Informace z 16. mezinárodní. My ANCA story. konference o vaskulitidách a ANCA. Ivo Lochman

Transkript

1 Informace z 16. mezinárodní My ANCA story konference o vaskulitidách a ANCA Ivo Lochman

2 Prof. Jo Bradwell, MD, Ph.D. Birmingham University & Binding Site Comp. Seminář Binding Site, Olomouc 1993 Wilfried Stoecker zakladatel firmy Euroimmun Wolfgang Schlumberger korunní princ firmy Euroimmun Ewald Müler-Kunert původní expert pro IIF firmy Euroimmun 1995 duben, veletrh Analytika, Mnichov, 1. kontakt s firmou Euroimmun 1996 vstup firmy Euroimmun na český trh prostřednictvím firmy Dynex Časomil, Praha prezentace firmy Euroimmun Časomil, Piešťany Doporučení SLI ČSAKI pro lab dg autoprotilátek

3 Doporučení pro laboratorní diagnostiku autoprotilátek závěry z pracovního semináře, Piešťany ANCA Referenční metodou pro diagnostiku ANCA protilátek zůstavá IF technika na ethanolem fixovaných lidských granulocytech. Pro správnou diagnostiku je kritická správná příprava substrátu. Na granulocytech lze rozeznat dva typy ANCA pozitivity - p- ANCA a c-anca. Oba typy mohou být asociovány s pozitivitou proti několika antigenům, p-anca nejčastěji s myeloperoxidázou (MPO) a c-anca s proteinázou 3 (PR-3). Jednotlivé ANCA lze potom detekovat a stanovovat jejich koncentrace pomocí ELISA. Ukazuje se však, že ani toto stanovení není dnes ještě zcela spolehlivé a soupravami různých výrobců můžeme dosáhnout různé výsledky. IF pozitivitu p-anca a c-anca je nutné vždy verifikovat ještě na jiných substrátech, zvláště jsou-li přítomny společně s ANA protilátkami (jde především o p-anca pozitivitu). Takovýmito substráty jsou formolemfixované lidské granulocyty (p-anca na ethanolem fixovaných granulocytech se mění na c-anca) a opičí játra, eventuelně i HEp-2 buňky. Kromě verifikace či vyloučení nálezu na ethanolem fixovaných granulocytech lze tak určit i jiné ANCA než MPO-ANCA a PR3- ANCA a GS-ANA (ANA specifické pro granulocyty). Podle doporučení EULAR by měly být tyto autoprotilátky vyšetřovány v ředění 1:20, některá pracoviště tvrdí, že až 1/3 pacientů může mít mimo stadium aktivního onemocnění titr c-anca protilátek nižší než 1:10 a doporučují vyšetřovat na c-anca séra neředěná nebo ředěná 1:3. Jako konjugát se používá polyvalentní konjugát anti-igg,a,m.

4 2001 Návštěva Serum Staten Institute, Kodaň. Allan Wiik: Jediné kvalitní granulocyty pro diagnostiku ANCA jsou ty, které si připravím sám th vasculitis & ANCA workshop, Praha - diskuse s A.Wiikem v kuloárech především o dg A-ANCA th Dresden Symposium on Autoantibodies námitka prof. Shoenfeldovi v kuloárech k jeho interpretaci P-ANCA. (Já nic, podklady od Alana Wiika) 2005 doporučení SLI ČSAKI pro dg ANCA v Alergii 7(1).

5 Alergie 2005; 7(1): 57-8, za výbor SLI ČSAKI V.Král, předseda výboru SLI ČSAKI Výtah vyvěšen na pokyny/

6 Alergie 2005; 7(1): 57-8

7 Laboratorní diagnostika ANCA - metodické doporučení SLI ČSAKI Vyšetření protilátek proti cytoplazmě neutrofilů se v posledních několika letech stalo součástí základních panelů autoprotilátek v imunologických laboratořích. Zkušenosti získané z diskusí na odborných fórech a v systému externí kontroly kvality SEKK vedly k rozhodnutí připravit metodické doporučení správného laboratorního diagnostického postupu. Doporučení připravil výbor Sekce laboratorní imunologie ČSAKI pod autorským vedením dr. Lochmana. Za recenzi textu a cenné připomínky výbor SLI děkuje prof. Bartůňkové. vyvěšeno

