Příprava materiálu byla podpořena projektem OPPA č. CZ.2.17/3.1.00/33253
|
|
- Tadeáš Bedřich Bařtipán
- před 7 lety
- Počet zobrazení:
Transkript
1 Příprava materiálu byla podpořena projektem OPPA č. CZ.2.17/3.1.00/33253 Část 9 Adsorpční chromatografie: Chromatografie v normálním módu Tento chromatografický mód je vysvětlen na silikagelu jako nejdůležitějším chromatografickém sorbentu. Podstata adsorpce Povrch silikagelu je pokryt silanolovými skupinami. Tyto OH skupiny jsou statisticky distribuovány po celém povrchu (viz obrázek níže). Silanolové skupiny jsou centry reaktivity stacionární fáze. S molekulami ve své blízkosti interagují slabými vazbami, jejichž podstatou jsou následující mezimolekulární interakce: dipól indukovaný dipól, dipól dipól, vodíkové vazby, π-komplexy Aby k těmto interakcím mohlo dojít, musí mít molekula dvojnou vazbu (π-komplexy) nebo alespoň jeden atom s volným elektronovým párem. Tedy např. alkany takto
2 neinteragují, protože jsou nasycené a tvořené jen atomy C a H, které nemají volné elektronové páry. Intenzita absorpce, a tím hodnoty k, rostou v následující řadě (eluční řada): nasycené uhlovodíky < olefiny < aromáty organické halogenderiváty < sulfidy < ethery < nitrolátky < estery aldehydy ketony < alkoholy aminy < sulfony < sulfoxidy < amidy < karboxylové kyseliny. Pokud má molekula několik funkčních skupin, retenční vlastnosti určuje ta nejpolárnější z nich. Na základě uvedeného lze učinit tři závěry: (a) Silikagel tvořící chromatografickou náplň je ze všech stran obklopen mobilní fází. Rozpouštědlo obsazuje více či méně pevně všechna vazebná místa. Molekula vzorku se může absorbovat pouze v případě, že se na silikagel adsorbuje pevněji než rozpouštědlo (mobilní fáze). (b) Všechny molekuly vzorku (i mobilní fáze) jsou vázány na povrch silikagelu tak, že jejich dvojné vazby nebo funkční skupiny jsou blízko silanolových skupin. Uhlovodíková část molekuly míří od silikagelu. Adsorbent proto nerozliší molekuly, které se vzájemně liší pouze v těchto uhlovodíkových částech. Například směs hexanolu, heptanolu a oktanolu proto nelze úspěšně adsorpční chromatografií separovat.
3 (c) Síla interakce nezávisí pouze na funkčních skupinách analytu, ale i na stérických vlivech. Molekuly s rozdílným stérickým uspořádáním, tj. izomery, lze velmi dobře separovat adsorpční chromatografií. Tento kvalitativní koncept lze použít i kvantitativně. Pokud jsou známy rovnovážné koncentrace analytu v mobilní a stacionární fázi, lze vypočítat distribuční konstantu K. Závislost koncentrace analytu ve stacionární fázi na koncentraci v mobilní fázi popisuje adsorpční izoterma, která je specifická pro daný chromatografický systém (analyt mobilní fáze stacionární fáze). Eluotropická řada Z předchozího textu je zřejmé, že různá rozpouštědla eluují analyty různou rychlostí. Pokud je mobilní fáze tvořená alifatickými uhlovodíky, je pro ně velice obtížné uvolnit molekuly analytu z aktivních míst sorbentu, a takové rozpouštědlo je proto označeno jako slabé. Na druhé straně tetrahydrofuran, který se na aktivní místa váže silně, neumožňuje, aby se molekuly analytu vázaly na sorbentu dlouhou dobu, a proto jsou rychle eluovány. Tento typ solventu se označuje jako silný. Vliv síly mobilní fáze na separaci je ukázán na níže uvedených chromatogramech. Hexan je příliš slabým rozpouštědlem pro analýzu uvedené testovací směsi a analýza trvá neúměrně dlouhou dobu, ale terc-butylmethylether je naopak příliš silné rozpouštědlo. Vhodným solventem je směs hexanu a terc-butylmethyletheru (9:1) (objemový poměr).
4 Eluční síla nebo síla různých rozpouštědel byla určena empiricky a číselně vyjádřena jako hodnota ε. Řada slabých, středně silných a silných rozpouštědel je označována jako eluotropická řada. Shora terc-butylmethylether, směs terc-butylmethylether-hexan, hexan. Požadované eluční síly lze dosáhnout také smícháním dvou rozpouštědel. Způsob výběru binárních směsí je ukázán níže. Jestliže potřebujeme sílu rozpouštědla např. ε = 0,4 dosáhneme ji vytvořením následujících binárních směsí: přibližně 60 % terc-butylmethyletheru v hexanu, 45 % tetrahydrofuranu v hexanu, 50 % ethylacetátu v hexanu, 15 % isopropanolu v hexanu,
5 20 % terc-butylmethyletheru v dichlormethanu, 45 % tetrahydrofuranu v dichlormethanu, 50 % ethylacetátu v dichlormethanu, nebo 15 % isopropanolu v dichlormethanu.
