IMMUNIA spol. s.r.o. laboratoř IMMUNIA

Označení: ID 2 IMMUNIA spol. s.r.o. laboratoř IMMUNIA Stran celkem:43 Č. vydání: 1 Datum vydání:1.4.2009 Název Laboratorní příručka Výtisk číslo: Změnový stav: Účinnost od: 1 0 1.4. 2009 Vypracoval Posoudil Schválil Funkce MK - - vedoucí laboratoře Jméno Ing. Petra Mrkvičková - - RNDr. ALena Lehovcová Datum Podpis

Rozdělovník Držitelé dokumentů: Č. výtisku Funkce Jméno Podpis 1. MK Ing. P. Mrkvičková 2. www.immunia.cz Zápis o seznámení s obsahem: Jméno Lehovcová A. RNDr. Havranová M. Ing. Daňková E., MUDr. Skokanová V., MUDr. Koubová J. RNDr. Nemcová J. RNDr. Adolfová V. Filipovská P. Chaloupková K. Ouvínová H. Boháč J. Krobová L. Zuskinová L. Podpis Přehled změn: Změna č. strana datum oprava výměna 2

Záznam o revizích: Datum Jméno Podpis 1.revize 2.revize 3.revize 4.revize 5.revize Datum Jméno Podpis 6.revize 7.revize 8.revize 9.revize 10.revize 3

OBSAH : strana 1. ÚVOD....... 5 2. IDENTIFIKAČNÍ ÚDAJE.....5-6 3. PŘEHLED VYŠETŘENÍ.7 4. ŽÁDANKY.8-9 5. DOPORUČENÍ K ODBĚRŮM 10-11 6. SPECIÁLNÍ ODBĚRY...11 7. MNOŽSTVÍ A POŽADAVKY NA ODBĚR VZORKŮ 12 8. TRANSPORT VZORKŮ..12-13 9. PŘÍJEM VZORKŮ...13 10. KRITÉRIA PRO PŘIJETÍ NEBO ODMÍTNUTÍ PRIMÁRNÍCH VZORKŮ 13-14 11. SKLADOVÁNÍ MATERÁLU..14 12. UVOLŇOVÁNÍ VÝSLEDKŮ..14 13. SEZNAM SOP.15 14. VYŠETŘENÍ (refer. meze, materiál, doba odezvy..) 16-46 4

1. ÚVOD V Centru prevence a léčby poruch imunity úzce spolupracují zkušení a kvalifikovaní odborníci, kteří mají dlouholeté zkušenosti v oboru imunologie. Činnost centra je zaměřena na prevenci a léčbu alergických onemocnění a chorob rozvíjejících se na podkladě poruch imunity, jejichž incidence neustále stoupá. Odborníci v laboratoři sledují výsledky intenzivního výzkumu v oblasti imunologie a alergologie a zavádějí do praxe nové metody pro využití v diagnostice či při monitorování imunopatologických chorob. V ambulantní části je pacientům věnována komplexní péče včetně prevence, diagnostiky a léčby alergických a imunopatologických chorob. Pracoviště se zabývá vyšetřováním parametrů imunitního systému, včetně vyšetření alergologických. Vyšetřuje rovněž široké spektrum specifických protilátek proti různým infekčním agens. Pravidelně se účastní cyklů externích kontrol pořádaných firmou SEKK. 2. IDENTIFIKAČNÍ ÚDAJE Adresa: IMMUNIA spol.s.r.o. Laboratoř IMMUNIA Křižíkova 147/77 186 00 Praha 8 IČ: 27906264 www.immunia.cz Laboratorní část: Vedoucí laboratoře: RNDr. Alena Lehovcová Zástupce vedoucí laboratoře: Ing. Marie Havranová Vedoucí oddělení serologie a humorální imunity: RNDr. Alena Lehovcová Odborný pracovník serologie: RNDr. Jana Nemcova, CSc. Odborný pracovník humorální imunity: RNDr. Jitka Koubová, CSc. Vedoucí oddělení buněčné imunity: Ing. Marie Havranová Odborný pracovník buněčné imunity: Ing. Petra Mrkvičková Manažer kvality: Ing. Petra Mrkvičková Ambulantní část: Vedoucí lékař: Prim. MUDr. Eva Daňková, CSc. Odborný lékař alergo-imuno: MUDr. Dagmar Pohlová Odborný lékař alergo-imuno: MUDr. Marcela Vorlíčková Info@immunia.cz 5

Kontakty: Ambulance/objednávání pacientů tel:+420 224 829 466, +420 777 757 879 objednavky@immunia.cz Laboratoř- příjem tel:+420 222 311 317, +420 775 755 707 chaloupkova@immunia.cz Laboratoř serologie a humorální imunity tel: +420 222 311 708 lehovcova@immunia.cz, nemcova@immunia.cz, koubova@immunia.cz Laboratoř buněčné imunity tel: +420 222 311 309 havranova@immunia.cz, mrkvickova@immunia.cz Sekretariát tel/fax +420 222 314 018 Info@immunia.cz Primářka dankova@immunia.cz Odborná lékařka pohlova@immunia.cz Odborná lékařka vorlíčkova@immunia.cz Provozní doba zařízení: Po- Čt: 7.30-16.00 hodin Pá: 7.30-15.00 hodin V případě, že klinické zařízení nedisponuje možností vlastního odběru, lze odeslat pacienta k odběru krve do ambulantní části společnosti IMMUNIA, a to denně od 7.00 do 9.30 hod. bez objednání. 6

