Česká zemědělská univerzita v Praze Vysoká škola chemicko-technologická v Praze OSEVA vývoj a výzkum s.r.o.

1. Titulní list Česká zemědělská univerzita v Praze Vysoká škola chemicko-technologická v Praze OSEVA vývoj a výzkum s.r.o. Redakčně upravená zpráva za rok 2010 Číslo projektu: QH 92106 Název projektu: PĚSTITELSKÉ SYSTÉMY U MÁKU SE ZAMĚŘENÍM NA KVALITU A BEZPEČNOST EKOLOGICKÉ A INTEGROVANÉ PRODUKCE. Program: PP2 Ochranné a šetrné postupy hospodaření Téma: Přírodě blízké hospodaření - welfare a permakultura Priorita Doba řešení: 1. 1. 2009-31. 12. 2011 Řešitel:.. Ing. Miroslava Hájková Odpovědný řešitel:. Ing. Perla Kuchtová, Ph.D. Řešitel: Prof.Ing. Jana Hajšlová, CSc. Statutární zástupce příjemce koordinátora:. Praha, leden, 2011 Prof. Ing. Jiří Balík, CSc., rektor

2. Osnova zprávy 3. Organizace účastnící se projektu 60460709 Česká zemědělská univerzita v Praze 60461373 Vysoká škola chemicko-technologická v Praze 26791251 OSEVA vývoj a výzkum s.r.o. 4. Řešitelský tým v roce 2010 Honsová Hana Ing. Ph.D. Bečka David Ing. Ph.D Budaiová Marcela Dvořák Petr Ing. Ph.D. Erhartová Daniela Bc. Hájek Martin Ing. Hájková Miroslava Ing. Hajšlová Jana Prof. Ing. CSc. Havel Jiří Ing. CSc. Kazda Jan Ing. CSc. Kostelanská Marta Ing. Kuchtová Perla Ing. Ph.D. Malachová Alexandra Ing. Mičák Libor Mikšík Vlastimil Ing. Ph.D. Pazderů Kateřina Ing. Ph.D. Plachká Eva Ing. Prokinová Evženie Doc. Ing. CSc. Šafránková Marie Schulzová Věra Dr. Ing. Vepříková Zdeňka Ing. Vospělová Jaroslava Vykoukal Václav Zachariášová Milena Ing. další pracovník další řešitel další pracovník další řešitel další pracovník další pracovník řešitel řešitel další řešitel další řešitel další řešitel odpovědný řešitel další řešitel další pracovník další řešitel další pracovník další řešitel další řešitel další pracovník další řešitel další řešitel další pracovník další pracovník další řešitel 2

5. Náklady na projekt celkem. 2010 Celkové náklady na projekt v roce 2010 činily 2 229 tis. Kč. Z toho přímé náklady 1 785 tis. Kč 6. Zhodnocení průběhu řešení V rámci aktivity A01/10 (Zkoušení hodnoty osiv máku podle metodik ISTA.) byly na řešitelských pracovištích ČZU a Oseva VaV realizovány zkoušky čistoty, klíčivosti a zdravotního stavu osiva získaného v průběhu řešení z pokusných lokalit. Pro ekologické zemědělství lze použít pouze osivo nevyžadující moření, a proto jsou zkoušky zdravotního stavu významné. V rámci aktivity A02/10 byla optimalizována a validována multidetekční metoda pracující na principu UHPLC-TOFMS určená pro stanovení širokého spektra mykotoxinů v semeni máku. Tato metoda byla použita pro analýzu mykotoxinů ve vzorcích máku ze sklizně 2009 a 2010 z různých pěstitelských oblastí ČR. Obecně lze konstatovat, že případné houbové choroby napadají především povrch makovic. Většina vzorků semen máku neobsahovala žádné mykotoxiny v detekovatelném množství. Semena uvnitř makovice přichází do kontaktu s plísní při poškození povrchu makovic ať už důsledkem nějaké choroby, škůdce, nepříznivého počasí nebo mechanického poškození při ruční nebo strojové separaci semen od makoviny během sklizně. Důsledkem toho nejspíše došlo ke kontaminaci tří vzorků semen máku pocházejících z ekologické farmy Budyně nad Ohří ze sklizně 2009, kde byly u tří vzorků detekovány v kvantifikovatelném množství alternariol (15,7 25 µg/kg) a alternariolmonomethylether (13 19,6 µg/kg). Požadavky kladené na řešitele aktivitami: (1) A03/10 - Různá ošetření osiva proti patogenům semen a vzcházejících rostlin spojené s hodnocením vlivu způsobu ošetření na zdravotní stav rostlin, produktivitu porostu a semenářskou jakost, (2) A 04/10 - Založení a vedení pokusů s osivem máku ošetřeného biofungicidy na plochách konvenčních i certifikovaných pro EZ., (3) A05/10 - Založení a vedení pokusu s vybranými parametry množitelského porostu s různým ošetřením chemickými i biologickými přípravky (herbicidy, insekticidy, fungicidy) během vegetace a (4) A06/10 - Založení a vedení pokusu s biologickými přípravky během vegetace v pokusném porostu byly v průběhu roku 2010 splněny. Pokusy byly zakládány a vedeny na plochách konvenčních (Červený Újezd, Uhříněves, Opava, Krásné Údolí) i certifikovaných pro ekologické zemědělství (Uhříněves, Budyně nad Ohří). Pokusná plocha v Krásném údolí byla zničena 19. 7. 2010 bouří s vichřicí. 3

Sledování a výsledky z této lokality nejsou součástí této zprávy. Plán pokusu, metodika a část sledování jsou k dispozici u řešitelů. Tabulky 1-6 (Přílohy) přehledně dokládají plnění aktivit souvisejících s ošetřováním osiva, zakládáním a vedením včetně využití přípravků chemosyntetických (v integrované části pokusu) i biologických. Osivo pro pokusné účely pocházelo dílem z uznaného množení odrůdy Orfeus, dílem z ekologických pokusných ploch s vybranými parametry množitelských porostů. Před výsevem byla sledována klíčivost a zdravotní stav. Osivo bylo ošetřováno přípravky registrovanými pro užití v konvenčním i ekologickém zemědělství samostatně i v kombinacích tak, aby nebylo dotčeno hospodaření v ekologickém režimu (tab. 1, 4). Pro zkoušení nových, k přírodě šetrných ošetření, jsme zahrnuli i využití fyzikálních metod (studené plazma, tab. 7), nevraceli jsme se k metodám HWT (hot water treatment), užitým v prvním roce řešení. Osivo z pokusů vedených na lokalitách Opava (OP), Uhříněves (UH), Uhříněves chmelnice (UHch) Červený Újezd (ČUJ) a Budyně nad Ohří (BUD) v roce 2009 bylo zkoušeno v podmínkách pokusné stanice katedry zahradnictví ČZU v Praze, která disponuje pozemky certifikovanými pro ekologické zemědělství (tab. 7). Jednalo se o osivo odrůdy Orfeus jednak přímo ze sklizně vybraných variant integrované i ekologické produkce na pokusných lokalitách, dále o směsné vzorky osiva z ekologické produkce kalibrované, případně ošetřené studeným plazmatem, a konečně o vzorky uznaného osiva ošetřeného elektronovým zářením (Eventus), případně přípravkem Polyversum (tab. 7) V rámci aktivity A07/10 (Sledování výskytu škůdců v porostech založených různými pěstitelskými technologiemi.) byl v rámci kontrol pokusy sledován výskyt hlavních škůdců máku, především pak: (1) krytonosce kořenového, který působí mimořádné škody při vzcházení ekologicky vedených porostů a (2) krytonosce makovicového, který začíná škodit především v době háčkujícího poupěte a počátkem kvetení a dále na mladých makovicích. V roce 2009 na podzim byl v Budyni n. Ohří vedle pozemku pro výsev jarního máku vyset ozimý mák, který se v době květu stal objektem masivního napadení krytonoscem makovicovým, které jsme zdokumentovali. Napadení makoviček krytonoscem probíhá ihned po rozvití květu a tvorbě makoviček. Samice kladou do makoviček po celou dobu květu a následně ještě i do mladých makoviček. Napadené rostliny jsou často druhotně napadány bejlomorkou makovou a houbou Helminthosporium papaveris (Miller, 1956). 4

