Extrakce vzorku tuhou fází. Izolační a separační metody, 2018

Transkript

1 Extrakce vzorku tuhou fází Izolační a separační metody, 2018

2 Extrakce pomocí tuhé fáze Extrakce tuhou fází (solid phase extraction, SPE) Extrakce na míchací tyčince (stir bar sorptive extraction, SBSE) Mikroextrakce tuhou fází (solid phase micro extraction, SPME) 2

3 Adsorpční chromatografie (LSC) rozdělení směsi látek (primární extrakt) na sloupci sorbentu (např. silikagel, florisil) ve skleněné koloně s fritou (cca 50 cm x 1 cm) obvykle jde o selektivní adsorpci nežádoucích látek (lipidy, pigmenty) a následnou eluci analytů vhodným rozpouštědlem extrakt aplikován v rozpouštědle použitém na přípravu sloupce 3

4 Adsorpční chromatografie (LSC) Sorbenty - příprava: aktivace (odstranění vody zahříváním v peci) deaktivace (standardizace obsahu vody, zeslabení sorpce) Silikagel: SiO 2 x H 2 O, většinou deaktivovaný, slabě kyselý charakter nevhodný pro separaci silně bazických analytů (silná sorpce) někdy impregnace AgNO 3 Florisil: Křemičitan hořečnatý, odstranění lipidů a dalších málo polárních látek, před použitím nutná aktivace záhřevem (130 C, i po vyžíhání) 4

5 Adsorpční chromatografie (LSC) Sorbenty: Oxid hlinitý: Dělení nepříliš polárních látek (záchyt pigmentů), obvykle slabě alkalický (ph = 10) může rozkládat estery promytím HCl a H2O vznikne neutrální (ph = 7,5) slabší sorpce, kyselý (ph = 4,5) impregnace AgNO3 Oxid hořečnatý: Malá afinita ke sloučeninám s dvojnými vazbami většinou ve směsných sorbentech (s křemelinou) Aktivní uhlí: Nepolární sorbent, často ireverzibilní sorpce, odstranění pigmentů 5

6 - kolonky Solid Phase Extraction SPE kolonky Interakce 3 složek: tuhá fáze-analyt-rozpouštědlo Cíl: digitální chromatografie Různý princip SPE kolonek: a) zádrž analytu, matrice prochází b) zádrž matrice, analyt prochází SPE kolonky tělo kolonky vyrobeno z polypropylenu nebo skla uvnitř kolonky frita např. 20 mm z polyethylenu nebo oceli naplněná sorbentem např, silikagel, vel. Částic 40 mm, velikost pórů 60 A objem kolonky je různý např. 1, 3, 6 ml množství sorbentu v kolonce: 100, 500 mg, 1, 2, 5, 10g kapacita kolonky: mg analytu / g náplně (musí se brát v úvahu i koextrakty = matrice) bod průniku: saturace sorbentu analyt se již nezadržuje 6

7 - kolonky Možnosti aplikace SPE kolonek (extrakční metody) A) Selektivní extrakce - záchyt analytů, ostatní složky matrice bez zádrže - eluce analytů B) Selektivní eluce - záchyt analytů i ostatních složek matrice - eluce pouze analytů C) Selektivní promývání - záchyt analytů i ostatních složek matrice - vymytí interferujících látek (analyty sorbovány) - eluce analytů D) Odstranění matrice - záchyt interferencí, analyt prochází bez zádrže 7

8 - kolonky Obecná SPE metoda Realizace pomocí: podtlaku, přetlaku, odstředění příprava kolonky = kondicionace rozpouštědlem 2 nanášení vzorku = zachycení např. jak analytu a matrice 3 promývání sorbentu = eluce matrice 4 promývání sorbentu = eluce analytu 8