3. PŘEHLED VYŠETŘENÍ Humorální imunita základní vyšetření: FW, IgG, IgA, IgM, IgE, C3, C4, CH50, CRP,IK PEG, ANA screening, ENA screening, ECP,specif. IgE další proteiny: ELFO + celk.bílkovina, Imunofixace sérum, Lehké řetězce (k, l), Imunofixace moč proteiny akutní fáze: alfa -1 antitrypsin, ceruloplasmin,orosomukoid, beta-2 makroglobulin, haptoglobin, prealbumin, transferin Autoprotilátky ANA IgG, IgA, IgM (titr), ENA typizace ELISA,ENA typizace Western blot,ds DNA,ACLA IgG, IgM,ACLA b 2 glykoprot,(igg, IgM),GADA,AMA,LKM,M2, LKM-1, SLA (Dot blot),asma,gpca,gbm,anca screening,anca typizace,stma,rf (latex),rf IgG, IgM (ELISA),TPO,TG,ASCA Speciální vyšetření Potravinové intolerance Buněčná imunita Serologie C1inhibitor, sekreční IgA kravské mléko, gliadin,ema, tkáňová transglutamináza základní vyšetření: CD3,CD4/CD8,CD3 Dr, CD20,CD3/CD56, HLA B27, fagocytóza, metabolické vzplanutí,další CD znaky blastické transformace lymf: (spont.,pha,cona,pwm) aktivace bazofilů:alergeny,rekombinantní alergeny Heterofilní protilátky (IM test),aslo, Toxoplazmóza (IgG,IgM), Lymeská borelióza (ELISA/Western Blot), EBV (VCA IgG,IgM, EA IgG, EBNA IgG), EBV-Western Blot, CMV (IgG,IgM), HSV1,2 (ELISA/Western Blot) Specifické IgE Reprodukční imunologie Očkování-tetanus (IgG) viz žádanka vyšetření ejakulátu: počet spermií, počet leukocytů,vitalita spermií, přítmnost akrozómu, MAR test 7

4.Žádanky žádanka 1: 8

žádanka 2: 9

5.Doporučení k odběrům Doporučení před odběrem krve: odběr nalačno ( netučná večeře den před odběrem) pacient může případě lehce posnídat jen neslazený čaj nebo vodu s ohledem na lékové interference všude tam, kde je to možné vysazení léků na dobu alespoň 12-24 hodin omezit větší fyzickou zátěž nepít alkohol (minimálně 14 hodin před odběrem). U vysoce citlivých analýz (např. CH 50) je nutno s naším pracovištěm dohodnout režim transportu tak, aby materiál dorazil do laboratoře co nejdříve. Vyšetření, které naše pracoviště neprovádí, bude zajištěno cestou odeslání materiálu do nejbližší vhodné laboratoře, případně do jiných specializovaných pracovišť Odběr venózní nesrážlivě krve: Pro vyšetření parametrů buněčné imunity se používá plná krev (cca 2-3 ml) odebraná do zkumavky s EDTA nebo s heparinem (zkumavky s fialovým či zeleným uzávěrem). Ihned po odběru je vhodné zkumavku několikrát mírně promíchat (pomalým obracením nebo kýváním), vzorek uchovávat při pokojové teplotě a dopravit do laboratoře v den odběru. Pro vyšetření fagocytózy je nutný odběr pouze do heparinu a vzorek dopravit co nejdříve do laboratoře Odběr venózní srážlivé krve: Většina vyšetření se provádí ze séra pacienta získaného sedimentací nebo centrifugací venózní srážlivé krve Vhodný je odběr do transportních zkumavek se separačním gelem, který zabrání vzniku hemolýzy Podle typu odběrové zkumavky se rozlišuje tzv. otevřený systém, kdy je proveden odběr do skleněné nebo umělohmotné zkumavky nebo bezpečnější a modernější tzv. uzavřený systém, kdy se odběr provádí do vakuové zkumavky. Uzavřené systémy pro odběr plné krve využívají vakuovanou zkumavku z plastu nebo ze skla, uzavřenou pryžovou zátkou. Celý systém je sterilní a je určen pro jednorázové použití. Pro sérum (příp.plazmu ) je nezbytné, aby byly odstředěny a odděleny od sraženého krevního koláče nebo krvinek co nejdříve Po oddělení séra od krevního koláče uschovat vzorek v lednici při 4-8 C. Vzorek je nutno dopravit do 24 hodin do laboratoře. Lze také zaslat vzorek ve formě séra separovaného po centrifugaci. Sérum je nutno uchovávat při 4 8 C a ihned transportovat do laboratoře do 12 hodin nebo zamrazit na -20 C a transportovat v zamr aženém stavu na suchém ledu. Množství odebírané krve záleží na počtu prováděných vyšetření. 10

Odběr moči: Jednorázový odběr ( nejlépe první nebo druhá ranní moč odebraná ze středního proudu ). 6.Speciální odběry Odběr krve na vyšetření ECP: Odebírání a zaslání vzorku zmraženého séra Krev se odebírá do vakuových zkumavek. Označí se čas odběru. Krev se nechá vysrážet podobu 60 minut při laboratorní teplotě (20 25 C). Centrifuguje se 10 minut při cca 3200 otáček (1000 1300 g) při laboratorní teplotě a sérum se oddělí od krvinek. Sérum se buď ihned odešle do laboratoře IMMUNIA při zachování teploty 2-8 C, nebo se zamrazí (-20 C) a zmražené se dopraví do laboratoře, kde se předá do pracovníkovi příjmu. Odebírání a zasílání vzorků krve Krev se odebírá do vakuových zkumavek. Označí se čas odběru a okamžitě se dopraví do laboratoře při zachování teploty transportu 20 25 C, tak aby d o 60 minut po odběru mohl být vzorek zpracován. Odběr ejakulátu: vzorek ejakulátu doručit do 2 hodin do laboratoře při teplotě blízké teplotě lidského těla. Odběr slin Před odběrem slin nejíst, nepít, nečistit si zuby a nekouřit Uchopit nádobku těsně pod zátkou a zátku odstranit (vnitřní pouzdro nechat v průhledné odběrové zkumavce) Vyjmout tampón a vložit do úst buď pod jazyk nebo pomalu žvýkat. Nechat tamponv ústech tak dlouho, dokud se nedostaví pocit potřeby vytvořené sliny polknout (přibližně 30 40sekund) Vložit tampon do vnitřního pouzdra a uzavřít zátkou Pokud nelze nádobku se slinami dopravit ihned do laboratoře, je potřeba uchovat ji v lednici, obsah však nesmí zmrznout 11