Jakékoliv aplikace proti dospělcům musí být aktivní po celou dobu, kdy mohou samice klást vajíčka (viz předchozí odstavec), proto určitou možnost skýtají záchytné obsevy. Z dalších škůdců byl hodnocen výskyt mšic, které se na pokusných lokalitách vyskytovaly spíše sporadicky. Aktivity ptačích druhů nebyly hodnoceny. Počet poškozených makovic byl minimální, škody nepřesáhly 3 %. A08/10 Sledování výskytu chorob v porostech založených různými pěstitelskými technologiemi. V pravidelných intervalech byly sledovány počty napadených rostlin na pokusných parcelách. Vysoký je počet rostlin vykazujících příznaky napadení plísní makovou či helmintosporiózou. Nespecifické příznaky bývají přičítány virózám. Alternariové černě se vyskytují především na makovicích při dozrávání. A09/10 Hodnocení zdravotního stavu osiva máku s cílem vyvinout metodu detekce původce helmintosporiózy v osivu máku pro rutinní využití při kontrole osiva V rámci aktivity byl v laboratorních podmínkách na vybraných partiích semen z různých lokalit zjišťován výskyt Dendryphion sp. v/na osivu. Jde o přesné laboratorní vyšetření vzorku 400 semen (pro pokusné účely lze i 100). Inkubace probíhá 9 dní na umělé živné půdě (PDA), při teplotě 22 C, ve tmě. Kontrola správnosti determinace patogenu mikroskopicky. A10/10 Sledování obsahu morfinu v makovině s cílem zjistit vliv pěstitelské technologie na kvalitu suroviny pro farmaceutický průmysl. Po sklizni a výmlatu byly ze všech lokalit podle výnosových parametrů vybrány pokusné varianty, u nichž byl stanoven obsah alkaloidů v makovině. K hodnocení obsahu morfinu ve vzorcích makoviny byly vybrány reprezentační varianty z fungicidního bloku na všech pokusných stanovištích: jednalo se o kontrolu, superkontrolu, varianty, které se osvědčily v loňské a letošní sezóně a dvě varianty z ekologického pěstování. Vzorky makoviny byly na pracovišti oddělení chemické laboratoře v Opavě homogenizovány a analyzovány metodou HPLC na obsah jednotlivých alkaloidů (morfin, thebain, kodein). 5

Shrnutí: byla optimalizována a validována multidetekční metoda pracující na principu UHPLC- TOFMS určená pro stanovení širokého spektra mykotoxinů v semeni máku. metoda byla použita ke stanovení širokého spektra mykotoxinů v semeni máku. Většina vzorků semen máku neobsahovala žádné mykotoxiny v detekovatelném množství. kontaminovány byly 3 vzorky pocházející z ekologické farmy ke kontaminaci semen pravděpodobně došlo v důsledku kombinace poškození povrchu makovic, druhotně napadených chorobami, a mechanického výmlatu. osivo pro pokusné účely bylo jak ekologického tak konvenčního původu (certifikované osivo), ošetřováno bylo v souladu s metodikou a doporučenými postupy pro přírodní a chemosyntetické prostředky parametry osiva byly hodnoceny v souladu s metodikou Pokusy byly zakládány a vedeny na plochách konvenčních i certifikovaných pro ekologické zemědělství regularita vzcházení na ekologických plochách byla limitována krytonoscem kořenovým, proti němuž zatím ekologický systém nedisponuje účinnou ochranou, v příštím roce se chceme zaměřit na možnost regulace poškození vzcházejícího máku tímto škůdcem ochrana proti krytonosci makovicovému by byla možná prostřednictvím záchytných pásů ozimého máku výskyt rostlin napadených chorobami na parcelách byl v korelaci s použitými chemosyntetickými i přírodními prostředky ochrany rostlin v laboratorních podmínkách byl na vybraných partiích semen z různých lokalit zjišťován výskyt Dendryphion sp. v/na osivu, výsledky jsou k dispozici u řešitele obsah morfinu v makovině odpovídal normě a pohyboval se podle původu vzorku v rozsahu 0,3-0,9 %, nejnižší obsah vykazovala makovina ozimého máku (0,3 %) Byl splněn výstup V004: Ověřit účinnost různých způsobů ošetření osiva proti patogenům osiva a vzcházejících rostlin máku na ekologických a konvenčních pěstitelských plochách. V roce 2010 byly výsledky vlivu prostředků použitých k ošetření osiva máku na zdravotní stav rostlin, výnos a produkci prezentován pro praktické využití v rámci dvou seminářů a konferencí. Gliorex i Polyversum jsou, samostatně i v kombinaci s dalšími postupy, vhodné k ošetření osiva. Zlepšují zdravotní stav rostlin a zvyšují stabilitu výnosu. 6

7. Přílohy 7.1. Příloha I. Přehled schválených aktivit 2010 A01/10 Zkoušení hodnoty osiv máku podle metodik ISTA. A02/10 Sledování vybraných fusariových a alternariových mykotoxinů v semeni máku A03/10 Různá ošetření osiva proti patogenům semen a vzcházejících rostlin spojené s hodnocením vlivu způsobu ošetření na zdravotní stav rostlin, produktivitu porostu a semenářskou jakost. (DP) A04/10 Založení a vedení pokusů s osivem máku ošetřeného biofungicidy na plochách konvenčních i certifikovaných pro EZ A05/10 Založení a vedení pokusu s vybranými parametry množitelského porostu s různým ošetřením chemickými i biologickými přípravky (herbicidy, insekticidy, fungicidy) během vegetace A06/10 Založení a vedení pokusu s biologickými přípravky během vegetace v pokusném porostu. A07/10 Sledování výskytu škůdců v porostech založených různými pěstitelskými technologiemi. A08/10 Sledování výskytu chorob v porostech založených různými pěstitelskými technologiemi. A09/10 Hodnocení zdravotního stavu osiva máku s cílem vyvinout metodu detekce původce helmintosporiózy v osivu máku pro rutinní využití při kontrole osiva A10/10 Sledování obsahu morfinu v makovině s cílem zjistit vliv pěstitelské technologie na kvalitu suroviny pro farmaceutický průmysl. 7.2. Příloha II. Výstup pro rok 2010 V004 Definice cíle: Ověřit účinnost různých způsobů ošetření osiva proti patogenům osiva a vzcházejících rostlin máku na ekologických a konvenčních pěstitelských plochách. 1.1.2009-31.12.2010 7

7.3 Příloha III. Přehled pokusných aktivit 2010 Aktivity: A03/10 A 04/10 A05/10 A06/10 Tab. 1 Pokusná metodika integrované technologie. Fungicidní blok. Opava, Uhříněves, Červený Újezd 2010 Var. Cíl ošetření Ošetření osiva Ošetření (++osiva) Termíny ošetření Počet ošetření vegetace Dávka na variantu*** 1. Kontrolní Cruiser kontrolní - 0 0 2. Plíseň maková Helmintosporióza Cruiser Polyversum 0,1 kg 2 listy, růžice, poupě 3 0,8 g Choroby tobolek 3. Plíseň maková Setí osivo Cruiser Gliorex++ 3 kg/ha Helmintosporióza 3 pravé listy 2 24 g Plíseň maková 4 Helmintosporióza Polyversum Polyversum 0,1 g 2 listy, růžice, poupě 3 0,8 g Choroby tobolek Plíseň maková 5 Helmintosporióza Gliorex Polyversum 0,1 g 2 listy, růžice, poupě 3 0,8 g Choroby tobolek 6 6 listů až růžice Plíseň maková Infinito*1,6 l 12,8 ml Cruiser háčkování až první 2 Helmintosporióza Prosaro 250 EC 0,75 l 6 ml otevřené květy 7 Plíseň maková 6 listů až růžice Cruiser Dithane DG Neotec 2 kg Helmintosporióza 2 týdny po 1. oš. 2 16 g 8 9 10 11 12 13 14 15 16 Plíseň maková Helmintosporióza Choroby tobolek Helmintosporióza Choroby tobolek Helmintosporióza Choroby tobolek Helmintosporióza Choroby tobolek Helmintosporióza Choroby tobolek Helmintosporióza Choroby tobolek Helmintosporióza Choroby tobolek Helmintosporióza Choroby tobolek SUPERKONTROLA (uznané osivo) Cruiser Cruiser Cruiser Cruiser Cruiser Cruiser Cruiser Cruiser 17** 2009 Chinook 18** 2009 Gliorex 19** 2009 Caramba 1,0 l Discus 0,2 kg Prosaro 250 EC 0,75 l Discus 0,25 kg Caramba 1,0 l Bumper Super 1,0 l Prosaro 250 EC 0,75 l + Hergit 0,2 l Prosaro 250 EC 0,75 l + Hergit 0,2 l + Zn 0,5 kg Prosaro 250 EC 0,75 l +Atonic 0,6 l 6 listů až růžice počátek kvetení háčkování až první otevřené květy háčkování až první otevřené květy háčkování až první otevřené květy háčkování až první otevřené květy háčkování až poupě před otevřením háčkování až poupě před otevřením háčkování až první otevřené květy 2 8 ml 1,6 g 1 6 ml 1 2 g 1 16 ml 1 8 ml 1 6 ml + 1,6 ml 1 6 ml + 1,6 ml + 4 g 1 6 ml + 4,8 ml kontrola kontrola 0 0 E-ventus+ Chinook Prosaro 250 EC 0,75 l + Biscaya* 0,3 l Prosaro 250 EC 0,75 l + Hergit 0,2 l Talstar 0,1 l + Gliorex 3,0 kg Biscaya* 0,3 l Prosaro 250 EC 0,75 l + Hergit 0,2 l + Zn 0,5 kg Aqua Vitrin 2,5 l/ha 20 cm háčkování - poupě před otevřením vzcházení 20 cm háčkování až poupě před otevřením poupě 7-10 dní po 1. 2 3 6 ml+1,2 ml 6ml+1,6 ml 0,8ml+24g 2,4 ml 6 g+1,6 ml + 4 g 2 20 ml Pozn. Aplikace ČUJ: 26. 4. 2010 - vzcházení až 2 listy, 28. 5. 2010 6 listů, 5. 6. 2010-20 cm, 16. 6. 2010 butonizace, 24. 6. 2010 háčkování, 29. 6. 2010 fungicidy květ 8