6 Selektivita mobilní fáze Selektivitou eluentu se rozumí vliv složení mobilní fáze na separační faktor α dvou a více látek ve vzorku. Nesouvisí se silou rozpouštědla ε, ale představuje jiný způsob jak ovlivnit výsledek separace. Selektivita v adsorpční chromatografii má dva hlavní aspekty lokalizaci a bazicitu. Lokalizace je mírou schopnosti molekul rozpouštědla interagovat se sorbentem, který je stacionární fází. Adsorpční centra silikagelu jsou tvořeny silanolovými skupinami. Molekuly, které s těmito místy interagují svými polárními funkčními skupinami, jako jsou ethery, estery, alkoholy, nitrily a aminy, budou zaujímat vzhledem k okolním silanolovým skupinám určitou orientaci. Povrch silikagelu obsazený takovými zorientovanými molekulami solventu nebo vzorku je pokrytý dobře definovanou vrstvou molekul. Rozpouštědla, jejichž molekuly se nelokalizují jako např. dichlormethan nebo benzen, interagují se silikagelem mnohem slaběji a pokrytí povrchu je neuspořádané. První polovina rozpouštědel uvedených v elutropní řadě, od fluor alkanů po dichlormethan, jsou nelokalizující se rozpouštědla, výjimku tvoří diethylether. Diethylether spolu s dolní polovinou tabulky od triethylaminu po vodu patří mezi rozpouštědla, která se na povrchu silikagelu lokalizují. Proto se ve své selektivitě liší rozpouštědla se stejnou (podobnou) silou ε, jako např. dichlormethan (bez lokalizace) a diethylether (s lokalizací) s hodnotami ε 0,30 a 0,29. Bazicita tvoří další hranu trojúhelníku selektivit rozpouštědel. Nejbazičtějšími rozpouštědly běžně používanými v HPLC jsou ethery. Volba a optimalizace složení mobilní fáze Nejvhodnější eluční sílu mobilní fáze pro daný problém lze zjistit tenkovrstvou chromatografií (TLC, angl. thin-layer chromatography) a představuje ji takové složení mobilní fáze, ve kterém je hodnota retardačního faktoru R F cca 0,3. Výsledky z TLC jsou snadno přenositelné do oblasti HPLC, tedy pokud je v obou metodách shodná stacionární fáze, lze predikovat hodnoty retenčních faktorů k (i přes rozdílnou velikostí částic sorbentu). Eluční vzdálenost pouhých 5 cm je pro tento test dostatečná a lze jej proto provádět na malých TLC destičkách a velmi rychle. Malé uzavíratelné sklenice jsou dostatečnou náhradou speciálních vyvíjecích komor.
7 Zóny látek lze detekovat: (a) UV zářením (pro látky absorbující UV záření bývá používano vrstev s fluorescenčním indikátorem); (b) parami jodu; (c) aerosolem (z rozprašovače) reakčního činidla, pokud postupy (a) a (b) nefungují. Popsaným TLC testem lze vyhledat potřebnou hodnotu eluční síly ε, ale selektivita musí být dále optimalizována pokud mají být všechny píky zcela rozděleny. Změny selektivity se dosáhne volbou rozpouštědla (směsi rozpouštědel) s odlišnou lokalizací a bazicitou. Mobilní fáze jsou v mnoha případech tvořeny dvěma rozpouštědly A a B. Obvyklým rozpouštědlem A je hexan, který má prakticky nulovou eluční sílu, lokalizaci a bazicitu. Ale preferovaným solventem by zde měl být heptan (také s ε = 0), neboť na rozdíl od hexanu není neurotoxický. Jako B je nejlepší zvolit rozpouštědlo, které se nelokalizuje, nebo se lokalizuje ale není bazické, nebo bazické rozpouštědlo, které se lokalizuje. Pro systematické testování selektivity a dosažení maximálních změn eluce je třeba testovat všechny tři typy rozpouštědel B. Typickým rozpouštědlem B, které se nelokalizuje, je dichlormethan. Typickými rozpouštědly B, která se lokalizují a nejsou bazická, jsou acetonitril a ethylacetát. Acetonitril je pouze málo (v malém rozsahu) mísitelný s hexanem; ethylacetát má vysoko hranu absorpce UV záření (až 260 nm). Typickým rozpouštědlem B, které se lokalizuje a je bazické je terc-butylmethylether. Protože selektivita není v praxi jediným sledovaným parametrem, používají se i další rozpouštědla. Z ekologických důvodů se např. halogenovaná rozpouštědla používají jen pokud je to poslední výše uvedený obrázek. Jestliže vzorek obsahuje analyty s kyselými vlastnostmi, může být nutné přidat do eluentu malé množství kyseliny octové, trifluoroctové nebo mravenčí; pro bazické analyty se přidává např. triethylamin.
8 Deaktivátory Všechna adsorpční místa na povrchu silikagelu (nebo aluminy) nemají stejnou aktivitu. Výsledkem je to, že kolonu lze snadno přetížit a retenční faktory jsou závislé na množství vzorku, i když je dávkováno jen malé množství vzorku. Navíc se objeví chvostování píků. Adsorpční kapacitu sorbentu lze nejůépe využít pouze v případě, že jsou nejaktivnější centra záměrně obsazena, tzv. deaktivována. Toho se dosáhne přídavkem malého množství na povrchu se lokalizující látky do mobilní fáze. Deaktivátor obsadí místa s nejvyšší aktivitou, takže následně molekuly vzorku již interagují s poměrně homogenním povrchem obsahujícím adsorpční centra o přibližně stejné aktivitě. Voda je nejdůležitějším deaktivátorem (moderátorem). Je silně polární a přítomná ve všech rozpouštědlech, ačkoliv někdy pouze ve stopových množstvích. Její vliv na chromatografickou separaci je menší, čím polárnější je mobilní fáze a čím je silikagelová kolona starší (nové kolony jsou choulostivější). Alkoholy, methanol, ethanol a isopropanol lze také použít jako deaktivátory. Ačkoli je to obvykle zbytečné, kontrola aktivace může být důležitá při použití samotného čistého nepolárního solventu A nebo pokud je separace velmi náročná. V adsorpční chromatografii je možné aplikovat gradientovou eluci, ale jen tehdy, jestliže rozdíl polarit obou solventů není příliš velký. Gradientová eluce může být obtížná, a je méně doporučována než v případě chromatografie na reverzních fázích: (a) složení solventu se v koloně může měnit adsorpcí polárnějšího rozpouštědla; (b) obsah modifikátoru v obou rozpouštědlech může být různý; (c) znovuobnovení rovnovážných podmínek po analýze, tj. reekvilibrace kolony, může dlouho trvat; (d) je vhodnější nezačínat gradient s 0 % rozpouštědla B, ale s určitým (malým) obsahem silnějšího rozpouštědla B. Aplikace Silikagel je vynikající stacionární fáze pro separaci isomerů.
