LBC DALŠÍ DIMENZE CYTOLOGIE. Líšková Daniela, Rýcová Andrea Dis., PATOLOGIE NOVÝ JIČÍN

Transkript

1 Líšková Daniela, Rýcová Andrea Dis., PATOLOGIE NOVÝ JIČÍN

2 - ROBERT HOOKE ( 1665, primitvní mikroskop ) - ANTONI van LEEUWENHOEK ( svět mikroorganizmů ) - JAN EVANGELISTA PURKYNĚ ( první popis jádra živočišně buňky, 1825 ) - MULLER ( 1838, popsal nádorové bujení a rozlišil sarkom a karcinom ) - MATTHIAS SCHLEIDEN a THEODOR SCHWANN ( buněčná teorie ) - VILÉM DUŠAN LAMBL ( 1846, našel nádorové buňky při vyšetření moči ) - R. VIRCHOW ( 1855, významný bod: OMNIS CELLULA E CELLULA BUŇKY VZNIKAJÍ JEN Z BUNĚK ) - G. N. PAPANICOLAOU OTEC KLINICKÉ CYTODIAGNOSTIKY p. George N. Papanicolaou

3 PAP TEST - prevence rakoviny čípku děložního - nejrozšířenější screeningové vyšetření na světě - každoročně ho podstoupí pouze 1/3 žen - LBC nejrozšířenější v gynekologii

4 Co by jsme mohli tmto významným pánům nabídnout, pokud by jsme jim pod objektiv vložili LBC preparát? p. George N. Papanicolaou

5 KONVENČNÍ CYTOLOGIE - příjem do laboratorního systému, objednání preparátů a barvení

6 KONVENČNÍ CYTOLOGIE barvení HEMATOXYLIN EOSIN (HE) 96% ALKOHOL 10 min oplach 70% ALKOHOL oplach destil.voda KOĎOUSKŮV HEMATOXYLIN 5-10min oplach destil.voda a modrání v tekoucí vodě 10 min EOSIN 3 min oplach destil.voda odvodnit, projasnit, zamontovat GIEMSA- cytologická (G-c) 1. 96% ALKOHOL 10 min 2. GIEMSA min 3. oplach pramenitou vodou, skla nechat uschnout 5. projasnit, zamontovat Příprava roztoku GIEMSY: 200ml destil.vody + 14ml GIEMSA ROMANOWSKI + 1 kapku 1% UHLIČITAN SODNÝ + 3 kapky 1% NEUTRÁLNÍ ČERVEŇ PAS 96% ALKOHOL 10 min oplach 70% ALKOHOL oplach destil.voda 1% KYSELINA PERJODOVÁ 10 min oplach destil.vodou SCHIFFOVO REAGENS min promývat vodovodní vodou oplach destil.vodou HARRISŮV HEMATOXYLIN oplach destil.vodou diferencovat kyselým alkoholem modrání ve vodovodní vodě odvodnit, projasnit, zamontovat 20 min 5 min 10 min

7 CYTOSPIN ( HE-C ) KONVENČNÍ CYTOLOGIE makro/mikro obraz NÁTĚR ( HE-C )

8 ThinPrep system SurePath system

9 Metoda LBC využívá dva systémy: SurePath - systém využívá pro zhotovení preparátu promíchávání, ředění na určitou hustotu, centrifugací a sedimentací. ThinPrep - systém využívá nasávaní a fltraci řízeným tlakem přes fltr na podložní sklíčko.

10 Výhody LBC - okamžitá fiace buněk bezprostředně po odběru archivace materiálu až 3 měsíce odstraněn hlen, příměsi krve buňky jsou rozprostřené v tenké vrstvě a soustředěny v jedné části podložního sklíčka jednoduché zhotovení dalšího preparátu, není nutné opakovat odběr u pacienta lepší záchyt buněk Nevýhody LBC - vyšetření není hrazené zdravotní pojišťovnou řidké LBC preparáty jsou těžce hodnottelné - v některých případech odstraněny příměsi, které jsou pro určité diagnózy specifcké

11 LBC procesor CELLPREP PLUS, BioDyne, Korea Systém ThinPrep Vlastní komerčně přednaplněné odběrové nádoby Každá odběrová nádobka má příslušný fltr 5 přednastavených programů + 1 CUSTOM Celý proces trvá 26 vteřin Proces zhotovení LBC preparátu je plně automatzován Elektrická klasifkace : Napět: 220V Frekvence: 50/60Hz Výkon: 700W

12 Modrá Cervical 20mm fltr 20ml cancer soluton Fialová Respiratory 20mm fltr 20ml respiratory tract soluton Žlutá FNA 13mm fltr 10ml FNA soluton Zelená Urine CSF 13mm fltr 10ml urine soluton

13 Respiratory vial + respiratory fltr Adhezivní podložní skla Cellprep s terčíkem

14 LBC procesor CELLPREP PLUS, BioDyne, Korea Filtr, vkládání do procesoru, zásobník 50ks fltrů Nanopolyesterový fltr v uzávěru vialky