Aktivity: A03/10 A 04/10 A05/10 A06/10 Tab. 2 Pokusná metodika integrované technologie. Insekticidní blok. Opava, Uhříněves, Červený Újezd 2010 Cíl aplikace: Krytonosec kořenový Cíl aplikace: Žlabatka stonková Var. Moření Přípravek - Termín Dávka v Termín Dávka / ha Var. Přípravek osiva postřik aplikace l/ha aplikace 20 Chinook - moření - 25* kontrola - 21 - Nurelle D 0,6 l vzcházení 26 Vaztak 10 EC 0,15 22 - Mospilan 120 g vzcházení 27 Callypso 480 0,2 SC 24.6. 23 - Vaztak 10 EC 0,15 l vzcházení 28 Biscaya 240 35-40 cm 0,3 OD BBCH 55-57 24 - Vaztak 10 EC + 0,15 l + Mospilan 120 g vzcházení 29 Mavrik 2 F 0,2 * VARIANTA 25: kontrola shodná pro oba cíle Aktivity: A03/10 A 04/10 A05/10 A06/10 Tab. 3 Agrotechnika integrované technologie. Insekticidní i fungicidní blok. Opava (OP), Uhříněves (UH), Červený Újezd (ČUJ) 2010 OP pšenice ozimá Předplodina: UH hrách + bob + peluška - zelené hnojení ČUJ pšenice ozimá Podmítka OP srpen 2009, talířový podmítač OP konec října 2009, střední orba Orba: UH 24. 11. 2009 ČUJ 2. 11. 2009 orba pluh, následné urovnání povrchu (smyk + brány) OP březen 2010, urovnání povrchu, 31. 3. - 1. 4. 2010 kompaktor Příprava půdy: UH 24-30. 3. 2010. ČUJ 24. 3. 2010 příprava půdy (1 přejezd smyk + obrány) OP 1. 4. 2010 Výsev: UH 30. 3. 2010. (meziřádek 25 cm) Ø t 11,9 C - srážky 0 mm ČUJ 26.3. 2010 setí mák + hnojení 50 kg N v LAD Odrůda: OP, UH, ČUJ Orfeus, výsevní množství 1,2 kg/ha 3. 4. 2010 Merlin 80 g/ha - PREE OP 7. 6. 2010 Callisto 0,2 l/ha + Starane 0,3 l/ha 17. 6. 2010 Stratos Ultra + Dash 2,5+2,5 l/ha Herbicid: UH 2. 4. 2010 Merlin 750 WG - 0,1 kg/ha PREE 11. 6. 2010 Starane 0,3 l/ha + Laudis 1,2 l/ha (dlouživý růst 30-40 cm) ČUJ 29. 3. 2010 postřik Callisto 480 SC 0,25 l/ha 8. 6. 2010 Lentipur 500 FW 1,5 l/ha + Starane 250 EC 0,3 l/ha TM UH 30. 4.2010 NURELLE D - 0,6 l/ha Insekticid (mimo varianty 20 25) 2-4 pravé lístky ČUJ 26. 4. 2010 Targa Super 5 EC 2,5 l/ha, Karate Zeon 0,1 l/ha mimo insekticidních pokusů, vzcházení až 2 listy dle metodiky OP 9. 6. 2010 LAV 30 kg N/ha Hnojení: UH 30. 3. 2010-50 kg N/ha - LAD 27 (před poslední přípravou) 21. 5. 2010-20 kg N/ha - LAD 27, růžice 6-8 listů ČUJ 26. 3. 2010 setí mák + hnojení 50 kg N v LAD, 17. 5. 2010 hnojení, 20 kg v LAD OP 19. 8. 2010 Sklizeň: UH 18. 8. 2010 - ruční sklizeň - označené parcely 20. 8. 2010 - sklízecí mlátička ČUJ 31. 7. 2010 desikace, 19. 8. 2010 odběr makovic, 20. 8. 2010 sklizeň OP od zasetí - 141 dnů Dnů vegetace UH od zasetí - 141 dnů - ruční sklizeň, od zasetí - 143 dnů - přímá kombajnová sklizeň ČUJ od zasetí - 147 dnů ČUJ aplikace dle metodik: 26. 4. 2010 - vzcházení až 2 listy dle metodiky, 28. 5. 2010 6 listů, 5. 6. 2010-20 cm, 16. 6. 2010 butonizace., 24. 6. 2010 háčkování.,29. 6. 2010 fungicidy květ 9

Aktivity: A03/10 A 04/10 A05/10 A06/10 Tab. 4 Pokusná metodika ekologické technologie. Uhříněves. 2010 Ošetření osiva Ošetření ve vegetaci Ošetření ve vegetaci Var. Kalibrace osiva* (2 g/kg) 6 7 pravých listů poupě až počátek květu 51. 1. (> 1mm) gliorex kontrola kontrola 52. 1. (> 1mm) gliorex BIOAN - 2% roztok BIOAN - 2% roztok 53. 1. (> 1mm) gliorex POLYVERSUM - 100 g/ha POLYVERSUM - 100 g/ha 54. 1. (> 1mm) polyversum kontrola kontrola 55. 2. (1 mm) polyversum BIOAN - 2% roztok BIOAN - 2% roztok 56. 3. (1 mm) polyversum POLYVERSUM - 100 g/ha POLYVERSUM - 100 g/ha 57. 4. (1 mm) gliorex kontrola kontrola 58. 5. (1 mm) gliorex BIOAN - 2% roztok BIOAN - 2% roztok 59. kontrolní gliorex POLYVERSUM - 100 g/ha POLYVERSUM - 100 g/ha 60. kontrolní polyversum kontrola kontrola 61. kontrolní polyversum BIOAN - 2% roztok BIOAN - 2% roztok 62. kontrolní polyversum POLYVERSUM - 100 g/ha POLYVERSUM - 100 g/ha Podmínky aplikace ve vegetaci 31. 5., 18 00 hod Ø t 11,6 C,srážky 0 mm 30. 6, 18 00 hod., Ø t 23,1 C, srážky 0 mm *Ekologické osivo odrůdy Orfeus ze sklizně 2009, Budyně n. Ohří Aktivity: A03/10 A 04/10 A05/10 A06/10 Tab. 5 Agrotechnika ekologické technolog technologie Uhříněves (UH), Uhříněves chmelnice (UHch), Budyně nad Ohří (BUD), Trója (TR) 2010 UH UHch BUD TR Předplodina: hrách + bob + peluška (zelené hnojení) brambory košťáloviny černý úhor po košťálovinách Orba: 18. 11. 2009 Příprava půdy: 24.3. - 30. 3. 30. 3. 7. 4.. 15. 21. 4. Výsev: 30. 3. 2010 Ø t 11,9 C - srážky 0 mm 7. 4. 2010 22. 4. 2010 Meziřádková vzdálenost (cm): 25 45 25 Odrůda: Orfeus, výsevní množství 1,8 kg/ha Regulace plevelů 29. 4. 29. 4., 13. - 14. 5. 2010 (plečkování, ruční pletí) 13. - 25. 6. 20. 5. 25. 6. Postřik lignohumát 14. 7. 13. 7. Přírodní insekticid dle metodiky ne dle metodiky ne Ruční sklizeň, odběry makovic: 18. 8. 2010 10. 8. 2010 25. 8. 2010 Dnů vegetace (výsev-sklizeń) 141 dnů 141 dnů 126 dnů 126 dnů Aktivity: A03/10 A 04/10 A05/10 A06/10 Tab. 6 Pokusná metodika ekologické technologie. Budyně nad Ohří. 2010 Var. osivo Původ osiva kalibrace Lignohumát Polyversum 1. gliorex EKO 1. (> 1mm) 13. 7. 1. 6., 22. 6. 2. gliorex EKO 1. (> 1mm) 13. 7. 3. polyversum EKO 1. (> 1mm) 13. 7. 1. 6., 22. 6. 4. polyversum EKO 1. (> 1mm) 13. 7. 5. gliorex EKO 2. (1 mm) 13. 7. 1. 6., 22. 6. 6. gliorex EKO 3. (1 mm) 13. 7. 7. polyversum EKO 4. (1 mm) 13. 7. 1. 6., 22. 6. 8. polyversum EKO 5. (1 mm) 13. 7. 9. neošetřené KON nekalibrované 10. gliorex KON okraj nekalibrované 11. polyversum KON okraj nekalibrované 10