9 Jak již bylo uvedeno, nelze pro separaci složitých vzorků na silikagelu všeobecně doporučit gradientovou eluci, protože reekvilibrace sorbentu na počátku analýzy může trvat mnohem déle než u chemicky modifikovaných fází. Nicméně lze tuto techniku úspěšně použít, jak ukazuje tento chromatogram separace karotenoidů gradientem acetonu v petroletheru. Další chromatogram níže ukazuje separaci velmi polárních látek na silikagelu. Karotenoid krocetin, který je nejméně polární látkou a eluuje první, a jeho mono a diglykosylové estery patří mezi látky izolované z extraktu šafránu.
10
Mobilní fáze. HPLC mobilní fáze 1
Mobilní fáze 1 VLIV CHROMATOGRAFICKÝCH PODMÍNEK NA ELUČNÍ CHARAKTERISTIKY SEPAROVANÝCH LÁTEK - SLOŽENÍ MOBILNÍ FÁZE Složení mobilní fáze má vliv na eluční charakteristiky : účinnost kolony; kapacitní poměr;
VícePříprava materiálu byla podpořena projektem OPPA č. CZ.2.17/3.1.00/33253
Příprava materiálu byla podpořena projektem OPPA č. CZ.2.17/3.1.00/33253 Část 7 Vlastnosti solventů (rozpouštědel) Přehled organických rozpouštědel Tabulka níže shrnuje velký počet solventů v pořadí stoupající
VíceKapalinová chromatografie - LC
Kapalinová chromatografie - LC Fyzikálně-chemická metoda dělení kapalin (roztoků) využívající rozdělování složky mezi dvě nestejnorodé fáze, nepohyblivou (stacionární) a pohyblivou (mobilní), přičemž pohyblivou
VíceEXTRAKČNÍ METODY. Studijní materiál. 1. Obecná charakteristika extrakce. 2. Extrakce kapalina/kapalina LLE. 3. Alkalická hydrolýza
Studijní materiál EXTRAKČNÍ METODY 1. Obecná charakteristika extrakce 2. Extrakce kapalina/kapalina LLE 3. Alkalická hydrolýza 4. Soxhletova extrakce 5. Extrakce za zvýšené teploty a tlaku PLE, ASE, PSE
VícePříprava materiálu byla podpořena projektem OPPA č. CZ.2.17/3.1.00/33253
Příprava materiálu byla podpořena projektem OPPA č. CZ.2.17/3.1.00/33253 Část 8 Detektory Úvodní informace Detektor musí být schopen zaregistrovat okamžik průchodu analytu vystupujícího z kolony. Musí
VícePentachlorfenol (PCP)
Zpracováno podle Raclavská, H. Kuchařová, J. Plachá, D.: Podklady k provádění Protokolu o PRTR Přehled metod a identifikace látek sledovaných podle Protokolu o registrech úniků a přenosů znečišťujících
VíceEXTRAKCE, CHROMATOGRAFICKÉ DĚLENÍ (C18, TLC) A STANOVENÍ LISTOVÝCH BARVIV
Úloha č. 7 Extrakce a chromatografické dělení (C18 a TLC) a stanovení listových barviv -1 - EXTRAKCE, CHROMATOGRAFICKÉ DĚLENÍ (C18, TLC) A STANOVENÍ LISTOVÝCH BARVIV LISTOVÁ BARVIVA A JEJICH FYZIOLOGICKÝ
Více13/sv. 6 CS (80/891/EHS)
65 31980L0891 27.9.1980 ÚŘEDNÍ VĚSTNÍK EVROPSKÝCH SPOLEČENSTVÍ L 254/35 SMĚRNICE KOMISE ze dne 25. července 1980 o analytické metodě Společenství pro stanovení obsahu kyseliny erukové v olejích a tucích
VíceInovace bakalářského studijního oboru Aplikovaná chemie CZ.1.07/2.2.00/15.0247
Papírová a tenkovrstvá chromatografie Jednou z nejrozšířenějších analytických metod je bezesporu chromatografie, umožňující účinnou separaci látek nutnou pro spolehlivou identifikaci a kvantifikaci složek
VíceHydrofobní chromatografie
Hydrofobní chromatografie Hydrofobicita proteinu insulin malwmrllpl lallalwgpd paaafvnqhl cgshlvealy lvcgergffy tpktrreaed lqvgqvelgg gpgagslqpl alegslqkrg iveqcctsic slyqlenycn vliv soli na protein Stacionární
VíceKapalinová chromatografie - LC
Kapalinová chromatografie - LC Fyzikálně-chemická metoda dělení kapalin (roztoků) využívající rozdělování složky mezi dvě nestejnorodé fáze, nepohyblivou (stacionární) a pohyblivou (mobilní), přičemž pohyblivou
VícePříprava materiálu byla podpořena projektem OPPA č. CZ.2.17/3.1.00/33253
Příprava materiálu byla podpořena projektem OPPA č. CZ.2.17/3.1.00/33253 Část 6 - Gradientové systémy V případě separace složitých vzorků musí být složení mobilní fáze v průběhu analýzy měněno. Změna složení
VíceOptimalizace metody stanovení volných mastných kyselin v reálných systémech. Bc. Lenka Hasoňová
Optimalizace metody stanovení volných mastných kyselin v reálných systémech Bc. Lenka Hasoňová Diplomová práce 2015 ABSTRAKT Předkládaná diplomová práce se zabývá optimalizací metody stanovení volných
VíceUNIVERZITA KARLOVA V PRAZE FARMACEUTICKÁ FAKULTA V HRADCI KRÁLOVÉ RIGORÓZNÍ PRÁCE
UNIVERZITA KARLOVA V PRAZE FARMACEUTICKÁ FAKULTA V HRADCI KRÁLOVÉ KATEDRA FARMACEUTICKÉ CHEMIE A KONTROLY LÉČIV RIGORÓZNÍ PRÁCE HPLC stanovení obsahu amlodipinu a perindoprilu v kombinovaném léčivém přípravku
VíceVITAMÍNY ROZPUSTNÉ V TUCÍCH. Retinoidy (vitamin A) A, E a D v nezmýdelnitelném podílu, K se rozkládá
VITAMÍNY ZPUSTNÉ V TUCÍCH A, E a D v nezmýdelnitelném podílu, K se rozkládá etinoidy (vitamin A) Účinná forma vitaminu A: retinol (all trans-), neoretinal ( 13-cis, trans-), retinal H 3 C = CH2 H = HCH
VíceVysokoúčinná kapalinová chromatografie