8

9

10 2001 Návštěva Serum Staten Institute, Kodaň. Allan Wiik: Jediné kvalitní granulocyty pro diagnostiku ANCA jsou ty, které si připravím sám th vasculitis & ANCA workshop, Praha - diskuse s A.Wiikem v kuloárech především o dg A-ANCA th Dresden Symposium on Autoantibodies námitka prof. Shoenfeldovi v kuloárech k jeho interpretaci P-ANCA. (Já nic, podklady od Alana Wiika) 2005 doporučení SLI ČSAKI pro dg ANCA v Alergii 7(1) th Int. Congress on Autoimmunity, Ljubljana - Prof. Shoenfeld slib, že z jeho laboratoře přednese někdo zásadní referát k dg ANCA. Nesplněno a výzva, napsat článek do Autoimmunity Rev.

11

12 2001 Návštěva Serum Staten Institute, Kodaň. Allan Wiik: Jediné kvalitní granulocyty pro diagnostiku ANCA jsou ty, které si připravím sám th vasculitis & ANCA workshop, Praha - diskuse s A.Wiikem v kuloárech především o dg A-ANCA th Dresden Symposium on Autoantibodies námitka prof. Shoenfeldovi v kuloárech k jeho interpretaci P-ANCA. (Já nic, podklady od Alana Wiika) 2005 doporučení SLI ČSAKI pro dg ANCA v Alergii 7(1) th Int. Congress on Autoimmunity, Ljubljana - Prof. Shoenfeld slib, že z jeho laboratoře přednese někdo zásadní referát k dg ANCA. Nesplněno a výzva, napsat článek do Autoimmunity Rev článek v Autoimmunity Rev., 11 th Dresden Symposium on Autoantibodies, konzultace navrhovaného schématu pro dg ANCA s A.Wiikem, R.L. Humbelem a M. Fritzlerem

13 Marvin Fritzler Alan Wiik René Luis Humbel University Calgary Statum Serum Institut, Kodaň Univ. Luxemboug

14 2001 Návštěva Serum Staten Institute, Kodaň. Allan Wiik: Jediné kvalitní granulocyty pro diagnostiku ANCA jsou ty, které si připravím sám th vasculitis & ANCA workshop, Praha - diskuse s A.Wiikem v kuloárech především o dg A-ANCA th Dresden Symposium on Autoantibodies námitka prof. Shoenfeldovi v kuloárech k jeho interpretaci P-ANCA. (Já nic, podklady od Alana Wiika) 2005 doporučení SLI ČSAKI pro dg ANCA v Alergii 7(1) th Int. Congress on Autoimmunity, Ljubljana - Prof. Shoenfeld slib, že z jeho laboratoře přednese někdo zásadní referát k dg ANCA. Nesplněno a výzva, napsat článek do Autoimmunity Rev článek v Autoimmunity Rev., 11 th Dresden Symposium on Autoantibodies, konzultace navrhovaného schématu pro dg ANCA s A.Wiikem, RL Humbelem a M. Fritzlerem 2012 článek Postup pro vyšetřování ANCA, Alergie 15(2), výzva k nasání článku do Frontiers in Immunology odkaz na mezinárodní skupinu a projednání na ANCA workshopu v dubnu 2013 v Paříži (N. Rasmussen)

15 Alergie 2012;14(2):147-8, vyvěšeno na (i anglická verze)

16 Alergie 2012;14(2):147-8

17 EUVAS group - a new consensus for ANCA detection X. Bossuyt, J.W. Cohen-Tervaert, E. Csernok, J. Damoiseaux, N. Rasmussen, M. Snyder Reply to Dr. Lochman ( ): 1. First of all, we fully agree with your point of view that the international consensus statement on testing and reporting on ANCA needs to be urgently revised. Currently, the aim of our EUVAS group is to improve and revise the international recommendations for ANCA. 2. Concerning the terminology: We had considerable discussion about the terms ANCA, GS-ANA and neutrophil specific autoantibodies (NSA) - at the ANCA Workshop in Cancun, It was the consensus that NSA and GS-ANA were not useful terms. The term ANCA described by IIF include all the relevant patterns that may be detected on ethanol-fixed granulocytes. There are three main patterns: C-, P- and A- ANCA. A positive ANCA pattern does not exclude concomitant ANA. 3. Requests for ANCA testing should enable distinction between a request for vasculitis/glomerulonephritis or other chronic inflammatory diseases (i.e.inflammatory bowel disease (IBD), autoimmune liver disease) (AILD) 4. The recommended screening assay for both disease groups is IIF on ethanol-fixed neutrophils. However, new developments in the detection of ANCA in vasculitis lead to novel strategies for ANCA screening. We are presently launching a project to establish a background for reappraisal of the international consensus for ANCA testing for diagnostic purpose. The evaluation of the obtained data would help us to prepare our meeting and to start the work to reach our goals. 5. We would like to organize an expert meeting at the next ANCA Workshop in Paris and to try to come to a new consensus on ANCA testing. Our issues only deal with vasculitis/glomerulonephritis and we would like to ask you if you would agree to participate and be ready to prepare a recommendation for the detection of ANCA in other inflammatory diseases. 6. Concerning Frontiers in Immunology : It could be an appropriate journal to publish the new recommendations and a consensus concerning the management of ANCA in other diseases than ANCA-associated vasculitis.