Aktivity: A03/10 A 04/10 A05/10 A06/10 Tab. 7:Vegetační zkoušky osiva odrůdy Orfeus z integrované a ekologické produkce. Trója, 2010 Var. Vzorek (var/lok) Osivo Ošetření osiva Výnos (t/ha) HTS (g) Var. Vzorek (varianta/lokalita) Osivo Ošetření osiva Výnos (t/ha) 0 kontrola O Polyversum 0,69 0,386 29 18 UH INT ne 0,36 0,377 1 5 OP INT ne 0,56 0,399 30 18 ČUJ INT ne 0,42 0,381 2 5 UH INT ne 0,322 31 INT mix INT ne 0,51 0,383 3 5 ČUJ INT ne 0,28 0,420 32 EKO mix EKO > 1 mm kalibrace 0,40 0,414 4 6 OP INT ne 0,49 0,387 33 EKO mix EKO < 1 mm kalibrace 0,45 0,395 5 6 UH INT ne 0,48 0,433 34 1,3,7 BUD EKO ne 0,53 0,399 6 6 ČUJ INT ne 0,434 35 2 BUD EKO ne 0,26 0,407 7 7 OP INT ne 0,74 0,440 36 4 BUD EKO ne 0,36 0,419 8 7 UH INT ne 0,41 0,375 37 5 BUD EKO ne 0,27 0,452 9 7 ČUJ INT ne 0,44 0,441 38 6 BUD EKO ne 0,48 0,390 10 8 OP INT ne 0,38 0,402 39 8 BUD EKO ne 0,21 0,373 11 8 UH INT ne 0,51 0,406 40 9 BUD EKO ne 0,32 0,404 12 8 ČUJ INT ne 0,35 0,390 41 10 BUD EKO ne 0,41 0,418 13 9 OP INT ne 0,37 0,441 42 11 BUD EKO ne 0,25 0,451 14 9 UH INT ne 0,32 0,361 43 12 BUD EKO ne 0,38 0,430 15 9 ČUJ INT ne 0,41 0,402 44 1 UHch EKO ne 0,36 0,408 16 10 OP INT ne 0,24 0,303 45 2 UHch EKO ne 0,426 17 10 UH INT ne 0,35 0,394 46 3 UHch EKO ne 0,41 0,377 18 10 ČUJ INT ne 0,27 0,427 47 4 UHch EKO ne 0,52 0,422 19 11 OP INT ne 0,37 0,326 48 5 UH UHch EKO ne 0,18 0,408 20 11 UH INT ne 0,42 0,356 49 Eventus O E-ventus 0,10 0,357 21 11 ČUJ INT ne 0,35 0,356 50 Pm001 mix EKO Plazma 001 0,11 0,392 22 14 OP INT ne 0,45 0,352 51 Pm002 mix EKO Plazma - 002 0,53 0,395 23 14 UH INT ne 0,54 0,419 52 kontrola O Polyversum 0,45 0,431 24 14 ČUJ INT ne 0,32 0,365 53 kontrola O Polyversum 0,21 0,379 25 17 OP INT ne 0,443 54 Pm003mix EKO Plazma 003 0,08 0,329 26 17 UH INT ne 0,37 0,396 55 Pm004 mix) EKO Plazma - 004 0,14 0,311 27 17 ČUJ INT ne 0,39 0,396 56 kontrola O Polyversum 0,43 0,422 28 18 OP INT ne 0,66 0,389 57 kontrola O Polyversum 0,36 0,377 Pozn. Původ osiva: O certifikované osivo, INT osivo z pokusů s integrovanou technologií, EKO osivo z pokusů s ekologickou technologií Aktivity: A03/10 A 04/10 A05/10 A06/10 Tab. 8: Klimatologická data Uhříněves v roce 2010 Měsíc I 10 II 10 III 10 IV 10 V 10 VI 10 VII 10 1. dekáda Teplota ( C) -3,4-2,6-1,7 83,1 119,1 174,4 22,2 1. 10. Srážky (mm) 36,7 11,7 2 2,3 5,5 6,4 13,9 2. dekáda Teplota ( C) -2,4-2,1 4,3 88,6 108,5 174 23,5 11. 20. Srážky (mm) 19,8 3,9 4,6 4,7 4,3 4,7 47,3 3. dekáda Teplota ( C) -5,8 4,5 10,2 122,6 150,2 174,4 18,6 21. 31. Srážky (mm) 6,9 3,1 8,7 0,8 2,6 0,2 56,8 Měsíc Ø Teplota ( C) -3,93-0,32 4,52 10,05 12,64 17,92 21,58 Měsíc Srážky (mm) 63,5 18,7 18,7 32,0 93,1 62,2 118,0 Počet deštivých dnů 1-5 mm Počet deštivých dnů 5-10 mm Počet deštivých dnů < 10 mm Normál Ø Teplota ( C) -2,1-0,8 3,4 8,2 13,4 16,3 18,2 Normál Srážky (mm) 28 27 31 46 65 74 74 Zdroj: Mičák, 2010 HTS (g) 11

Aktivity: A03/10 A 04/10 A05/10 A06/10 Tab. 9: Průběh počasí z automatické meteorologické stanice Otice v roce 2010 Měsíc Dekáda Ø t dekádní ( C) srážek (mm) Ø t ( C)/normál srážek (mm)/normál Leden I. -3,78 57,3 II. -3,37 7,9-5,98/-1,9 65,5/19,1 III. -10,36 0,3 Únor I. -4,65 5,4 II. -2 9,1-1,23/-0,5 20,9/22,4 III. 4 6,4 Březen I. -1,73 0,3 II. 3,11 3,9 3,89/3,1 9,9/29,4 III. 9,72 5,7 Duben I. 5,95 21,1 II. 8,28 38,4 8,65/8 65,6/43,6 III. 11,72 6,1 Květen I. 11,34 65,8 II. 10,37 63,7 12,11/13,2 184,2/73,8 III. 14,29 54,7 Červen I. 17,8 49,3 II. 16,54 43,9 17,06/16,3 96,5/86,3 III. 16,84 3,3 Červenec I. 19,99 11,1 II. 21,96 34,5 19,97/17,9 139,6/90,1 III. 18,15 94,0 Srpen I. 17,89 13,8 II. 17,84 16,1 17,44/17,4 78,4/71,2 III. 16,65 48,5 Září I. 10,99 19,5 II. 12,11 7,5 11,53/13,4 86,8/54,6 III. 11,49 59,8 Aktivity: A03/10 A 04/10 A05/10 A06/10 Tab. 10 Klimatologická data Doksany (Budyně nad Ohří). 2010 Měsíc I 10 II 10 III 10 IV 10 V 10 VI 10 VII 10 VIII 10 IX. 10 1. dekáda Teplota ( C) -3,7-2,2-1,8 7,4 11,8 17,7 21,8 19,1 13,8 1. 10. Srážky (mm) 21,3 3,3 5,2 4,3 36,4 15,9 20,5 95 2,7 2. dekáda Teplota ( C) -2,0-2,2 4,2 9,3 11,7 16,7 23,6 19,0 12,6 11. 20. Srážky (mm) 10,9 3,6 7,4 11,7 19 15,1 28,2 77,3 7 3. dekáda Teplota ( C) -5,7 1,6 9,2 12,0 14,8 19,1 19,2 17,5 11,6 21. 31. Srážky (mm) 4 4,6 8,5 0,7 12,4 4,2 73,6 28,9 85,3 Měsíc Ø Teplota ( C) -3,8-0,9 3,9 9,6 12,8 17,9 21,5 18,5 12,7 Měsíc Srážky (mm) 36,2 11,5 21,1 16,7 67,8 35,2 122,3 201,2 95 Počet deštivých dnů 1-5 mm Počet deštivých dnů 5-10 mm Počet deštivých dnů < 10 mm Normál Ø Teplota ( C) -2-0,2 3,7 8,5 13,4 16,7 18,1 17,4 13,5 Normál Srážky (mm) 20,4 19,2 22,8 32,4 54,4 55,7 59,6 64,6 40,1 Zdroj: ČHMÚ, 2010 12

