Výsledky kontroly jakosti transfuzních přípravků ve vztahu k procesu jeho výroby a ve vztahu k pohlaví dárce krve

Transkript

1 Masarykova univerzita v Brně Lékařská fakulta Výsledky kontroly jakosti transfuzních přípravků ve vztahu k procesu jeho výroby a ve vztahu k pohlaví dárce krve Bakalářská práce V oboru zdravotní laborant Vedoucí bakalářské práce: MVDr. Naděţda Poloková Autor: Kateřina Bajajová Brno, duben 21

2 Jméno a příjmení autora: Kateřina Bajajová Název bakalářské práce: Výsledky kontroly jakosti transfuzních přípravků ve vztahu k procesu jeho výroby a ve vztahu k pohlaví dárce krve Pracoviště: Transfuzní oddělení a krevní banka FN Brno Vedoucí bakalářské práce: MVDr. Naděţda Poloková Rok obhajoby bakalářské práce: 21 Souhrn: Předmětem této práce je analýza jakosti vybraných transfuzních přípravků na TO a KB ve Fakultní nemocnici Brno za rok 28 ve vztahu k procesu jeho výroby a ve vztahu k pohlaví dárce krve. Na začátku práce je popsána krev a jednotlivé krevní sloţky, poté vybrané transfuzní přípravky, jejich charakteristika, odběr, výroba, skladování, transport, označení a indikace k pouţití. Další část poskytuje informace o kontrole kvality a parametrech jakosti transfuzních přípravků. Parametry jakosti transfuzních přípravků ve vztahu k procesu výroby a k pohlaví dárce krve jsou analyzovány a statisticky zhodnoceny v závěrečné části práce. Klíčová slova: transfuzní přípravky, parametry jakosti, vztah k pohlaví Souhlasím, aby práce byla půjčována ke studijním účelům a byla citována dle platných norem.

3 Prohlašuji, ţe jsem bakalářskou práci vypracovala samostatně pod vedením MVDr. Naděţdy Polokové a uvedla v seznamu literatury všechny pouţité literární a odborné zdroje. V Brně dne.. Kateřina Bajajová

4 Poděkování Děkuji paní MVDr. Naděţdě Polokové za cenné rady, pomoc během zpracování práce a v neposlední řadě za ochotu a čas věnovaný této práci. Dále bych chtěla poděkovat svým rodičům za jejich podporu a trpělivost.

5 Použité symboly a zkratky AB 16 ACD-A ATP CMV CPD DK EBR ERD F VIII FNHTR Hb Htk antikoagulační roztok antikoagulační roztok adenosintrifosfát cytomegalovirus antikoagulační roztok dárce krve erytrocyty bez buffy coatu resuspendované erytrocyty resuspendované, deleukotizované faktor VIII febrilní nehemolytická potransfuzní reakce hemoglobin hematokrit IL-1, 6 interleukin 1, 6 KK OS P PLT PVC RBC SAG-M TA TAD TB TO a KB FN Brno TP WBC kontrola kvality odběrové středisko čerstvá zmraţená plazma trombocyty polyvinylchlorid erytrocyty resuspenzní roztok trombocyty z aferézy trombocyty z aferézy deleukotizované trombocyty z buffy coatu transfuzní oddělení a krevní banka Fakultní nemocnice Brno transfuzní přípravek leukocyty

6 Obsah Úvod Krev Popis krve Erytrocyt = červená krvinka Trombocyt = krevní destička Plazma Leukocyt = bílá krvinka Fyziologie krve, rozdíly mezi muţem a ţenou Jednotlivé transfuzní přípravky Vliv parametrů dárce na zpracování odebrané plné krve a výrobu transfuzních přípravků Transfuzní přípravky erytrocytového typu Charakteristika Erytrocyty bez buffy coatu resuspendované Erytrocyty resuspendované, deleukotizované Odběr Výroba Skladování Transport Značení Indikace k pouţití Transfuzní přípravky trombocytového typu Charakteristika Trombocyty z buffy coatu Trombocyty z aferézy Trombocyty z aferézy deleukotizované Odběr, výroba... 21

7 Trombocyty z buffy coatu Trombocyty z aferézy, trombocyty z aferézy deleukotizované Skladování Transport Značení Indikace k pouţití Transfuzní přípravek plazma čerstvá zmraţená Charakteristika Odběr, výroba Skladování Transport Značení Indikace k pouţití Kontrola kvality Zajištění jakosti Kontrolované parametry u kaţdého odběru Sledované parametry jednotlivých transfuzních přípravků Sledované parametry u EBR Sledované parametry u ERD Sledované parametry u TB Sledované parametry u TA Sledované parametry u TAD Sledované parametry u P Statistická část První série grafů Druhá série grafů Třetí série grafů Závěr... 59

8 Pouţité zdroje... 6 Obrazová dokumentace Přílohy... 63

9 Úvod Cílem práce byla analýza jakosti transfuzních přípravků, tedy statistické zhodnocení jejich parametrů jakosti s ohledem vlivu pohlaví dárce krve a procesu výroby. Existuje mnoho transfuzních přípravků. Jsou to transfuzní přípravky erytrocytového typu, trombocytového typu a plazma. V této práci jsou analyzovány jen vybrané transfuzní přípravky, na základě pověření vedoucího práce MVDr. N. Polokové. Jedná se o 6 druhů transfuzních přípravků, které se vyrábějí a podávají pacientům nejčastěji. Všechny údaje pouţité ve statistické části této práce jsou získány z dostupných materiálů TO a KB FN Brno za rok 28. Celá práce je členěna do dvou úseků, na část teoretickou a část statistickou. Teoretická část je dále rozdělena na tři kapitoly, z nichţ první kapitola popisuje krev, jednotlivé krevní sloţky a rozdíly ve fyziologii krve u muţů a ţen. Druhá kapitola informuje o vybraných transfuzních přípravcích, jejich charakteristice, odběru, výrobě, skladování, transportu, označení a indikaci k pouţití. Kontrolou kvality a parametry jakosti transfuzních přípravků se zabývá kapitola třetí. V části statistické jsou graficky zpracovány jednotlivé parametry jakosti v závislosti na procesu výroby a pohlaví dárce krve. Je zde porovnána kvalita transfuzních přípravků vzhledem k limitům, které jsou dány vyhláškou 143/28 Sb. o lidské krvi. V závěru jsou zhodnoceny poznatky vyplývající ze statistické části. 9