9 - kolonky Obecná SPE metoda 1. KONDICIONACE 1 2 ml / 100 mg náplně Cíl: Vymytí nečistot (síla rozpouštědla stejná jako vzorku) Převedení do rozpouštědla vzorku (menší nebo stejná síla rozpouštědla jako vzorku) Smáčení: Dobře smáčený povrch Nedostatečné smáčení povrchu 9

10 - kolonky Obecná SPE metoda 2. APLIKACE VZORKU Úprava (ph, iontová síla, ředění, snížení rozpustnosti analytu ve vzorku) Objem (vyšší objem, odstranění kondicionačního rozpouštědla, snížení účinnosti, výtěžnosti) Průtok (max. 5 ml/min, dostatečný kontakt vzorek / fáze) Objem ovlivňuje: - velikost a typ kolonky - koncentrace analytu - množství interferencí - zádrž analytu sorbentem 10

11 - kolonky Obecná SPE metoda 3. PROMYTÍ 0,5 ml / 100 mg náplně Odstranění koextraktů (stejná nebo větší síla) 4. ELUCENA ANALYTU Typ rozpouštědla (podobné rozpouští podobné, snadno odpařitelné) Objem rozpouštědla (2 x mrtvý objem, cca 2 x 100 ml / 100 mg sorbentu) 11

12 - kolonky Důvody pro použití SPE Odstranění interferujících látek Zakoncentrování analytu Skupinové frakcionace Změna prostředí vzorku (tj. rozpouštědla) Odsolování rostoucí síla rozpouštědla IPA = isopropanol Cíl: odstranění interferencí nebo maximální citlivost (zakoncentrace) 12

13 - kolonky VOLBA ROZPOUŠTĚDEL síla rozpouštědla pro daný systém slabé rozpouštědlo = sorpce analytů silné rozpouštědlo = eluce analytů Normální fáze Hexan Isooktan Toluen Chloroform Dichlormethan Tetrahydrofuran Diethylether Ethylacetát Aceton Acetonitril Isopropanol Methanol voda SLABÉ SILNÉ Reverzní fáze Voda Methanol Isopropanol Acetonitril Aceton Ethylacetát Diethylether Tetrahydrofuran Dichlormethan Chloroform Toluen Isooktan Hexan 13

14 - kolonky Vazebné interakce analyt-sorbent A) HYDROFOBNÍ INTERAKCE (nepolární fáze) Interakce mezi nepolárními molekulami v důsledku vzniku indukovaných dipólů: - přitažlivé i odpudivé - slabší než vodíková vazba či dipól-dipól interakce B) POLÁRNÍ INTERAKCE (polární fáze) Vodíková vazba mezi molekulami s vodíkem kovalentně vázaným k silně elektronegativnímu prvku (O, N, F) Dipól-dipól mezi polárními molekulami s permanentním dipól momentem C) IONTOVÉ (ELEKTROSTATICKÉ) INTERAKCE Interakce mezi opačně nabitými skupinami iontoměniče a analytu 14

15 - kolonky Fáze používané pro SPE Výběr fáze ovlivňuje: - povaha analytu - rozpouštědlo vzorku - typ interferencí Nejlepší retence analytů: polarita analytu podobná polaritě fáze Interference méně polární než analyt normální fáze Interference polárnější než analyt reverzní fáze 15

16 - kolonky Fáze používané pro SPE A) NORMÁLNÍ FÁZE (polární fáze) silikagel, oxid hlinitý, florisil, polárně modifikovaný silikagel (CN, diol, NH 2 ) B) REVERZNÍ FÁZE (nepolární fáze) nepolárně modifikovaný silikagel (C 18, C 8, C 4, CH, PH, CN) C) IONTOMĚNIČE ANEX silikagel s chemicky vázaným kladně nabitým modifikátorem (kvarterní amin, sekundární amin) KATEX silikagel s chemicky vázaným záporně nabitým modifikátorem (benzen- či propylsulfonová kys.) 16