Aktivity: A03/10 A 04/10 A05/10 A06/10 Tab. 11 Klimatologická data Červený Újezd v roce 2010 Měsíc I 10 II 10 III 10 IV 10 V 10 VI 10 VII 10 VIII 10 1. dekáda Teplota ( C) -4,85-4,35-2,57 6,02 11,28 16,31 20,34 18,27 1. 10. Srážky (mm) 23,3 8,5 4,1 11,2 42,5 38,6 28 77 2. dekáda Teplota ( C) -3,59-3,6 2,92 8,08 10,11 15,75 22,34 18,07 11. 20. Srážky (mm) 13,9 3,1 4,5 24,7 14,9 21,3 34,9 34,8 3. dekáda Teplota ( C) -7,58 3,06 9,75 10,89 14,4 17,27 18,28 18,8 21. 31. Srážky (mm) 9,1 2,7 10,1 1,5 26,4 0,1 82,4 33 Měsíc Ø Teplota ( C) -5,71-1,96 3,57 8,55 12,01 16,44 20,22 17,72 Měsíc Srážky (mm) 45,3 14,3 18,7 37,4 83,8 60 145,3 145,7 Počet deštivých dnů 1-5 mm 5 4 7 2 10 4 4 9 Počet deštivých dnů 5-10 mm 3 0 0 1 3 0 2 4 Počet deštivých dnů < 10 mm 1 0 0 2 2 2 4 4 Normál Ø Teplota ( C) -2,1-1 3 7,4 12,6 15,6 16,6 17,4 Normál Srážky (mm) 22 22 26 41 54 63 64 69 Aktivity: A03/10 A 04/10 A05/10 A06/10 Obr. 1 Odchylky od průměru 2010. Výzkumná stanice Uhříněves Zdroj: Mičák, 2010 13

Aktivita: A07/10 Obr. 2. a, b, c: Poškození krytonoscem makovicovým. Zleva doprava: a) jarní mák, b a c) ozimý mák (Budyně nad Ohří, 25. 6. 2010) Aktivity: A03/10 A 04/10 A05/10 A06/10 Charakteristika lokality Opava v roce 2010 Pokusné parcely byly vysety na honu č. 33 v katastru Opavy Kylešovic. Pozemek leží v nadmořské výšce 295 m, svahovitost pozemku je 0 %. Patří do teplé oblasti s průměrnou roční teplotou 8,23 C, výrobního typu řepařského. Dlouhodobý normál ročního úhrnu srážek zde činí 640 mm. Půda je hlinitá, podíl jednotlivých frakcí: jílovité 26 %, hlinité 58 %, písčité 32 %. Podíl humusu činí 1,81 %, ph 7,06 s hloubkou ornice 30 cm. Půdní analýza byla provedena v únoru 2010 s těmito výsledky: Ca 0,41 %, P 129 mg, K 148 mg, Mg 118 mg. Zastoupení obilnin v osevním sledu je 50 %. Aktivity: A03/10 A 04/10 A05/10 A06/10 Charakteristika lokality Červený Újezd v roce 2010 Přesné polní maloparcelkové pokusy byly založeny na Výzkumné stanici Agronomické fakulty ČZU v Praze v Červeném Újezdě. Stanice se nalézá na rozhraní okresů Kladno a Praha-západ, cca 25 km od Prahy. Patří do teplé, mírně suché oblasti, výrobního typu řepařského. Klimaticky pokusné stanoviště spadá do oblasti mírně teplé, klimatického okrsku mírně suchého, převážně s mírnou zimou. Průměrná roční teplota vzduchu činí 6,9 C. Průměrný roční úhrn srážek činí 549 mm. Průměrná teplota ve vegetačním období (1.4. - 30.9.) je 12,9 C), průměrný vegetační úhrn srážek činí 361 mm. Průměrná teplota ve vegetačním klidu (1.12. - 28.2.) činí -2,2 C a úhrn srážek za toto období 53,0 mm. Sluneční svit v období 1926-1950 (Praha-Karlov) je 1902 hodin. Délka vegetačního období činí 150-160 dní. První mrazivý den se dostavuje v průměru 11. října. Na jaře se ojediněle vyskytují mrazíky koncem dubna. Půda na spraších. Ornice je šedohnědá, hlinitá, s drobtovitou strukturou. Její hloubka je od 28 do 35 cm a má střední až silné prokořenění a biologickou 14

činnost. Podorniční horizont (50-70 cm) je hnědý až rezavý, hlinitý s příměsí opuky. Prokořenění a biologická aktivita je střední. Aktivity: A03/10 A 04/10 A05/10 A06/10 Charakteristika lokality Uhříněves v roce 2010 Pozemky v okolí stanice jsou řazeny do řepařského výrobního typu, řepařsko pšeničného subtypu. Průměrná nadmořská výška je 295 metrů. Průměrná denní teplota vzduchu 8,3 C, průměrná teplota ve vegetačním období činí 14,6 C. Nejteplejším měsícem je červenec s průměrnou teplotou vzduchu 18,2 C. Zimy jsou relativně dlouhé se silnějšími mrazy, které se ojediněle objevují jako pozdní jarní mrazy, ještě koncem dubna a také mohou předčasně nastupovat již v říjnu. Průměrné roční srážky dosahují 575 mm, z toho v období duben až září 380 mm. Nejbohatší srážky jsou v měsíci červnu a červenci, nejchudší v únoru. Pokusné místo podle Langova dešťového faktoru patří do semihumidní oblasti. Sušší ráz podnebí je umíněn převládajícími západními a severozápadními větry, které snižují výpar. Stanice hospodaří na půdách s hlubokou ornicí (do 32 cm) a s humusovým horizontem do hloubky 70 cm. Ornice je mírně až středně humózní (1,74 2,12 %), s neutrální reakcí v celém svém profilu. Sorpční komplex je nasycený. Půdy poskytují určitou výnosovou jistotu, a to zejména v sušších letech. Vyžadují však dodržování základních agrotechnických opatření, neboť při intenzivních srážkách a následných přísušcích mají sklon ke kornatění. Produkční schopnost půd dosahuje 84 bodů. Hladina spodní vody se nachází v hloubce 1 metr a má trvalý charakter. Příznivý vodní režim je podmíněn vyvinutými iluviálními horizonty s poměrně dobrou vododržností, která má vliv na stabilní obsah vláhy využitelné rostlinami. Aktivity: A03/10 A 04/10 A05/10 A06/10 Charakteristika lokality Budyně n. Ohří v roce 2010 Statek hospodaří na cca 80 ha v Dolnooharské tabuli v nadmořské výšce 165 m, ve srážkovém stínu Krušných hor. K statku náleží široká kvalita půd od lehkých písčitých po těžké jílovité půdy. Většinu výměry tvoří orná půda. Cca 6 ha tvoří květnaté lužní louky, zdroj sena a píce pro chov krav BTPM. Vyrovnanou bilanci živin zajišťuje pravidelné přihnojování polí zkompostovaným kravským hnojem. Na orné půdě se pěstují ozimé a jarní obiloviny a jeteloviny pro skot. Jako zelené hnojení slouží svazenka a hořčice bílá. Na zlomku výměry se pěstuje mák, náročný na ruční práci. Od jara do podzimu se pěstuje různorodá polní zelenina (www.tacheci.cz, Tachecí 2008). Budyně n/o patří do mikroregionu Podřipsko. 15