10 1 Krev Cílem této kapitoly je poskytnutí krátkého úvodu o krvi kolující v cévním řečišti a jednotlivých krevních sloţkách. Na konci kapitoly je zmínka o rozdílech ve fyziologii krve u muţů a ţen Popis krve Krev lze charakterizovat jako červenou, neprůhlednou, vazkou kapalinu, která plní ţivotně důleţité funkce. Mezi tyto funkce patří udrţování homeostázy, zajišťování imunity, termoregulace, transport kyslíku z plic do tkání a oxidu uhličitého z tkání do plic a rozvod speciálních látek jako jsou hormony, vitamíny a ţiviny. Objem krve je proměnlivý s pohlavím, výškou, hmotností, fyzickou aktivitou, věkem a zdravotním stavem. Její objem činí 4,5 6 l, přičemţ ţeny mají asi o 1% menší objem neţ muţi, coţ je spjato s menším mnoţstvím erytrocytů. V krvi rozeznáváme část buněčnou a část tekutou, která je tvořena plazmou. Část buněčná je zastoupena erytrocyty, trombocyty a leukocyty Erytrocyt = červená krvinka Slovo pochází z řeckého erythros = červený a kýtos = buňka. 2 Erytrocyt je bezjaderný buněčný fragment, v krvi nejpočetněji zastoupen. Normální hodnota v obvodové krvi je 4,3 5,7 x 1 12 / l u muţů a 3,8 4,9 x 1 12 / l u ţen. Má bikonkávní, dvojvydutý tvar. Tento tvar je velmi výhodný, protoţe umoţňuje erytrocytu snést opakované deformace z jeho průměru 7,2 μm ve velkých cévách na průměry kolem 2 μm v kapilárách a mezi endotelovými buňkami. Erytrocyt je tvořen u dospělého jedince v kostní dřeni. Jeho normální délka ţivota v obvodové krvi je asi 12 dní. (Obr. 1) Poté opouští cirkulaci a je destruován zejména ve slezině. Při zvýšeném zániku erytrocytů v obvodové krvi, můţe být jejich mnoţství po určitou mez kompenzováno zvýšenou erytropoézou, či-li zvýšeným vznikem a vývojem červených krvinek. 1 2 WILHELM et al. Stručný přehled fyziologie člověka pro bakalářské studijní programy (Brno, 25) PECKA, M. Přehled laboratorní hematologie I., Krvetvorba, Červená krevní řada (Praha, 1995) 1

11 Obr. 1 Vývojová řada erytrocytu Pluripotentní kmenová buňka Proerytroblast (pronormoblast) Bazofilní erytroblast (normoblast) Polychromní erytroblast (normoblast) Oxyfilní erytroblast (normoblast) Retikulocyt Erytrocyty Erytrocyt povaţujeme za buňku neúplnou z důvodu absence většiny nitrobuněčných organel. I přesto jsou buňkami FEWF nenahraditelnými. Hlavní funkcí erytrocytů v organismu, kterou zprostředkovává hemoglobin, je vazba a přenos O 2 z plic do tkání a CO 2 opačným směrem. Červené krevní barvivo hemoglobin a poměrně velký počet erytrocytů v krvi jí dává charakteristické červené zabarvení. Z funkčního hlediska je nejdůleţitější součástí erytrocytu hemoglobin, avšak neméně důleţitou roli hraje i jeho buněčná membrána a enzymatická výbava. Buněčná membrána erytrocytu je pevná, ale i elastická. Jejím základem je dvojvrstva fosfolipidů. Na membráně rozlišujeme vnitřní a vnější stranu. K vnitřní straně jsou fixovány kontraktilní bílkoviny, hlavně spektrin a aktin, které udrţují tvar a zajišťují pruţnost 11

12 erytrocytu. Vnější strana obsahuje integrální molekuly glykolipidů a glykoproteinů, coţ jsou antigeny a receptory, podle kterých určujeme krevní skupiny. Tyto antigeny neboli aglutinogeny formují 27 antigenních skupinových systémů. Nebezpečí hemolytické reakce nastává, kdyţ příjemce transfuze erytrocytů vytvoří specifické protilátky proti aglutinogenům transfundovaných erytrocytů. Důsledkem je vazba protilátek na erytrocyt a jeho předčasná destrukce. 3 V erytrocytu probíhají intenzivní metabolické pochody, které jsou zajištěny asi 22 základními enzymy. Tyto enzymy umoţňují jak anaerobní, tak i aerobní glykolýzu, při nichţ vzniká chemická energie v podobě ATP. Hlavním zdrojem energie v erytrocytu je tedy odbourávání glukosy. Velmi důleţitý produkt metabolismu 2,3-difosfoglycerát chrání deoxygenovaný hemoglobin. S jeho stoupající hladinou je uvolnění kyslíku z hemoglobinu snadnější Trombocyt = krevní destička Slovo pochází z řeckého thrombos = sedlina, sraţenina. 5 Trombocyt je ze všech krvinek nejmenší bezjaderný element. Tento v nativním nátěru jevící se okrouhlý nebo protáhlý element tvaru oválného disku dosahuje průměru kolem 1,5 3,5 μm. Za fyziologických okolností činí počet trombocytů v periferní krvi x 1 9 / l, coţ představuje asi dvě třetiny. Jedna třetina trombocytů se nachází ve slezině jako tzv. slezinný pool. Tento pool se dostává do cirkulace v krizových situacích, např. při velkých ztrátách krve. Trombocyt vzniká v kostní dřeni fragmentací cytoplazmy velkých dřeňových buněk, megakaryocytů. (Obr. 2) Fyziologicky přeţívá v obvodové krvi 8 14 dní po vyplavení z kostní dřeně. Postupně u něj probíhá proces stárnutí ukončený odbouráváním nefunkčního zestárlého trombocytu především ve slezině, ale i v játrech a kostní dřeni. Obr. 2 Vývojová řada trombocytu 3 PECKA, M. Laboratorní hematologie v přehledu, 2. díl, Fyziologie a patofyziologie krevní buňky (Český Těšín, 26), PENKA et al. Hematologie-učební text, Institut pro další vzdělávání pracovníků ve zdravotnictví v Brně (Brno, 1994), Rada evropy, optimální vyuţití krve (25) 4 PECKA, M. Laboratorní hematologie v přehledu, 2. díl, Fyziologie a patofyziologie krevní buňky (Český Těšín, 26), PENKA et al. Hematologie-učební text, Institut pro další vzdělávání pracovníků ve zdravotnictví v Brně (Brno, 1994) 5 PECKA, M. Přehled laboratorní hematologie I., Krvetvorba, Červená krevní řada (Praha, 1995) 12

13 Megakaryoblast Megakaryocyt Trombocyty Hlavní funkcí trombocytu v organismu je tvorba tzv. primární cévní zátky, zejména při porušení celistvosti cévní stěny provázené krvácením. Narušením cévní výstelky dostanou trombocyty podnět k adhezi, při níţ se uplatňuje především faktor VIII, coţ je hemokoagulační plazmatický faktor. Dalším krokem je vzájemné shlukování destiček k sobě, čímţ vzniká destičkový agregát tvořící základ trombu a tedy základ pro zástavu krvácení. Retrakce neboli smrštění koagula je další důleţitou úlohou trombocytů. K tomu, aby trombocyty mohly vykonávat všechny tyto děje, je zapotřebí velké mnoţství energie, která je získávána při anaerobní glykolýze a oxidativní fosforylaci probíhající v mitochondriích trombocytů Plazma Slovo pochází z řeckého plassein = tvořit. 7 Plazma představuje tekutou část krve, ve které je rozptýlena část buněčná zastoupena erytrocyty, leukocyty a trombocyty. Na plazmu připadá z celkového krevního objemu asi 55%, coţ odpovídá u zdravého dospělého člověka 2,8 3,5 litrům. 6 PECKA, M. Přehled laboratorní hematologie II., Bílá krevní řada, Krevní destička (Praha, 1996), PECKA, M. Laboratorní hematologie v přehledu, 2. díl, Fyziologie a patofyziologie krevní buňky (Český Těšín, 26), PENKA et al. Hematologie-učební text, Institut pro další vzdělávání pracovníků ve zdravotnictví v Brně (Brno, 1994), ZVAROVÁ et al. Hematologie a transfuzní služba-učební texty pro studenty SZŠ Lipová v Brně, Obor zdravotní laborant, 1. díl-hematologie (Brno, 25) 7 PECKA, M. Přehled laboratorní hematologie I., Krvetvorba, Červená krevní řada (Praha, 1995) 13

