Histologické techniky

Podobné dokumenty
histologie je nauka o mikroskopické skladbě organismu zkoumá skladbu těla živočišného i rostlinného, důležitá v humánní medicíně histologický preparát

Metody v histologii Mikroskop Vj. 4

1 Popis vzorku. 2 Detekční limit vyšetření. 3 Časová náročnost. 4 Zpracování vzorku. 4.1 Množství vzorku. 4.2 Odběr vzorků

(cv04) Metody výroby mikroskopických preparátů z rostlinných pletiv (2. část) Preparáty pro dokumentaci tvorby dřeva a lýka

Protokol 04. pšeničná bílkovina. masné výrobky. zkrácená verze

(cv03) Metody výroby mikroskopických preparátů z rostlinných pletiv

Části postižených tkání či orgánů / záněty, benigní či

Histochemie a imunohistochemie, elektronová mikroskopie

BARVENÍ TRVALÝCH PREPARÁTŮ

Speciální metody v histologii

1 Popis vzorku. 2 Detekční limit vyšetření. 3 Časová náročnost. 4 Zpracování vzorku. 4.1 Množství vzorku. 4.2 Odběr vzorků

Struktura a skladba potravin Magisterský studijní program. Přednáška 4.

MIKROBIOLOGIE. Grampozitivní kokovitá bakterie STAPHYLOCOCCUS AUREUS bakteriální kmen dle ATCC 1260 (CCM 888).

Praktický kurz Příprava nanočástic metodami syntézy v žížalách, charakterizace - Imunohistochemické barvení

Kostní biopsie role patologa

Laboratorní příručka. Oddělení patologie. Rozdělovník řízených výtisků:

ÚVOD DO HISTOLOGICKÉ TECHNIKY A ZPRACOVÁNÍ VZORKŮ PRO SVĚTELNOU A ELEKTRONOVOU MIKROSKOPII ÚHE LF MU, 2016

Řezové preparáty Barvení histologické a histochemické. Řezy ruční žiletka, břitva, ruční mikrotom Řezy připravené mikrotomem

Řezové preparáty Barvení histologické a histochemické. Řezy ruční žiletka, břitva, ruční mikrotom Řezy připravené mikrotomem

Příloha č. 1 PK 01 Seznam vyšetření laboratoře Zdravotnická laboratoř VELAB s.r.o.

BARVENÍ TRVALÝCH PREPARÁTŮ

Praktikum z histologie a embryologie

Histologie - cvičení. Laboratorní zpracování tkání a orgánů pro světelnou a elektronovou mikroskopii

Ukazka knihy z internetoveho knihkupectvi

Laboratorní příručka

Zdravotnická laboratoř VELAB s.r.o. Název vyšetření: Cervikovaginální cytologické vyšetření a diagnostika

TRVALÝ PREPARÁT. Zhotovení roztěru

N Laboratoř hydrobiologie a mikrobiologie

Přehled histologických barvení včetně imunohistochemie

CZ.1.07/1.5.00/

Praktikum z histologie a embryologie

Protokol 04. pšeničná bílkovina. masné výrobky. plná verze

INFORMAČNÍ PŘÍRUČKA ODDĚLENÍ PATOLOGIE

SM_02_Laboratorní příručka. Jméno Datum Podpis Zpracoval Marie Podoláková Obsah

LABORATORNÍ PŘÍRUČKA BIOS

IMUNOCYTOCHEMICKÁ METODA JEJÍ PRINCIP A VYUŽITÍ V LABORATOŘI

Modul IB. Histochemie. CBO Odd. histologie a embryologie. MUDr. Martin Špaček

Řízená dokumentace. Laboratorní příručka

1 Popis vzorku. 2 Detekční limit vyšetření. 3 Časová náročnost. 4 Zpracování vzorku. 4.1 Množství vzorku. 4.2 Odběr vzorků.

LABORATORNÍ PŘÍRUČKA ODDĚLENÍ PATOLOGIE

Protokol ke cvičení z Biologie vodních živočichů

Spektroskopické é techniky a mikroskopie. Spektroskopie. Typy spektroskopických metod. Cirkulární dichroismus. Fluorescence UV-VIS

LABORATORNÍ PŘÍRUČKA

PŘEHLED OBECNÉ HISTOLOGIE

L A B O R A T O R N Í P Ř Í R U Č K A - B I O S

LABORATORNÍ PŘÍRUČKA ODDĚLENÍ PATOLOGIE

Program kursu Rostlinná buňka

Technická specifikace předmětu veřejné zakázky

synlab czech s.r.o. U Vojenské nemocnice 1200, Praha 6

LABORATORNÍ PŘÍRUČKA ODDĚLENÍ PATOLOGIE

LABORATORNÍ PŘÍRUČKA

Laboratorní příručka

Laboratorní příručka

Chemická analýza moče

IMUNOFLUORESCENČNÍ SOUPRAVA K DIAGNOSTICE AUTOIMUNITNÍCH ONEMOCNĚNÍ JATER A ŽALUDKU

Laboratorní příručka

Laboratorní příručka

LABORATORNÍ PŘÍRUČKA. Laboratoř Cytohisto Břeclav, Bří. Mrštíků 3065, PSČ Výtisk č.: 01. Počet stran: 20. Počet příloh: 0.

