Kortizol, ACTH Olga Bálková Roche s.r.o., Diagnostics Division
ACTH: biochemie a fyziologie Hormon peptidové povahy, 39 AMK Produkován předním lalokem hypofýzy Cirkadiánní rytmus nejvyšší koncentrace v 8:00 hod., nejnižší kolem půlnoci Přímý vliv na produkci hormonů kůry nadledvin Sekrece ACTH řízena CRH hypothalamu Zdroj: Atlas fyziologie člověka, Grada, 2001
Řízení produkce hormonů kůry nadledvin Zdroj: Atlas fyziologie člověka, Grada, 2001
Důsledky a příznaky nadbytku kortikosteroidů Cushingův syndrom Cushingova choroba Zdroj: Atlas patofyziologie člověka, Grada, 2001
Důsledky a příznaky nedostatku kortikosteroidů Zdroj: Atlas patofyziologie člověka, Grada, 2001
Klinické využit ití stanovení kortizolu a ACTH Nemoc Kortizol ACTH Cushingova choroba vysoký vysoký (nádor hypofýzy produkující ACTH) Tumor nadledvin vysoký nízký Ektopická produkce ACTH vysoký vysoký (ACTH produkovaný tumorem mimo hypofýzu, obv. v plicích) Addisonova choroba nízký vysoký (poškození nadledvin) Hypopituitarizmy nízký nízký
Funkční testy osy hypothalamus hypofýza - nadledviny Funkční testy Testovaný parametr Cirkadiánní rytmus Cirkadiánní rytmus sekrece kortizolu. ACTH stimulační test Dexamethasonový supresivní test CRH test Reakce kůry nadledvin na sekreční podnět. Normální potlačení sekrece ACTH hypofýzou cestou negativní zpětné vazby při použití dexamenthasonu (2 nebo 8 mg /den). Zvýšení sekrece ACTH hypofýzou při stimulaci odpovídajícím releasing hormonem hypothalamu. Test inzulínem navozené hypoglykémie Stimulace osy hypothalamus-hypofýza-nadledviny stresem; normální reakce je dosaženo za podmínky, že všechny složky systému fungují fyziologicky. Metyraponový stimulační test Zvýšení sekrece ACTH hypofýzou snížením negativní zpětnovazebné kontroly kortizolu.
Elecsys ACTH ECLIA Krevní vzorek: 50 µl, K3-EDTA-plazma, předchlazené zkumavky TAT: 18 min. Funkční senzitivita: < 2,0 pg/ml (< 0,440 pmol/l) Analytická senzitivita: 1,0 pg/ml (0,220 pmol/) Rozmezí: 1,0-2000 pg/ml (0,220-440 pmol/l) nižší výskyt nutnosti ředění, rerunů, vysoká přesnost výsledků Reprodukovatelnost (CV): E2010: 1,8-5,4 %; E170 1,8-5,4 % Očekávané hodnoty: ranní koncentrace: 7,18-63,3 pg/ml odběr krve 7-10 hod.
