Výsledky monitoringu mykotoxinů v krmivech (ÚKZÚZ) Markéta Pospíchalová marketa.pospichalova@ukzuz.cz Mykotoxiny a zemědělská produkce, 13.3.213, Brno
Průchod vzorku laboratoří Akreditace ČSN EN ISO1725:25 Příjem Přečištění pomocí imunoafinitních kolonek Úprava Příprava extraktu, přečištění Modifikovaná QuEChERS metoda HPLC-DAD; HPLC-FLD; LC-MS/MS; UPLC-MS/MS Měření Zpracování dat Výstup - protokol
Potraviny Stanovované mykotoxiny AFM1 T-2 Ergot alkaloids PAT DON HT-2 FB2 FB1 AF B2 AF G1 AF G2 AF B1 Alternaria toxins ZEN OTA Moniliformin Phomopsins Krmiva EN 15791/21 - Determination of Deoxynivalenol in animal feed HPLC method with UV detection and immunoaffinity column clean-up. EN 15792/21 - Determination of Zearalenone in animal feed HPLC method with fluorescence detection and immunoaffinity column clean-up. EN 167 - Determination of Ochratoxin A in animal feed HPLC method with fluorescence detection and immunoaffinity column clean-up. EN 166 - Determination of Fumonisin B1& B2 in compound animal feed with immunoaffinity column clean up and RP-HPLC with fluorescence detection after pre-or post column derivatisation CEN 327: Feed and Feed Ingredients Multimethod Mycotoxins LC-MS/MS Nově požadované NIV EnA EnB1 Beauv EnA1 EnB2 Sterigmatocystin Citrinin EFSA výzva na sledování dalších mykotoxinů
Stanovované materiály Obtížnost matrice především u multimetody LC-MS/MS 18 16 14 12 1 8 6 4 2 26 27 28 29 21 211 212 ostatní sojový loupaný šrot sojový extrahovaný šrot KKS DKS siláž seno senáž žito pšenice oves kukuřice ječmen
V Ý S L E D K Y 1 9 8 7 6 5 4 3 2 1 Complementary feeds Zastoupení mykotoxinů ve vybraných komoditách (%) Complete feeds Barley Wheat Maize Soybean groats Haylage Dosavadní výsledky potvrzují situaci ve Střední Evropě Silage Hay ZEA FUM B1 FUM B2 OTA DON T-2 HT-2 25 2 22 Četnost výskytu mykotoxinů ve vzájemných kombinacích (%) 15 1 8,2 8,8 9,9 9,3 8,5 5 1,7 2,3 5,6 2,5 2,5 3,4 2,3 1,7 1,1 1,4 1,4 1,1 1,4 1,4 2,3 1,2 ZEA DON FUMs OTA T-2 HT-2 DON FUMs FUMs- DON OTA- DON T-2 - HT-2 OTA- DON DON-T- 2 -HT-2 FUMs- DON FUMs- DON-T- 2 -HT-2 OTA FUMs- OTA T- 2 -HT-2 FUMs- OTA OTA- DON-T- 2 -HT-2 FUMs- DON-T- 2 -HT-2 FUMs- DON- OTA-T- 2 HT-2
Typy kontrolovaných komodit u prvovýrobců a výrobců 4 P r v o v ý r o b c i V ý r o b c i Rozdíly?? 35 3 25 2 15 1 5 7 6 5 4 3 2 suroviny objemná krmiva směsi soja ostatní řepka Zastoupení mykotoxinů (%) 1 ZEN FUMB1 FUMB2 OTA DON T-2 HT-2
Koncentrační hladiny Zearalenon Deoxynivalenol 18 16 14 12 1 8 6 4 2 169 16 144 116 112 ZEN Med ZEN Max 33,2 24,7 21,4 7 6 5 4 3 2 1 DON Med 629 DON Max 4563 323 2612 1694 633 723 915 Fumonisin B1 Fumonisin B2 16 14 12 138 FUMB1 Med FUMB1 Max 4 35 3 376 FUMB2 Med FUMB2 Max 1 25 8 2 199 6 4 2 532 288 261 25 166 18 1,5 15 1 5 83 86,8 43,1 16,6 28,5 6
Koncentrační hladiny chratoxin A Koncentrační hladiny jsou pro jednotlivé mykotoxiny u prvovýrobců i výrobců podobné 6 5 4 3 2 1 OTA Med 5,9 OTA Max 24,6 29,1 25,1 26,8 14,7 1,9 6,37 T-2 toxin HT-2 toxin 9 8 7 6 5 4 3 2 1 T-2 Med 84,5 68,4 T-2 Max 26,2 24,2 26,9 17,7 17,2 5,1 14 12 1 8 6 4 2 HT-2 Med 12 HT-2 Max 51,7 55 38,6 37,5 28,5 14,7 16,4
Četnost výskytu mykotoxinů ve vzájemných kombinacích (%) Rozdílnost v četnosti výskytu několika mykotoxinů najednou 1% 9% 8% 7% 6% 5% 4% 3% 2% 1% % ZEN DON FUMs OTA T-2, H-T2 ZEN-DON ZEN-FUM FUMs-DON ZEN-OTA OTA-T-2-HT-2 FUMs-OTA ZEN-T-2-HT-2 DON-T-2-HT-2 ZEN-FUMs-DON ZEN-FUMs-T-2-HT-2 ZEN-OTA-DON ZEN-DON-T-2-HT-2 FUMs-DON-T-2-HT-2 DON-OTA-T-2-HT-2 ZEN-FUMs-OTA-DON ZEN-FUMs-DON-T-2-HT-2 ZEN-OTA-DON-T-2-H-T-2 ZEN-FUMs-DON-OTA-T-2-HT-2
