MASARYKOVA UNIVERZITA PŘÍRODOVĚDECKÁ FAKULTA ÚSTAV EXPERIMENTÁLNÍ BIOLOGIE Lékařská mykologie (Bi3390) Dermatofytózy Dermatomykózy http://ziva.avcr.cz/2012-3/vlaknite-houby-z-povrchu-lidskeho-tela.html
Dermatofyta cca 50-60 druhů, z toho 35 druhů z lidského klinického materiálu V ČR druhová diverzita tvoří 15 druhů keratinofilní houby - schopné metabolizovat částečky keratinu celosvětově rozšířeny nejčastější původce infekcí kůže, vlasů, chlupů a nehtů dermatofytózy pro vznik kožní infekce mají význam: vlastnosti houby, věk, pohlaví a celkový zdravotní stav infikované osoby a místní kožní podmínky (vlhkost kůže či poranění), snížená odolnost organismu proti mykotické infekci Trichophyton, MicrosporumaEpidermophyton náležející do oddělení Ascomycota, Arthrodermataceae diagnostikují se mikroskopicky a kultivačně léčba je dlouhodobá, většinou lokální, u onychomykóz systémová
Dermatofyta Podle svého dlouhodobého přežívání se dělí na 3 hlavní skupiny: Geofilní - druhy vyskytující se na keratinizovaných substrátech prostředí - saprotrofické půdní druhy (Microsporum gypseum, Trichophyton ajelloi, T. terrestre ), zřídka patogenní pro živočichy a člověka. Zoofilní - druhy specializující se na domácí i divoká zvířata (Microsporum canis, Trichophyton verrucosum, T. mentagrophytes). K nákaze zoofilními druhy dochází při hraní s domácími mazlíčky nebo jde o profesionální infekce. Antropofilní obligátně parazitické druhy člověka (Trichophyton rubrum, Epidermophyton floccosum, Trichophyton interdigitale). K přenosu dochází při úzkém kontaktu mezi osobami nebo nepřímo (společným užíváním bot, ručníku, prostřednictvím kontaminovaných podlah ve sprchách či saunách).
Dermatofyta - morfologie Vláknité mikroskopické houby septované větvící se hyfy mikrokonidie makrokonidie chlamydospory hyfová vlákna charakteristického tvaru (parohovitá, spirálovitá) http://www.doctorfungus.org/thefungi/epidermophyton.php http://ziva.avcr.cz/2012-3/vlaknite-houby-z-povrchu-lidskeho-tela.html
Dermatofyta - konidiogeneze THALICKÁ HOLOTHALICKÁ KONIDOGENEZE - hyfa se rozdělí přepážkami a pak se rozpadne na jednotlivé buňky, poté se formuje jejich tvar či obsah - rhexolytické uvolňování konidie vytváří se mezibuňka - thalokonidie http://www.mycolog.com/chap4a.htm
Dermatofyta patogenita místo vstupu poškozená kůže velmi pomalu pronikají do okolní tkáně (infekce má plíživý nástup i průběh) vznik kožních lézí začíná vniknutím mikromycet do stratum coroneum a keratinizovaných vrstev epidermis tomu předchází: adheze konidií trvající 12 hod. => klíčení konidií po 24 30 hod. => proliferace hyf a postupný průnik vláken po dalších 2-3 dnech faktorem virulence dermatofyt je schopnost metabolizovat svými enzymy keratin k průniku do hlubších tkání nedochází, brání jim v tom sérové inhibitory, inhibitory keratinas a buněčná imunita imunitní reakce organizmu bývá výraznější u infekcí způsobených zoofilními druhy (http://skin-conditions.knoji.com)
Dermatofyta patogenita Onemocnění vyvolané dermatofyty se obecně nazývá tinea a druhou část názvu tvoří lokalizace infekce tinea pedis postižení plosky nohou a meziprstní prostory tinea unguium (onychomykózy) postižení nehtové ploténky nohou a rukou tinea corporis postižení trupu, horních a dolních končetin tinea cruris postižení oblasti třísel, zevních pohlavních orgánů a hýždí tinea capitis postižení vlasové části hlavy, obočí a řas tinea faciei postižení bezvousé obličejové části tinea barbae postižení vousaté části obličeje tinea manuum postižení rukou tinea incognito nepoznaná mykotická infekce