14 Krevní plazma je extracelulární, průhledná, lehce naţloutlá tekutina se slabě zásaditou povahou. Získáme ji centrifugací nesráţlivé krve. Při zvýšeném mnoţství tukových látek můţe vykazovat lehké zakalení, jindy při hyperbilirubinémii sledujeme ţluté zabarvení a červeně zbarvená plazma nás upozorňuje na proběhlou hemolýzu erytrocytů. Plazma obsahuje látky anorganické a organické. Mezi anorganické látky patří voda, kationty, anionty a plyny jako jsou O 2, CO 2 a N 2. Voda, které je nejvíc, tvoří zhruba 8% plazmy. Kationty K + a Na + jsou zodpovědné za rovnováhu mezi mimo a nitrobuněčnou tekutinou. Ca 2+ a Mg 2+ jsou nezbytné pro správnou funkci nervové tkáně, srdeční a kosterní svalové tkáně, při obranyschopnosti organismu a při krevním sráţení. Fe 2+, Cu 2+ a Co 2+ jsou důleţité pro funkci některých enzymů a podílí se na hemopoéze. Z aniontů jsou významné fosfátové a uhličitanové, které udrţují acidobazickou rovnováhu, počítáme je tedy do nárazníkového systému. Hlavním aniontem mimobuněčné tekutiny je Cl - udrţující osmolalitu. Dále stojí za zmínku I -, bez kterého by nedocházelo k tvorbě hormonů štítné ţlázy. Z organických látek najdeme v plazmě bílkoviny, nebílkovinné dusíkaté látky, cukry, tuky, enzymy, vitamíny a hormony. Největší část bílkovin tvoří albumin udrţující onkotický tlak krve a pak globuliny, ze kterých vznikne po elektroforéze pět frakcí. Globuliny tvoří velmi heterogenní skupinu s nejrůznějšími vlastnostmi a funkcemi. V plazmě je v neaktivní formě bílkovina fibrinogen, která je základem pro sráţení krve. Lipidy slouţí jako energetická zásobárna organismu, zatímco pomocí sacharidů energii získáváme Leukocyt = bílá krvinka Slovo pochází z řeckého leukos = bílý a kýtos = buňka. 9 Leukocyty jsou nazývány buňkami imunitního systému. Jejich celkové mnoţství v obvodové krvi je 4 9 x 1 9 / l jak u muţů, tak u ţen. Hlavní funkcí leukocytů je obranyschopnost organismu proti cizorodým látkám. 8 PECKA, M. Přehled laboratorní hematologie I., Krvetvorba, Červená krevní řada (Praha, 1995), LEXOVÁ et al. Hematologie pro zdravotní laboranty, 1. díl (Brno, 2) 9 PECKA, M. Přehled laboratorní hematologie I., Krvetvorba, Červená krevní řada (Praha, 1995) 14

15 Podle toho, zda v cytoplazmě obsahují granula nebo ne, dělíme je na granulocyty a agranulocyty. Neutrofily, bazofily a eozinofily patří mezi granulocyty, zatímco monocyty a lymfocyty jsou agranulocyty. Všech 5 druhů leukocytů se liší místem vzniku, délkou ţivota a funkcí. Zastoupení jednotlivých druhů leukocytů v krvi zjistíme pomocí tzv. diferenciálního rozpočtu bílých krvinek Fyziologie krve, rozdíly mezi mužem a ženou Je všeobecně známo, ţe muţi jsou konstrukčně větší, mají vyšší hmotnost a více krve neţ ţeny, proto také mohou ročně darovat plnou krev 5 krát, zatímco ţeny pouze 4 krát v dostatečně dlouhých intervalech mezi jednotlivými odběry. Erytrocyty jsou nejpočetnější sloţkou krve. Jejich mnoţství v krvi je ovlivněno právě pohlavím (4,3 5,7 x 1 12 / l u muţů a 3,8 4,9 x 1 12 / l u ţen). Pohlavní rozdíly vznikají vlivem pohlavních hormonů na erytropoetin. Erytropoetin je růstový faktor pro červenou krevní řadu. Testosteron, či-li muţský pohlavní hormon, stimuluje tvorbu erytropoetinu. Naopak estrogen, či-li ţenský pohlavní hormon, tvorbu erytropoetinu inhibuje. Hlavní funkční sloţka erytrocytu, hemoglobin, zabezpečuje vazbu a přenos O 2 z plic do tkání. Koncentrace hemoglobinu u muţů je fyziologicky v rozmezí g/l a u ţen g/l. Z toho vyplývá, ţe ţeny mají niţší transportní kapacitu pro kyslík. Hematokrit vyjadřuje objemové zastoupení erytrocytů z celkového objemu krve. Jeho hodnota činí,4,51 u muţů a,38,46 u ţen. Sedimentace je rychlost, s jakou erytrocyty samovolně sedimentují v nesráţlivé krvi. Díky menšímu počtu erytrocytů a vyššímu obsahu fibrinogenu v plazmě je sedimentace u ţen vyšší. Její hodnota je 6 11 mm/h u ţen a 3 8 mm/h u muţů. Počet leukocytů u dospělého člověka je stejný, bez pohlavních rozdílů. Fyziologicky se mění s příjmem potravy, emocemi a tělesnou námahou. U zdravého člověka se pohybuje počet leukocytů od 4 do 1 x 1 9 /l. Aby byl dárce krve odebrán, lze přijmout hodnotu 3,5 x 1 9 / l leukocytů, ale jen v případě, ţe jeho mnoţství neutrofilů je nad 1,5 x 1 9 / l. 1 ZVAROVÁ et al. Hematologie a transfuzní služba-učební texty pro studenty SZŠ Lipová v Brně, Obor zdravotní laborant, 1. díl-hematologie (Brno, 25) 15

16 Hodnota trombocytů se u muţů a ţen výrazně neliší (13 38 x 1 9 /l). Přirozená odchylka nastává u ţen těsně před menstruací, kdy se můţe počet destiček lehce sníţit. S končící menstruací se obvykle vrátí normální hodnoty. Plazma ţen na TO a KB FN Brno se vyuţívá především pro frakcionaci (výrobu krevních derivátů). Pro klinické pouţití se vyuţívá výjimečně z důvodu imunizace ţen v těhotenství Informační web pro studenty a veřejnost, 16

