Charakteristika analýzy: Identifikace: DIAGNOSTIKA PORUCHY JATERNÍCH FUNKCÍ, DECHOVÝ TEST S C 13 -METHACETINEM Využití: diagnostika poruch jaterních funkcí (demetylační, oxidační) Referenční mez: viz tabulka očekávané hodnoty, uvedeno níže Cum120 > 32% = Komentář: Nález svědčí pro stimulaci jaterních funkcí (hyperregenerace). Cum120 23,2-32% Komentář: Nález svědčí pro závažnější postižení jaterních funkcí Cum120 17,4-23,2% Komentář: Nález svědčí pro HEPATOPATII s postižením demetylační a dekarboxylační funkce jaterních Lab. nález odpovídá dg hepatopatie typu steatozy. Cum120 11,6-17,4% Lab. nález odpovídá dg hepatopatie typu cirhozy Child-PughA Cum120 4,3-11,6% Lab. nález odpovídá dg hepatopatie typu cirhozy Child-PughB Cum120 <4,3% Lab. nález odpovídá dg hepatopatie typu cirhozy Child-PughC Doporučený způsob odběru materiálu: dechový sáček k analyzátoru IRIS (Wagner Analyse Technik - princip infračervená detekce NDIRS, CE Mark), za standardní se považuje tzv. spodní plicní (tracheální) výdech Klinická data: Princip 1
Princip dechového testu umožňuje kvantifikovat parametry jaterní funkce pomocí metabolizace methacetinu. Průkaz poruchy funkce jater je založen na schopnosti normálních hepatocytů štěpit methacetin na oxid uhličitý a acetaminophen. Vzniklý oxid uhličitý je rychle absorbován, dostává se do krve, krevním řečištěm do plic, kde je vydýchán. Při interpretaci výsledků je hodnocena dynamika změny poměru 13 CO 2 / 12 CO 2 po podání značeného substrátu. Substrát se podává ve formě methacetinu, který se smíchá s vlažným čajem. V určených časových intervalech je odebírán vzorek vzduchu po dobu dvou hodin od podání substrátu. Teoretická východiska: Játra hrají významnou úlohu v energetickém a intermediárním metabolismu. Vykonávají významnou funkci inaktivační, exkreční (endogenní látky) a detoxikační (exogenní látky). Jejich významnou funkcí je proteosyntéza. Částečně se podílejí též na trávení a homeostáze vnitřního prostředí. Ve fetálním období hrají důležité místo v krvetvorbě. Jaterní retikuloendotelový systém plní funkci v imunitních mechanismech a v zachytávání cizorodých antigenů. Úplné vyřazení jater z funkce vede nejprve k nevyváženému kolísání hladin krevního cukru, která je příčinou smrti organismu. Neschopnost tvorby močoviny v játrech (ureageneze) zahubí organismus nadměrným zvýšením hladiny toxického amoniaku (hyperamonemie). Chybění detoxikačních mechanismů (oxidace, redukce, konjugace) vede k nahromadění řady endogenních i exogenních toxických produktů. Cizorodé lipofilní substance, které nemohou být použity jako zdroj energie nebo jako stavební látky, musejí být převedeny na látky hydrofilní, aby mohly být z organismu snáze vyloučeny. Testy na detoxikační funkci jater: kofeinový perorální test lidokainový intravenózní test antipyrinový dechový test methacetinový dechový test Klinické využití analýz Biochemické vyšetření jater zaměřujeme na testy odrážející: 1. prostupnost a integritu membrán hepatocytů 2. produkci a vylučování žluči 3. změny v proteosyntéze hepatocytu 4. detoxikační funkci 5. poruchy v intermediálním metabolismu 6. poruchy v energetickém metabolismu 7. změny v non-hepatocytech 8. specifické jaterní změny provázející dědičné poruchy metabolismu 9. průkaz infekčních agens a markerů odpovědi Indikace dechového testu jaterní funkcí: pokročilé fáze jaterních onemocnění (vypovídají především o redukci jaterní masy) ukazatel chronického abuzu alkoholu jaterní cirhózy, autoimunitní hepatitidy, jaterní steatózy 2
modifikace testu byla použita i k odhadu krátkodobé prognózy u nemocných s alkoholovou hepatitidou modifikace testu byla dále použita u nemocných s maligním hematomem test platný pro zařazení pacienta do jedné z následujících skupin: stimulovaný/normální/patologický-bez cirhózy/child Pugh A/B/C 3
Očekávané hodnoty: (substrát 13 C-methacetin) Cum120 > 32% = Komentář: Nález svědčí pro stimulaci jaterních funkcí (hyperregenerace). Cum120 23,2-32% Komentář: Nález svědčí pro závažnější postižení jaterních funkcí Cum120 17,4-23,2% Komentář: Nález svědčí pro HEPATOPATII s postižením demetylační a dekarboxylační funkce jaterních Lab. nález odpovídá dg hepatopatie typu steatozy. Cum120 11,6-17,4% Lab. nález odpovídá dg hepatopatie typu cirhozy Child-PughA Cum120 4,3-11,6% Lab. nález odpovídá dg hepatopatie typu cirhozy Child-PughB Cum120 <4,3% Lab. nález odpovídá dg hepatopatie typu cirhozy Child-PughC závažnější postižení jaterních funkcí Parametr Norma Patologicky nízké MV max 40 (% 13 C) 0,8-1,2 < 0,8 CUM40 (% 13 C) 0,8-1,2 < 0,8 4
CUM120 (% 13 C) 0,8-1,2 < 0,8 MV max 40 - maximální kumulovaná dávka/hodinu v průběhu 0-40 minut od podání substrátu CUM 40 - kumulovaná dávka ve 40 minutě od podání substrátu CUM 120 - kumulovaná dávka ve 120 minutě od podání substrátu Manipulace s materiálem: (dechové sáčky s dechem) Stabilita dechového vzorku v sáčku je 7 dnů, vzorek nutno skladovat při pokojové teplotě! Reagencie: 13 C-methacetin Spotřební materiál sáček pro dva dechové vzorky náustek substrát se značeným izotopem uhlíku 13 C Pracovní postup příprava testovacího nápoje 1. naplnit sklenici (objem 0,2 l) vlažným čajem 2. rozpuštění v uvedeném objemu tekutiny 75 mg značeného methacetinu odběr vzorků 3. do dechového sáčku označeného 0 minut odebrat vzorek dechu před podáním substrátu 4. aplikace testovacího nápoje 5. délka testu jsou dvě hodiny, v průběhu první hodiny je odebírán dechový vzorek po deseti minutách, v následující druhé hodině po dvaceti minutách interpretace nálezu 6. vyhodnocení testu: vypočítat parametry k vyhodnocení testu tj. MV max 40, CUM 40 a CUM 120, pokud mají dva ze tří parametrů < 0,8 je potvrzena porucha oxidační a demethylační funkce jater, v opačném případě je test považován za negativní 7. odeslání výsledku analýzy ordinujícímu lékaři Literatura 1. Operator s Manual IRIS, fa.wagner Analysen Technik GmbH. 2. Validační protokol IRIS Doc. 3. Zima T. a kol. : Laboratorní diagnostika, Galen, Praha 2002. 4. Masopust J.: Klinická biochemie I, Karolinum, Praha 1998. 5. Kocna P.: http:/www.lf1.cuni.cz/kocna/wellcome.htm. 5