7.Množství a požadavky na odběr vzorků Humorální imunita Buněčná imunita Sérologie Sliny k vyšetření IgA Statim Reprodukční imunologie běžný odběr 4-8 ml krve v závislosti na množství požadavků odběr 2 ml nesrážlivé krve - Heparin (při odběru do K 3 EDTA nelze vyšetřit fagocytární funkce) současně nutno odebrat krevní obraz (ČKO + Le + Tr +dif) - 0,5-1,0 ml nesrážlivé krve do K 3 EDTA běžný odběr 2-6 ml krev v závislosti na množství požadavků odebírají se ráno, nalačno, před čistěním zubů u vyšetření prosíme uvést číslo telefonu, výsledek bude oznámen telefonicky Ejakulát Pro své zákazníky lékaře poskytuje laboratoř IMMUNIA odběrový materiál a žádanky na základě telefonického požadavku. je na ordinující pracoviště dodáván pracovníky svozové služby. 8.Transport vzorků (ID3) Doprava vzorků do laboratoře je zajišťována následujícími způsoby: vzorky dopravuje interní svozová služba (viz harmonogram svozu biolog. materiáu Z2) vzorky jsou doručovány externími svoznými linkami, se kterými mají smlouvu na tuto službu uzavřenu zákazníci (praktičtí lékaři) Podmínky transportu: transport musí být dostatečně rychlý při plánování času odběru pacienta je nutné počítat s rezervou pro dopravu a příjem vzorku na přijímající pracoviště při extrémních vnějších teplotách je nutné zajistit ochranu a transport vzorku v boxech zamezujících znehodnocení vzorku mrazem nebo horkem (chladicí vložka v létě, vytemperování boxu na laboratorní pokojovou teplotu v zimě), mráz může způsobit hemolýzu krevních vzorků, při vyšších teplotách dochází k inaktivaci enzymů vzorky biologického materiálu musí být transportovány v kolmé poloze, uzavřené a odběrová nádobka nesmí být zvenčí potřísněna biologickým materiálem, během transportu musí být odběrové nádoby umístěny v pevné a nepropustné nádobě nebo stojánku odděleně od žádanek při odběru srážlivé krve je vhodné, aby se krev srazila v místě odběru (cca 20 minut při pokojové teplotě), čímž se zabrání možné hemolýze vzorku při okamžitém transportu po odběru; pokud se srážlivá krev odstředí příliš brzy po odběru ještě před 12

vytvořením koagula, v oddělené plazmě se dodatečně sráží fibrin a vzniká gel krev nesmí být vystavena přímému světlu, vede to k odbourávání bilirubinu Pro transport biologického materiálu jsou používány přepravní boxy zamezující znehodnocení vzorků horkem nebo mrazem.(záznam Teplot v přepravním boxu Z5) 9.Příjem materiálu (ID3) Příjem vzorku krve (séra) pacienta (označený identifikačním štítkem se jménem pacienta a rodným číslem) s příslušnou průvodkou/žádankou řádně vyplněnou údaji: jméno a rodné číslo pacienta zdravotní pojišťovna Diagnóza údaje týkající se indikujícího lékaře jméno, adresa, IČZ a odbornost indikujícího lékaře datum a čas odběru vzorku požadovaná vyšetření případně kvalita analyzovaného vzorku (hemolytický, ikterický, chylózní). Kontrola všech údajů, jakékoliv neshody jsou ihned řešeny a zároveň zaznamenávány do knihy neshod-příjem. (Z3). Očíslování vzorku a žádanky pořadovým číslem (stejné číslo) pracovníkem příjmu a podpisem na rubu žádanky. Zadání veškerých údajů týkajících se vzorku do laboratorního informačního systému (LIRS) a současné vytisknutí štítku na označení vzorku. Vzorky, které nelze uchovávat (např. srážlivá krev) jsou po vyšetření likvidovány (viz Provozní řád ID25), ostatní uskladněny v mrazáku, příp. lednici ( Příloha č.1 ID 3). Vyšetření, které naše zařízení neprovádí jsou odesílána do spolupracujících laboratoří (viz ID 9). Před odesláním je proveden záznam do knihy odeslaných vzorků. (Z7) 10.Kritéria pro přijetí nebo odmítnutí vzorků Nekompletní dodávkou do laboratoře se rozumí neshoda týkající se dodaného vzorku nebo žádanky. Nekompletní dodávkou do laboratoře se rozumí neshoda týkající se dodaného vzorku nebo žádanky Podle obecných zásad strategie bezpečnosti práce s biologickým materiálem je nutné každý vzorek krve považovat za potencionálně infekční. Důvody pro odmítnutí biologického materiálu nebo požadavkového listu: 13 - žádanka nebo odběrová zkumavka znečištěná biologickým materiálem - žádanka s biologickým materiálem, na které chybí nebo jsou nečitelné základní identifikační údaje pacienta nebo indikujícího lékaře