17 2 Jednotlivé transfuzní přípravky V této kapitole jsou popsány jednotlivé transfuzní přípravky (dále jen TP). Jejich charakteristika, odběr, výroba, skladování, transport, označení a indikace k pouţití TP, jejichţ hodnoty jsou zpracovány ve statistické části. Jedná se o transfuzní přípravky erytrocytového typu, trombocytového typu a plazmu Vliv parametrů dárce na zpracování odebrané plné krve a výrobu transfuzních přípravků Krev od kaţdého dárce je specifická, různorodá. Kaţdý dárce má odlišné vstupní hodnoty krevního obrazu, a proto musí být zvolený způsob centrifugace a výroby TP jako takové validován, nastaven na optimální hodnotu a průběţně kontrolován, aby vyhovoval všem vstupním materiálům. Otáčky a čas centrifugace jsou zvoleny pro nejčastěji vyskytující se hodnoty vstupních materiálů. Hraniční vstupní hodnoty se však mohou chovat nestandardně. Při výrobě se berou v potaz fyziologické rozdíly mezi muţem a ţenou tak, ţe se vkládají do centrifugy ţeny proti ţenám a muţi proti muţům, v důsledku rozdílných hematokritů Transfuzní přípravky erytrocytového typu Charakteristika Erytrocyty bez buffy coatu resuspendované Erytrocyty bez buffy coatu resuspendované (dále jen EBR) je transfuzní přípravek získaný z odběru plné krve s následnou centrifugací, po které je odstraněno velké mnoţství plazmy a buffy coat, který obsahuje velký podíl leukocytů a trombocytů. V důsledku odejmutí buffy coatu dochází k objemovému sníţení erytrocytů asi o 6 ml. K erytrocytům je na konci výroby přidán resuspenzní roztok, který dovoluje zachovat ţivotnost erytrocytů, i kdyţ je odstraněno více neţ 9% plazmy. Mnoţství odebrané plné krve potřebné pro přípravu TP EBR je 47 ml ± 1% Erytrocyty resuspendované, deleukotizované Erytrocyty resuspendované, deleukotizované (dále jen ERD) je transfuzní přípravek vyroben z odebrané plné krve odstraněním velkého podílu krevní plazmy, leukocytů poststorage deleukotizací a přidáním resuspenzního roztoku k erytrocytům. Mnoţství odebrané plné krve potřebné pro přípravu TP ERD je 47 ml ± 1%. 17

18 Odběr Odebírá se plná krev od jedinců, kteří splňují daná kritéria pro darování krve. Odběr se provádí uzavřeným systémem pomocí venepunkční jehly, na kterou navazuje systém sterilních vícečetných plastových vaků určených k jednorázovému pouţití. Součástí systému vaků je odběrový vak s protisráţlivým roztokem, prázdné satelitní vaky, vak s konzervačním roztokem a vzorkovací váček umístěný za venepunkční jehlou k odběru prvních asi 3 ml krve. Tato krev je dále pouţita k předepsaným laboratorním testům. Vaky jsou vyrobeny z PVC s příměsí vhodného změkčovadla, coţ je velkou výhodou při manipulaci s nimi, ale především při skladování. Vaky jsou navzájem propojeny hadičkami. V případě správné manipulace s takto uzavřeným systémem se sniţuje riziko bakteriální kontaminace. Pomocí odběrových míchacích vah, na které jsou vaky při odběru umístěny, dochází k neustálému promíchávání krve s antikoagulačními roztoky. Antikoagulační roztoky zabraňují krevnímu sráţení a zajišťují uchování erytrocytů po určitou dobu. Odběrový vak pro EBR i ERD obsahuje antikoagulační roztok CPD v mnoţství 63 ml při odběru 45 ml krve. CPD obsahuje citronan sodný, kyselinu citrónovou, fosforečnan sodný a glukózu a umoţňuje skladování erytrocytů a krve aţ po dobu 21 dní Výroba Prvním krokem prováděným na úseku výroby je centrifugace plné krve. K centrifugaci slouţí speciální centrifugy, coţ jsou chlazené velkoobjemové odstředivky přizpůsobené k pouţití plastových vaků. Centrifugace probíhá při 3 55 otáčkách/ 11 minut, při +24 C. Sedimentace závisí na velikosti krevních buněk a na jejich koncentraci v krvi. Dále je ovlivněna viskozitou okolního prostředí buněk a flexibilitou buněk, které závisí na teplotě. Odstřeďováním se krev rozdělí na jednotlivé krevní komponenty. Konečná podoba plastového vaku po vytaţení z centrifugy je následující: v horní polovině vaku se nachází plazma bez dalších buněk, v dolní polovině masa erytrocytů. Asi v 1 ml horní části erytrocytové masy se rozkládají leukocyty, na které bezprostředně nasedá trombocytový prstenec, coţ je tenká bílá vrstva trombocytů. Trombocyty společně s leukocyty vytvářejí vrstvu označovanou jako buffy coat. Druhým a zároveň posledním krokem výroby u TP EBR je samotná separace (oddělení). Oddělení jednotlivých krevních komponent se provádí pomocí tzv. krevních lisů. Tyto lisy mohou být plně automatizované nebo manuální. Princip krevních lisů spočívá v postupném stlačování krevních vaků mezi dvěma plochami, čímţ se jednotlivé krevní komponenty 18

19 přemístí hadičkami uzavřeného odběrového systému do satelitních vaků. Od erytrocytů se nejprve odseparuje plazma, poté buffy coat. K erytrocytům je pak připuštěn resuspenzní roztok obsaţený v jednom z vaků soupravy. Nakonec je vak s erytrocyty a resuspenzním roztokem dokonale promíchám, zváţen a uloţen do chladící komory. Resuspenzní roztoky bohaté na glukózu a adenin se pouţívají z důvodu úbytku velkého mnoţství těchto látek při odstranění plazmy. Tyto roztoky slouţí pro stabilizaci a zachování ţivotaschopnosti erytrocytů. K erytrocytům u TP EBR a ERD je přidáno 1 ml resuspenzního roztoku SAG-M, který umoţňuje skladování těchto TP dnů. SAG-M obsahuje manitol, glukózu, adenin a chlorid sodný. TP ERD se vyrábí z erytrocytového TP, u kterého proběhl odběr před méně neţ 1 dny. Princip výroby ERD spočívá v odstranění leukocytů, tzv. deleukotizace. Deleukotizace je provedena sterilním navařením deleukotizační soupravy k TP EBR, který má být deleukotizován. Deleukotizační soupravu tvoří deleukotizační filtr s připojeným vakem. Erytrocyty jsou přepuštěny přes deleukotizační filtr samospádem do připojeného prázdného vaku. Jedná se o tzv. post-storage deleukotizaci. Po skončení procesu filtrace je odstraněn původní vak s filtrem. Deplecí leukocytů se výrazně sníţí riziko alloimunizace a přenosu některých virů, které napadají leukocyty, jako např. cytomegaloviry Skladování TP EBR a ERD jsou uchovávány při teplotě + 4 C ± 2 C maximálně 42 dní. Teplota by měla být nepřetrţitě kontrolována a to vizuálně i akusticky. Při skladování nesmí dojít k porušení či bakteriologické kontaminaci. Musí být dodrţeny poţadavky bezpečné práce i pouţití příslušných desinfekčních prostředků. Prostory pro skladování musí mít dobré osvětlení, dostatečnou kapacitu s jednoduchým přístupem. Cílem skladování je uchovat pouţitelný TP, coţ znamená uchovat ţivotaschopné a funkční krevní komponenty určené k transfuzi Transport Hlavním kritériem při přepravě materiálu je zajištění jeho celistvosti. TP erytrocytového typu se přepravují v předem vychlazených termoboxech se speciální chladící vloţkou, která udrţuje teplotu v rozmezí + 4 C ± 2 C. Maximální přijatelná teplota je +1 C aţ +1 C. Doporučuje se uvnitř boxů pouţívat přístroje k monitorování teploty jako důkaz, ţe maximální přijatelná teplota nebyla porušena. 19