18 Savige J, Dimech W, Fritzler M, Gieken J, Hagen EC, Jennette Savige J, JC, Gillis McEvoy D, Benson R, Pusey E, Davies C, Pollock D, Esnault W, Trevisin V, Falk M, RJ, Wiik Hagen A, Wong EC, Jayne R. Addendum D, Jennette to International JC, Paspaliaris B, Consensus Pollock W, Pusey Statement C, Savage on testing CO, and Silvestrini reporting R, of van der antineutrophil Woude F, Wieslander cytoplasmic J, Wiik antibodies. A.: International Quality control guidelines, Consensus comments, Statement and on recommendations Testing and Reporting for testing of in Antineutrophil other immune Cytoplasmic diseases. Am Antibodies J Clin Pathol (ANCA 2003;120: ) Am J Clin Pathol Apr;111(4):

19 Náměty Alana Wiika : byste nám 1. Na sklíčka s EtOH-GR zařadit také lymfocyty (rozlišení ANCA a ANA) a po screeningu na těchto sklíčcích přejít hned na typizaci pomocí ELISA, blotu nebo ALBIA. 2. Nepoužívat termín A-ANCA 3. Jak ale připravit, rozlišit a definovat antigeny nabízené IS ve formě NETs? 4. Nesměšovat IIF terminologii (P-ANCA a C-ANCA) s terminologií názvu autoab v ostatních imunoanalytických technikách (anti-pr3, anti-mpo atd.)

20 2001 Návštěva Serum Staten Institute, Kodaň. Allan Wiik: Jediné kvalitní granulocyty pro diagnostiku ANCA jsou ty, které si připravím sám th vasculitis & ANCA workshop, Praha - diskuse s A.Wiikem v kuloárech především o dg A-ANCA th Dresden Symposium on Autoantibodies námitka prof. Shoenfeldovi v kuloárech k jeho interpretaci P-ANCA. (Já nic, podklady od Alana Wiika) 2005 doporučení SLI ČSAKI pro dg ANCA v Alergii 7(1) th Int. Congress on Autoimmunity, Ljubljana - Prof. Shoenfeld slib, že z jeho laboratoře přednese někdo zásadní referát k dg ANCA. Nesplněno a výzva, napsat článek do Autoimmunity Rev článek v Autoimmunity Rev., 11 th Dresden Symposium on Autoantibodies, konzultace navrhovaného schématu pro dg ANCA s A.Wiikem, RL Humbelem a M. Fritzlerem 2012 článek Postup pro vyšetřování ANCA, Alergie 15(2), výzva k nasání článku do Frontiers in Immunology odkaz na mezinárodní skupinu a projednání na ANCA workshopu v dubnu 2013 v Paříži (N. Rasmussen)

21

22 International vasculitis & ANCA workshops Copenhagen (A. Wiik, N. Rasmussen) Noordwijkerhout (F. van der Woulde, C. Kallenberg) Washington, DC (C. Jennette, R. Falk) Lübeck (W. Gross) Cambridge (M. Lockwood, C. Pussey) Paris (P. Lesavre, L.H. Noel) Rochester (R. DeReeme) Birmingham (P. Bacon) Groningen (C. Kallenberg, JW Cohen Tervaert) Cleveland (G. Hoffman, L. Calabrese) Prague (V. Tesař, J. Bartůňková) Heidelberg (K. Andrassy) Cancun (L. F. Flores-Suarez) Lund-Copenhagen (M.Segelmark, N. Rasmussen) Chapel Hill (R. Falk, C. Jennette) Paris (L. Guillevine) London (C. Kallenberg)