- nedostatečně identifikovaná nebo neoznačená zkumavka s biologickým materiálem - biologický materiál bez žádanky - nádobka s biologickým materiálem, kde zjevně došlo k porušení doporučení o preanalytické fázi (chylosní nebo hemolytický materiál) Při nedostatečné identifikaci pacienta na žádance se materiál upraví pro skladování a uskladní s ohledem na požadované vyšetření a pracovník příjmu zažádá o doplňující informace a vyšetření se provede dodatečně. Není-li k dispozici údaj o odesílajícím pracovišti, žádanka i materiál se uchová 1 týden a potom se zlikviduje. Při nedostatečné identifikaci pacienta na biologickém materiálu se analýza neprovádí. Pokud je na žádance více požadavků z různých odběrových systémů: vyšetření z řádně označených zkumavek se provede; z neoznačených se vyšetření neprovádí, na žádnace se označí materiál nedodán a je proveden pracovníkem příjmu záznam do knihy neshodpříjmové Z3. Vedoucí laboratoře informuje indikujícího lékaře. 11.Skladování materiálu Sérum je dle metody ( Příloha PK kap. 5.4) uchováváno v chladničce při teplotě 2-8 C nebo v mrazáku při cca -20 C. Laboratoř uchovává séra označená H (Příloha č.1 ID3) po dobu 2 měsíců, poté je likviduje. Likvidace biologického materiálu se řídí provozním řádem společnosti IMMUNIA. Do této doby od příjmu séra lze opakovat vyšetření z původního materiálu. Poté je třeba k opakovanému vyšetření odeslat nové sérum. 12.Uvolňování výsledků Po vyšetření všech požadavků a kontrole a podpisu oprávněného pracovníka ( ID 12) se pošle protokol s výsledky lékaři, který toto vyšetření požadoval a žádanku uloží technický pracovník příjmu do archivu. V případě, že si to zadávající lékař přeje, jsou posílány i předběžné výsledky. Na výrazně patologické výsledky podle uvedeného seznamu upozorňujeme telefonicky bez ohledu na to, zda bylo vyšetření provedeno v pohotovostním nebo rutinním režimu: ASO > 400 IU/ml CRP > 20 mg/l ANCA: pozitivní 14

13.Seznam standardních operačních postupů (SOP) Pořadové číslo Přesný název postupu vyšetření / metody 1 Stanovení proteinů: IgG, IgM, IgA, C3, C4, C-reaktivní protein (CRP), alfa-1 antitrypsin (A1AT), ceruloplasmin (CPL),transferin (TRF), orosomukoid (OROSO), alfa 2- makroglobulin ((A2M) turbidimetrickou metodou 2 Stanovení IgG, IgM protilátek proti Herpes Simplex viru (HSV IgG, HSV IgM) metodou ELISA 3 Imunofenotypizace buněčných subpopulací CD3,CD4, CD8 na průtokovém cytometru 4 Stanovení celkového a specifického IgE (IgE, sige) chemiluminiscenční metodou 5 Stanovení autoprotilátek proti thyreoperoxidáze (atpo) a thyreoglobulinu (atg) chemiluminiscenční metodou 6 Stanovení autoprotilátek antinukleárních (ANA screen ), proti dvouvláknové DNA (ds- DNA), antimitochondriálních (AMA), proti hladkému svalu (ASMA), proti mikrosomům jater a ledvin (LKM), proti endomysiu (EMA IgA) metodou nepřímé imunofluorescence 7 Stanovení protilátek proti viru Epstein Barr ( EBV VCA IgG, EBV VCA IgM, EBV EBNA 1 IgG, EBV EA IgG) metodou ELISA 8 Stanovení protilátek proti Borelia species ( Borrelia IgG, Borrelia IgM) metodou ELISA 9 Stanovení protilátek proti Cytomegaloviru (CMV IgG, CMV IgM ) metodou ELISA Identifikace postupu vyšetření / metody SOP1 SOP 2 k vyšetření krev/ sérum krev/ sérum Akreditováno (Osvědčení o akreditaci pro zadrav. laboratoř č.) č.8071 č.8071 SOP 3 krev č.8071 SOP 4 SOP 5 SOP 6 SOP 7 SOP 8 SOP 9 krev/ sérum krev/ sérum krev/ sérum krev/ sérum krev/ sérum krev/ sérum č.8071 č.8071 č.8071 č.8071 č.8071 č.8071 15

14. Vyšetření (refer. meze, doba odezvy ) HUMORÁLNÍ IMUNITA 1) Základní vyšetření Imunoglobulin G IgG Doba odezyy do 2x ýdně turbidimetrie 1m 4m 2,50 7,50 g/l 4m 7m 1,80 8,00 g/l 7m 1r 3,00 10,00 g/l 1r 2r 3,50 10,00 g/l 2r 6r 5,00 13,00 g/l 6r 10r 6,00 13,00 g/l 10r 14r 7,00 14,00 g/l 14r 99r 7,00 16,00 g/l Imunoglobulin A IgA Doba odezyy do 2x týdně turbidimetrie 0m 1m 0,00 0,08 g/l 1m 4m 0,05 0,5 g/l 4m 7m 0,08 0,8 g/l 7m 1r 0,3 1,4 g/l 1r 3r 0,3 1,2 g/l 3r 6r 0,4 1,8 g/l 6r 10r 0,6 2,2 g/l 10r 14r 0,7 2,3 g/l 14r 99r 0,7 4,0 g/l 16