Vysokoúčinná kapalinová chromatografie HPLC High Performance Liquid Chromatography Vysokoúčinná...X... Vysoceúčinná kapalinová chromatografie RRLC Rapid Resolution Liquid Chromatography Rychle rozlišovací
VícePrincipy chromatografie v analýze potravin
Principy chromatografie v analýze potravin živočišného původu p Ivana Borkovcová Ústav hygieny a technologie mléka FVHE VFU Brno, borkovcovai@vfu.cz Úvod, základní pojmy chromatografické systémy dělení
VíceAnalýza kofeinu v kávě pomocí kapalinové chromatografie
Analýza kofeinu v kávě pomocí kapalinové chromatografie Kofein (obr.1) se jako přírodní alkaloid vyskytuje v mnoha rostlinách (např. fazolích, kakaových bobech, černém čaji apod.) avšak nejvíce je spojován
VícePříprava materiálu byla podpořena projektem OPPA č. CZ.2.17/3.1.00/33253
Příprava materiálu byla podpořena projektem OPPA č. CZ.2.17/3.1.00/33253 Část 4 - Nástřik vzorku Dávkovače vzorků/injektory Dávkování vzorků je jednou z klíčových záležitostí v HPLC. Ani nejlepší kolona
VíceNázev: Vypracovala: Datum: 7. 2. 2014. Zuzana Lacková
Název: Vypracovala: Zuzana Lacková Datum: 7. 2. 2014 Reg.č.projektu: CZ.1.07/2.4.00/31.0023 Název projektu: Partnerská síť centra excelentního bionanotechnologického výzkumu MĚLI BYCHOM ZNÁT: informace,
VíceSPE je metoda vhodná pro rychlou přípravu vzorků, která užívá
Extrakce na pevné fázi (SPE) Příprava předmětu byla podpořena projektem OPPA č. CZ.2.17/3.1.00/33253 Extrakce na pevné fázi (SPE) (Solid Phase Extraction) SPE je metoda vhodná pro rychlou přípravu vzorků,
VíceRadioimunologická analýza
Radioimunologická analýza Reakce antigenu (nefyziologické látky kterou stanovujeme, AG) v biologickém materiálu s protilátkou (antibody, AB), kterou vytváří organismus. AB + AG AB-AG Imunochemická specifita
VíceChromatofokusace. separace proteinů na základě jejich pi vysoké rozlišení. není potřeba připravovat ph gradient zaostřovací efekt jednoduchost
Chromatofokusace separace proteinů na základě jejich pi vysoké rozlišení není potřeba připravovat ph gradient zaostřovací efekt jednoduchost Polypufry - amfolyty Stacionární fáze Polybuffer 96 - ph 9-6
VíceSTANOVENÍ TĚKAVÝCH HALOGENOVÝCH UHLOVODÍKŮ VE VODNÉM PROSTŘEDÍ METODOU PLYNOVÉ CHROMATOGRAFIE S DETEKCÍ NA PRINCIPU ELEKTRONOVÉHO ZÁCHYTU (GC/ECD)
Organické kontaminanty Pracovní úkol 1. Určete složení neznámého vzorku. 2. Pro přípravu vzorku k analýze použijte 2 různé postupy pro extrakci. 3. Separujte a identifikujte jejich jednotlivé analyty.
VíceNávod pro laboratorní úlohu: Komerční senzory plynů a jejich testování
Návod pro laboratorní úlohu: Komerční senzory plynů a jejich testování Úkol měření: 1) Proměřte závislost citlivosti senzoru TGS na koncentraci vodíku 2) Porovnejte vaši citlivostní charakteristiku s charakteristikou
VíceVysokoúčinná kapalinová chromatografie. Petr Kozlík Katedra analytické chemie
Vysokoúčinná kapalinová chromatografie Petr Kozlík Katedra analytické chemie e-mail: kozlik@natur.cuni.cz 1 Sylabus přednášky: Praxe v HPLC Mobilní fáze Chromatografická kolona Spoje v HPLC Vývoj chromatografické
VícePříprava materiálu byla podpořena projektem OPPA č. CZ.2.17/3.1.00/33253
Příprava materiálu byla podpořena projektem OPPA č. CZ.2.17/3.1.00/33253 Část 16 Iontová chromatografie Iontová chromatografie je speciální technika vyvinutá pro separaci anorganických iontů a organických
VíceCvičení KATA Analytická chemie Chromatografie
je analytická metoda, při které dochází k separaci (rozdělení) jednotlivých složek, které tvoří analyzovaný vzorek. Je založena na opakovaném ustanovení rovnováh mezi dvěma fázemi, mobilní (pohybující
VíceStanovení sacharidů ve vybraných přírodních matricích pomocí kapalinové chromatografie s odpařovacím detektorem rozptylu světla (UHPLC-ELSD)
Stanovení sacharidů ve vybraných přírodních matricích pomocí kapalinové chromatografie s odpařovacím detektorem rozptylu světla (UHPLC-ELSD) A) Ultrazvuková extrakce Ultrazvuková extrakce je významnou
VícePříloha 2. Návod pro laboratorní úlohu
Příloha 2. Návod pro laboratorní úlohu VYSOKÁ ŠKOLA CHEMICKO-TECHNOLOGICKÁ V PRAZE ÚSTAV CHEMIE A ANALÝZY POTRAVIN Technická 5, 166 28 Praha 6 tel./fax.: + 42 224 353 185; jana.hajslova@vscht.cz Analýza
Víceisolace analytu oddělení analytu od matrice (přečištění) zakoncentrování analytu stanovení analytu (analytů) ve vícesložkové směsi
SEPARAČNÍ METODY Využití separačních metod isolace analytu oddělení analytu od matrice (přečištění) zakoncentrování analytu stanovení analytu (analytů) ve vícesložkové směsi Druhy separačních metod Srážení
VíceChromatografické metody
Chromatografické metody Irina Nikolova, Mgr. Oddělení ochrany čistoty ovzduší Český hydrometeorologický ústav, pobočka Ústí nad Labem Kočkovská 18, 400 11 Ústí nad Labem tel: +420 472706050 fax: +420 472706024
VíceGelová permeační chromatografie
Gelová permeační chromatografie (Gel Permeation Chromatography - GPC) - separační a čisticí metoda - umožňuje separaci skupin sloučenin s podobnou molekulovou hmotností (frakcionace) - analyty jsou po
