ThinPrep Pap test a Imaging system Iva Kinkorová Luňáčková XXII. Cytologický den Brno 2014
Boj proti Ca děložního hrdla 1. celoplošná vakcinace mladých děvčat 2. organizovaný skríning (adresné výzvy) Kvalita diagnostických postupů!
Pap test - skríning karcinomu děložního hrdla George Papanicolaou 1883-1962 1943 - Diagnosis of uterine cancer by the vaginal smear 1954 - Atlas of Exfoliative Cytology
Konvenční Pap stěr odběr - fixace - barvení - odečet pod mikroskopem
LIQUID BASED CYTOLOGY Odběr cytologie do tekutého média Cytologie v tenké vrstvě
LBC - odběr do tekutého média ThinPrep Imaging system SurePath FocalPoint procesor CellPrep Plus NovaPrep Turbitec
1996 - ThinPrep Pap Test 2003 - ThinPrep Imaging systém FDA certifikace (>170 studií) bezpečný test unikátní mezi ostatními LBC signifikantně více efektivní jediný test s prokázanou detekcí žlazových lézí Imager 2003 ASC-US+ sensitivity HSIL specifity
Nový způsob získání materiálu broom, brush, plastová spatule přenos do tekutého média NE! dřevěná spatula
Fixační roztok - PreservCyt okamžitá a dokonalá fixace bb. odstraní hlen a krev lépe viditelné kontury jaderné membrány přehledná struktura chromatinu Zlepšení kvality preparátů dokonalá fixace buněk rovnoměrná distribuce bb. bb. v tenké vrstvě, bez překrývání méně artefaktů
Redukce obtížně hodnotitelných stěrů Konvenční stěr ThinPrep Pap test
Redukce prokrvácených stěrů
Buněčnost na skle - C až 250 000 bb. LBC 60-75 000 bb.
Zbytkový buněčný materiál Nové možnosti 1 odběr = více vyšetření 6 týdnů HPV test ( ASCUS 30 let, LSIL postmenopauzálně, kontrola po LEEP, vyřazení z dispenzarizace ) ( DNA Hybrid capture II, mrna Aptima HPV Assay ) Imunohistochemie - p16/ki67 metylace TSG - PreCursor M kit, (triage HR HPV+) Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorhoe - PCR
Cytoimunohistochemie p16/ki 67 - duální barvení Kombinace průkazu HR HPV inf. + proliferační marker Pozitivní nález - vyšší riziko léze CIN2+ Triage pro ASCUS/LSIL
Výhody LBC vyšší záchytnost suspektních bb. snížení počtu neuspokojivých stěrů doplňková vyšetření větší množství bb. do laboratoře bb. v tenké vrstvě bez překrývání čisté pozadí, přehlednost
Imager - počítačová analýza obrazu (automatický skríning) abnormální bb. - větší jádra, extra kopie DNA - vyhledá největší a nejtmavší objekty analyzuje objekty digitální optickou denzitometrií nevyhodnocuje lidským přístupem ( barva, tvar, N/C poměr ) NEUMÍ INTERPRETOVAT!
Imager s vloženými skly v kazetách k označení suspektních míst Automatický mikroskop s rychlou navigací pomocí elektronických souřadnic sklo LBC Značky pro automatický mikroskop Čárový kód Buněčný terčík 120 ZP
ThinPrep Imaging System označí 22 zorných polí pro cytotechnology automatický mikroskop Dvojitý skríning
Vybraná zorná pole suspektní bb. uspokojivý x neuspokojivý odběr endocervikální komponenta mikroorganismy infekční agens
Automatický mikroskop standardní optika program uživatelských preferencí - směr skríningu - rychlost - Autoscan mode - rychlá navigace elektronické značky
Překryv zorných polí - Autoscan Řízený pohyb mikroskopu zaručuje shlédnutí 100 % buněk Překryv - min 30 %, med 40%, max 50 %
Fyzické odlišnosti Manuální skríning - pohyb skla s minimálním pohybem očí FOV skríning - vyžaduje pohyb očí v celém rozsahu pole
Imager všechny preparáty Pracovní schéma dvojitý skríning identifikace 22 ZP Cytotechnolog Automatický mikroskop 22 zorných polí Suspektní nebo abnormální skla Normální nález Cytotechnolog AutoScan Archiv Patolog Definitivní klasifikace
Výhody ThinPrep Imaging systému označení suspektních míst další detekce susp. bb. ( x manuální skríning) vyšší senzitivita a specifita 22 zorných polí ( udržení pozornosti, přesnosti, produktivita )
Miller et al.2007: Improved LSIL and HSIL detection with the ThinPrep Imaging system 82,063 manuálně vs. 84,473 Imager stabilní populace beze změn v průběhu studie statisticky signifikantní detekce s Imagerem HSIL o 42 %, LSIL o 37,6 % bioptické verifikace - nárůst není důsledkem falešně pozitivních dg. 50 % redukce falešně negativní frakce ( LSIL + )
Imager - označí suspektní místa HSIL
Limitace konvenčního stěru = falešně negativní výsledky možné chyby odběr/zpracování vzorku vlastní skríning
Příčiny falešně negativních výsledků ( FNV ) Chyby při odběru / zpracování - 2/3 FNV bb. nejsou sebrány na odběrový nástroj bb. nejsou přeneseny na sklíčko bb. nejsou dostatečně uchovány ThinPrep Pap test
Příčiny falešně negativních výsledků ( FNV ) Chyby při skríningu - 1/3 FNV vyhledávání - atypické bb. přítomny, ale nenalezeny interpretace - bb. nejsou správně zhodnoceny ThinPrep Imaging systém
ThinPrep Pap test s Imaging systémem Akreditovaná metoda ČIA dle ČSN EN ISO 15 189 1.9. 2011-26.10. 2014 90 589 vyš.