Imunoglobulin M IgM Doba odezyy do 2x týdně turbidimetrie 1m 4m 0,1 0,3 g/l 4m 7m 0,1 0,7 g/l 7m 1r 0,3 1,00 g/l 1r 3r 0,3 1,20 g/l 3r 6r 0,4 1,8 g/l 6r 10r 0,6 2,2 g/l 10r 14r 0,7 2,3 g/l 14r 99r 0,7 4,0 g/l Imunoglobulin E IgE 2x ýdně do měsíce chemiluminiscence 0m 1m 0,10 2,80 IU/ml 1m 3m 0,30 3,10 IU/ml 3m 6m 0,90 20,00 IU/ml 6m 1r 0,90 20,00 IU/ml 1r 2r 1,10 30,00 IU/ml 2r 4r 2,00 40,00 IU/ml 4r 7r 2,00 60,00 IU/ml 7r 9r 2,00 90,00 IU/ml 9r 16r 2,00 200,00 IU/ml 16r 100r 2,00 150,00 IU/ml 17

C3 složka komplementu C3 2x týdně turbidimetrie 0d 14r 0,83 1,64 g/l 14r 99r 0,83 1,8 g/l C4 složka komplementu C4 2x týdně turbidimetrie 0d 99r 0,10 0,40 g/l CH50 složka komplementu CH50 2x týdně turbidimetrie 0d 99r 23 56 U/ml C reaktivní protein CRP 2x týdně turbidimetrie 18

0d 99r 0,00 6,00 mg/l Cirkulující imunokomlex IK 2x týdně turbidimetrie 0d 99r 10,00 46,00 g/l Antinukleární protilátky - screening ANA-screen 2x týdně do 3 týdnů nepřímá imunofluorescence Hodnocení t1 t2 t3 t4 t5 negativní hraniční = nejistý výsledek, zopakujte při další kontrole slabě pozitivní pozitivní silně pozitivní Protilátky proti extrahovatelným nukleárním antigenům - screening ENA-screen 1x týdně ELISA Hodnocení-index pozitivty <1 negativní 1-1,2 hraniční = nejistý výsledek, zopakujte při další kontrole 19

>1,2 pozitivní Eozinofilní kationtový protein ECP 2xtýdně chemiluminiscence 0d 99r 0,00 24,00 ng/ml Specifické IgE sige 2x týdně do 3 týdnů chemiluminiscence Jednotlivé alergeny viz. požadavkový list pro specifické IgE. Hodnocení IU/ml <0,34 negativní 0,35 0,69 slabě pozitviní 0,7 17,4 pozitivní >17,5 silně pozitivní 2) Další proteiny Elektroforéza proteinů celková bílkovina ELFO Doba odezvy do 1x za 3týdny měsíce elektorforéza Název Sex Věk od - do DRM HRM Jedn. Celková bílkovina 0d 99r g/l Albumin 0d 99r 60 71 % Alpha 1 globulin 0d 99r 1,4 2,9 % 20

Alpha 2 globulin 0d 99r 7 11,0 % Beta globulin 0d 99r 8 13,0 % Gama globulin 0d 99r 9 16,0 % Paraprotein 0d 99r 0 0 % Imunofixace sérum PARA 1x za 3 týdny měsíce imunofixace Doporučení: současně vyšetřit poměr lehkých řetězců v séru (kappa/lambda) Vyšetření monoklonálních IgG, IgA, IgM, kappa, lambda, IgD, IgE Hodnocení: kvalitativní Imunofixace moč PARA-moč moč plast dle potřeby Doporučení: současně vyšetřit poměr lehkých řetězců v séru (kappa/lambda) Vyšetření monoklonálních IgG, IgA, IgM, kappa, lambda, IgD, IgE Hodnocení: kvalitativní Lehké řetězce (κ, λ) kapp, lamb 2x týdně turbidimetrie Stanovení lehkých řetězců kappa, lambda (g/l). Slouží pro výpočet poměru. Název Sex Věk od - do DRM HRM Jedn. 21

poměr kappa/lambda 0d 99r 1,20 2,80 3) Proteiny akutní fáze Alpha 1 - antitrypsin A1A 2x týdně turbidimetrie 0d 7d 0,90 2,20 g/l 7d 6m 0,80 1,80 g/l 6m 1r 1,10 2,00 g/l 1r 5r 1,10 2,00 g/l 5r 10r 1,10 2,30 g/l 10r 15r 1,10 2,00 g/l 15r 99r 0,90 2,00 g/l Ceruloplasmin lokální kód CPL 2x týdně turbidimetrie 0d 5m 0,05 0,29 g/l 5m 99r 0,20 0,60 g/l 22

Orosomukoid OROSO 2x týdně turbidimetrie 0d 99r 0,50 1,20 g/l Alpha 2 - makroglobulin A2M 2x týdně turbidimetrie 0d 5m 1,41 3,29 g/l 5m 99r 1,3 3,00 g/l Haptoglobin HAPT 2x týdně turbidimetrie 0d 99r 0,30 2,00 g/l Prealbumin PREA 23

2x týdně turbidimetrie 0d 99r 0,20 0,40 g/l Transferin TRF 2x týdně turbidimetrie 0d 99r 2,00 3,60 g/l 4) Potravinová intolerance Protilátky proti kravskému mléku ve třídě IgG, IgA KM 1x týdně měsíce ELISA Hodnocení: index pozitivity <0,9 negativní 0,9-1,1 hraniční >1,1 pozitivní 24

Protilátky proti gliadinu ve třídě IgG, IgA Glia Hodnocení: index pozitivtiy 1x týdně do měsíce ELISA <0,9 negativní 0,9-1,1 hraniční >1,1 pozitivní Protilátky proti endomysiu ve třídě IgA EMA 1x za 10 dní do 3 týdnů nepřímá IF Hodnocení t1 t2 t3 t4 t5 negativní hraniční = nejistý výsledek, zopakujte při další kontrole slabě pozitivní pozitivní silně pozitivní Protilátky proti tkáňové transglutamináze ve třídě IgA tta 1x týdně do 3 týdnů ELISA Název Sex Věk od - do DRM HRM Jedn. ttga - IgG 0d 99r < 1,2 IP ttga IgA 0d 99r < 8 U/ml 25