17 - kolonky Fáze používané pro SPE nepolární sorbet umožňuje retenci látek z vodných roztoků EC = end capped zachycené látky/mechanismus retence nepolární polární ion-exchange C18 (EC)* C18 MF C18 C8 (EC)* C8 C2 (EC)* C2 CH (EC)* PH (EC)* PH CN (EC)* Oktadecyl Oktadecyl Oktadecyl Oktyl Oktyl Ethyl Ethyl Cyklohexyl Fenyl Fenyl Kyanopropyl - Si - C 18 H 27 - Si - C 18 H 27 - Si - C 18 H 27 -Si- - Si - -Si-CH 2 CH 2 CH 2 CN polární sorbet umožňuje retenci látek z nevodných roztoků nepolární polární ion-exchange Silikagel Silikagel - Si - OH 1 3 NH 2 Aminopropyl -Si-CH 2 CH 2 CH 2 NH DIOL 2,3-dihydroxypropoxypropyl -Si-CH 2 CH 2 CH 2 OCH 2 CH-CH 2 1 CN Kyanopropyl -Si-CH 2 CH 2 CH 2 CN OH OH Primární interakce, sekundární interakce, silanol kation exchange, 2 = silná, 3 = slabá 17

18 - kolonky Fáze používané pro SPE ion-exchange sorbet umožňuje retenci látek z vodných roztoků zachycené látky/mechanismus retence nepolární polární ion-exchange NH 2 SAX CBA Aminopropyl Trimethylaminopropyl (kvarterní amin) Karboxypropyl -Si-CH 2 CH 2 CH 2 NH 2 -Si-CH 2 CH 2 CH 2 N + (CH 3 ) 2 Cl - -Si-CH 2 CH 2 CH 2 COOH SCX Benzensulfonová kyselina - Si - -SO 3- H PRS Propylsulfonová kyselina -Si-CH 2 CH 2 CH 2 SO 3- H Primární interakce, sekundární interakce, 2 = silná, 3 = slabá 18

19 - použití rostlinné materiály alkoholické nápoje obiloviny esenciální oleje ovoce/zelenina potraviny pitná voda oleje odpadní voda farmaka % respondentů % respondentů C18 kation exchange florisil silikagel amino anion exchange kyano C4 fenyl diol alumina jiné

20 Syntéza chemicky vázaných sorbentů silikagel + derivatizační činidlo siloxany Derivatizační činidla: - mono- ař tri- halo či alkoxy silyl deriváty - alkylchlorsilany monofunkční (M) trifunkční (T) CH 3 Si Cl - - (CH 2 ) X R CH 3 Cl Si Cl - - (CH 2 ) X R Cl - Si-OH - Si-OH - Si-OH M T - Si-OH CH 3 - Si-O Si - Si-OH CH (CH 2 ) X R - Si-O Si - (CH 2 ) X R - Si-O OH - Si-OH 20

21 Omezení sorbentů na bázi silikagelu Problémy: Nutná kondicionace, nesmí vyschnout (x automatizace) Reziduální silanolové skupiny (záchyt zásaditých sloučenin) Omezená stabilita v závislosti na ph (2-8) ph hydrolýza vázané fáze ph rozpouštění silikageu volná silanolová skupina C18 řetěze Nedostatečná zádrž polárnějších analytů Neselektivní (čistota extraktu!) Příliš silné (ireverzibilní) sorpce nepolárních analytů částice Částice silikagelu vodná vrstva 21

22 Omezení sorbentů na bázi silikagelu Aktivitu zbytkových silanolových skupin lze potlačit či podpořit: Potlačení: - endcapped fáze (lze vyvázat max. 70% silanolových skupin sterické důvody) - Si-O - Si-O - Si-OH Si - (CH 2 ) X R OH trimethylchlorsilan + Cl-Si(CH 3 ) 3 - Si-O Si - (CH 2 ) X R - Si-O OH - Si-Si(CH 3 ) 3 - úprava ph (při ph 2 je silanol nedisociovaný, ph < 2 = disociace záporný náboj elektrostatické interakce) - maskování silanolů použitím zásady (triethylamin) - zvýšení iontové síly rozpouštědla vzorku = prevence vazby analytu Podpora: - úprava ph ( 4 ionizace silanolů) - neednkapované fáze 22