23 Loic Guilervin President of 16th International Vasculitis & ANCA Workshop cca 1000 účastníků plenární bloky vždy na zahájení dopoledne a odpoledne, pak 3-4 paralelní tématické bloky 52 Institut přehledných des Cordeliers, sdělení Paris 68 krátkých sdělení 231 nástěnkových sdělení 3 multicentrické studie (Rituximab USA, VB, Francie)

24

25 Results of ANCA testing in the DIA of IPH in Ostrava during years From the poster on 16 th International vasculitis & ANCA workshop in Paris, Apr 14-16, 2013

26 Terminologie: ANCA - Antineutrophil cytoplasmatic autoantibodies AAV ANCA associated vasculitis Klasifikace AAV: MPA microscopic polyangitis GPA granulomatosis with polyangitis (Wegener s) EGPA eosinophilc granulomatosis with polyangitis (Churg-Strauss) renal limited vasculitis projevuje se jako glomerulonefritída nerozlišitelná od glomerulonefridídy u MPA, GPA a EGPA Laboratorní diagnostika AAV: Směřuje ke stanovování protilátek s jasně definovanými Ag. Zatím PR3 a MPO. Léčba: Individualaizovaná, kombinace biologické léčby a klasických imunosupresiv

27 J. Charles Jennette, Ronald J. Falk: Pathogenesis of ANCA-associated vasculitis: Observations, theories and speculations. L1 on 16 th vasculitis & ANCA workshop, Paris, 2016 Stejně jako u mnoha dalších autoimunitních onemocnění jsou etiologie a patogeneze AAV multifaktoriální a zahrnují jak vyvolávající, tak predispoziční genetické faktory a vlivy prostředí, ztrátu imunologické tolerance a způsob řešení akutního poškození daným jedincem. Z toho také plyne, že i léčba AAV musí být rozmanitá a řídit se patogezou daného onemocnění a stádiem nemoci. - Patologická autoimunitní reakce může být tlumena nebo přesměrovávána imunomodulační léčbou (anti-b lymfocytární terapie, adoptivní přenos Treg) - akutní nekrotizující poškozování může být snižováno protizánětlivou léčbou (tj. kortikoidy a inhibice komplementu) - chronická odpověď na poškození může být potlačována anti-fibrotickou léčbou (inhibitory angiotenzinkonvertázy)

28 RJ Falk, ME Free, DJ Ciavatta: How antigens influence the disease. An immunologist point of view. L12 on 16 th Int. Vasculitis & ANCA workshop, Paris, 2013 Pacienti s anti-mpo a s anti-pr3 se liší. Relapsy u pacientů s anti-pr3 jsou častější, pacienti s anti-mpo mají delší klidová stadia nemoci. Pacienti s anti-pr3 mají častěji onemocnění respiračního traktu s tvorbou granulomů, pacienti s anti-mpo trpí častěji nemocněním ledvin Sérologická klasifikace AAV se ukazuje lepším klinickým rozlišovacím kritériem něž stávající oficiální klasifikační systém vaskulitíd Existují geografické a etnické rozdíly ve výskytu anti-pr3 a anti-mpo vaskulitid. Pro každou z těchto dvou AAV existují genetické predispozice, a to především v těchto lokusech: HLA-DQ, HLA-DP, SERPINA1 a PRTN3. PR3 je sérinová proteáza, která se vyskytuje také ve formě mpr3 v membránách buněk. MPO ne. Reaktivita T buněk včetně Tregs a B buněk proti oběma antigenům je srovnatelná. Existuje překryv mezi GPA a MPA. 20% GPA pacientů má anti-mpo a 50% MPA pacientů má anti-pr3. ANCA s nízkou aviditou (přirozené ANCA) se vyskytují v nízkých koncentracích i u zdravých jedinců.