Opakovatelnost a reprodukovatelnost Automatizovaný test, SWA platforma optimalizace nákladů laboratoře CV < 5 % spolehlivost výsledků Intra-Assay Precision (PreciControls + Plasma-Pools; n=21) Inter-Assay Precision (Controls + HS; n=10) 7 14 6 12 5 10 [CV%] 4 3 [CV%] 8 6 2 1 0 0 200 400 600 800 1000 1200 ACTH [pg/ml] 4 2 0 0,0 200,0 400,0 600,0 800,0 1000,0 1200,0 ACTH [pg/ml] PreciControl ACTH EDTA-Plasma Pool Spec 100-1000 pg/ml Spec > 1000 pg/ml Control EDTA-Plasma Specification Zdroj: Přístroj: Multicentrické hodnocení Elecsys ACTH MODULAR ANALYTICS <E>
Funkční senzitivita Elecsys ACTH < 2 pg/ml Lower concentration range 25 20 [CV%] 15 10 5 0 0 2 4 6 8 10 ACTH [pg/ml] ACTH Spec Potenziell (ACTH) Zdroj: Přístroj: Multicentrické hodnocení Elecsys ACTH MODULAR ANALYTICS <E>
Elecsys ACTH / E170: shodné výsledky měření Plot_MC 250 200 Elecsys ACTH _ Elecsys 2010 [pg/ml] 150 100 50 0 0 50 100 150 200 250 Elecsys ACTH _ E170 [pg/ml] Zdroj: Multicentrické hodnocení Elecsys ACTH
Elecsys ACTH ACTH: Nabídka a výhody Nabídka Automatizovaná metoda (pouze ROCHE a DPC) Plná konsolidace na vlastní platformě SWA - pouze ROCHE! Vysoká přesnost metody Nejširší rozmezí měření ROCHE: Kompletní endokrinologické menu ACTH a kortizol dostupné na jedné platformě Benefit zákazníka Efektivita nákladů není třeba provádět RIA, MTP Efektivní chod laboratoře, úspora nákladů Spolehlivost výsledků Nižší náklady na ředění vzorků a reruny, vysoká přesnost výsledků Efektivní chod laboratoře, úspora nákladů Spolehlivé a rychlé výsledky pro dif. dg. hypo/hyperkortizolismu z jedné zkumavky, bez potřeby dělení vzorků nebo tvorby aliquotů
Kortizol: biochemie a fyziologie Hormon kůry nadledvin (glukokortikoid), sekrece řízena CRH ACTH Transport v krvi ve vazbě na transkortin (cortisol-binding-globulin, CBG), receptory pro kortizol prakticky ve všech tkáních Cirkadiánní rytmus, max. v ranních hodinách Účinky: - glykémie, katabolismus bílkovin - vazokonstrikce, pozitivně inotropní efekt, zesílení účinku katecholaminů - potlačení zánětlivé a alergické reakce - zpomalení vylučování vody v ledvinách - ochrany žaludeční sliznice Klinické využití: dg. poruch funkce kůry nadledvin, poruch osy hypothalamus hypofýzy kůra nadledvin, dif. dg. hypo/hyperkortizolismu Biologický materiál: sérum, plazma, moč, sliny Stanovení volného kortizolu v séru/plazmě nákladné a náročné výhodnější stanovení v moči nebo slinách V moči: 24 hod. sběr, nutná extrakce kortizolu (přítomny i metabolity)
Kortizol ve slinách Neinvazivní a rychlý odběr biologického materiálu (výhodné u dětí) Spolehlivé výsledky měření (bez ohledu na slinotok, bez ohledu na koncentraci CBG) Možné opakované vyšetření pro dynamické sledování hladiny během dne, využitelné i pro funkční dg. testy Není nutná předúprava vzorku Metody měření volného kortizolu ve slinách: imunochemické metody Prokázána silná korelace výsledků mezi hladinou volného kortizolu ve slinách a v plazmě, bez ohledu na koncentrace CBG Požadované množství slin: 0,025-2 ml
Elecsys Kortizol ve slinách ECLIA Kortizol uvolněn z vazby na bílkoviny danazolem Opakovaně bylo prokázáno, že samostatné stanovení kortizolu ve slinách v nočních hodinách je v dg. Cushingova sy nadřazeno azeno stanovení volného kortizolu v moči. Stanovení kortizolu ve slinách v nočních hodinách je zvl. přínosné pro děti, psychiatrické pacienty a osoby, u kterých rozličné stresové faktory mohou ovlivnit kůru nadledvin a způsobit nárůst koncentrací adrenálních steroidů. (Zdroj: van Aken, 2003, Raff H, 2003, Groeschl M, 2003)
Elecsys Kortizol ve slinách Klinická studie: 27 zdravých dobrovolníků (11 mužů, 16 žen, 10-65 let, prům. věk 23 let), měření volného kortizolu ve slinách na přístroji Elecsys. 5 odběrů ranních vzorků během 2 týdnů, vzorky zmražena na -20 C, po 2 týdnech vzorky donešeny do laboratoře. Naměřené rozmezí: 6,4-39,1 nmol/ střední koncentrace: 12,7-28,8 nmol/l střední hodnota: 20,4 nmol/l, bez rozdílu pohlaví Analytická variabilita: 3,8 % intraindividuální variabilita: 6,3 % interindividuální variabilita: 20,5 % (sérový kortizol 20,9 %, resp. 45,6 %) Zdroj: Roche Data
Výsledky