VíceSeparační metody v analytické chemii. Kapalinová chromatografie (LC) - princip
Kapalinová chromatografie (LC) - princip Kapalinová chromatografie (Liquid chromatography, zkratka LC) je typ separační metody, založené na rozdílné distribuci dělených látek ve směsi mezi dvě různé nemísitelné
VícePříprava materiálu byla podpořena projektem OPPA č. CZ.2.17/3.1.00/33253
Příprava materiálu byla podpořena projektem OPPA č. CZ.2.17/3.1.00/33253 Část 10 Chromatografie v reverzním/obráceném módu (Reveresed-Phase chromatography, RP) Princip separace Termín chromatografie v
VíceStanovení cholesterolu ve vaječném žloutku a mléce kapilární elektroforézou
Stanovení cholesterolu ve vaječném žloutku a mléce kapilární elektroforézou Úkol Stanovte obsah cholesterolu ve vaječném žloutku a mléce pomocí kapilární elektroforézy. Teoretická část Cholesterol je steroidní
VíceÚvod do vysokoúčinné kapalinové chromatografie
Vysokoúčinná kapalinová chromatografie Zuzana Bosáková, Josef Cvačka, Petr Kozlík (pondělky 12:20 13:50, CH3) 1/ Úvod do HPLC [JC; 5. 10.] 2/ Teorie HPLC [PK; 12. 10.] 3/ Instrumentace [PK; 19.10.] 4/
VíceChromatografie. 1 Úvod
Chromatografie 1 Úvod Chromatografie je metoda sloužící k separaci a analýze složitých směsí. Chromatografie se velmi široce uplatňuje ve všech vědeckých odvětvích včetně lékařství. V rámci lékařských
VíceRepetitorium chemie IX (2016) (teorie a praxe chromatografie)
Repetitorium chemie IX (2016) (teorie a praxe chromatografie) Chromatografie Podstatou je rozdělování složek směsi dávkovaného vzorku mezi dvěma fázemi Stacionární fáze je nepohyblivá (silikagel, celulóza,
VíceZáklady interpretace hmotnostních spekter
Základy interpretace hmotnostních spekter Zpracováno podle: http://www.chem.arizona.edu/massspec/ - doporučený zdroj pro samostudium 1. Měříme četnost iontů pro dané hodnoty m/z 2. Vytvoříme grafickou
VíceTECHNOLOGIE KE SNIŽOVÁNÍ EMISÍ (SEKUNDÁRNÍ OPATŘENÍ K OMEZOVÁNÍ EMISÍ)
TECHNOLOGIE KE SNIŽOVÁNÍ EMISÍ (SEKUNDÁRNÍ OPATŘENÍ K OMEZOVÁNÍ EMISÍ) 5. část TĚKAVÉ ORGANICKÉ SLOUČENINY A PACHOVÉ LÁTKY Zpracoval: Tým autorů EVECO Brno, s.r.o. TĚKAVÉ ORGANICKÉ SLOUČENINY Těkavé organické
VíceP. Martinková, D. Pospíchalová, R. Jobánek, M. Jokešová. Stanovení perfluorovaných organických látek v elektroodpadech
P. Martinková, D. Pospíchalová, R. Jobánek, M. Jokešová Stanovení perfluorovaných organických látek v elektroodpadech Perfluorované a polyfluorované uhlovodíky (PFC,PFAS) Perfluorované - všechny vodíky
Vícemobilní fáze pohyblivá - obsahuje dělené látky, které mají různou afinitu ke stacionární fázi.
separační metody Chromatografické metody Distribuce látky mezi dvě fáze: stacionární fáze nepohyblivá - ukotvený materiál mobilní fáze pohyblivá - obsahuje dělené látky, které mají různou afinitu ke stacionární
VícePLANÁRNÍ (PLOŠNÁ) CHROMATOGRAFIE
PLANÁRNÍ (PLOŠNÁ) CHROMATOGRAFIE Tenkovrstvá chromatografie je technika pro identifikaci a separaci směsi organických látek Identifikace složek směsi (nutné použít standard) analysa frakcí sbíraných během
Více1. ročník Počet hodin
SOUSTAVY LÁTEK A JEJICH SLOŽENÍ rozdělení přírodních látek a vlastnosti chemických látek soustavy látek a jejich složení STAVBA ATOMU historie pohledu na atom složení a struktura atomu stavba atomu VELIČINY
VícePříprava materiálu byla podpořena projektem OPPA č. CZ.2.17/3.1.00/33253
Příprava materiálu byla podpořena projektem OPPA č. CZ.2.17/3.1.00/33253 Část 14 Iontově výměnná chromatografie Iontově výměnná chromatografie se používá pro separaci aminokyselin od roku 1956. Jak z pohledu
VíceSYNPO, akciová společnost Oddělení analytické a fyzikální chemie S. K. Neumanna 1316, Zelené Předměstí, 532 07 Pardubice
List 1 z 7 Zkoušky: Laboratoři je umožněn flexibilní rozsah akreditace upřesněný v dodatku. Aktuální seznam činností prováděných v rámci vlastního flexibilního rozsahu je k dispozici v laboratoři u manažera
VíceSYNPO, akciová společnost Oddělení analytické a fyzikální chemie S. K. Neumanna 1316, 532 07 Pardubice, Zelené Předměstí
Laboratoř je způsobilá aktualizovat normativní dokumenty identifikující zkušební postupy. Laboratoř uplatňuje flexibilní přístup k rozsahu akreditace upřesněný v dodatku. Aktuální seznam činností prováděných
VíceAldehydy, ketony, karboxylové kyseliny
Projekt: Inovace oboru Mechatronik pro Zlínský kraj Registrační číslo: CZ.1.07/1.1.08/03.0009 Aldehydy, ketony, karboxylové kyseliny Aldehydy jsou organické sloučeniny, které obsahují aldehydickou funkční
VíceJednotné pracovní postupy zkoušení krmiv STANOVENÍ OBSAHU VITAMÍNU D METODOU HPLC
Národní referenční laboratoř Strana 1 STANOVENÍ OBSAHU VITAMÍNU D METODOU HPLC 1 Rozsah a účel Tato metoda specifikuje podmínky pro stanovení vitamínu D v premixech pro výrobu krmných směsí metodou HPLC.