23 Omezení sorbentů na bázi silikagelu SILIKAGEL (normální fáze): Silná sorpce velmi polárních sloučenin (glycerol) použití modifikovaných silikagelů (slabší retence) C18 (reverzní fáze): Neselektivní, někdy příliš silná sorpce použití fáze s polárnějšími modifikátory (C 8, C 4 ) část koextraktů projde bez zádrže POUŽITÍ FÁZÍ NA BÁZI PS-DVB: (kopolymer polystyren-divinylbenzen) bez silanolů stabilní v širokém rozmezí ph lepší zádrž polárnějších analytů 23

24 Trendy ve vývoji sorbentů pro SPE 24

25 Trendy ve vývoji sorbentů pro SPE Supel QuE Z-Sep: Odstranění tuku v Obtížné matrice Fosfátová skupina fosfolipidů je silná Lewisova báze (donor elektronů) interaguje s atomy Zr vázanými na křemičitý povrch. Části oxidu křemičitého pokryté zirkonem - Supel QuE Z-Sep sorbenty - selektivně odstraňují z extraktu vzorku více tuku a barviv než tradiční fáze pro metody QuEChERS. Retence lipidů je založena na dvou synergetických interakcích: interakce mezi polárními skupina lipidu a iontově výměnnou skupina sorbentu a také interakce mezi hydrofobními řetězci lipidu a hydrofobní skupiny sorbentu (buď C18 nebo Z-Sep +). Z-Sep se doporučuje pro analýzu hydrofobních analytů v tucích matrice. výrazně snižuje interference z tučných matic a různé barviva Může nahradit fáze C18 a PSA v současných metodách bez další vývojové metody 25

26 Trendy ve vývoji sorbentů pro SPE SMĚSNÉ SORBENTY Speciální produkty pro analýzu pesticidů Supel Sphere Carbon / NH 2 Vlastnosti a výhody: SPE kolonka naplněna sférickými ne-drobnými částicemi Vyšší průtokové charakteristiky a rychlejší průtok mobilní fáze Uhlík odstraňuje pigmenty a steroly, které se v mnoha případech vyskytují v potravinách a přírodních produktech Aminopropyl (NH 2 ) odstraňuje organické kyseliny, polární pigmenty a cukry 26

27 Trendy ve vývoji sorbentů pro SPE SMĚSNÉ SORBENTY Supelclean TM ENVI-Carb II / PSA SPE retence RP + ANEX chemická filtr odstranění klíčových interferencí při analýze pesticidů vrstva Supelclean TM ENVI-Carb II: - Neporézní grafitovaný uhlík - Plocha povrchu 100m 2 /g - Afinita k planárním molekulám - Záchyt pigmentů (chlorofyl, karotenoidy) a sterolů vrstva Supelclean TM PSA: - N-propyl ethylendiamin (primární-sekundární amin) - Záchyt mastných kyselin, cukrů, polárních pigmentů 27

28 Trendy ve vývoji sorbentů pro SPE SupelMIP SPE - Molekulárně vtištěné polymery Molecularly Imprinted Polymers Vlastnosti a výhody: Dosáhnout nižších detekčních limitů díky vynikající selektivitě Zmenšete potlačení iontů Minimální až žádné vyvinutí metody nevyžaduje, což je sníženo čas přípravy vzorku Stabilní při širokém rozsahu ph a vysokých teplotách Řada SupelMIP SPE se skládá z vysoce zesíťovaných polymerů které jsou navrženy tak, aby získaly jediný analyt, který je předmětem zájmu nebo skupinu strukturně podobných analytů s extrémně vysokým stupněm selektivity. To je možné, protože selektivita je zavedena během MIP syntéza, ve které je molekula templátu navržena tak, aby napodobovala tvar analytu. Molekulu templátu obklopí polymer během syntézy a je tak vtištěn tvar cílových analytů, které jsou stericky a chemicky podobné. 28

