QMS Kvalita v mikrobiologii 14. vydání Datum vydání: červen 2018

Transkript

1 Příjem a uchování Při příjmu vzorků zaznamenejte datum dodání a skladujte vzorek při chladničkové teplotě 2-8 C až do provedení analýzy. Vzorky by měly být analyzovány dle termínů uvedených na webové stránce Pokud není uvedeno jinak, dodané vzorky představují skutečný vzorek potraviny nebo mléčného produktu, který může, ale nemusí obsahovat cílový/é mikroorganismus/y v rozmezí inokulačních hladin. Mikroflóra pozadí může být přítomna. Analyzujte celý dodaný vzorek, nerozdělujte jej před ředěním, pokud tento postup není součástí instrukcí. Oživte vzorek dle instrukcí uvedených v bodech A-K, které jsou určeny pro daný vzorek: A B C D E F 21 G H 35 I 36 J 38 K 37 L 39 M 04 N 40 A (10g počet) 1. Připravte 90ml zřeďovacího roztoku, jak je stanoveno ve vaší metodě. 2. Přidejte 90ml k 10g vzorku. 3. Za aseptických podmínek pečlivě promíchejte vzorek. Poté je vzorek 5. Bezprostředně před provedením analýzy vzorek pečlivě protřepejte, následně proveďte analýzu cílového/ých mikroorganismu/ů svou běžně používanou laboratorní metodou. 6. Pro výpočet výsledku vezměte v úvahu počáteční faktor ředění. B (25g detekce) 1. Připravte 225ml vámi zvoleného obohaceného agaru. 2. Přidejte těchto 225ml k 25g vzorku. 3. Za aseptických podmínek zředěný vzorek pečlivě promíchejte. 5. Analyzujte cílový organismus/y za použití běžně používaných metod. qms@lgcgroup.com Web: Strana 1 ze 5

2 C (Lahvička + 10g matrice) 1. Připravte 90ml zřeďovacího roztoku, jak je stanoveno vaší metodou. 2. Z tohoto objemu odeberte 10ml a přidejte je do lahvičky, ze které jste za aseptických podmínek odstranili víčko a zátku. 3. Uzavřete zátkou a protřepejte do rozpuštění. 5. Resuscitujte matrici zbývajícím objemem zřeďovacího roztoku z bodu Po uplynutí doby 60 až 90 minut přidejte obsah lahvičky připravené v bodě 2 k matrici připravené v bodě 5, 2-3x lahvičku propláchněte, aby došlo k vymytí veškerého obsahu lahvičky. Vzorek je nyní 7. Bezprostředně před provedením analýzy vzorek pečlivě protřepejte, následně proveďte analýzu cílového/ých mikroorganismu/ů svou běžně používanou laboratorní metodou. 8. Pro výpočet výsledku vezměte v úvahu počáteční faktor ředění. D (Lahvička + 25g matrice) 1. Připravte 225ml vámi zvoleného obohacené agaru. 2. Z tohoto objemu odeberte 10ml přidejte je do lahvičky, ze které jste za aseptických podmínek odstranili víčko a zátku. 5. Resuscitujte matrici zbývajícím objemem zřeďovacího roztoku z bodu Po uplynutí doby 60 až 90 minut přidejte obsah lahvičky připravené v bodě 2 k matrici připravené v bodě 5, 2-3x lahvičku propláchněte, aby došlo k vymytí veškerého obsahu lahvičky. Zředěný vzorek promíchejte za přísně aseptických podmínek. 7. Analyzujte cílový/é mikroorganizmus/y za použití běžně používané laboratorní metody. E (Lahvička - Počet) 1. Připravte 10ml zřeďovacího roztoku, jak je stanoveno vaší metodou. 2. Asepticky odstraňte víčko a zátku a oživte lyofilizovaný vzorek přidáním 10 ml zřeďovacího roztoku připraveného v bodě 1. Vzorek je 5. Bezprostředně před prováděním analýzy vzorek pečlivě promíchejte a analyzujte cílový/é 6. Vzorek považujte za čistý vzorek, tzn. neberte při výpočtu výsledku v úvahu počáteční ředění. F (Lahvička - Detekce) 1. Připravte 225ml vámi zvoleného obohaceného agaru. 2. Asepticky odstraňte víčko a zátku z lahvičky a oživte lyofilizovaný vzorek 10ml obohaceného agaru. 4. Přidejte obsah lahvičky ke zbývajícímu obohacenému agaru, 2-3x promyjte, abyste zajistili, že došlo k rozpuštění veškerého lyofilizovaného vzorku. Za aseptických podmínek pečlivě promíchejte zředěný vzorek. qms@lgcgroup.com Web: Strana 2 ze 5

