KG - 1 Jednokanálový koagulometr UŽIVATELSKÁ PŘÍRUČKA
ÚVOD Koagulometr KG-1 je určen k objektivnímu a přesnému stanovení času koagulace. Pracuje jako automatické stopky, které jsou spouštěny a zastavovány změnou optické propustnosti reakční směsi v měřicí kyvetě. POPIS A TECHNICKÉ ÚDAJE Koagulometr KG-1 je vybaven termostatovaným inkubačním blokem s otvory pro 10 ks měřicích kyvet a lahvičku s reagentem. Součástí inkubačního bloku je i měřicí pozice. Teplota inkubačního bloku je udržována na hodnotě 37 C ± 0,1 C. Ovládací a indikční panel obsahuje: tlačítka RESET a START, kterými je přístroj ovládán, čtyřmístný displej, na kterém jsou zobrazovány naměřené hodnoty indikátor teploty inkubačního bloku Přístroj není vybaven ani tiskárnou ani komunikačním rozhraním pro komunikaci s počítačem. Síťový spínač a síťová zásuvka jsou umístěny na zadním panelu přístroje. Rozměry přístroje: Hmotnost: Napájení: 180 x 300 x 140 mm 5,2 kg 230V/50Hz, 120VA INSTALACE A UVEDENÍ PŘÍSTROJE DO PROVOZU Po vybalení přístroje z transportního obalu zkontrolujte, není-li přístroj poškozen a je-li dodávka kompletní. Součástí dodávky je: koagulometr KG-1 síťová šňůra plastový kryt přístroje plastové víčko měřicího prostoru s otvorem pro pipetu 100 ks měřicích kyvet 100 ks magnetických míchacích tyčinek návod k obsluze Pokud shledáte jakékoli závady, obraťte se neprodleně na dodavatele přístroje. Přístroj instalujte na takové místo v laboratoři, které není vystaveno přímému zdroji světla, aby byly vyloučeny rušivé vlivy světla, dopadajícího zevně na fotodetekční prvek. Přístroj připojte k elektrické síti 230 V/50 Hz dodanou síťovou šňůrou. Elektrická zásuvka musí být správně uzemněna. Síťový spínač na zadním panelu přístroje přepněte do polohy I a stiskem tlačítka RESET zastavte chronometr. Vyčkejte ohřátí inkubačního bloku na provozní teplotu 37 C. (Pokud této teploty není dosaženo, teplotní indikátor na displeji červeně svítí.) Po ustálení teploty je koagulometr připraven k použití. Poznámka: Jakákoliv optická změna je schopna aktivovat detekční fotodiodu a tím zahájit nebo ukončit činnost chronometru. Běžící chronometr lze zastavit tlačítkem RESET.
Chronometr může být používán také zcela nezávisle jako stopky. Tlačítkem START lze chronometr spustit a tlačítkem RESET zastavit. PRINCIP MĚŘENÍ Princip měření uveďme na příkladu měření protrombinového času, tzv.quickova testu: Po umístění vytemperované kyvety s roztokem kalcium tromboplastinu do měřícího prostoru a po stisknutí tlačítka RESET dojde k vynulování časomíry a nastavení optické nuly měřicího systému na aktuální hodnotu optické propustnosti použitého kalcium tromboplastinu. Po vynulování je do kyvety pipetována citrátová plazma, která způsobí změnu v propustnosti světla. Tato změna je detekována a vyvolává spuštění chronometru, který měří reakční čas. Přístroj si po krátkém časovém intervalu, v jehož průběhu dojde k homogenizaci směsi v kyvetě, ukládá do paměti aktuální hodnotu propustnosti světla jako novou nulovou hodnotu. Při vylučování fibrinu dochází opět ke změně propustnosti světla. Okamžik, kdy změna optické hustoty dosáhne určité, vnitřně nastavené hodnoty, je interpretován jako ukončení koagulační reakce a dochází k zastavení chronometru. Na displeji je zobrazen výsledný reakční čas. P T (PROTROMBINOVÝ ČAS neboli QUICKŮV TEST) POSTUP STANOVENÍ Kyvety, reagenční roztoky a vzorky plazmy musí být před provedením vlastního testu vytemperovány na teplotu 37 C. Následující postup stanovení odpovídá použití kalcium tromboplastinu (např. HEMOPLASTIN, kat.