20 Značení Kaţdý přípravek se označuje tzv. adjustačním štítkem, který je vytištěn tiskárnou zvanou zebra. Důleţité údaje jsou většinou uváděny ve formě čárových kódů. Na štítku u TP erytrocytového typu by mělo být uvedeno: Kód výrobce Název a identifikační číslo krevní komponenty Číslo a datum odběru Datum exspirace Krevní skupina systému AB, znak D systému Rh a další antigeny erytrocytů Mnoţství krevní komponenty (objem a hmotnost) Pouţité roztoky (název a objem) Výsledky předepsaných laboratorních testů Skladovací podmínky (teplota) Označení M na štítku zohledňuje pouţitou medikaci DK Indikace k použití Transfuzní přípravky EBR i ERD se podávají jako náhrada při akutních ztrátách krve nebo k léčbě pacientů trpících anémií Transfuzní přípravky trombocytového typu Charakteristika Trombocyty z buffy coatu Trombocyty z buffy coatu (dále jen TB) je transfuzní přípravek vyrobený z jedné jednotky plné krve při metodě pouţívající buffy coat. Jde o koncentrovanou suspenzi trombocytů. 12 Tesařová et al. Studijní materiál pro program bakalářského studia imunohematologie a transfuzní služby (Brno, 28), Rada evropy, optimální vyuţití krve (25), Vyhláška č. 143, vyhláška o lidské krvi (28), Směrnice Specifikace transfuzních přípravků (21) 2

21 Trombocyty z aferézy Trombocyty z aferézy (dále jen TA) je transfuzní přípravek vyrobený metodou aferézy. Jedná se o koncentrát trombocytů resuspendovaných v plazmě Trombocyty z aferézy deleukotizované Trombocyty z aferézy deleukotizované (dále jen TAD) je transfuzní přípravek vyrobený metodou aferézy, ze kterého jsou odstraněny reziduální leukocyty ihned při výrobě nebo před výdejem Odběr, výroba Trombocyty z buffy coatu Pro výrobu TP TB je potřebný buffy coat, který je získán při zpracování plné krve a výroby TP EBR (viz. Výroba EBR). Oddělený buffy coat se rozředí plazmou od stejného dárce a centrifuguje se. Erytrocyty a leukocyty sedimentují na dno, zatímco trombocyty zůstávají v plazmě. Vzniklý supernatant tvořený plazmou s trombocyty a malou částí leukocytů je oddělen od suspenze erytrocytů a většiny leukocytů do vaku vhodného pro uskladnění trombocytů Trombocyty z aferézy, trombocyty z aferézy deleukotizované Odběr se provádí pomocí techniky zvané aferéza. Při aferézách dochází k separaci jednotlivých krevních sloţek na přístrojích zvaných krevní separátory. Na TO a KB FN Brno jsou pouţívány dva typy separátorů krevních destiček: GAMBRO BTC Trima Accel a Haemonetics MCS+. Technika, při které jsou odebíranou sloţkou trombocyty, se nazývá trombocytaferéza. Tato procedura vyuţívá jednorázový uzavřený systém odběrových vaků a diskontinuální vstup, čili vpich pouze jedné jehly do jedné ruky. Krev získaná při odběru se smísí s antikoagulačním roztokem AB 16 nebo ACD-A a na principu diferenciální centrifugace se rozdělí na jednotlivé sloţky. Trombocyty se shromaţďují ve sběrném vaku a ostatní sloţky krve jsou navráceny zpět do krevního oběhu dárce. Celá tato procedura probíhá v několika cyklech a trvá asi 6 minut. Antikoagulační roztoky AB 16 i ACD-A obsahují citronan sodný, kyselinu citrónovou a dextrózu. 21

22 Během jednoho odběru lze od dárce získat jednu aţ tři terapeutické dávky obsahující více neţ 2 x 1 9 trombocytů. Kolik terapeutických dávek se vyrobí závisí na počtu trombocytů v krvi dárce, na poţadavcích z klinik a na pouţité technice. Trombocyty získané aferézou jsou resuspendovány v plazmě. Transfuzní přípravky typu TAD se vyrábí stejným způsobem jako TP TA, jen je vmezeřen při separaci deleukotizační filtr, který je součástí odběrového setu. Takto vyrobené TP jsou deleukotizované jiţ při výrobě, před skladováním,,pre-storage. Nebo se mohou tyto TP deleukotizovat těsně před výdejem,,post-storage navařením deleukotizačního filtru (viz. ERD). Čím více leukocytů je odstraněno při výrobě, tím menší je riziko vzniku závaţných neţádoucích febrilních potransfuzních reakcí. Vlivem skladování trombocytových koncentrátů při teplotě 22 C ±2 C dochází k rozpadu leukocytů a uvolnění pyrogenních cytokinů IL-1, IL-6 a tumor nekrosis faktoru. Po podání TP s vyšší hladinou cytokinů můţe vyvolat u příjemce nehemolytickou febrilní potransfuzní reakci (FNHTR). Z tohoto důvodu se na TO a KB FN Brno přestaly v dubnu 28 vyrábět TP TA a jsou zcela nahrazeny TP TAD deleukotizované,,pre-storage Skladování TP trombocytového typu jsou uchovávány po dobu maximálně 5 dní při teplotě od + 2 C do +24 C na agitátorech. To jsou speciální validované třepačky zajišťující kontinuální promíchávání trombocytů, aby nedošlo k jejich agregaci a aktivaci. Teplota musí být nepřetrţitě monitorována z důvodu aktivace trombocytů při poklesu teploty pod +2 C Transport TP je zabalen v plastové folii, která jej má chránit před poškozením. Poté je vloţen a přepravován v termoboxech vytemperovaných na teplotu od +2 C do + 24 C. Teplota pro transport se pravidelně validuje Značení Na štítku u TP trombocytového typu by mělo být uvedeno: Kód výrobce Název a identifikační číslo krevní komponenty Číslo a datum odběru 22

23 Datum a přesný čas exspirace Krevní skupina systému AB, znak D systému Rh a další antigeny erytrocytů Mnoţství krevní komponenty (objem a hmotnost) Pouţité roztoky (název a objem) Výsledky předepsaných laboratorních testů Skladovací podmínky (teplota) Indikace k použití TP trombocytového typu jsou indikovány při trombocytopenii nebo trombocytopatii s významným krvácením či s podezřením na něj. V případě nehemolytické potransfuzní reakce, rizika alloimunizace nebo rizika infekce CMV u CMV séronegativních příjemců se podávají deleukotizované trombocyty Transfuzní přípravek plazma čerstvá zmražená Charakteristika Čerstvá zmraţená plazma (dále jen P) je transfuzní přípravek získaný z odběru plné krve, s následným zmraţením. TP P obsahuje kromě plazmy ještě antikoagulační roztok CPD. Přípravek obsahuje stabilní koagulační faktory, albumin a imunoglobuliny v koncentracích, jejichţ výskyt je obvyklý u zdravých osob Odběr, výroba Výroba plazmy je stejná, jako u TP EBR (viz. Str. 9) z plné krve. Při zpracování odběru plné krve se plazma po centrifugaci přepustí do satelitního vaku odběrové soupravy a šokově se zmrazí na 3 C v jádře během 6-ti minut. Oddělení plazmy z plné krve má být ukončeno nejpozději za 18 hodin od odběru u plazmy pro klinické pouţití a za 12 hodin u plazmy pro frakcionaci (výrobu krevních derivátů). Techniky šokového zmraţení se vyuţívá z důvodu zachování aktivity labilních koagulačních faktorů, zejména faktoru VIIIc. Hladiny stabilních koagulačních faktorů, inhibitorů, imunoglobulinů a 13 Tesařová et al. Studijní materiál pro program bakalářského studia imunohematologie a transfuzní služby (Brno, 28), Rada evropy, optimální vyuţití krve (25), Vyhláška č. 143, vyhláška o lidské krvi (28), Směrnice Specifikace transfuzních přípravků (21) 23