3 5. Nechte vzorek stát při pokojové teplotě minimálně 60 minut, ne však déle než 90 minut. 6. Analyzujte cílový/é organizmus/y běžně používanou laboratorní metodou. G (Lahvička ID) 1. Připravte 9ml zřeďovacího roztoku dle vaší metody. 2. Asepticky odstraňte víčko a zátku z lahvičky a oživte lyofilizovaný vzorek přidáním 9ml zřeďovacího roztoku z bodu 1. Vzorek je 5. Bezprostředně před prováděním analýzy vzorek pečlivě promíchejte. 6. Naneste na neselektivní média a inkubujte při mezofilní teplotě. 7. Použijte své mikrobiologické znalosti a dle mikrobiologických standardů identifikujte mikroorganismus ve vzorku. H (Teoretické cvičení) 1. Vzorek 35 je teoretické cvičení, ke kterému jsou instrukce přiloženy. I (2x lahvička + 2x 10g matrice) 1. Připravte 2 x 90ml zřeďovacího roztoku dle vaší metody a označte si lahvička písmeny A a B. 2. Z 90ml zřeďovacího roztoku označeného A, vezměte 10ml a přidejte je do lahvičky označené písmenem A, ze které jste asepticky odstranili víčko a zátku. 5. Oživte 10g matrici zbývajícím množstvím zřeďovacího roztoku připraveného v bodě Pečlivě za aseptických podmínek zředěný vzorek promíchejte. 7. Po minutách přidejte obsah lahviček připravený v bodě 2 k matrici připravené v bodě 5, 2-3x promyjte, abyste zajistili že došlo k rozpuštění veškerého lyofilizovaného vzorku z lahvičky. Vzorek je nyní 8. Bezprostředně před prováděním analýzy vzorek pečlivě promíchejte a analyzujte cílový/é 9. Opakujte dle bodu 2-8 stejný postup pro zřeďovací roztok a lahvičku označenou písmenem B a zbývající 10g matrici. 10. Při výpočtu výsledku počítejte s počátečním faktorem ředění. J (Lahvička + 2x 10g matrice) 1. Připravte 10ml zřeďovacího roztoku dle vaší metody. 2. Asepticky odstraňte víčko a zátku z lahvičky a oživte lyofilizovaný vzorek přidáním 10ml zřeďovacího roztoku z bodu Připravte dalších 90ml zřeďovacího roztoku dle vaší metody. 6. Přidejte těchto 90ml k jednomu z 10g vzorků. 7. Opakujte postup dle bodu 5 a 6 pro druhý 10g vzorek, pokud je potřeba. 8. Pečlivě za aseptických podmínek smíchejte zředěný vzorek. 9. Po minutách přidejte 1ml obsahu lahvičky, připraveného v bodě 2 ke každé matrici připravené v bodě 5-7. Vzorek je nyní qms@lgcgroup.com Web: Strana 3 ze 5