VíceSTANOVENÍ AMINOKYSELINOVÉHO SLOŽENÍ BÍLKOVIN. Postup stanovení aminokyselinového složení
STANVENÍ AMINKYSELINVÉH SLŽENÍ BÍLKVIN Důvody pro stanovení AK složení určení nutriční hodnoty potraviny, suroviny (esenciální vs. neesenciální AK) charakterizace určité bílkovinné frakce nebo konkrétní
VíceCHEMICKY ČISTÁ LÁTKA A SMĚS
CHEMICKY ČISTÁ LÁTKA A SMĚS Látka = forma hmoty, která se skládá z velkého množství základních stavebních částic: atomů, iontů a... Látky se liší podle druhu částic, ze kterých se skládají. Druh částic
VíceTrendy v moderní HPLC
Trendy v moderní HPLC Josef Cvačka, 5.1.2011 CHROMATOGRAFIE NA ČIPECH Miniaturizace separačních systémů Mikrofluidní čipy Mikrofabrikace Chromatografické mikrofluidní čipy s MS detekcí Praktické využití
VíceJednotné pracovní postupy zkoušení krmiv STANOVENÍ OBSAHU MASTNÝCH KYSELIN V OLEJÍCH A TUCÍCH METODOU GC
Národní referenční laboratoř Strana 1 STANOVENÍ OBSAHU MASTNÝCH KYSELIN V OLEJÍCH A TUCÍCH METODOU GC 1 Rozsah a účel Metoda je určena pro kvantitativní a kvalitativní určení složení směsi methylesterů
VíceVysokoúčinná kapalinová chromatografie. Petr Kozlík Katedra analytické chemie
Vysokoúčinná kapalinová chromatografie Petr Kozlík Katedra analytické chemie e-mail: kozlik@natur.cuni.cz http://web.natur.cuni.cz/~kozlik/ 1 Vysokoúčinná kapalinová chromatografie Teorie HPLC Praktické
VíceSelektrivní distribuce anlytu mezi rozpouštědlo a adsorpční povrch stacionární fáze. Konkurence na povrchu sorbentu: analyt versus solvent
Vysokoúčinná kapalinová chromatografie - Techniky/mody HPLC - I Příprava předmětu byla podpořena projektem PPA č. CZ.2.17/3.1.00/33253 2.3.1. Techniky HPLC - Mody HPLC 2.3.1.1. Adsorpční chromatografie
VíceZáklady analýzy potravin Přednáška 7. Důvody pro stanovení vody v potravinách. Obsah vody v potravinách a potravinových surovinách
VODA Důvody pro stanovení vody v potravinách technologická a hygienická jakost (údržnost, konzistence) ekonomická hlediska vyjádření obsahu jiných složek v sušině vzorku Obsah vody v potravinách a potravinových
VíceJednotné pracovní postupy zkoušení krmiv STANOVENÍ OBSAHU MADURAMICINU A SEMDURAMICINU METODOU HPLC
Národní referenční laboratoř Strana 1 STANOVENÍ OBSAHU MADURAMICINU A SEMDURAMICINU METODOU HPLC 1 Rozsah a účel Metoda specifikuje podmínky pro stanovení maduramicinu a semduramicinu v krmivech a premixech.
VíceÚvod do vysokoúčinné kapalinové chromatografie
Úvod do vysokoúčinné kapalinové chromatografie Josef Cvačka, 1. 10. 2018 Chromatografické techniky převzato z M.Klusáčková: Chromatografie Královna analýz Vysokoúčinná kapalinová chromatografie Vysokoúčinná
VíceRepetitorium chemie IV (2014)
Repetitorium chemie IV (2014) Chromatografie Podstatou je rozdělování složek směsi dávkovaného vzorku mezi dvěma fázemi Stacionární fáze je nepohyblivá (silikagel, celulóza, polymerní částice) Mobilní
VíceSuperkritická fluidní extrakce (SFE) Superkritická fluidní extrakce
Superkritická fluidní extrakce (zkráceně SFE, z angl. Supercritical Fluid Extraction) = extrakce, kde extrakčním činidlem je tekutina v superkritickém stavu, tzv. superkritická (nadkritická) tekutina (zkráceně
VíceI N V E S T I C E D O R O Z V O J E V Z D Ě L Á V Á N Í
CHEMICKY ČISTÉ LÁTKY A SMĚSI Látka = forma hmoty, která se skládá z velkého množství základních částic: atomů, iontů a... 1. Přiřaďte látky: glukóza, sůl, vodík a helium k níže zobrazeným typům částic.