5) Autoprotilátky Antinukleární protilátky ve třídě IgG, IgA, IgM ΑΝΑ 1x za 10 dní měsíce NIF Název Sex Věk od - do DRM HRM Jedn. ANA IgG ANA IgA ANA IgM Hodnocení t1 Negativní t2 hraniční = nejistý výsledek, zopakujte při další kontrole t3 slabě pozitivní t4 Pozitivní t5 silně pozitivní Protilátky proti extrahovatelným nukleárním antigenům - typizace lokální kód tena 1x za 14 dní do měsíce ELISA Zjištění přítomnosti autoprotilátek ENA proti jednotlivým antigenům (Sm, SS-A, SS-B, Jo-1, Scl-70, RNP) metodou ELISA. Hodnocení: t1 t2 t3 t4 t5 Negativní hraniční = nejistý výsledek, zopakujte při další kontrole slabě pozitivní Pozitivní silně pozitivní 26

Protilátky proti extrahovatelným nukleárním antigenům Western blot lokální kód ENA - WB 1xza 3 týdny do měsíce WB Zjištění přítomnosti autoprotilátek ENA proti jednotlivým antigenům (SmB, SmD, RNP-70k, RNP-A, RNP-C, SSA/Ro52, SSA/Ro60, SSB/La, Cenp-B, Topo-I/Scl-70, Jo-I/HRS, Ribosomal P, Histones) metodou Western blot. Hodnocení: kvalitativní Protilátky proti dvouvláknové DNA lokální kód dsdna 1x týdně do měsíce NIF Hodnocení t1 t2 t3 t4 t5 negativní hraniční = nejistý výsledek, zopakujte při další kontrole slabě pozitivní pozitivní silně pozitivní Protilátky proti cytoplasmě neutrofilů - screening lokální kód ANCA- screen 1x týdně do měsíce NIF 27

0d 99r 0 0,5 Hodnocení t1 negativní t2 hraniční = nejistý výsledek, zopakujte při další kontrole t3 slabě pozitivní t4 pozitivní t5 silně pozitivní Antikardiolipinové protilátky - screening lokální kód ACLA- screen 1x týdně do měsíce ELISA Název Sex Věk od - do DRM HRM Jedn. ACLA IgG 0d 99r 0 10 U/ml ACLA IgM 0d 99r 0 10 U/ml Protilátky proti β-2-glykoproteinu I lokální kód B2-Gly 1x týdně do měsíce ELISA Název Sex Věk od - do DRM HRM Jedn. B2-Gly IgG 0d 99r 0 8 U/ml B2-Gly IgM 0d 99r 0 8 U/ml Protilátky proti hladkému svalu lokální kód SMA 1x týdně 28

do měsíce NIF Hodnocení t1 t2 t3 t4 t5 negativní hraniční = nejistý výsledek, zopakujte při další kontrole slabě pozitivní pozitivní silně pozitivní Antimitochondriální protilátky lokální kód AMA 1x týdně do měsíce NIF Hodnocení t1 t2 t3 t4 t5 negativní hraniční = nejistý výsledek, zopakujte při další kontrole slabě pozitivní pozitivní silně pozitivní Protilátky proti mikrozomům jater a ledvin lokální kód LKM 1x za 3 týdny do měsíce NIF Hodnocení t1 negativní 29

t2 t3 t4 t5 hraniční = nejistý výsledek, zopakujte při další kontrole slabě pozitivní pozitivní silně pozitivní Protilátky proti parietálním buňkám žaludku lokální kód GPCA 1x za 3 týdny do měsíce NIF Hodnocení t1 t2 t3 t4 t5 negativní hraniční = nejistý výsledek, zopakujte při další kontrole slabě pozitivní pozitivní silně pozitivní Protilátky proti bazální membráně glomerulů lokální kód GBM 1x za 3 týdny do měsíce NIF Hodnocení t1 t2 t3 t4 t5 negativní hraniční = nejistý výsledek, zopakujte při další kontrole slabě pozitivní pozitivní silně pozitivní 30

Protilátky proti příčně pruhovanému svalu lokální kód StMA 1x za 3 týdny do měsíce NIF Hodnocení t1 t2 t3 t4 t5 negativní hraniční = nejistý výsledek, zopakujte při další kontrole slabě pozitivní pozitivní silně pozitivní Revmatoidní faktor lokální kód RF LFT 2x týdně turbidimetrie 0d 99r 0 25 IU/ml Revmatoidní faktor ve třídách IgG, IgM, IgA lokální kód RF IgG,A,M 1x za 14 dní do měsíce ELISA 0d 99r <20 IU/ml ve všech třídách 31

Protilátky proti thyreoidální peroxidáze lokální kód TPO 2x týdně chemiluminiscence 0d 99r 0 35 IU/ml Protilátky proti thyreoglobulinu lokální kód TG 2x týdně chemiluminiscence 0d 99r 0 40 IU/ml 5) Speciální vyšetření C1 inhibitor lokální kód C1-i dle potřeby 0d 99r 0,12 0,35 g/l 32