29 Prognostický význam ANCA Calculated five yearkaplan-mayer survival in respectively the ANCA-PR3-positive group(n = 18), the ANCA-MPO-positive(n = 17)group, the atypical ANCAgroup(n = 19)and the gender and age matched random ANCA-negative group. The curves differ significantly (P=0.012, Wilcoxon test). Převzato z: Drooger J.C. et al., The Open Rheumatology Journal, 2009, 3, 14-17

30 Rozsáhlá diskuse s Nielsem Rasmussenem. EUVAS skupina pro dg ANCA se nesešla a nedá se spoléhat ani na to, že by byla aktivní v přípravě revize pro dg ANCA. Výzva: Připrav návrh textu revize a pošli k diskusi! Co závěrem? Niels Rasmussen Nezbývá, než pokusit se napsat návrh revize doporučení pro dg ANCA a získat pro spolupráci vlivné osoby (A. Wiik, C. Jennette, R. Falk, N. Rasmussen aj.).

31 Specifičnost imunoanalytických metod Ivo Lochman oddělení imunologie a alergologie Zdravotní ústav Ostrava XXIV. Kongres SSAKI a ČSAKI, Žilina,

32 Analytická funkce IS je založena na vyhodnocení několika signálů v daném prostoru a čase. Vyhodnocována je nejen kvalita, ale i kvantita signálu Pro její realizaci si vytvořil IS řadu prostředků, mezi které patří i protilátky, komplement a interleukiny. Vzhledem k tomu, že IS se rozhoduje na základě vyhodnocení několika signálů, nemůže být jeho logika booleanovská, ale je fuzzy!!! Leung Q., Bentwich Z.: Scand.J.Immunol. 2002, 56, Prostředky a nástroje IS nejsou založeny na přísné specifičnosti!

33 Imunoanalytické metody jsou metody založené na reakci antigenů s protilátkami, a proto nemohou již z principu poskytovat přísně specifické výsledky

34 Blázen Blázen je člověk, který smýšlí jinak než jeho okolí Jako blázen může být označován člověk psychicky nemocný, slabomyslný, ale i geniální Blázen bývá většinou společností tolerován, pokud neprosazuje své myšlenky Tichý blázen je k ničemu. Jen blázen, který poví, k něčemu je Blázen promluví jen k tomu, kdo je připravený jej poslouchat Jako blázen bývá označován člověk trpící šílenstvím (bláznovstvím, nepříčetností), tedy takový, který se neřídí obecně akceptovanými sociálními normami kultury, která jej obklopuje. V hovorové mluvě tak bývá označován jakýkoliv excentrik. Ve středověké kultuře měli blázni důležité místo. (Wikipedia) Kto s chce blázniť, musí rozum mať. Slovenské přísloví Na blázna je příliš hloupý (anglické přísloví) Je sladké být bláznem v pravý čas. Horatius

35 Civilizační statky jsou soubory idejí a zkušeností, které platí jako všeobecně lidské z podstaty věci, nikoliv z vůle a dekretu určitých lidí. Jan Patočka..Civilizační statky vznikají jako odpovědi na skandální otázky, které se náhle vynořují ve společnosti. Ti, kteří je položili, jsou z ní někdy vyhnáni, často pak nacházejí na své otázky špatné odpovědi..dvě třetiny současné demokracie například jsou odpovědi na otázky, které položil Marx. Václav Bělohradský: Proč nejsem antikomunistou, Právo, Civilizační statky jsou v podstatě jen dva racionální argumentace a etika občanské rovnosti Václav Bělohradský: Čas prozření - Mezi postdemokratickou ekonomikou a demokratickou politikou, Právo,

36 Všechno je relativní.. relativní jsou všechny pravdy, ale pak jsou relativní i všechny omyly. Nehodíš, člověče relativní, kamenem po žádném omylu; nemá-li ani kousíček pravdy, tož má aspoň své dobré příčiny, proč vznikl a byl řekl-li jsem všechno je relativní, uklouzlo mi tím něco docela nerelativistického; neboť hříšné slovo všechno páchne zarytým a tajným absolutismem. Pravý relativism musí dospěti k lepšímu poznání: skoro všechno je relativní definitivní relativism vám praví jsou věci, jež nejsou relativní. (K.Čapek: Kritika slov) Každá polarizace vede k extremismu. (Václav Bělohradský)

37 Imunologie jako hra s možnostmi Ctirad John, SANQUIS 2005, 42, str.11 V Renčově Císařově mimu se ve vzrušeném dialogu vyznává vladař Dioglecián: Já však chci stálost, pevnost, řád. Herec Genesius císaře vybízí: Hledej řád v tom, co se mění..domnívám se, že tento dramatický fragment dobře vystihuje imunologii, úsek biologie vystavený neustálým proměnám. Považujeme ji dnes za integrující obor medicíny..

38