29 Trendy ve vývoji sorbentů pro SPE HBL = hydrofilně lipofilní sorbent kopolymer N-vinylpyrrilodinu (zvyšuje smočitelnost vodou) a divinylbenzenu (RP) vodou smáčitelný polymer - vyschnutí nesnižuje výtěžnost (automatizace) - větší stabilita ve větším rozsahu ph (x C18) - vyšší retence hlavně pro polární látky (x C18) - univerzální (i pro polární a zásadité analyty) H - hydrofilní L - lipofilní 29

30 Trendy ve vývoji sorbentů pro SPE Další modifikace HLB sorbentů: vodou smáčitelné polymery stabilní v organických rozpouštědlech Oasis MCX = Mixed-mode, strong Cation-eXchange, reversedphase, selektivní pro báze Oasis MAX = Mixed-mode, strong Anion-eXchange, reversed-phase, selektivní pro kyseliny Oasis WCX = mixed-mode, Weak Cation-eXchange, reversed-phase, k zadržování a uvolňování silných bází Oasis WAX = mixed-mode, Weak Anion-eXchange, reversed-phase, k zadržování a uvolňování silných kyselin 30

31 Trendy ve vývoji sorbentů pro SPE Polymerní SPE sorbenty pro extrakci různých typů analytu Pro extrakci neutrálních molekul Pro extrakci slabých kyselin Pro extrakci slabých bází 31

32 Iontoměniče Extrakce kyselin a zásad z vodných roztoků podle zásad iontové výměny (interakce nabitého analytu a opačně nabitého ionexu). 32

33 Iontoměniče ph analyty musí být ionizovány podle pka analytu, ph se upravuje 2 jednotky nad či pod pka (octová kyselina 4,75; cyklohexylamin 10,66) Síla protiiontu KATEX: Li +, H +, Na +, NH 4 + snadno nahraditelné Cu 2+, Ca 2+, Ba 2+ obtížně nahraditelné ANEX: OH -, F - snadno nahraditelné HSO 3-, NO 3-, CN -, Cl - obtížně nahraditelné Iontová síla - celková koncentrace iontů ve vzorku - soutěž s analytem o místa na iontoměniči 33

34 Iontoměniče 34

35 Iontoměniče tykadlové (tentacle) Funkční skupiny umístěny podél pohyblivého, kovalentně vázaného řetězce složeného z 5 20 monomerních jednotek. (u klasických iontoměničů jsou funkční skupiny zakotveny přímo na nosiči v rigidní pozici) Dobrá přístupnost analytů k funkčním skupinám = rychlý přenos hmoty, vysoká kapacita, malé objemy elučních rozpouštědel. 35

36 Problémy SPE kolonek - omezený průtok /malý poměr průtočné plochy a sloupce sorbentu) - vznik kanálků (nehomogenita sorbentu, prostor mezi částicemi) nejednotný průtok sorpční kapacita a reprodukovatelnost SPE disky: Ploché disky podobné membránovým filtrům Síla: 1 mm Průměr: 4 96 mm ( průměr povrch průtok A) Rigidní disky B) Membránové disky Dávkování vzorku na klasickou SPE kolonku Dávkování vzorku na SPEC disk 36

37 Výhody SPE disků - větší průtočná plocha tenká vrstva, malý rozdíl tlaků průtoky - snížená hmota sorbentu mrtvý objem objem vzorku objem elučního rozpouštědla interference (menší zádrž) - bez tvorby kanálků účinnost zádrže, kapacita a výtěžnost - rychlejší sušení - úspora času (1 l vody : 10 min 45 mm disk, 2 hodkolonka) Mínus = omezený počet fází 37