LABORATORNÍ PŘÍRUČKA

PATOLOGICKO ANATOMICKÉ ODDĚLENÍ LABORATORNÍ PŘÍRUČKA

synlab czech s.r.o. U Vojenské nemocnice 1200, Praha 6

Laboratorní příručka laboratoří oddělení patologie

Laboratorní příručka Patologického oddělení

Fixace Uzavírací média

Laboratorní příručka oddělení patologické anatomie LP /12

NÁRODNÍ TECHNICKÉ MUZEUM NATIONAL TECHNICAL MUSEUM VÝZKUMNÁ LABORATOŘ

Laboratorní příručka Patologickoanatomické oddělení. Nemocnice Kyjov, příspěvková organizace

LABORATORNÍ PŘÍRUČKA

Závěrečná zpráva. Zkoušení způsobilosti v lékařské mikrobiologii (Externí hodnocení kvality) PT#M/20-2/2017 (č. 997)

Tvorba trvalých mikroskopických preparátů

Příručka pro odběr primárních vzorků

Závěrečná zpráva. Zkoušení způsobilosti v lékařské mikrobiologii (Externí hodnocení kvality) PT#M/20-2/2016 (č. 952)

Laboratorní příručka

Výukový materiál v rámci projektu OPVK 1.5 Peníze středním školám

Cytologické a histologické vyšetření. Tento výukový materiál vznikl za přispění Evropské unie, státního rozpočtu ČR a Středočeského kraje

LABORATORNÍ PŘÍRUČKA

Laboratorní příručka Oddělení patologické anatomie

Vlastnosti mikroskopovaných objektů, mikroskopické preparáty

Oblastní nemocnice Náchod. Obsah

M A T E R I Á L O V Ý P R Ů Z K U M, Z P R Á V A Č. P 9 9 7

Obsah Protein Gel Electrophoresis Kitu a jeho skladování

Příručka pro odběr primárních vzorků Oddělení patologie, Histologická laboratoř Dokument první vrstvy řízené dokumentace

LABORATORNÍ PŘÍRUČKA ODDĚLENÍ PATOLOGIE

LABORATORNÍ PŘÍRUČKA

Laboratorní příručka

Laboratorní příručka oddělení patologie. Nemocnice s poliklinikou Havířov, p.o.

Laboratorní p íru ka P íru ka pro odb r primárních vzork dle SN EN ISO 15189


Laboratorní příručka Oddělení patologické anatomie

Využití FNAC v diagnostice jaterních metastáz

Laboratorní příručka Příručka pro odběr primárních vzorků dle ČSN EN ISO 15189

Vazivo. Chrupavka. Kost

Základem je vazba molekul imunoglobulinů s molekulami antigenů ve tkáni.

Odběry biologického materiálu. Markéta Vojtová VOŠZ a SZŠ Hradec Králové

Laboratorní příručka Patologie

Laboratorní příručka pro uživatele služeb oddělení patologie ON Kladno (platnost dokumentu od 4/2011)

Odběrový manuál (Výtah z laboratorní příručky) Cytologická a bioptická laboratoř MUDr. Pavla Formánka

LABORATORNÍ PŘÍRUČKA

Karyotyp člověka. Karyotyp soubor chromozomů v jádře buňky. Význam v genetickém poradenství ke stanovení změn ve struktuře a počtu chromozomů

Otázka: Vyšetření moče. Předmět: Biologie - biochemie. Přidal(a): Tabletka. VOŠ zdravotnická a SŠ zdravotnická škola, Hradec Králové.