4 10. Bezprostředně před prováděním analýzy vzorek pečlivě promíchejte a analyzujte cílový/é 11. Při výpočtu výsledku počítejte s počátečním faktorem ředění. K (2x lahvička + 2x 100g matrice) 1. Rozdělte jednu ze 100g matric na 25g části. 2. Připravte 10ml vhodného sterilního zřeďovacího roztoku např. MRD. 3. Asepticky odstraňte víčko a zátku z lahvičky označené písmenem A a oživte lyofilizovaný vzorek přidáním 10ml zřeďovacího roztoku připraveného v bodě Uzavřete zátkou a třepejte do rozpuštění. 5. Nechte vzorek stát při pokojové teplotě minimálně 60 minut, ne však déle než 90 minut. 6. Připravte 225ml vámi zvoleného obohaceného agaru. 7. Přidejte 225ml obohaceného agaru k 25g připraveným v bodě Opakujte kroky 6 a 7 dle potřeby. 9. Pečlivě za aseptických podmínek smíchejte zředěný vzorek. 10. Po minutách přidejte 1ml obsahu lahvičky z bodu 3 k matrici připravené v bodu Analyzujte vzorek na cílový/é organizmus/y za použití běžné metody. 12. Opakujte krok 1-11 pro lahvičku označenou písmenem B a zbývající 100g matrici. L (10g vzorku) 1. Připravte 90ml zřeďovače dle vámi zvolené metody. 2. Přidejte 90ml k 10g vzorku. 3. Pečlivě za aseptických podmínek promíchejte zředěný vzorek. Vzorek je 5. Bezprostředně před analýzou vzorek řádně promíchejte a analyzujte na cílové organizmy běžně používanou laboratorní metodou. 6. Připravený vzorek považujte za čistý tekutý vzorek pro analýzu. M (Vzorek 4) 1. Rozhodněte, zda budete analyzovat 25g porci vzorku nebo 10g porci. 2. Pokud budete analyzovat vzorek jako 10g, asepticky odeberte 10g množství dodaného vzorku. 3. Připravte 225 ml nebo 90ml vámi zvoleného obohaceného agaru dle velikosti analyzovaného vzorku. 4. Přidejte buď 225 ml ke svému 25g vzorku nebo 90ml k 10g vzorku. 5. Pečlivě za aseptických podmínek zředěný vzorek promíchejte. 6. Nechte vzorek stát při pokojové teplotě 60 minut, ne však déle než 90 minut. 7. Analyzujte vzorek na cílové organizmy běžně používanou laboratorní metodou. N (vialka g matrice) 1. Připravte vhodný objem ke zvolenému obohacenému agaru. 2. Z tohoto objemu odeberte 10ml a přidejte ho k vialce, ze které jste za aseptických podmínek sňali vršek a gumovou zátku. 3. Uzavřete zátkou a protřepejte do rozpuštění. 5. Oživte matrici se zbývajícím množstvím objemu zřeďovače připraveného v bodu 1. qms@lgcgroup.com Web: Strana 4 ze 5

5 6. Po minutách přidejte obsah vialky připravený v bodu 2 k matrici připravené v bodu 5, promyjte 2 3x, abyste zajistilil, že veškerý lyofilizovaný materiál byl použit. Za aseptických podmínek zředěný materiál pečlivě promíchejte. 7. Analyzujte vzorek na cílové organizmy běžně používanou laboratorní metodou. Záznam výsledků Všechny výsledky by měly být zaslány prostřednictvím naší webové stránky PORTAL Najděte si, prosím, webovou stránku Přihlaste se Vaším laboratorním ID číslem, uživatelským jménem a heslem. Uživatelská příručka pro PORTAL je ke stažení v sekci Help. Neváhejte kontaktovat místní kancelář nebo náš tým, pokud budete potřebovat jakoukoliv Pomoc: LGC Standards: Tel , pl@lgcgroup.com Bezpečnost Mikrobiologické vzorky obsahují živé mikroorganismy a jsou dodávány za předpokladu, že objednávající má vyškolený a kvalifikovaný personál, který s nimi bude zacházet bezpečně. Vzorky mohou být otevřeny pouze kvalifikovaným personálem v laboratoři. Informace o bezpečném zacházení a likvidaci vzorků naleznete v listu bezpečnosti qms@lgcgroup.com Web: Strana 5 ze 5