8. Dosažené výsledky 8.1. A01/10 Zkoušení hodnoty osiv máku podle metodik ISTA Řešitelský tým: ČZU v Praze, OSEVA VaV Vypracoval: Ing. Perla Kuchtová, PhD., Ing. Miroslava Hájková, Ing. Jan Kazda, CSc., RNDr. Jiří Skuhrovec, PhD., Doc. Ing. Evženie Prokinová, CSc. U semen ze sklizně jednotlivých variant 2010 ze všech lokalit byla stanovena HTS, klíčivost (graf 1) a energie klíčení (graf 2). Graf 1 Klíčivost semen (%). Fungicidní blok. Opava 2010 (Přílohy, tab. 1) Klíčivost semen v % 100 90 80 70 60 % 50 40 30 20 10 klíčivost 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16-superkontrola 17 18 19 varianty Graf 2 Energie klíčivosti semen (%). Fungicidní blok. Opava 2010 (Přílohy, tab. 1) Energie klíčivosti semen v % 100 90 80 70 60 % 50 40 30 20 10 energie klíčivosti 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16-superkontrola 17 18 19 varianty 16

Energie klíčivosti a klíčivost (graf 1 a 2) sklizených semen se u jednotlivých sledovaných variant velmi lišila, pohybovala se ve velkém rozmezí od 28,5 až po 90,25 %. Na těchto ukazatelích se vliv počasí projevil asi nejmarkantněji. Nelze vůbec jednoznačně určit jako příčinu vliv použitých přípravků. HTS se u jednotlivých variant pohybovala v rozmezí 0,495 0,53 g (graf. 3). Graf 2 HTS (g). Fungicidní blok. Opava 2010 (Přílohy, tab. 1) HTS 0,54 0,53 0,52 0,51 g 0,5 HTS 0,49 0,48 0,47 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16-superkontrola 17 18 19 varianty Na jaře roku 2010 byly založeny vegetační zkoušky osiv získaných v rámci pokusu. Byly vybrány reprezentativní vzorky a vysety. Založení porostu proběhlo s třítýdenním zpožděním proti optimálnímu termínu. Graf 3 Vegetační zkoušky osiva reprezentačních vzorků. Výnos (t/ha) a HTS (g). Trója 2010. Průměry variant. (Přílohy, tab. 7 ) 17

Ze souhrnných výsledků uvedených v grafu je zřejmý nejvyšší výkon dosažený u osiva z varianty 5 integrovaného pěstování (Chinook + 2 x ve vegetaci Aqua vitrin), na opačné straně spektra se nachází výnos osiva z ekologického pěstování ošetřeného studeným plazmatem. Pravidelně byl sledován stav porostu vzcházení, zaplevelení, zdravotní stav. Výsledky jsou k dispozici u řešitelů. Budou komplexně zpracovány a stanou se součástí bakalářské práce, která bude předložena a obhájena v roce 2011. 8.2. A02/10 Sledování vybraných fusariových a alternariových mykotoxinů v semeni máku VYSOKÁ ŠKOLA CHEMICKO-TECHNOLOGICKÁ V PRAZE Ústav chemie a analýzy potravin Technická 3, 166 28 Praha 6 tel./fax: +420 220443185, tel: +420 2 24314096, +420602833424 e-mail: jana.hajslova@vscht.cz ROČNÍ TECHNICKÁ ZPRÁVA 2010 Kód projektu: QH92106 Aktivita: A507 A02/10 Sledování vybraných fusariových a alternariových mykotoxinů v semeni máku Řešitelský tým: Vysoká škola chemicko-technologická v Praze Vypracoval: Ing. Zdenka Vepříková Ing. Alexandra Malachová, Ing. Milena Zachariášová, Ing. Marta Kostelanská a Prof. Ing. Jana Hajšlová, CSc. Cílem aktivity bylo stanovit množství mykotoxinové kontaminace vzorků semen máku. Pozornost byla zaměřena na vybrané i) fusariové mykotoxiny (deoxynivalenol (DON), deoxynivalenol-3-glucosid (D3G), nivalenol (NIV), 3-a 15-deoxynivalenol (ADONs), HT-2 toxin (HT-2), T-2 toxin (T-2) a zearalenon (ZEA)) a ii) alternariové mykotoxiny (alternariol 18

(AOH), alternariolmonomethylether (AME) a altenuen (ALT)). V rámci této aktivity byla v letošním roce stávající metoda rozšířena o další významné mykotoxiny, které by mohly potenciálně kontaminovat tuto komoditu. Konkrétně se jedná o iii) aflatoxiny (AFB1, AFB2, AFG1, AFG2), iv) ergotové mykotoxiny (ergosine, ergocornine, ergocryptine, ergochristine), v) enniatiny (enniatin A, enniatin A1, enniatin B, enniatin B1), vi) metabolity zearalenonu (µ ZOL, β ZOL), vii) další vybrané mykotoxiny (diacetoxyscirpenol (DAS), ochratoxin A (OTA), sterigmatocystin (ST), penitrem A, beauvericin). Takto rozšířená metoda byla dále optimalizována a validována. Pro identifikaci a kvantifikaci analytů byla zvolena ultra-vysokoúčinná kapalinová chromatografie ve spojení s vysokorozlišovacím hmotnostním spektrometrem typu Time-of- Flight (UHPLC-TOFMS). Sledované analyty byly detekovány na základě přesné hmoty dané látky a retenčního času příslušných certifikovaných standardů. Ionizace byla provedena elektrosprejem (ESI) v pozitivním i negativním módu. Příprava vzorků Homogenizace Vliv homogenizace (rozemletí semen máku na mlýnku k tomu určeném) na extrakci a následnou identifikaci a kvantifikaci cílových analytů byl testován pomocí přídavku čistého standardu směsi všech látek na hladině 100 µg/kg do pomleté i nepomleté matrice. Z výsledků analýz vyplynulo, že extrakcí rozemleté matrice se do extraktu dostává velké množství interferujících látek, které následně zhoršují detekci vybraných analytů a zároveň homogenizace matrice nemá žádný vliv na výtěžnost jednotlivých analytů Z toho důvodu bylo rozhodnuto, že se od homogenizace vzorků v dalším postupu upustí. Extrakce a přečištění Izolace analytů z matrice semen máku a následné přečištění extraktů byla provedena pomocí modifikované disperzní extrakce na tuhou fázi nazývané QuEChERS (Quick, Easy, Cheap, Effective, Rugged, Safe), která byla vyvinuta původně pro multireziduální stanovení pesticidů v různých matricích (Anastassiades M a kol., 2003). Postup spočívá v navážení 4 g vzorku, které byly extrahovány v kyvetě směsí 7,5 ml vody a 10 ml acetonitrilu po dobu 3 minut. Následně byl přidán 1 g chloridu sodného a 4 g síranu hořečnatého. Tato směs byla opět třepána 3 min a poté centrifugována po dobu 10 min při 10 000 ot./min., díky čemuž došlo k oddělení jednotlivých fází. Cílové analyty byly vysoleny do horní acetonitrilové vrstvy, zatímco polární matriční koextrakty (např. cukry nebo aminokyseliny) zůstávají ve fázi vodné. Alikvotní podíl 2 ml organické fáze acetonitrilu byl převeden do nové kyvety a následně k němu bylo přidáno 100 mg sorbetu Bondesil 19

(modifikovaný C18 silikagel, který slouží k vyvázání nepolárních koextraktů) a 300 mg síranu hořečnatého. Tato směs byla třepána po dobu 1 min a následně centrifugována po dobu 2 min při 10 000 ot./min. Alikvotní podíl 1 ml byl filtrován přes mikrofiltr a odebrán do vialky. 1 ml finálního vzorku připravený tímto způsobem obsahoval 0,4 g původní matrice. Takto připravený vzorek byl připraven k analýze. Identifikace a kvantifikace Identifikace a kvantifikace byla provedena pomocí ultra-vysokoúčinné kapalinové chromatografie ve spojení s hmotnostním spektrometrem s analyzátorem s měřením doby letu (UHPLC-TOFMS). Sledované analyty byly detekovány na základě přesné hmoty dané látky a retenčního času příslušných certifikovaných standardů. Ionizace byla provedena elektrosprejem (ESI) v pozitivním i negativním módu. Pracovní podmínky UPLC-TOFMS Chromatografické podmínky: Přístroj: Waters Acquity UPLC, USA Kolona: HSS T3 (10 mm x 21 mm; 1,8 µm, Waters, USA) Teplota kolony: 40 C Teplota autosampleru: 10 C Průtok: 0,3 ml/min Mobilní fáze: 5 mm mravenčan amonný, methanol Objem nástřiku: 5 µl Tab. I Gradient mobilní fáze složení mobilní fáze čas (min.) % 5 mm mravenčan amonný % methanol 0 90 10 0-6 50 50 6-10 0 100 10-14 0 100 14-17 90 10 Podmínky hmotnostní spektrometrie: Přístroj: LCT Premier XE, Waters, USA, hmotnostní spektrometr s analyzátorem s měřením doby letu Typ zdroje: ESI Polarita: +/- Desolvatační plyn: N 2, průtok 740 l/h Plyn na kóně: N 2, průtok 10 l/h 20