38 A) RIGIDNÍ DISKY - Rigidní skleněná vlákna se zakotvenou fází (silikagel, modifikovaný silikagel) - Oproti membránovým diskům levnější, rychlejší průtoky, menší riziko ucpání SPEC mikrokolonky (Ansys) - tělo z polypropylenu, bez frit - silikagel, NH 2, CN, PH, C2, C8, C18, katex, anex ENVI TM disky (Supleco, Inc.) - Průměr 47 a 90 mm - C8, C18 38

39 A) RIGIDNÍ DISKY Změna hmoty sorbentu změna průměru či síly membrány, změna porozity sorbentu 39

40 B) MEMBRÁNOVÉ DISKY - pružná PVC či PTFE síť s chemicky vázanou stacionární fází - menší průtoky než u rigidních disků - větší nebezpečí ucpání předfiltrace EMPORE TM disky (3M Corp. + Varian) - 10 % PTFE + 90 % silikagelové fáze - C8, C18, PS-DVB, anex, katex - průměr: standardní 25, 47, 90 mm - v kolonkách: zmenšený 4, 7, 11 mm 40

41 B) MEMBRÁNOVÉ DISKY VersaPure TM Buchnerovy nálvky (předplněné, na 1 použití) - tělo z polypropylenu - frity z polyethylenu (20 mm) - 0,7 mm membrána ze skleněných vláken pod spodní fritou - 12,5 100 g sorbentu Discovery SPE 96-Well Plates (předplněné, na 1 použití) - 2 ml polypropylenove čtvercové nádobky (96 pozic) mg sorbentu / pozice 41

42 Mykosep Extrakce na tuhou fázi (SPE) formát pushthrough využívaný pro mykotoxiny (velmi rychlé, matriční komponenty jsou zachyceny na sorbentu) 42

43 Imunoafinitní kolonky Princip: Stejný postup jako u normálních SPE kolonek, mechanismus retence je založen na specifické interakci protilátka-antigen, tedy na sorbent kolonky jsou ukotveny specifické protilátky a cílové analyty fungují jako antigeny a jsou zachytávány protilátkami a matrice prochází bez zádrže. Analyty jsou pak eluovány z kolonky. Problém = tzv. cross-reaktivita Látky podobné cílovým analytům mohou být zachyceny protilátkou společně s cílovým analytem. Využití: zejména pro stanovení mykotoxinů, kolonky specifické buď přímo pro některý z mykotoxinů nebo skupinu podobných mykotoxinů. 43

44 Pasterovi pipetky naplněné sorbentem miniaturizace SPE, GLC Příprava vzorku Plnění pipety Eluce Často využíváno k odstranění tuku (triacylglycerolů) z hrubého extraktu. 44

45 Extrakce disperzní tuhou fází Matrix Solid Phase Dispersion (MSPD) rozetření vzorku s vhodným sorbentem (C18) naplnění směsi do kolony (tělo stříkačky) (přídavek dalšího sorbentu např. Florisil) stlačení eluce analytů rozpouštědlem Výhody: izolace a přečištění v 1 kroku úspora času a rozpouštědel operačně nenáročné 45

46 Extrakce disperzní tuhou fází Matrix Solid Phase Dispersion (MSPD) Rozetření vzorku se sorbentem (vzorek : C18 = 1 : 4) Porušení membrán mechanickými a hydrofobními silami (uvolnění lipidů apod.) Pevná fáze rozpouští a disperguje složky vzorku (nepolární složky k C18, polární k OH silikagelu) Velká styčná plocha Samotná matrice se stává novou sorpční fází ovlivňující proces (analyty se eluují ve frakcích neodpovídajících pouze systému analyt čistá pevná fáze zvolené rozpouštědlo) 46