HR HPV test z LBC (1.1.2013-31.12.2013) celkem 2913 x 1113 x pozitivní ( 38,21% ) současně x dodatečně
Bez endocervikálních bb. CL - 5,3 % C - 6,1 %
Srovnání závěrů u vyšetření typu CL a C 2013 100,00% 95,01% 90,00% 83,70% 80,00% 70,00% 60,00% 50,00% 40,00% C CL 30,00% 20,00% 10,00% 7,53% 0,00% Bez neopl. intraepit. změn a malignit 1,54% LSIL (včetně HPV) 0,22% H SIL 1,68%
Srovnání závěrů u vyšetření typu CL a C 2013 6,00% 5,00% 4,90% 4,00% 3,00% 2,51% C CL 2,00% 1,72% 1,00% 0,00% 0,39% 0,17% 0,21% ASC-US ASC-H (nelze vyloučit HSIL) Atypie žláz. buněk (nespecifikovány)
Popis zadání porovnání cytologických závěrů konvenční cytologie (C) a ThinPrep Pap testu s Imaging systémem (LBC) stanovených před histologickou diagnózou CIN III / HSILv konizátu děložního hrdla sledované období 1.9.2011-1.9.2013 (2 roky) počet CIN III v konizátu v databázi Bioptické laboratoře s předchozí cytologií na stejném pracovišti - LBC celkem 404 x a C celkem 1022 x závěry cytologických vyšetření dle kategorií Bethesda systému 2001 seřazeny do 2 tabulek samostatně pro LBC a konvenční C s udáním celkového počtu a percentuálního vyjádření zastoupení jednotlivých cytologických závěrů
Srovnání cytologických závěrů LBC a C před histologicky verifikovanou CIN III / HSIL v konizátu děložního hrdla Závěr LBC Počet % Závěr C Počet % NILM 3 0,74% NILM 60 5,87% ASCUS 6 1,49% ASCUS 115 11,25% ASC - H 57 14,11% ASC - H 256 25,05% LSIL 82 20,30% LSIL 187 18,30% HSIL 233 57,67% HSIL 362 35,42% HSIL invaze? 5 1,24% HSIL invaze? 8 0,78% karcinom 0 0,00% karcinom 1 0,10% AGUS - NOS 8 1,98% AGUS - NOS 28 2,74% AGUS - NEO 6 1,49% AGUS - NEO 4 0,39% Jiné 3 0,74% Jiné 1 0,10% Počet CIN III 404 100,00% Počet CIN III 1022 100,00%
Výsledky závěr cytologie HSIL před dg. CIN III v konizátech byl stanoven u LBC v 57,67% oproti konvenční C v 35,42% případů jedná se o statisticky významný rozdíl s p-hodnotou <0,0001 dle Chí-kvadrát testu závěr cytologie s doporučením histologického ověření byl u LBC v 60,4% oproti konvenční C v 36,69% případů klinicky nevýznamné závěry typu NILM a ASCUS u LBC tvořily < 3 %, u konvenční C tvořily 17% prokázali jsme vyšší senzitivitu i specifitu LBC Thinprep Pap test s počítačovou analýzou Imaging system pro detekci HG léze děložního hrdla typu CIN III oproti konvenční cytologii C www.biopticka.cz www.gynekolog.cz
Statistika shody současně odebrané konvenční C a LBC, kde LBC závěr HSIL s následně ověřenou diagnózou D06.9 Závěr cytologie Počet % NILM 1 2,86% ASCUS 3 8,57% ASC - H 7 20,00% LSIL 3 8,57% HSIL 20 57,14% AGUS - NOS 1 2,86% Celkový počet 35 100,00%
Konvenční stěr x ThinPrep Pap test
Zlepšení sensitivity vyšetření konvenční cytologie 60-70 % ThinPrep Pap test až 90 %
www.gynekolog.cz
Stanovisko Společnosti českých patologů ČLS JEP k otázce cervikální cytologie z tekutého média (Liquid Based Cytology LBC) ve vztahu k Národnímu programu screeningu cervikálního karcinomu Cytologie z tekutého média (LBC) představuje alternativu ke klasickému vyšetření nátěru z cervikálních buněk označovanému v mezinárodním písemnictví včetně normativního CP (conventional preparation). Česká společnost patologů se domnívá, že: vyšetření LBC představuje v individuálním případě rovnocennou alternativu k CP pro zjištění přednádorového stavu na děložním hrdle nabízí navíc v indikovaných případech možnost dalších vyšetření, zejména testu na přítomnost vysoce rizikových virů bez nutnosti další návštěvy gynekologa s ohledem na probíhající Národní program screeningu cervikálního karcinomu, jehož finanční krytí je zajištěno v úrovni CP, považuje SČP ČLS JEP za zásadní, aby pacientkám byla vždy nabídnuta v rámci programu bezplatně možnost vyšetření metodou CP, LBC jako alternativa v kategorii nadstandardu s úhradou. V zájmu Národního screeningového programu musí laboratoře vyšetřující metodou LBC zajistit ve spolupráci s centrem sběru a analýzy dat, aby byla tato vyšetření adekvátně do programu hlášena.
Dotazy?