Napětí na kapiláře: 3500 V Napětí na kóně: 90 V Teplota zdroje: 120 C Vypařovací teplota: 350 C Mód: W Tab. II Sledované mateřské ionty při TOF MS detekci ESI + molekulová hmotnost sumární vzorec [M+H]+ [M+NH4]+ Retenční čas (min) HT-2 424,2097 C22H32O8 442,2435 8,62 T-2 466,2202 C24H34O9 484,2541 9,11 AFB1 312,0628 C17H12O6 313,0712 7,78 AFB2 314,0785 C17H14O6 315,0869 7,77 AFG1 328,0578 C17H12O7 329,0661 7,14 AFG2 330,0734 C17H14O7 331,0818 6,77 DAS 366,1779 C19H26O7 384,2022 7,87 ST 324,0634 C18H12O6 325,0712 9,69 beauvericin 783,4089 C45H57N3O9 801,4439 11,01 ergosine 547,2789 C30H37O5N5 548,2873 7,62 ergocornine 561,2946 C31H39N5O5 562,3029 7,80 ergocryptine 611,3102 C35H41N5O5 612,3186 8,21 ergochristine 609,2946 C35H39N5O5 610,3029 8,26 enniatin A 681,4559 C36H63N3O9 699,4908 11,31 enniatin A1 667,4402 C35H61N3O9 685,4752 11,20 enniatin B 639,4089 C33H57N3O9 657,4439 10,98 enniatin B1 653,4246 C34H59N3O9 671,4595 11,10 ESI - molekulová hmotnost sumární vzorec [M-H]- [M+HCOO]- Retenční čas (min) AOH 258,0528 C14H10O5 257,045 8,7 AME 272,0685 C15H12O5 271,0607 9,74 ALT 292,0947 C15H16O6 337,0924 7,55 NIV 312,1209 C15H20O7 357,1186 2,58 D3G 458,1788 C21H30O11 503,1765 3,60 DON 296,126 C15H20O6 341,1237 3,61 FUS-X 354,1315 C17H22O8 399,1292 4,75 3-ADON 338,1366 C17H22O7 383,1343 6,08 15-ADON 338,1366 C17H22O7 383,1343 6,08 penitrem A 633,2852 C37H44ClNO6 632,2779 10,41 ZON 318,1467 C18H22O5 317,1389 9,47 α-zol 320,1624 C18H24O5 319,1545 9,33 β-zol 320,1624 C18H24O5 319,1545 8,94 OTA 403,0823 C20H18ClNO6 402,0744 9,41 Validace multireziduální metody pro matrici mák Metoda byla validována pomocí řady matričních kalibračních standardů v rozsahu 1 200 ng/ml, což odpovídá 2,5 500 µg/kg matrice. Linearita, která byla vyjádřena korelačním koeficientem R 2, se u všech kalibračních křivek pohybovala v rozmezí 0,998-0,9999. Hodnoty byly pro většinu analytů lineární v rozmezí koncentrací 5 500 µg/kg matrice. 21

Pracovní charakteristiky metody (mez kvantifikace (LOQ), výtěžnost a opakovatelnost pro sledované analyty) jsou uvedeny v Tab. III. Ke zjištění výtěžnosti metody pro semena máku byly použity vzorky blankových semen máku (semena máku s velmi nízkým, případně žádným přirozeným obsahem mykotoxinů) s přídavkem standardu na hladině 100 µg/kg. Průměrná výtěžnost, stejně jako opakovatelnost metody vyjádřena jako RSD byla určena z pěti opakování. Tab. III Parametry metody pro semena máku u vybraných mykotoxinů na koncentrační hladině 100 µg/kg parametr parametr LOQ Výtěžnost RSD (%), LOQ Výtěžnost RSD (%), (µg/kg) (%) n = 5 (µg/kg) (%) n = 5 AOH 5 103 6,2 AFG1 5 78 4,5 AME 5 95 9,1 AFG2 5 84 4,3 ALT 5 107 5,0 DAS 5 107 3,9 NIV 75 72 15,5 ST 5 89 7,7 DON 50 107 9,2 OTA 5 47 22,7 D3G 50 37 18,4 penitrema 5 69 6,7 Fus-X 50 108 5,9 beauvericin 5 57 13,1 ADONs 25 97 6,9 ergosine 50 53 7,9 HT-2 10 107 4,8 ergocornine 10 36 8,3 T-2 10 101 5,0 ergocryptine 10 42 2,6 ZEA 5 93 7,6 ergochristine 25 35 8,0 α-zol 5 93 7,0 enniatina 25 58 8,4 β-zol 5 95 8,2 enniatina1 10 58 7,5 AFB1 5 79 5,9 enniatinb 10 69 18,2 AFB2 25 92 47,9 enniatinb1 10 53 28,3 Vzorky semen máku Optimalizovaná a validovaná multireziduální analytická metoda pro stanovení mykotoxinů byla využita k analýze 76 vzorků máku pocházejících z různých pěstitelských oblastí ČR a 4 směsných vzorků. Stručný přehled původu vzorků je uveden v Tab. IV. Tab. IV Přehled vzorků semen máku Rok sklizně Pěstitelská technologie Oblast Počet vzorků Integrovaná Uhříněves 10 2010 2009 Integrovaná Červený Újezd 9 Integrovaná Opava 10 Ekologická Budyně nad Ohří 10 Integrovaná Uhříněves 6 Integrovaná Červený Újezd 6 Integrovaná Opava 6 Ekologická Budyně nad Ohří 7 Ekologická Uhříněves 12 Extenzivní - směs* Troja 1 Integrovaná - směs* Mšené Lázně 1 Ekologická - směs* Budyně (ozimý mák) 1 Ekologická - směs* Budyně 1 22

*Jedná se o směsný vzorek všech různých variant pěstovaných v konkrétní lokalitě Výsledky Experimentální měření provedená na vzorcích poskytnutých Českou zemědělskou univerzitou v Praze (ČZÚ Praha) ukázala, že pouze tři vzorky z oblasti Budyně nad Ohří ze sklizně 2009 pěstované v souladu s ekologickým zemědělstvím byly pozitivní na přítomnost alternariových mykotoxinů. Konkrétně se jednalo o alternariol (15,7 25 µg/kg) a alternariolmonomethylether (13 19,6 µg/kg), grafické znázornění je uvedeno na Obr. 1. Během vegetace ekologického máku byl zaznamenán vyšší výskyt škůdce krytonosce makovicového, který mohl způsobit takové poškození vegetace, které mohlo vést k tomu, že se rostliny máku setého staly náchylnější k plísňovým chorobám. Ostatní vzorky neobsahovaly v detekovatelném množství žádné z výše uvedených mykotoxinů, pro něž byla optimalizována multireziduální metoda. Obr. 1 Grafické znázornění obsahu mykotoxinů ve vzorcích semen máku, sklizeň 2009 Budyně nad Ohří 30 Obsah mykotoxinů v semenech máku - Budyně nad Ohří, sklizeň 2009 [µg/kg] 25 20 15 10 5 alternariol alternariolmethylether 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 číslo vzorku Závěr V rámci aktivity A507 A02/10 byla optimalizována a validována multidetekční metoda pracující na principu UHPLC-TOFMS určená pro stanovení širokého spektra mykotoxinů v semeni máku. Tato metoda byla použita pro analýzu mykotoxinů ve vzorcích máku ze sklizně 2009 a 2010 z různých pěstitelských oblastí ČR. Obecně lze konstatovat, že případné plísně napadají převážně jen povrch makovic. Převážná většina vzorků semen máku neobsahovala žádné mykotoxiny v detekovatelném množství. Semena uvnitř makovice přichází do kontaktu s plísní při poškození povrchu makovic ať už důsledkem nějaké choroby, škůdce, nepříznivého počasí nebo mechanického poškození při ruční nebo strojové separaci 23