č. GN1010, dodávaný firmou DOT diagnostics,s.r.o.). Při použití tromboplastinu bez přídavku chloridu vápenatého je nutno dodržovat postup, stanovený výrobcem reagentu. a) Do každé měřicí kyvety, kterou použijete, vložte magnetické míchadélko. b) Do kyvet nadávkujte 0,2 ml kalcium tromboplastinu. Ujistěte se, že roztok v kyvetách je homogenní, to znamená, že v něm nejsou přítomny vzduchové bubliny nebo kapky roztoku na stěnách kyvety. Kyvety vložte do inkubačního bloku k vytemperování. c) Vytemperovanou kyvetu (s míchadélkem) vložte do měřicího prostoru a stiskněte RESET. Asi po 5-6 sekundách se přístroj automaticky vynuluje. Displej chronometru musí zobrazovat nulu. d) Doprostřed hladiny roztoku v kyvetě napipetujte 100 µl citrátové plazmy. Tento úkon usnadňuje kryt měřicího prostoru s otvorem pro špičku pipety, který se dodává spolu s přístrojem. V důsledku změny optické propustnosti, která je způsobena pipetováním vzorku, přístroj okamžitě zahájí měření času. Promíchávání obsahu kyvety zajišťuje magnetické míchadélko. Změna optické hustoty při tvorbě fibrinu je přístrojem registrována jako ukončení reakce a dojde k zastavení chronometru. e) Na displeji je zobrazen výsledný čas koagulační reakce. f) Odstraňte použitou kyvetu a stejným způsobem pokračujte ve zpracování dalšího vzorku. g) Po ukončení práce vypněte přístroj přepnutím síťového spínače do polohy 0.
a P T T (AKTIVOVANÝ PARCIÁLNÍ TROMBOPLASTINOVÝ ČAS) POSTUP STANOVENÍ a) Do každé měřicí kyvety, kterou budete používat, vložte magnetické míchadélko. b) Do kyvet nadávkujte 100 µl aptt reagentu. Ujistěte se, že roztok v kyvetách je homogenní, to znamená, že neosahuje vzduchové bubliny nebo kapky roztoku na stěnách kyvety. c) Kyvety vložte do inkubačního bloku k vytemperování na dobu 3-5 minut. d) V 30sekundových intervalech nadávkujte do každé kyvety s reagentem 100 µl citrátové plazmy. Kyvetu vždy vraťte do stejné pozice inkubačního bloku a inkubujte přibližně 3 minuty, nebo po dobu, doporučenou výrobcem reagentu. e) Po uplynutí požadovaného inkubačního času přeneste první kyvetu do měřícího prostoru a stiskněte RESET. Displej chronometru musí zobrazovat nulu. f) Doprostřed hladiny roztoku v kyvetě napipetujte 100 µl chloridu vápenatého. Tento úkon usnadňuje kryt měřicího prostoru s otvorem pro špičku pipety, který je dodáván spolu s přístrojem. V důsledku změny optické propustnosti, která je způsobena pipetováním chloridu vápenatého, přístroj okamžitě zahájí měření času. Promíchávání obsahu kyvety zajišťuje magnetické míchadélko. Změna optické propustnosti při tvorbě fibrinu je přístrojem registrována jako ukončení reakce a dojde k zastavení chronometru. g) Na displeji je zobrazen výsledný čas koagulační reakce. h) Z měřicího prostoru odstraňte použitou kyvetu a stejným způsobem pokračujte ve zpracování dalšího vzorku. FIBRINOGEN (FB), TROMBINOVÝ ČAS (TT) U těchto metod postupujte podle instrukcí