24 albuminu se během zpracování a skladování výrazně nemění. TP P obsahuje protilátky AB krevní skupiny proti aglutinogenům, které nejsou přítomné na erytrocytech dárce. Dárce by neměl mít klinicky významné nepravidelné protilátky Skladování TP P pro klinické vyuţití se skladuje buď po dobu 3 měsíců při teplotě 18 C aţ 25 C anebo po dobu 36 měsíců při teplotě menší neţ 25 C. Plazma pro frakcionaci se uchovává po dobu 18 měsíců při teplotě menší neţ 2 C. Teplota se nepřetrţitě monitoruje. S vaky zmraţené plazmy se musí zacházet velmi opatrně, neboť nízké teploty skladování zvyšují křehkost jejich obalu. Plazma určená ke klinickému pouţití je po 6 měsících uskladnění uvolněna z tzv. karantény, pokud je opakované vyšetření dárce krve negativní Transport Při transportu by měl být TP P ve stejné teplotě jako při skladování. K tomu slouţí předem vychlazené uzavřené termoboxy se suchým ledem v ochranném papírovém obalu Značení Na štítku u P by mělo být uvedeno: Kód výrobce Název a identifikační číslo krevní komponenty Číslo a datum odběru Datum a přesný čas exspirace Krevní skupina systému AB, znak D systému Rh a další antigeny erytrocytů Mnoţství krevní komponenty (objem a hmotnost) Pouţité roztoky (název a objem) Výsledky předepsaných laboratorních testů Skladovací podmínky (teplota) Původ přípravku (z odběru plné krve, z aferézy) 24

25 Indikace k použití P pro klinické pouţití se podává v případě krvácení u koagulopatií. Pro dospělé obsahuje jedna transfuzní jednotka 18 3 ml plazmy. P pro frakcionaci je plazma určená pro zpracování na jednotlivé bílkovinné sloţky. Frakcionací se vyrábí tzv. krevní deriváty Tesařová et al. Studijní materiál pro program bakalářského studia imunohematologie a transfuzní služby (Brno, 28), Rada evropy, optimální vyuţití krve (25), Vyhláška č. 143, vyhláška o lidské krvi (28), Směrnice Specifikace transfuzních přípravků (21) 25

26 3 Kontrola kvality Tato kapitola si klade za cíl shrnutí problematiky jakosti transfuzních přípravků. Na začátku kapitoly je popsáno zajištění jakosti a poté sledované parametry u jednotlivých transfuzních přípravků Zajištění jakosti Jakost je definována jako celkový souhrn vlastností a znaků výrobku nebo sluţby, které zaručují schopnost uspokojovat předem stanovené nebo předpokládané potřeby zákazníka (norma ČSN ISO 842). 15 Hlavním cílem kontroly kvality je zajištění bezpečného TP pro pacienty. Chyby vzniklé při zajištění jakosti mohou vést k závaţným aţ smrtelným důsledkům. Můţe jít o nedodrţení laboratorních postupů, záměnu výsledků od pacientů i od dárců, nesprávné označení vzorků nebo identifikace pacienta, přehlédnutí abnormálního výsledku nebo vzhledu vzorku a další. Z tohoto důvodu je nezbytně nutné kontrolovat kvalitní provedení a zajištění jakosti v rámci celé laboratoře. Všechny informace o zajištění jakosti a bezpečnosti lidské krve jsou uvedeny ve Vyhlášce 143/28 Sb, tj. Vyhláška o lidské krvi. Aby byla vyhláška dodrţena, musí být všechny přístroje, postupy, prostory a vybavení, které by mohly nějakým způsobem ovlivnit jakost TP, validovány před zavedením do provozu, a poté v pravidelných intervalech. Dále musí být pravidelně proškolováni zdravotní pracovníci podílející se na procesu výroby, protoţe především oni přispívají ke zvyšování kvality. Cesta za kvalitou TP je dlouhá. Kvalita se musí stále sledovat a musí být snaha o její zlepšování, coţ je velmi obtíţný a pomalý proces Kontrolované parametry u každého odběru U kaţdého odběru plné krve nebo krevních sloţek se provádí vyšetření základních parametrů z odebraného vzorku krve. 15 Dastych et al. Klinická biochemie, bakalářský obor Zdravotní laborant (Brno, 28) 16 Dastych et al. Klinická biochemie, bakalářský obor Zdravotní laborant (Brno, 28), Vyhláška č. 143, vyhláška o lidské krvi (28) 26

27 Tabulka 1: Kontrolované parametry u kaţdého odběru Kontrolovaný parametr Krevní skupinový systém (AB, RhD) Antierytrocytární protilátky HIV (Ag, Ab) Protilátky anti-hcv Antigen HBsAg Protilátky proti Treponema pallidum (původce syfilis) Jakostní požadavek určení skupiny negativní negativní negativní negativní negativní Zdroj: Směrnice Specifikace TP TO a KB 3.3. Sledované parametry jednotlivých transfuzních přípravků Kaţdá laboratoř kontroly kvality musí splňovat poţadavky na jakost a bezpečnost TP. Laboratoř KK provádí namátkovou kontrolu určitého mnoţství vyrobených TP, u kterých se vyšetřují sledované parametry. Hodnoty se pohybují v určitých rozmezích, četnost odběrů je řízena podle statistické kontroly procesu Sledované parametry u EBR Tabulka 2: Sledované parametry u EBR Kontrolovaný parametr Jakostní požadavek Frekvence kontroly Objem ml všechny jednotky Hemoglobin minimálně 43 g na jednotku 1 % všech jednotek Obsah leukocytů méně neţ 1,2 x 1 9 na jednotku 1 % všech jednotek 17 Rada evropy, optimální vyuţití krve (25) 27

28 Hemolýza Sterilita méně neţ,8 % erytrocytové hmoty na konci doby pouţitelnosti sterilní Zdroj: Směrnice Specifikace TP TO a KB 4 jednotky měsíčně,4 x druhá odmocnina z počtu vyrobených jednotek za měsíc Sledované parametry u ERD Tabulka 3: Sledované parametry u ERD Kontrolovaný parametr Jakostní požadavek Frekvence kontroly Objem ml všechny jednotky Hemoglobin Obsah leukocytů Hemolýza Sterilita minimálně 4 g na jednotku méně neţ 1 x 1 6 na jednotku méně neţ,8 % erytrocytové hmoty na konci doby pouţitelnosti sterilní 1 % všech jednotek, nejméně 4 jednotky měsíčně 1 % všech jednotek, nejméně 1 jednotek měsíčně 1 % všech jednotek, nejméně 4 jednotky měsíčně,4 x druhá odmocnina z počtu vyrobených jednotek za měsíc Zdroj: Směrnice Specifikace TP TO a KB Sledované parametry u TB Tabulka 4: Sledované parametry u TB Kontrolovaný parametr Jakostní požadavek Frekvence kontroly Objem 5 8 ml * všechny jednotky 28