semen od makoviny během sklizně. Důsledkem toho nejspíše došlo ke kontaminaci tří vzorků semen máku pocházejících z ekologické farmy Budyně nad Ohří ze sklizně 2009, kde byly u tří vzorků detekovány v kvantifikovatelném množství alternariol (15,7 25 µg/kg) a alternariolmonomethylether (13 19,6 µg/kg). Literatura Anastassiades M, Lehotay S, Stajnbaher D, Schenck F, Fast and easy multiresidue method employing acetonitrile extraction/partitioning and "dispersive solid-phase extraction" for the determination of pesticide residues in produce, Journal of AOAC 86 (2003) 412-431 8.3. Aktivity: A03/10 A 04/10 A05/10 A06/10 A03/10 Různá ošetření osiva proti patogenům semen a vzcházejících rostlin spojené s hodnocením vlivu způsobu ošetření na zdravotní stav rostlin, produktivitu porostu a semenářskou jakost. (DP) A04/10 Založení a vedení pokusů s osivem máku ošetřeného biofungicidy na plochách konvenčních i certifikovaných pro EZ A05/10 Založení a vedení pokusu s vybranými parametry množitelského porostu s různým ošetřením chemickými i biologickými přípravky (herbicidy, insekticidy, fungicidy) během vegetace A06/10 Založení a vedení pokusu s biologickými přípravky během vegetace v pokusném porostu. Řešitelský tým: ČZU v Praze, OSEVA VaV Vypracoval: Ing. Perla Kuchtová, PhD., Ing. Miroslava Hájková, Ing. Jan Kazda, CSc., Ing. Plachká, Ing. Jiří Havel, Doc. Ing. Evženie Prokinová, CSc. Randomizované pokusy s parcelami o velikosti 10 m 2 byly podle metodik na jednotlivých lokalitách postupně vysety do připravené půdy od 30. 3. - 7. 4. 2010 (Přílohy, tab. 3). Výsevek v integrovaném pokusu činil 1,2 kg/ha. Hodnocení vzcházivosti, kdy počty vzešlých rostlin na metr čtvereční byly převedeny na %, přičemž 100 % byla neošetřená kontrola, proběhlo ve fázi BBCH 14-19. Nejlépe byla vyhodnocena varianta s kombinovaným ošetřením osiva metodou e-ventus a mořením přípravkem Chinook 136 %. Velmi dobře dopadl také přípravek Cruiser OSR 112 %. 24

Méně než neošetřená kontrola měly parcely s osivem ošetřeným přípravkem Polyversum 90 %, ostatní varianty jen mírně kladně lišily od neošetřené kontroly (graf 4). Graf 4 Vzcházivost v závislosti na ošetření osiva. Fungicidní blok. Opava 2010 (Příl. tab.1) Ve fázi BBCH 14-49 byly hodnoceny parcely ošetřené proti krytonosci kořenovému. Hodnocení byly vyjádřeno jako vzcházivost, jednalo se o počty rostlin na metr čtvereční a přepočteno na %, přičemž 100% byl údaj u neošetřené kontroly (jako u předchozího grafu). Ve srovnání s počtem rostlin na neošetřené kontrole byl počet rostlin vyšší u všech ošetřených variant kromě varianty s Mospilanem, kde byl počet rostlin nižší (graf 5). Jedná se pouze o doplňkový údaj, ne stěžejní. Graf 5 Vzcházivost v závislosti na ošetření. Fungicidní blok. Opava 2010 (Příl. tab.1) Vzcházivost v % ve srovnání s neošetřenou kontrolou BBCH 14-19 120 100 80 60 % vzcházivost 40 20 0 Chinook Nurelle D Mospilan Vaztak 10 EC Vaztak 10 EC + Mospilan kontrola nemořená Kontrolní varianty dosáhly v pokusech v Uhříněvsi a Červeném Újezdu, v porovnání s ostatními variantami, velmi dobrého výnosu (graf 6): Červený Újezd 3. nejlepší a Uhříněves dokonce nejlepší. U superkontroly (var 16, uznané osivo, neošetřené) tomu tak nebylo. 25

V Opavě byla, pokud jde o kontrolu varianta 1 (ošetření osiva přípravkem Cruiser OSR), situace odlišná, ale i zde dosáhla tato varianta lepšího výsledku, než dalších pět pokusných variant (graf 6). Tyto skutečnosti vyžadují hlubší rozbor a analýzu faktorů, které mohly konečný výsledek ovlivnit. Graf 6 Výnosy (t/ha). Fungicidní blok. Opava, Uhříněves, Červený Újezd 2010 (Příl. tab. 1) 1,6 1,5 1,4 1,3 1,2 1,1 1,0 0,9 0,8 0,7 0,6 2 16 3 5 4 1 6 11 10 17 19 7 9 14 18 13 8 12 15 UH ČUJ OP Pokud jde o insekticidní blok, zde byla kontrola 1 v Opavě výnosově 2. nejlepší a superkontrola (var. 16 ) nejhorší v Uhříněvsi a Opavě (graf 7). Graf 7 Výnosy (t/ha). Insekticidní blok. Opava, Uhříněves, Červený Újezd 2010 (Příl. tab. 1) V průměru bylo v insekticidním bloku dosaženo nižšího výnosu (všechny varianty 1,076 t/ha) než v bloku fungicidním (všechny varianty 1,131 t/ha), což platí pro všechny lokality a varianty (s výjimkou kontrolní varianty 25 v Uhříněvsi a Červeném Újezdě). 26

Tabulka 12 uvádí přehled výnosů v jednotlivých blocích i výnosy vyjádřené v % na průměr všech variant. Tab. 12 Výnosy (t/ha) variant fungicidního (1-19) a insekticidního bloku (20-25). Opava, Uhříněves, Červený Újezd 2010 (Příl. tab. 1) Varianta Výnos (t/ha) % na průměr všech variant Varianta Výnos (t/ha) % na průměr všech variant UH ČUJ OP UH ČUJ OP UH ČUJ OP UH ČUJ OP 1 1,334 1,464 0,889 118 129 79 20 1,187 1,113 0,794 110 103 74 2 1,178 1,498 0,742 104 132 66 21 1,121 1,337 0,889 104 124 83 3 1,097 1,209 0,806 97 107 71 22 1,191 1,075 0,876 111 100 81 4 1,210 1,268 0,855 107 112 76 23 1,176 1,117 0,970 109 104 90 5 1,186 1,256 0,842 105 111 74 24 1,163 1,018 0,841 108 95 78 6 1,168 1,346 0,918 103 119 81 25 1,226 1,308 0,840 114 122 78 7 1,209 1,401 0,942 107 124 83 8 1,252 1,546 1,049 111 137 93 9 1,238 1,440 0,944 109 127 83 10 1,161 1,420 0,928 103 126 82 11 1,128 1,121 0,925 100 99 82 12 0,992 1,057 1,083 88 93 96 13 1,269 1,360 1,044 112 120 92 14 1,312 1,265 0,957 116 112 85 15 1,137 1,170 1,112 101 103 98 16 1,035 1,145 0,763 91 101 67 17 1,007 1,240 0,933 89 110 83 18 1,124 1,120 1,041 99 99 92 19 1,146 1,255 0,938 101 111 83 U všech variant došlo, ve srovnání s neošetřenou superkontrolou, k mírnému zvýšení výnosu semen, pouze u varianty, kde bylo osivo před setím přimořeno přípravkem Polyversum, tomu tak nebylo. S přihlédnutím k průběhu počasí v pokusné sezóně je velmi obtížné výsledky analyzovat. Graf 7 Výnosy makoviny i semen (t/ha) ze 30-ti odebraných makovic. Fungicidní blok. Opava, Uhříněves, Červený Újezd 2010 (Příl. tab. 1) Výnos makoviny a semen ze 30-ti odebraných makovic 80,00 70,00 60,00 50,00 g/30 makovic 40,00 30,00 makovina semena 20,00 10,00 0,00 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 varianty 27

Před sklizní bylo odebráno 30 makovic z každé parcely. Tyto makovice byly zařazeny do jednoho ze tří stupňů podle míry napadení houbovými chorobami vyjádřená v % (graf 8). Graf 8 Napadení makovic houbovými chorobami. Fungicidní blok. Opava, Uhříněves, Červený Újezd 2010 (Příl. tab. 1) Napadení makovic houbovými chorobami v % 100% 90% 80% 70% 60% % 50% 40% 30% 61-100% 31-60% 0-30% 20% 10% 0% 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 varianty Z jednotlivých odebraných makovic byl zjišťován výnos semen a makoviny, z grafu lze také vyčíst poměr mezi makovinou a semeny. Tento graf prezentuje % makoviny ve vztahu k semenům. Hodnoty se pohybují od 53,5 do 57,3 %. Graf 9 % makoviny ve vztahu k semenům máku. Fungicidní blok. Opava, Uhříněves, Červený Újezd 2010 (Příl. tab. 1) % makoviny ve vztahu k semenům máku 58,00 57,00 56,00 % 55,00 54,00 % makoviny 53,00 52,00 51,00 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 varianty 28