 66 88 30 Fax: +32 13 66 47 49 Objem netto (po naředění pro lyofilizovaný materiál) Pouze pro uvedené kolony