C1 inhibitor funkční test lokální kód C1f dle potřeby 0d 99r >68 % Podtřídy IgG lokální kód Podtřídy IgG dle potřeby Název Sex Věk od - do DRM HRM Jedn. IgG1 0d 1m 2,4 10,8 g/l 1m 4m 1,8 6,7 g/l 4m 6m 1,8 7,0 g/l 6m 1r 1,90 7,9 g/l 1r 1r 6m 2,5 8,2 g/l 1r6m 2r 2,9 8,5 g/l 2r 3r 3,2 9,00 g/l 3r 4r 3,5 9,4 g/l 6r 9r 4,0 10,8 g/l 9r 12r 4,0 11,5 g/l 12r 18r 3,7 12,8 g/l 18r 99r 4,9 11,4 IgG2 0 1m 0,87 4,1 g/l 1m 4m 0,38 2,1 g/l 4m 6m 0,34 2,1 g/l 6m 1r 0,34 2,3 g/l 1r 1,6r 0,38 2,4 g/l 1,6r 2r 0,45 2,6 g/l 2r 3r 0,52 2,8 g/l 3r 4r 0,63 3,00 g/l 4r 6r 0,72 3,4 g/l 6r 9r 0,85 4,1 g/l 9r 12r 0,98 4,8 g/l 12r 18r 1,06 6,1 g/l 18r 99r 1,5 6,4 g/l IgG3 0d 1m 0,14 4,1 g/l 1m 4m 0,14 0,73 g/l 4m 6m 0,15 0,8 g/l 33

6m 1r 0,15 0,97 g/l 1r 1,6r 0,15 1,07 g/l 1,6r 2r 0,15 1,13 g/l 2r 3r 0,14 1,21 g/l 3r 4r 0,13 1,26 g/l 4r 6r 0,13 1,33 g/l 6r 9r 0,13 1,42 g/l 9r 12r 0,15 1,49 g/l 12r 18r 0,18 1,63 g/l 18r 99r 0,2 1,1 IgG4 0d 1m 0,04 0,56 g/l 1m 4m 0,01 0,36 g/l 4m 6m 0,01 0,23 g/l 6m 1r 0,01 0,43 g/l 1r 1,6r 0,01 0,62 g/l 1,6r 2r 0,01 0,79 g/l 2r 3r 0,01 1,06 g/l 3r 4r 0,01 1,27 g/l 4r 6r 0,01 1,58 g/l 6r 9r 0,01 1,89 g/l 9r 12r 0,03 2,1 g/l 12r 18r 0,04 2,3 g/l 18r 99r 0,08 1,4 g/l Sekreční imunoglobulin A lokální kód siga sliny dle potřeby turbidimetrie Sex Věk od - do DRM HRM Jedn. Pozn. 0r 2r 0,15 0,50 g/l 2r 6r 0,20 0,70 g/l 6r 99r 0,30 0,90 g/l BUNĚČNÁ IMUNITA 1) Běžné vyšetření 34

Základní CD znaky T a B lymfocytů lokální kód Tly / Bly nesrážlivá krev denně Název Sex Věk od - do DRM HRM Jedn. Tly CD3 - absolutní počet 0d 6r 1,5 2,7 *10 9 / l 6r 10r 1,3 2,2 *10 9 / l 10r 99r 1,3 1,7 *10 9 / l CD3 - % * 0d 6r 60 80 % 6r 99r 65 80 % CD4 - absolutní počet 0d 6r 0,8 2,0 *10 9 / l 6r 10r 0,8 1,7 *10 9 / l 10r 99r 0,8 1,2 *10 9 / l CD4 - % * 0d 6r 35 65 % 6r 10r 35 65 % 10r 99r 35 60 % CD3/Dr - absolutní počet 0d 99r 0,1 0,7 *10 9 / l CD3/Dr - % 0d 2m 15 23 % 2m 2r 19 31 % 2r 5r 19 28 % 5r 15r 12 22 % 15r 99r 5 15 % CD8 - absolutní počet 0d 99r 0,4 0,7 *10 9 / l CD8 - % * 0d 6r 10 30 % 6r 10r 15 30 % 10r 99r 15 35 % Poměr CD4 / CD8 0d 99r 1,6 2,4 Bly CD20 - absolutní počet 0d 2m 0,5 1,5 *10 9 / l 2r 5r 0,7 1,3 *10 9 / l 5r 15r 0,3 0,6 *10 9 / l 15r 99r 0,1 0,6 *10 9 / l CD20 - % 0d 2m 15 23 % 2m 2r 19 31 % 2r 5r 19 28 % 5r 15r 12 22 % 15r 99r 5 15 % 35

HLA B27 lokální kód HLA B27 nesrážlivá krev denně Název Sex Věk od - do DRM HRM Jedn. 0d 99r Fagocytóza lokální kód Fag nesrážlivá krev denně Název Sex Věk od - do DRM HRM Jedn. Fag - absolutní počet 0d 99r > 1,9 *10 9 / l Fag - % 0d 5r 50 90 % 5r 99r 65 90 % Metabolické vzplanutí lokální kód NBT nesrážlivá krev denně Název Sex Věk od - do DRM HRM Jedn. NBT nestimulované 0d 99r 0 5 % NBT stimulované PMA 0d 99r 75 95 % 36

Stimulační index NBT 0d 99r 30 Myeloperoxidáza lokální kód MPO nesrážlivá krev dle potřeby Vyšetření přítomnosti MPO v granulocytech. Hodnocení: kvalitativní 2) Blastické transformace Odběry (v heparinu) pouze v pondělí. Blastické transformace lokální kód Bl.tr. nesrážlivá krev 1x týdně Název Sex Věk od - do DRM HRM Jedn. SPON 0d 99r 0 6 % PHA 0d 99r 50 68 % ConA 0d 99r 18 38 % PWM 0d 99r 11 21 % 3) Aktivace basofilů Seznam alergenů shodný s alergeny používanými na kožní testy. 37