29 Obsah trombocytů Obsah leukocytů Hodnota ph Sterilita více neţ 5 x 1 9 na jednotku * méně neţ,5 x 1 9 na jednotku 6,4 7,4 korigované na 22 C, na konci doby skladování sterilní 1 % všech jednotek, nejméně 1 jednotek měsíčně 1 % všech jednotek, nejméně 1 jednotek měsíčně 1 % všech jednotek,4 x druhá odmocnina z počtu vyrobených jednotek za měsíc * Koncentrace trombocytů je menší neţ 1,5 x 1 9 /ml Zdroj: Směrnice Specifikace TP TO a KB Sledované parametry u TA Tabulka 5: Sledované parametry u TA Kontrolovaný parametr Jakostní požadavek Frekvence kontroly Objem 15 2 ml * všechny jednotky Obsah trombocytů Obsah leukocytů Hodnota ph Sterilita více neţ 2 x 1 9 na jednotku * méně neţ 1 x 1 9 na jednotku 6,4 7,4 korigované na 22 C, na konci doby skladování sterilní 1 % všech jednotek, nejméně 1 jednotek měsíčně 1 % všech jednotek, nejméně 1 jednotek měsíčně 1 % všech jednotek,4 x druhá odmocnina z počtu vyrobených jednotek za měsíc * Koncentrace trombocytů je menší neţ 1,5 x 1 9 /ml 29

30 Zdroj: Směrnice Specifikace TP TO a KB Sledované parametry u TAD Tabulka 6: Sledované parametry u TAD Kontrolovaný parametr Jakostní požadavek Frekvence kontroly Objem 15 2 ml * všechny jednotky Obsah trombocytů více neţ 2 x 1 9 na jednotku * 1 % všech jednotek, nejméně 1 jednotek měsíčně Obsah leukocytů méně neţ 1 x 1 6 na jednotku 1 % všech jednotek Hodnota ph Sterilita 6,4 7,4 korigované na 22 C, na konci doby skladování sterilní 1 % všech jednotek,4 x druhá odmocnina z počtu vyrobených jednotek za měsíc * Koncentrace trombocytů je menší neţ 1,5 x 1 9 /ml Zdroj: Směrnice Specifikace TP TO a KB Trombocytové koncentráty musí být vizuálně kontrolovány. Kromě změny zabarvení, shlukování, zakalení a závady balení je zvláštní pozornost věnována ztrátě fenoménu víření trombocytů. Tj. trombocyty mají za normálních okolností diskovitý tvar a díky němu rozptylují světlo. Pokud ale dojde k jejich poškození, stávají se kulovitými a rozptyl světla nenastává Sledované parametry u P Tabulka 7: Sledované parametry u P Kontrolovaný parametr Jakostní požadavek Frekvence kontroly Objem ml všechny jednotky Faktor VIIIc průměrně (po zmraţení a kaţdé 3 měsíce, 3

31 rozmraţení) > 7% hodnoty čerstvé odebrané jednotky plazmy 1 jednotek v prvním měsíci skladování Celková bílkovina nejméně 5 g/l 5 jednotek měsíčně Residuální erytrocyty * méně neţ 6, x 1 9 /l Residuální trombocyty * méně neţ 5 x 1 9 /l Residuální leukocyty * méně neţ,1 x 1 9 /l 1 % všech jednotek, nejméně 4 jednotky měsíčně 1 % všech jednotek, nejméně 4 jednotky měsíčně 1 % všech jednotek, nejméně 4 jednotky měsíčně Sterilita sterilní,4 x druhá odmocnina z počtu vyrobených jednotek za měsíc * Počítání krevních buněk se provádí před zmraţením Zdroj: Směrnice Specifikace TP TO a KB Vizuální kontrola TP P zahrnuje neporušenost obalu, tedy prosáknutí jakékoliv části vaku a změny obsahu vaku. Těmi mohou být viditelné sraţeniny, nadměrné zabarvení nebo zakalení Směrnice Specifikace transfuzních přípravků (21) 31

32 4 Statistická část V této kapitole jsou uceleným způsobem analyzovány a hodnoceny jednotlivé parametry jakosti vybraných transfuzních přípravků ve vztahu k procesu výroby a k pohlaví dárce krve. Všechny údaje pouţité v této části práce jsou získány z dostupných materiálů TO a KB FN Brno za rok 28. Na jejich základě je graficky vypracovaná statistická analýza jakosti TP, jak na TO a KB FN Brno, tak na OS Třebíč. Vlastní statistická analýza zahrnuje tři série grafů. Pro lepší názornost jsou parametry barevně odlišené První série grafů Tato série grafů vyjadřuje procento kontrolovaných ţen a muţů v jednotlivých parametrech jakosti u kaţdého TP zvlášť za sledované období (rok 28). Jednotlivá data jsem nejdříve vypsala z dokumentace, roztřídila podle měsíců a nakonec podle pohlaví. Sestavila jsem tabulky ukazující počet kontrolovaných TP ţen a muţů za rok 28 a poté jsem tyto hodnoty přepočetla na procenta (viz. Příloha 1). Pro lepší orientaci: fialové sloupce náleţí ţenám, světle modré muţům a modrozelené udávají celkovou hodnotu = 1%. Grafy č. 1 3 znázorňují procento kontrolovaných ţen a muţů v jednotlivých parametrech jakosti u TP EBR. % 12 Graf č. 1 Procento kontrolovaných žen a mužů EBR Brno za rok WBC Htk Hb hemolýza ženy muži celkem 32

33 12 % Graf č. 2 Procento kontrolovaných žen a mužů EBR Třebíč za rok WBC Htk Hb hemolýza ženy muži celkem % 12 Graf č. 3 Procento kontrolovaných žen a mužů EBR celkem za rok WBC Htk Hb hemolýza ženy muži celkem Z grafů č. 1 3 vyplývá: U TP EBR je malé procento kontrolovaných ţen. Důvodem je, ţe krev ţen vzhledem ke krvi muţů obsahuje více plazmy a méně erytrocytů, a proto je z ní vyrobena váhově menší transfuzní jednotka EBR. Po vnitřní domluvě mezi úseky na TO a KB FN Brno vybírala v této době laboratoř KK vzorky pro kontrolu kvality sice namátkově, ale tak, aby nedocházelo k ubírání materiálu na vzorky z terapeutické dávky pro příjemce. Proto vybírala laboratoř KK váhově větší transfuzní jednotky, coţ byli převáţně muţi. Dále můţeme pozorovat u parametru hemolýza vyšší procentuální zastoupení ţen vzhledem k ostatním parametrům. To je dáno frekvencí kontroly. Kontrola hemolýzy se provádí jenom asi u 4 jednotek měsíčně. 33

34 Graf č. 4 znázorňuje procento kontrolovaných ţen a muţů v jednotlivých parametrech jakosti u TP ERD. % 12 Graf č. 4 Procento kontrolovaných žen a mužů ERD za rok WBC Hb hemolýza ženy muži celkem Z grafu č. 4 vyplývá: U TP ERD je malé procento kontrolovaných ţen. Vliv těchto výsledků je stejný, jako u TP EBR (viz. Výše z grafů č. 1 3 vyplývá). Graf č. 5 znázorňuje procento kontrolovaných ţen a muţů v jednotlivých parametrech jakosti u TP TB. % 12 Graf č. 5 Procento kontrolovaných žen a mužů TB za rok WBC PLT ph ženy muži celkem Z grafu č. 5 vyplývá: Parametry jakosti TP TB byly kontrolovány asi z jedné třetiny u ţen a ze dvou třetin u muţů, coţ je optimální rozloţení kontrol. 34