VíceProblémy u kapalinové chromatografie
Problémy u kapalinové chromatografie Troubleshooting 1 Problémy v HPLC Většinu problémů, které se vyskytují při separaci látek na chromatografické koloně můžeme vyčíst již zpouhého průběhu základní linie,
VíceVysokoúčinná kapalinová chromatografie
Příprava materiálu byla podpořena projektem OPPA č. CZ.2.17/3.1.00/33253 Vysokoúčinná kapalinová chromatografie Autorský kolektiv ústavu 402 VŠCHT Praha Část 1, Úvod Vysokoúčinná kapalinová chromatografie
VíceCS Úřední věstník Evropské unie L 54/85
26.2.2009 CS Úřední věstník Evropské unie L 54/85 F. STANOVENÍ DICLAZURILU 2,6-dichlor-alfa-(4-chlorofenyl)-4-(4,5-dihydro-3,5-dioxo-1,2,4-triazin-2-(3-H)yl)benzenacetonitril 1. Účel a rozsah Tato metoda
VíceTeorie chromatografie - I
Teorie chromatografie - I Veronika R. Meyer Practical High-Performance Liquid Chromatography, Wiley, 2010 http://onlinelibrary.wiley.com/book/10.1002/9780470688427 Příprava předmětu byla podpořena projektem
VíceVYSOKOÚČINNÁ KAPALINOVÁ CHROMATOGRAFIE (HPLC) HPLC = high performance liquid chromatography high pressure liquid chromatography
VYSOKOÚČINNÁ KAPALINOVÁ CHROMATOGRAFIE (HPLC) HPLC = high performance liquid chromatography high pressure liquid chromatography Separační principy kapalinové chromatografie adsorpce: anorg. sorbenty Al
VíceSeparační metody SEPARAČNÍ (DĚLÍCÍ) METODY CHROMATOGRAFIE ROZDĚLENÍ SEPARAČNÍCH METOD. www.natur.cuni.cz/~suchan. Jana Sobotníková
Univerzita Karlova v Praze Přírodovědecká fakulta Katedra analytické chemie Separační metody Jana Sobotníková tel.: 221951230 e-mail: jana.sobotnikova@natur.cuni.cz www.natur.cuni.cz/~suchan *přednášky
VíceHYDROXYDERIVÁTY - ALKOHOLY
LABORATORNÍ PRÁCE Č. 26 HYDROXYDERIVÁTY - ALKOHOLY PRINCIP Hydroxyderiváty jsou kyslíkaté deriváty uhlovodíků, které vznikají náhradou jednoho nebo více atomů vodíku v molekule uhlovodíku hydroxylovou
VíceVysokoúčinná kapalinová chromatografie High-Performance Liquid Chromatography (HPLC) Příprava předmětu byla podpořena projektem OPPA č. CZ.2.17/3.1.00/33253 Kapalinová chromatografie (LC) 1.1. Teorie kapalinové
VíceVLIV CHROMATOGRAFICKÝCH PODMÍNEK NA ELUČNÍ CHARAKTERISTIKY SEPAROVANÝCH LÁTEK - SLOŽENÍ MOBILNÍ FÁZE
Mobilní fáze VLIV CHROMATOGRAFICKÝCH PODMÍNEK NA ELUČNÍ CHARAKTERISTIKY SEPAROVANÝCH LÁTEK - SLOŽENÍ MOBILNÍ FÁZE Složení mobilní fáze má vliv na eluční charakteristiky : účinnost kolony; kapacitní poměr;
VíceKapalinová chromatografie
Kapalinová chromatografie LC - mobilní fáze kapalina, která proudí kolonou naplněnou stacionární fází 1 - adsorpční chromatografie (LSC) tuhá látka jako sorbent (použití méně často proti LLC) 2 -rozdělovací
VíceSeparační metody. Jana Sobotníková. přednášky též ke stažení v SIS nebo Moodle
Separační metody Jana Sobotníková e-mail: jana.sobotnikova@natur.cuni.cz www.natur.cuni.cz/~suchan přednášky též ke stažení v SIS nebo Moodle SEPARAČNÍ (DĚLÍCÍ) METODY založeny (většinou) na rozdílné distribuci
VíceHYDROGENAČNÍ RAFINACE MINERÁLNÍCH OLEJŮ
VYSOKÁ ŠKOLA CHEMICKO-TECHNOLOGICKÁ V PRAZE Fakulta technologie ochrany prostředí Ústav technologie ropy a alternativních paliv HYDROGENAČNÍ RAFINACE MINERÁLNÍCH OLEJŮ Laboratorní cvičení ÚVOD Při výrobě
VíceSimazin. Standardizované metody
Zpracováno podle Raclavská, H. Kuchařová, J. Plachá, D.: Podklady k provádění Protokolu o PRTR Přehled metod a identifikace látek sledovaných podle Protokolu o registrech úniků a přenosů znečišťujících
VíceGymnázium Vysoké Mýto nám. Vaňorného 163, 566 01 Vysoké Mýto
Gymnázium Vysoké Mýto nám. Vaňorného 163, 566 01 Vysoké Mýto Alklany a cykloalkany Homologická řada alkanů Nerozvětvené alkany tvoří homologickou řadu obecného vzorce C n H 2n+2, kde n jsou malá celá čísla.
VíceEXTRAKČNÍ METODY používané pro stanovení lipofilních a hydrofilních látek. Mgr. Romana Kostrhounová, Ph. D. RNDr. Ivana Borkovcová, Ph.D.
EXTRAKČNÍ METODY používané pro stanovení lipofilních a hydrofilních látek Mgr. Romana Kostrhounová, Ph. D. RNDr. Ivana Borkovcová, Ph.D. EXTRAKČNÍ METODY Úvod rozdělení látek podle polarity extrakce lipofilních
VíceADSORPČNÍ CHROMATOGRAFIE (LSC)
EXTRAKCE TUHOU FÁZÍ ADSORPČNÍ CHROMATOGRAFIE (LSC) -rozdělení směsi látek (primární extrakt) na sloupci sorbentu ve skleněné koloně s fritou (cca 50 cm x 1 cm) -obvykle jde o selektivní adsorpci nežádoucích
VíceVYSOKÁ ŠKOLA CHEMICKO-TECHNOLOGICKÁ V PRAZE Ústav chemie a analýzy potravin Technická 5, 166 28 Praha 6 tel./fax: 220443185, tel. 220443184, 224314096
strana 1/15 VYSOKÁ ŠKOLA CHEMICKO-TECHNOLOGICKÁ V PRAZE Ústav chemie a analýzy potravin Technická 5, 166 28 Praha 6 tel./fax: 220443185, tel. 220443184, 224314096 PROTOKOL O ZKOUŠCE č. LN 8212 LN 8217
VíceStanovení sacharidů ve vybraných přírodních matricích pomocí kapalinové chromatografie s odpařovacím detektorem rozptylu světla (HPLC-ELSD)
Stanovení sacharidů ve vybraných přírodních matricích pomocí kapalinové chromatografie s odpařovacím detektorem rozptylu světla (HPLC-ELSD) A) Ultrazvuková extrakce Ultrazvuková extrakce je významnou extrakční
VíceÚvod do problematiky extrakčních metod
Inovace výuky veterinárních studijních programů v oblasti bezpečnosti potravin (reg. č. CZ.1.07/2.2.00/15.0063) Úvod do problematiky extrakčních metod RNDr. Ivana Borkovcová, Ph.D. Obsah definice, vymezení
VíceCHROMATOGRAFIE ÚVOD Společný rys působením nemísících fází: jedna fáze je nepohyblivá (stacionární), druhá pohyblivá (mobilní).