Aktivace basofilů (CD203c/CD63) lokální kód Baso nesrážlivá krev denně Název Sex Věk od - do DRM HRM Jedn. Bez stimulace 0d 99r 0 15 % Stimul anti IgE 0d 99r 0 15 % Stimul alergenem 0d 99r 0 15 % KREVNÍ OBRAZ Krevní obraz lokální kód KO nesrážlivá krev denně Název Sex Věk od - do DRM HRM Jedn. Erytrocyty 0d 99r 3,5 6 *10 12 /l Hemoglobin 0d 6m 95 145 g/l 6m 6r 105 140 g/l 6r 12r 110 160 g/l Ž 12r 99r 120 160 g/l M 12r 99r 140 180 g/l Hematokrit 0d 99r 0,36 0,54 Střední objem ery 0d 99r 80 100 fl Hemoglobin ery 0d 99r 27 34 pg Střední koncentrace Hb 0d 99r 330 350 g/l Trombocyty 0d 99r 150 450 *10 9 /l Leukocyty 0d 6m 6 18 *10 9 /l 6m 5r 6 15 *10 9 /l 5r 12r 4,5 13,5 *10 9 /l 12r 99r 3,8 10 *10 9 /l Diferenciální rozpočet leukocytů lokální kód Dif nesrážlivá krev dle potřeby 38

Název Sex Věk od - do DRM HRM Jedn. Lymfocyty - % 0d 2m 35 47 % 2m 3m 45 78 % 3m 1r 45 79 % 1r 2r 44 72 % 2r 5r 38 64 % 5r 15r 36 43 % 16r 99r 25 45 % Lymfocyty absolutní počet 0d 7r >2 *10 9 /l 7r 99r >1,5 *10 9 /l Neutrofilní segmenty - % 0d 6r 0 0 % 6r 99r 40 75 % Neutrofilní segmenty absolutní počet 0d 6m 1,8 5,4 *10 9 /l 6m 6r 2,7 6,75 *10 9 /l 6r 12r 2,4 7,43 *10 9 /l 12r 99r 2,6 5,5 *10 9 /l Monocyty - % 0d 99r 0 13 % Monocyty absolutní počet 0d 99r 0 1,3 *10 9 /l Eosinofilní segmenty - % 0d 99r 0,5 8 % Eosinofilní segmenty absolutní počet 0d 99r 0 0,7 *10 9 /l Basofilní segmenty - % 0d 99r 0 2 % Basofilní segmenty absolutní počet 0d 99r 0 0 *10 9 /l Heterofilní protilátky lokální kód PB nesrážlivá krev dle potřeby do měsíce aglutinace Hodnocení: kvalitativní Antistreptolyzin O lokální kód ASLO 39 nesrážlivá krev 2x týdně turbidimetrie

0d 99r 0 200 IU/ml Některé serologické techniky hodnoceny IP: IP: <0,9 negativní 0,9-1,1 hraniční >1,1 pozitivní Lymská borrelióza ELISA ve třídě IgG, IgM lokální kód Bo nesrážlivá krev 1x 14 dní do měsíce ELISA Hodnocení: Název Bo IgG Bo IgM IP IP Lymská borrelióza WB ve třídě IgG, IgM lokální kód Bo-WB nesrážlivá krev 1x za 3 týdny měsíce WB Zjištění přítomnosti protilátek proti jednotlivým významným antigenům (p83, p39, p30, p29, p25, p21, p19) metodou Western blot. Hodnocení: kvalitativní EBV specifické protilátky lokální kód EBV nesrážlivá krev 1x za 14 dní do měsíce ELISA 40

Hodnocení 0,9-1,1 hraniční >1,1 pozitivní IP: <0,9 negativní Cytomegalovirus ve třídě IgG, IgM lokální kód CMV Hodnocení Název CMV IgG CMV IGM IP IP nesrážlivá krev 1x za 14 dní do měsíce ELISA Herpesvirus 1, 2 ELISA ve třídě IgG, IgM lokální kód HSV 1,2 : nesrážlivá krev : sklo nebo plast se sepraračním gelem : 1x za 14 dní : do měsíce : ELISA Hodnocení Název HSV 1,2 IgG HSV 1,2 IGM IP IP Herpesvirus 1, 2 WB ve třídě IgG, IgM lokální kód HSV 1,2 - WB : nesrážlivá krev : sklo nebo plast se sepraračním gelem : 1x za 3 týdny : do měsíce : WB Zjištění přítomnosti protilátek proti jednotlivým významným antigenům (gc1 pro HSV 1, gg2 pro HSV 2) metodou Western blot. Hodnocení: kvalitativní 41

4) REPRODUKČNÍ IMUNOLOGIE Protilátky proti spermiím v ejakulátu ve třídě IgG a IgA SPG / SPA ejakulát 1x týdně aglutinace Název Sex Věk od - do DRM HRM Jedn. ASA IgG (SPG) M 0d 99r < 10 % ASA IgM (SPA) M 0d 99r < 10 % Vitalita spermií VIT ejakulát 1 x týdně průtoková cytometrie M 0d 99r 70 100 % Počet spermií PS ejakulát 1 x týdně průtoková cytometrie Název Sex Věk od - do DRM HRM Jedn. POC M 0d 99r > 20 10 6 / ml 42

Počet leukocytů v ejakulátu (CD45) PL ejakulát 1x týdně průtoková cytometrie M 0d 99r < 5 % Kvalita akrozómu nativní / po permeabilizaci lokální kód H8N / H8P ejakulát 1x týdně průtoková cytometrie Název Sex Věk od - do DRM HRM Jedn. H8N M 0d 99r < 20 % H8P M 0d 99r 65 100 % 43