k provedení metody, poskytovaných výrobcem reagentu. Mějte na zřeteli, že k přesnému provedení měření je zapotřebí 300-400 µl reagenční směsi. SPOTŘEBNÍ MATERIÁL K měření jsou potřebné reagenty, vzorky a pomůcky pro dávkování, ředění apod. Reagenty: PT: kalcium tromboplastin, fyziologický roztok NaCl a kalibrátor. aptt: aktivátor (Cephaline-Kaolin, kyselina elagová apod.), chlorid vápenatý, fyziologický roztok NaCl a kalibrátor. Fibrinogen: trombinový reagent, pufr a kalibrátor. Další potřeby: automatické mikropipety k dávkování vzorků a reagentů reakční kyvety magnetická míchadélka
Společnost DOT diagnostics s.r.o. Praha dodává pro koagulační měření následující reagenty a spotřební materiál: Protrombinový čas - Quickův Test (PT) GN 1010 HEMOPLASTIN (hodnota ISI = 1,8) 6 x 4 ml (120 testů) GN 1020 HEMOPLASTIN SP (hodnota ISI = 1,1) 6 x 4 ml (120 testů) Aktivovaný parciální tromboplastinový čas (aptt) GN 1030 HEMOS aptt 6 x 10 ml (300 testů) (kyselina elagová 3 x 10ml, chlorid vápenatý 3 x 10ml) Fibrinogen Test (FB) GN 1040 HEMOFIBRIN 6 x 2 ml (80 testů) (hovězí tromboplastin 4 x 2ml, roztok imidazolu 2 x 2ml) Kontrolní plazma GN 1100 HEMOTROL N (normální) 6 x 1 ml GN 1200 HEMOTROL P (patologická) 6 x 1 ml Spotřební materiál FC5200007 Reakční kyvety 1000 ks FC5200008 Magnetické míchací tyčinky 1000 ks A. Preventivní údržba Preventivní údržba není nutná. B. Čištění ÚDRŽBA Vypnutý přístroj musí být chráněn dodávaným plastovým krytem. Kryt umístěte na přístroj až několik minut po jeho vypnutí (po vychladnutí přístroje). Zvláště dbejte na čistotu dutiny měřicího prostoru, do které by nemělo vniknout větší množství prachu. Veškeré pipetování roztoků provádějte mimo přístroj. Toto neplatí pro přidání poslední komponenty, kdy je kyveta v měřicím prostoru koagulometru. C. Desinfekce a sterilizace Žádná část přístroje nepotřebuje ošetření tohoto druhu. Při rozlití potenciálně infekčního materiálu proveďte desinfekci podle zásad laboratorní praxe. ODSTRAŇOVÁNÍ PROBLÉMŮ PROBLÉMY PŘÍČINY ŘEŠENÍ Velmi krátký čas Vzduchové bubliny v kyvetě Odstraňte vzduchové bubliny Sraženina nebyla detekována Chybí míchadélko Chybí reagent Nebyl přidán vzorek Nebyla stisknuta klávesa RESET Dodejte chybějící složku Stiskněte RESET Špatná reprodukovatelnost Nepřesnost pipetování Zkontrolujte dávkované množství, případně překalibrujte pipety Chronometr není aktivován Před přidáním poslední kompo- Opakujte test
nenty nebyla stisknuta klávesa RESET Při výskytu poruchy přístroje kontaktujte servisního technika. Pro přístroje, dodávané společností DOT diagnostics, s.r.o. Praha, zajišťujeme také veškerou servisní činnost: DOT diagnostics, s.r.o. - servisní oddělení Ruzyňská 519/16 161 00 Praha 6 servisní technik - tel.: 602 344 581 ZÁRUKA A OMEZENÍ ZÁRUKY Výrobce poskytuje záruku po dobu dvou let od data instalace přístroje za předpokladu, že přístroj byl správně uveden do chodu. Záruka se nevztahuje na poškození přístroje, které vzniklo hrubým zacházením. Vyrábí: RAL Técnica para el Laboratorio S.A. Avda. Virgen de Montserrat, 51 08970 SANT JOAN DESPÍ, Barcelona - SPAIN Dodává: DOT diagnostics, s.r.o. Ruzyňská 16 161 00 Praha 6 tel./fax: 235 318 612 (614) e-mail: dotdiag@dotdiag.cz web: www.dotdiag.cz