47 Extrakce disperzní tuhou fází Quick, Easy, Cheap, Effective, Rugged and Safe (QuEChERS) Princip: extrakce látek, méně polárnějších než je voda. Acetonitrilem za pomoci přídavku anorganických solí Anorganické soli (síran hořečnatá a chlorid sodný změní iontovou sílu vody, voda je díky nim ještě polárnější a do té doby analyty ve vodě rozpustné, ale méně polárnější než voda jsou vypuzeny do acetonitrilu, který je jim příznivější Originální metoda 2003 Anastassiades a Lehotay 10 g vzorku 10 ml MeCN 1 min třepání navážka vzorku závisí na obsahu vody v matrici, matrice s vysokým obsahem vody = 10 g, matrice s nižším obsahem vody = 5 g, cereálie a podobné matrice = 2,5 g, čaj, káva, koření = 1 g, v případě nižší navážky se ke vzorku přidává voda (často s přídavkem 0,1 % HCOOH), v případě cereálií je zařazen krok bobtnání (30 min vzorek stojí a vstřebává vodu pro lepší smáčení a extrakci) 4 g MgSO 4 1 g NaCl existují různé modifikace této metody s přídavkem různých solí 1 min třepání nyní doporučeno třepat min 2 min odstředění hrubý extrakt clean-up přečištění 150 mg/ml MgSO 4 25 mg/ml PSA 1 min třepání odstředění finál extrakt 47

48 Extrakce disperzní tuhou fází Quick, Easy, Cheap, Effective, Rugged and Safe (QuEChERS) Podmínkou dobrého průběhu extrakce je dodržení poměru acetonitril : voda = cca 1 : 1 10 g vzorku 10 ml MeCN cca 1 :1 Vše se odvíjí od přirozené vlhkosti vzorku, tedy obsahu vody v matrici. Matrice s vysokým obsahem vody cca 90 % = v 10 g vzorku je 9 g vody = podmínka splněna Matrice s nižším obsahem vody cca 70 % = v 5 g vzorku je cca 3,5 g vody = ke vzorku se přidá 5 g vody = obsah vody 8,5g a celková hmotnost vzorku 10 g Matrice s nízkým obsahem vody cca 20 % = v 2,5 g vzorku je cca 0,5 g vody = ke vzorku se přidá 7,5 g vody = obsah vody 8g a celková hmotnost vzorku 10 g Přídavky solí: soli si buď analytik předváží před extrakcí nebo jsou dostupné komerční kity, pytlíčky či kyvety, již s předváženým množstvím solí o daném složení 48

49 Extrakce disperzní tuhou fází Quick, Easy, Cheap, Effective, Rugged and Safe (QuEChERS) Směs po odstředění: QuEChERS PSA: primární sekundární amin acetonitrilová fáze látky méně polární než voda silně polární látky vodná fáze sole (NaCl + MgSO 4 ) 49

50 Extrakce disperzní tuhou fází Quick, Easy, Cheap, Effective, Rugged and Safe (QuEChERS) QuEChERS: extrakty 6-12 vzorků mohou být připraveny za 30 až 40 minut jediným analytikem Celková příprava vzorku je finančně nenáročná oproti jiným Během přípravy vzorku nejsou vytvářeny žádné nebezpečné odpady vysoké výtěžnosti (většinou % s RSD <5%) jsou dosaženy pro širokou škálu pesticidů (stanovitelných jak pomocí GC tak i LC) i matric. 50

51 Extrakce disperzní tuhou fází Quick, Easy, Cheap, Effective, Rugged and Safe (QuEChERS) odstranění polárních složek matrice (organické kyseliny, polární pigmenty, sacharidy) okyselení pro některé analyty zvyšuje extrahovatelnost a stabilitu vs degradace jiných vyžadováno například alkalické prostředí (úprava ph pomocí uhličitanu sodného) VÝHODY: izolace a přečištění v 1 kroku úspora času a rozpouštědel operačně nenáročné rychlé APLIKACE: rezidua pesticidů (LC-MS, GC-MS) mykotoxiny enviro kontaminanty akrylamid rostlinné alkaloidy a další jiné 51