Vliv doby odběru vzorků na výskyt mykotoxinů Potvrzení vlivu doby skladování na výskyt mykotoxinů leden, únor, březen duben, květen, červen červenec, srpen, září říjen, listopad, prosinec M A X I M Á L N Í H O D N O T Y ZEN kukuřice pšenice kukuřice KKS - P DKS Telata DKS Skot kukuřice kukuřice FUMB1 kukuřice kukuřice kukuřice KKS - P KKS Kuřata ječmen KKS Ptáci kukuřice FUMB2 kukuřice kukuřice kukuřice KKS - P DKS Telata ječmen KKS Ptáci oves OTA senáž KKS - P tritikale KKS - P ječmen kukuřice pšenice KKS Králíci DON kukuřice ječmen ječmen KKS - P T-2 seno oves oves ječmen KKS Nosnice tritikale kukuřice kukuřice kakaové slupky kukuřice DKS Ptáci KKS Ptáci HT-2 kukuřice oves oves ječmen KKS - P KKS - P DKS Ptáci KKS Ptáci M E D I Á N Y ZEN kukuřice siláž KKS pšenice KKS KKS kukuřice KKS FUMB1 kukuřice KKS siláž siláž DKS KKS sojový šrot kukuřice FUMB2 siláž kukuřice ječmen senáž KKS KKS KKS kukuřice OTA ječmen oves pšenice ječmen KKS DKS KKS pš.otruby DON siláž pšenice KKS pšenice DKS KKS pšenice pš.otruby T-2 ječmen pšenice ječmen ječmen DKS KKS KKS KKS HT-2 ječmen siláž seno ječmen DKS pšenice KKS KKS
T-2, HT-2 toxin Vysoká citlivost Poškození zobákové dutiny Poškození nervového systému Abnormální opeření Prudké snížení produkce vajec Zearalenon Vysoká citlivost především u mladých zvířat Estrogenní účinky Poruchy reprodukce Aflatoxiny Poškození jater Potlačení imunity Zpomalený růst Nechutenství Hrubá srst Ochratoxin A Průjmy Snížení hmotnosti Snížení produkce vajec Ochratoxin A Prasečí nefropatie Snížení plodnosti T-2, HT-2 toxin Poruchy zažívání Úbytek váhy Poškození sliznic a pokožky Průjmy, zvracení Aflatoxiny Netečnost Anorexie Zpomalený růst Snížená produkce vajec Zvýšená mortalita Zvětšení jater Poruchy ledvin Fumonisiny Nekróza jater Edém plic Neplodnost spojená s poškozením vaječníků a dělohy Deoxynivalenol Poruchy zažívání Úbytek váhy Průjmy, zvracení Poruchy reprodukce Potlačení imunity Fumonisiny Vysoká citlivost Leukoencepahlomalacie u koní (ELEM) Deoxynivalenol, T-2 toxin Pokles hmotnosti Potlačení imunity Aflatoxiny Poškození jater Aflatoxiny Pokles produkce mléka Kontaminace mléka AFM1 Potlačení imunity T-2 Neplodnost, potraty Satratoxiny Gastroenteritida u skotu Snížení produkce mléka Stachybotryotoxikóza Zearalenon Špatná reprodukční užitkovost Ochratoxin A, Deoxynivalenol, Fumonisiny Vyšší tolerance (neplatí u telat) Různé druhy zvířat jsou různě citlivé k různým mykotoxinům
Biologické faktory Inokulum Substrát Podmínky prostředí Vegetace Počasí: teplota, vlhkost Napadení škůdci, stres Předplodina, datum setí Náchylnost odrůdy Polní mykotoxiny Lokalita, způsob pěstování DON, zearalenon, fumonisiny, T-2, HT-2, Podmínky během sklizně Doba sklizně Vlhkost zrna Poranění palic, zrna Výjimka Obiloviny - fuzáriové mykotoxiny i během skladování Výjimka Skladištní mykotoxiny Ochratoxin A, aflatoxiny kukuřice aflatoxiny už za vegetace Skladování Teplota Vlhkost Odstranění prachu, poškozených zrn Napadení hmyzem a plísněmi Bezpečné skladování u obilovin např. 14% při 2 C Detekování přítomnosti mykotoxinů Výroba a distibuce potravin, krmiv Import surovin, potravin a krmiv Mykotoxiny v životním prostředí spotřebitel zvířata
Závěry Mezi nejčastěji se vyskytující mykotoxiny v krmivech patří DON, ZEN, OTA a FUMs. Nejčastěji mykotoxiny kontaminovanými komoditami jsou kukuřice, siláž, KKS a DKS. Mykotoxiny se v krmivech vyskytují v nízkých koncentracích, za sledované období byly směrné hodnoty překročeny zcela ojediněle. Vzorky odebrané v 1.polovině roku (před sklizní) vykazují vyšší kontaminaci mykotoxiny projevuje se vliv uskladnění. Mykotoxiny se v krmivech a v surovinách pro výrobu krmiv vyskytují často ve svých vzájemných kombinacích, a tím zvyšují toxický účinek na zvířata. Společný výskyt více mykotoxinů najednou je častější u KKS a DKS než u surovin. Různé druhy zvířat jsou různě citlivé k účinkům různých mykotoxinů. V souvislosti s EFSA požadavky je potřeba rozšířit spektrum stanovovaných mykotoxinů.
Poděkování Ing.Marie Mrkvicová RNDr.Zuzana Nehybová Ing.Martina Bolechová Mgr.Petra Kosubová, Ph.D. Marie Jakšová Ing.Iva Strížová Děkuji Vám za pozornost