CHROMATOGRAFIE ÚOD Existují různé chromatografické metody, viz rozdělení metod níže. Společný rys chromatografických dělení: vzorek jako směs látek - složek se dělí na jednotlivé složky působením dvou
Více215.1.10 SKUPINOVÁ ANALÝZA MOTOROVÝCH NAFT
215.1.10 SKUPINOVÁ ANALÝZA MOTOROVÝCH NAFT ÚVOD Snižování emisí výfukových plynů a jejich škodlivosti je hlavní hnací silou legislativního procesu v oblasti motorových paliv. Po úspěšném snížení obsahu
VícePřístupy k analýze opticky aktivních látek metodou HPLC
Přístupy k analýze opticky aktivních látek metodou HPLC Karel Lemr Katedra analytické chemie, Přírodovědecká fakulta Univerzity Palackého tř. Svobody 8, 771 46 Olomouc lemr@prfnw.upol.cz Zentiva, Praha,
VícePotřebný čas pro výuku DUM: Metodické zhodnocení a popis práce s digitálním učebním materiálem:
Název školy Číslo projektu Číslo a název klíčové aktivity ZÁKLADNÍ ŠKOLA, JIČÍN, HUSOVA 170 CZ.1.07/1.4.00/21.2862 3.2 Inovace a zkvalitnění výuky prostřednictvím ICT Název DUM: DERIVÁTY UHLOVODÍKŮ Šablona
VícePříloha 1: Série chromatogramů vybraných standardů polyfenolických látek zaznamenány pomocí metody HPLC s detekcí UV-DAD.
PŘÍLOHY 1-3 Seznam příloh Příloha 1: Série chromatogramů vybraných standardů polyfenolických látek zaznamenány pomocí metody HPLC s detekcí UV-DAD. Obr. 1.1: Série chromatogramů standardů polyfenolických
VícePříprava materiálu byla podpořena projektem OPPA č. CZ.2.17/3.1.00/33253
Příprava materiálu byla podpořena projektem OPPA č. CZ.2.17/3.1.00/33253 Část 23 Preparativní chromatografie je používána pro separaci látek, které jsou určeny pro další zpracování. Množství získávané
VíceIontové zdroje II. Iontový zdroj. Data. Vzorek. Hmotnostní analyzátor. Zdroj vakua. Iontové zdroje pracující za sníženého tlaku
Iontové zdroje II. Iontové zdroje pracující za sníženého tlaku Elektronová/chemická ionizace Iontové zdroje pro spojení s planárními separacemi Ionizace laserem za účasti matrice Ambientní ionizační techniky
VíceStudijní materiál HMF_1 1. Hydroxymethylfurfural a jeho stanovení v potravinách 2. Kapalinová chromatografie (HPLC, UPLC)
Studijní materiál HMF_1 1. Hydroxymethylfurfural a jeho stanovení v potravinách 2. Kapalinová chromatografie (HPLC, UPLC) V Brně dne 20. 11. 2011 Vypracoval: RNDr. Ivana Borkovcová, Ph.D. 1. Hydroxymethylfurfural
Více[ A] 7. KAPITOLA CHROMATOGRAFIE K =
7. KAPITOLA CHROMATOGRAFIE Chromatografie je primární separační metoda, při níž se využívá mnohokrát opakované ustanovení rovnováhy mezi dvěma nemísitelnými fázemi. Jedná se o mnohostrannou techniku, která
VíceOrganická chemie - úvod
rganická chemie - úvod Trocha historie Původní dělení hmoty: Neživá anorganická Živá organická Rozdělení chemie na organickou a anorganickou objevy a isolace látek z přírodních materiálů.w.scheele(1742-1786):
VíceIVA: 2015FaF/3150/89
IVA: 2015FaF/3150/89 Analýza optické čistoty vybraných léčiv pomocí HPLC inovace úloh praktických cvičení z předmětů: organická chemie, farmaceutická chemie, analytická chemie nebo analýza léčiv Lucie
VíceKAPALINOVÁ CHROMATOGRAFIE A ABSORPČNÍ UV SPEKTROFOTOMETRIE
KAPALINOVÁ CHROMATOGRAFIE A ABSORPČNÍ UV SPEKTROFOTOMETRIE D. SÝKORA, J. FÄHNRICH Obecné základy kapalinové eluční kolonové chromatografie Kapalinová chromatografie je jednou z chromatografických separačních
VíceII. Chromatografické separace
II. Chromatografické separace 9. Jednotlivé chromatografické metody Adsorpční, gelová, iontově výměnná, afinitní chromatografie, chromatografie na reverzní a normální fázi 10. Teoretické základy chromatografických
VíceIontové zdroje II. Iontový zdroj. Data. Vzorek. Hmotnostní analyzátor. Zdroj vakua. Iontové zdroje pracující za sníženého tlaku
MC230P43 Hmotnostní detekce v separačních metodách, 2015 Iontové zdroje II. Iontové zdroje pracující za sníženého tlaku Elektronová/chemická ionizace Iontové zdroje pro spojení s planárními separacemi
VíceDERIVÁTY - OPAKOVÁNÍ
DERIVÁTY - OPAKOVÁNÍ Doplňte k názvu derivátu uhlovodíku charakteristickou skupinu: alkohol Název derivátu Charakteristická skupina nitroderivát karboxylová kyselina aldehyd halogenderivát keton Doplňte
VíceChromatografické metody základní rozdělení a instrumentace
Chromatografické metody základní rozdělení a instrumentace Plynová chromatografie separace organických látek s bodem varu do 400 C není vhodná k separaci biomakromolekul detekce produktů enzymových reakcí
VíceChemie životního prostředí III Atmosféra (10) Těkavé organické látky (VOCs)
Centre of Excellence Chemie životního prostředí III Atmosféra (10) Těkavé organické látky (VOCs) Ivan Holoubek RECETOX, Masaryk University, Brno, CR holoubek@recetox. recetox.muni.cz; http://recetox.muni
Více