15 Vial Filtr Slide cellprep Zpracování respiratory vial s příslušným fltrem: nasávaní roztoku probíhá pod tlakem 17 kpa

16

17 HE-C, 40i

18 Náter 7 Rozdíl v mikroskopickém obrazu Výrazné hemoragické pozadí

19 Rozdíl v mikroskopickém obrazu Cytospin 7, vytvořený z materiálu z LBC vialky Na pozadí růžové chomáče Cytoplazma je nejednoznačně ohraničená Větší počet jader bez cytoplazmy Tvar buněk je zachován, nepodléhají deformaci

20 Rozdíl v mikroskopickém obrazu LBC 7 Pozadí růžové chomáče Buňky jsou scvrklé Nevidíme zřetelnou cytoplazmu Jádra jsou přibarveny

21 Výhody LBC - okamžitá fiace buněk bezprostředně po odběru archivace materiálu až 3 měsíce odstraněn hlen, příměsi krve buňky jsou rozprostřené v tenké vrstvě a soustředěny v jedné části podložního sklíčka jednoduché zhotovení dalšího preparátu, není nutné opakovat odběr u pacienta lepší záchyt buněk Nevýhody LBC - vyšetření není hrazené zdravotní pojišťovnou řidké LBC preparáty jsou těžce hodnotitelné - v některých případech odstraněny příměsi, které jsou pro určité diagnózy specifcké

22 Záchyt buněk LBC 8 / C 784 / B Biopsie invazivní sqaumózní ( spinocelulární ) karcinom ( distální bronchus vpravo ) Hemoragické pozadí, suspektně maligní buňky zachyceny jenom v jednom preparátu

23 C 784, HE Záchyt buněk LBC 8 / C 784 / B Záplava silně atypických buněk Se zahuštěním jaderním chromatinem Jádra s výrazným jadérkem Buňky evidentně maligní

24 Vial : sangvinoletní tekutina Zhotoveno celkem 10 HE Hodnotitelné 8z10 Opakované zhotovení preparátů

25 LBC HE1 LBC HE6 Opakované zhotovení preparátů LBC HE2 LBC HE8 LBC 8 / C 784 / B LBC HE4 LBC HE9

26 Opakované zhotovení preparátů LBC 18 / C 841 C 841, HE Hemoragické pozadí Lymfocyty, polynukleáry Bronchiální cylindrické epitelie s řasinkami Maligní buňky nepřítomny

27 Opakované zhotovení preparátů LBC 18 / C 841 LBC 18, HE Buňky suspektní z malignity Jádra bez ostrých kontur Buňky s nukleoplazmatickým poměrem zvýšeným/ sníženým

28 HE1 Opakované zhotovení preparátů HE2 LBC 18 / C 841 Vial : bezbarvá tekutina Zhotoveno 2iHE ( zákl.) IHC profl selhal Úbytek buněk Materiál nepřítomen IHC NAPSIN A IHC Ki67 IHC CK7 Biopsie punkčních válečku z pravá plíce diagnostikován nízce diferencovaný plicní adenokarcinom G3

29 Výhody LBC - okamžitá fiace buněk bezprostředně po odběru archivace materiálu až 3 měsíce odstraněn hlen, příměsi krve buňky jsou rozprostřené v tenké vrstvě a soustředěny v jedné části podložního sklíčka jednoduché zhotovení dalšího preparátu, není nutné opakovat odběr u pacienta Nevýhody LBC - vyšetření není hrazené zdravotní pojišťovnou řidké LBC preparáty jsou těžce hodnotitelné - v některých případech odstraněny příměsi, které jsou pro určité diagnózy specifcké

30 Odstranění hlenu a příměsi krve LBC 14 / C 807 C 807 vs. LBC 14 ( centrální TU levé plíce ) Záplava erytrocytů a shluky nádorových buněk Nerozpoznatelné chomáče a mezi nimi shluky nádorových buněk Špinavé pozadí je většinou známkou výskytu nádoru.

31 Odstranění hlenu a příměsi krve Nátěr PAS LBC 8 / C 784 / B Špinavé pozadí je většinou známkou výskytu nádoru. Hemosiderin v tkáni známkou např. myioidních nádoru měkkých tkaní Poprašek pigmentů ( důkaz Fe ) hemosiderin známka krvácení Právě v LBC preparátu tento lyzován enzymy a nepřítomen

32 Souhrn NÁTĚR CYTOSPIN LBC ZÁCHYTNOST MENŠÍ STŘEDNÍ VYŠŠÍ TRANSFERACE BB TLAK NAHROMADĚNÝ SMRŠTĚNÝ POZADÍ STŘEDNÍ VYŠŠÍ ODHAD/0 ODHAD? MIKRO OBRAZ OPAKOVATELNOST

33 CYTOLOGICKÉ COMBO NÁTĚR + CYTOSPIN + LBC

34 Poděkování: Plicní oddělení nemocnice Nový Jičín Plicní oddělení Vítkovická nemocnice, Ostrava MUDr. Jiří Rychnovský MUDr. Petr Buzrla Kolektv patologie Děkuji za pozornosť