35 Graf č. 6 znázorňuje procento kontrolovaných ţen a muţů v jednotlivých parametrech jakosti u TP TAD-H. % 12 Graf č. 6 Procento kontrolovaných žen a mužů TAD-H za rok WBC PLT ph ženy muži celkem Z grafu č. 6 vyplývá: Obecně je separátorových dárců muţů více neţ ţen, protoţe pro odběr na separátorech je podmínkou minimální hmotnost 6 kg a tyto odběry lépe zvládají muţi. Ţeny lépe snášejí odběr na separátoru Haemonetics MCS+, a proto můţeme v tomto grafu pozorovat téměř vyrovnané procentuální zastoupení obou pohlaví. Dále můţeme pozorovat u parametru ph niţší procentuální zastoupení ţen vzhledem k ostatním parametrům. To je dáno frekvencí kontroly. Kontrola ph se provádí u 1% všech jednotek. Graf č. 7 znázorňuje procento kontrolovaných ţen a muţů v jednotlivých parametrech jakosti u TP TAD-C. 35

36 % 12 Graf č. 7 Procento kontrolovaných žen a mužů TAD-C za rok WBC PLT p H ženy muži celkem Z grafu č. 7 vyplývá: Separace na přístroji GAMBRO BTC Trima Accel je rychlejší způsob odběru neţ na separátoru Haemonetics MCS+. Ovšem snášenlivost ţen k tomuto odběru je mnohem horší, proto v kontrole kvality převaţují muţi. Grafy č. 8-1 znázorňují procento kontrolovaných ţen a muţů v jednotlivých parametrech jakosti u TP P. % 12 Graf č. 8 Procento kontrolovaných žen a mužů P Brno za rok WBC PLT RBC ženy muži celkem 36

37 12 % Graf č. 9 Procento kontrolovaných žen a mužů P Třebíč za rok WBC PLT RBC ženy muži celkem % 12 Graf č. 1 Procento kontrolovaných žen a mužů P celkem za rok WBC PLT RBC ženy muži celkem Z grafů č. 8 1 vyplývá: Parametry jakosti TP P byly kontrolovány asi z jedné třetiny u ţen a ze dvou třetin u muţů, coţ je optimální rozloţení kontrol. U TP P se vzorky pro kontrolu kvality berou před zmraţením, tudíţ má laboratoř KK k dispozici všechny TP bez ohledu na pohlaví a velikost terapeutické dávky Druhá série grafů Tato série grafů vyjadřuje procento vyhovujících a nevyhovujících ţen nebo muţů z celkového počtu kontrolovaných ţen nebo muţů jednotlivých TP za rok 28. Grafy této série jsem zhotovila na základě tabulek, ve kterých jsem roztřídila TP na vyhovující a nevyhovující podle limitních hodnot pro kaţdý parametr jakosti a u ţen i muţů 37

38 zvlášť. Poté jsem sečetla zvlášť vyhovující a nevyhovující hodnoty ţen i muţů kaţdého parametru jakosti a přepočetla je na procenta (viz. Příloha 2). Pro lepší orientaci: modré sloupce představují % vyhovujících ţen, zelené sloupce % vyhovujících muţů a fialové sloupce % nevyhovujících ţen (u ţenských grafů) a muţů (u muţských grafů). Grafy č znázorňují procento vyhovujících a nevyhovujících ţen nebo muţů z celkového počtu kontrolovaných ţen nebo muţů TP EBR Brno (Graf 11, 12), Třebíč (Graf 13, 14) a celkem (Graf 15, 16). 12 % Graf č. 11 Vyjádření % vyhovujících a nevyhovujících žen z celkového počtu kontrolovaných žen TP EBR Brno za rok WBC Htk Hb hemolýza % vyhovujících žen % nevyhovujících žen % 12 Graf č. 12 Vyjádření % vyhovujících a nevyhovujících mužů k celkovému počtu kontrolovaných mužů TP EBR Brno za rok WBC Htk Hb hemolýza % vyhovujících mužů % nevyhovujících mužů 38

39 12 % Graf č. 13Vyjádření % vyhovujících a nevyhovujících žen z celkového počtu kontrolovaných žen TP EBR Třebíč za rok WBC Htk Hb hemolýza % vyhovujících žen % nevyhovujících žen 12 % Graf č. 14 Vyjádření % vyhovujících a nevyhovujících mužů z celkového počtu kontrolovaných mužů TP EBR Třebíč za rok WBC Htk Hb hemolýza % vyhovujících mužů % nevyhovujících mužů % 12 Graf č. 15 Vyjádření % vyhovujících a nevyhovujících žen z celkového počtu kontrolovaných žen TP EBR celkem za rok WBC Htk Hb hemolýza % vyhovujících žen % nevyhovujících žen 39

40 % 12 Graf č. 16 Vyjádření % vyhovujících a nevyhovujících mužů z celkového počtu kontrolovaných mužů TP EBR celkem za rok WBC Htk Hb hemolýza % vyhovujících mužů % nevyhovujících mužů Z grafů č vyplývá: V celkovém hodnocení si můţeme povšimnout u parametru WBC většího procenta nevyhovujících ţen neţ muţů. Důvodem je rozdílný počet erytrocytů u ţen a muţů a také rozdílné chování krve dárců ţen a muţů při centrifugaci. Navíc v roce 28 ještě nebylo zcela zaţité pravidlo vyvaţování krve při centrifugaci, tedy vkládání ţena proti ţeně a muţ proti muţi. Také je důleţité v tomto případě poukázat na malé mnoţství kontrolovaných TP u ţen, coţ by mohlo být hlavním důvodem těchto statistických výstupů. Grafy č. 17 a 18 znázorňují procento vyhovujících a nevyhovujících ţen nebo muţů z celkového počtu kontrolovaných ţen nebo muţů TP ERD. % 12 Graf č. 17 Vyjádření % vyhovujících a nevyhovujících žen z celkového počtu kontrolovaných žen TP ERD za rok WBC Hb hemolýza % vyhovujících žen % nevyhovujících žen 4

41 % 12 Graf č. 18 Vyjádření % vyhovujících a nevyhovujících mužů z celkového počtu kontrolovaných mužů TP ERD za rok WBC Hb hemolýza % vyhovujících mužů % nevyhovujících mužů Z grafů č. 17 a 18 vyplývá: U parametru hemoglobin u TP ERD zaznamenáváme větší procento nevyhovujících ţen neţ muţů. To můţe být způsobeno niţší vstupní hodnotou hemoglobinu u ţen nebo opět velmi malým mnoţstvím kontrolovaných TP od dárců krve ţen. Grafy č. 19 a 2 znázorňují procento vyhovujících a nevyhovujících ţen nebo muţů z celkového počtu kontrolovaných ţen nebo muţů TP TB. % 12 Graf č. 19 Vyjádření % vyhovujících a nevyhovujících žen z celkového počtu kontrolovaných žen TP TB za rok WBC PLT ph % vyhovujících žen % nevyhovujících žen 8 41

42 % 12 Graf č. 2 Vyjádření % vyhovujících a nevyhovujících mužů z celkového počtu kontrolovaných mužů TP TB za rok WBC PLT ph % vyhovujících mužů % nevyhovujících mužů 5 Z grafů č. 19 a 2 vyplývá: U TP TB má vliv na parametr PLT vstupní hodnota trombocytů dárce. Jenomţe při jeho výrobě se cíleně nevyhledávají odběry plné krve s vysokými vstupy, proto se můţe vyskytnout nevyhovující TP. Grafy č. 21 a 22 znázorňují procento vyhovujících a nevyhovujících ţen nebo muţů z celkového počtu kontrolovaných ţen nebo muţů TP TAD-H. % 12 Graf č. 21 Vyjádření % vyhovujících a nevyhovujících žen z celkového počtu kontrolovaných žen TP TAD-H za rok WBC PLT ph % vyhovujících žen % nevyhovujících žen 42