Transkript:

Histologické techniky stručný přehled Iva Dyková

Histologická / histopatologická vyšetření Histologické techniky Histologická technika soubor postupů, kterými připravíme tkáně pro mikroskopické vyšetření - obvykle v procházejícím světle Prohlížíme tenké histologické řezy, které získáme na základě serie postupů, k nimž patří: odvodnění a prosycení parafinem odparafinování, převedení řezů do vody odvodnění

Odběr vzorků tkání Excize / šetrné vyříznutí vzorků z tkání a orgánů (vzorek = excize) odvodnění a prosycení parafinem Odběr provádíme co nejdříve, bezprostředně po uhynutí / usmrcení, tj., z čerstvého kadaveru Velikost vzorků dost velké aby obsahovaly normální i alterovanou tkáň, dost malé aby se rychle a dobře nafixovaly Opatrný odběr, tkáně jsou křehké, snadno se poškodí např. pinzetou; Doba fixace se řídí rychlostí penetrace fixáže do hlubších vrstev vzorku K rutině histopatologických laboratoří patří uschování tzv. zbytkového materiálu až do stanovení diagnozy Dodržují se zásady přesné archivace dat o původu odebraných vzorků, archivují se i bločky pod pořadovými čísly s označením roku

Fixace odvodnění a prosycení parafinem Cílem fixace zachovat tkáně ve stavu, který se co nejvíce podobá intravitálnímu (konzervace struktur / morfologie i chemického složení) a umožní následné obarvení Fixáže chemické látky s následujícími vlastnostmi: musí působit rychle, fixovat tkáň dříve než nastoupí post-mortální změny (autolysis), (musí pronikat rychle i do hlubších vrstev vzorku), měly by zabránit vyplavení rozpustných látek z cytoplasmy buněk, vzniku artefaktů, neměly by působit nadměrné smrštění tkání a ztvrdnutí. Jednoduché fixáže: (10% formol) Složité z více komponent (Boiun, Davidson, FAA, atd.) objem vzorku objem fixáže (10x větší) tvar fixační nádoby! (tkáně ztvrdnou) označení obyčejnou tužkou!

Odvodnění odvodnění a prosycení parafinem Tkáně obsahují vodu, aby mohly být zpevněny prosycením parafinem musí být odvodněny pomocí tekutin, které vodu pohlcují Vzestupná řada alkoholů (EtOH) a impregnace organickým rozpustidlem, které Rozpouští parafin (xylol, toluen, chloroform atd.) Technické provedení individuálně / v kazetách / pomalým postupem / automatikou

Zalití vzorků do parafinu odvodnění a prosycení parafinem, bločky Prosycení parafinem udržovaným v tekutém stavu v termostatu při teplotě dané bodem tání parafinu (56-58ºC) 3 parafinové lázně, čistý parafin pro bločky Příprava bločků různé tvary / typy formiček, historicky skládané krabičky Po ztuhnutí parafinu případná úprava bločků odstranění nadbytku parafinu Upevnění bločku na podložku sloužící k upevnění do mikrotomu

Příprava histologických řezů odvodnění, prosycení parafinem, bločky Mikrotomy: Stabilní poloha bločku, horizontální pohyb nože sáňkové mikrotomy Stabilní poloha nože, vertikální pohyb bločku rotační mikrotom Úhel nože ve vztahu k bločku Histologické řezy 4-6 mikrometrů

Napínání řezů na vodní hladině, vhodné nastavení teploty vody, adheze na podložní sklo

Barvení histologických řezů odvodnění a prosycení parafinem, bločky Rehydratace řezů po rozpuštění parafinu organickým rozpustidlem a sestupnou řadou alkoholů Barvičky / barviva přírodní (karmín, hematoxylin, orcein, šafrán) umělá / syntetická kyselá - cytoplasmatická (eosin) basická - jaderná (metylenová modř) neutrální - (červeň šarlachová) Ortochromatická / metachromatická barviva Význam barevného indexu (C. I. No 75290)

Barvicí postupy: přímé nepřímé (s použitím tzv. mořidel kamenců = sírany Fe, Cr, Al) progresivní- (barvivo se nechá působit až do žádaného odstínu) regresivní napřed se řez přebarví, pak se diferencuje Odvodnění před zamontováním, význam projasňování řezů Montování do kanadského balzámu ředěného xylolem

Barvení v histologii Hematoxylin a eosin (HE) Trichrom podle Malloryho Van Giesonovo barvení Metoda podle Giemsy

Identifikace specifickýchn struktur (kolagen, elastická vlákna, sekrety, pigmenty atd. Speciální /selektivní barvení Van Gieson Perls Hall Schmorl Mucicarmín PAS Bodian Luxol fast blue identifikované struktury/ komponenty kolagen, hladký sval železo žluč melanin muciny glykogen, kys. mukopolysacharidy axony myelin

Diagnostické postupy v histopatologii Založeny na mikroskopickém vyšetření Histopatologické diagnózy versus etiologické diagnózy Čím je výsledek histopatologického vyšetření limitován: determinace patogenních agens / etiologie lezí; souvztažnost jevů, versus počitačové diagnózy