Dermatofytózy tinea pedis postižení plosky nohou - nemoc zvaná atletická noha nejčastější forma dermatofytické infekce postihuje meziprstní prostory nohou a plosky především mužů středního věku, zpravidla v souvislosti se sportovními aktivitami vznikají loupající se macerovaná ložiska se zarudlým okrajem, později se objevují bolestivé trhliny v kůži predisponující faktory: vlhké i teplé mikroklima v obuvi, poruchy prokrvení, diabetes mellitus, chronická žilní nedostatečnost, kouření, poruchy obranyschopnosti, onkologická onemocnění, podvýživa Trichophyton rubrum, Trichophyton interdigitale, stále řidčeji Epidermophyton floccosum konidie hub zůstávají virulentní několik měsíců především na podlahách společných sprch, tělocvičen, umýváren, kolem bazénů www.itg.be
Dermatofytózy tinea unguium www.itg.be postižení nehtového aparátu (onychomykózy) dermatofyt se z bříšek prstů rozšíří i na epidermis nehtového lůžka a postupuje dále pod nehtovou ploténku nehet je ztluštělý, deformovaný a odlišně zbarvený predisponujícími faktory: jsou traumatické postižení nehtu (zdravý nehet bývá napaden zřídka), vyšší věk, tinea pedis, nedostatečná nehtová hygiena, snížení periferní vaskulární cirkulace, sportovní aktivity, uzavřená obuv, diabetes mellitus Trichophyton rubrum (až v 85 %), Trichophyton interdigitale, Epidermophyton floccosum
Dermatofytózy tinea corporis postihuje neochlupenou kůži trupu, paží až k zápěstí a dolních končetin, kromě třísel, chodidel a rukou typicky se projevuje jako okrouhlá olupující se ložiska, na okraji zarudlá infekci vyvolávají všechny druhy dermatofytů původcem jsou nejčastěji zoofilní druhy (Trichophyton interdigitale, Trichophyton verrucosum, Microsporum canis) Microsporum canis (kočky, štěňata, králíci a morčata), nejčastěji jsou postiženy děti Trichophyton interdigitale (hlodavci, pes, kočka) Trichophyton rubrum (antropofilní druh) může způsobovat infekce u imunodeficitních a zanedbaných osob středního věku http://zdravi.e15.cz/clanek/postgradualni-medicina/dermatomykozy-450833
Dermatofytózy tinea cruris postižení třísel zejména mladších mužů infekce velmi často vzniká autoinokulací ze současné mykózy nohou a nehtů predisponujícími faktory: nedostatečná hygiena, vlhkost, obezita, zapaření v těsném oděvu Trichophyton rubrum, Trichophyton interdigitale, Epidermophyton floccosum http://trialx.com/curebyte/2012/11/29/images-related-to-tinea-cruris/
Dermatofytózy tinea capitis postižení vlasové části hlavy, obočí a řas typicky se tvoří ložiska s olámanými vlasy, kůže se loupe, případně se tvoří krusty v našich podmínkách nejčastěji vyvolané zoofilními dermatofyty postiženy bývají především děti předškolního věku infekce se přenáší ze zvířete na člověka, zdrojem infekce jsou kočky, psi, koně nejčastějším původcem infekce ve světě (s výjimkou USA) je Microsporum canis, zdrojem nákazy jsou kočky v USA je hlavním původcem Trichophyton tonsurans v Africe Trichophyton violaceum k přenosu z člověka na člověka prakticky nedochází http://www.scripps.org/articles/516-tinea-capitis
http://vdshahane.hpage.co.in/gallery27139.html Dermatofytózy tinea capitis rod Microsporum postihuje lidský vlas podle typu ektotrix (vlákna a konidie se nacházejí na povrchu vlasu) rod Trichophyton vyvolává typ ektotrix i endotrix (vlákna a konidie se nacházejí uvnitř vlasu) http://www.studyblue.com/notes/note/n/test-3/deck/869757
Dermatofytózy tinea faciei povrchní mykóza lokalizovaná v obličeji postihuje často děti začíná asymptomaticky, případně mírně svědí, proto zůstává často nepoznána Trichophyton interdigitale, Microsporum canis, občas i Trichophyton rubrum http://www.dermis.net/dermisroot/en/1269268/image.htm
Dermatofytózy tinea barbae postižení vousaté části obličeje www.emedicine.com vyskytuje se u dospělých mužů postižení diskrétní povrchovou formou nebo silně zánětlivou hlubokou formou nejčastějším původcem bývá zoofilní Trichophyton interdigitale (hlodavci), Trichophyton verrucosum (skot) nejčastěji jsou postiženy osoby pracující se zvířaty, např. chovatelé, veterináři zvířata (přenašeči infekce) bývají často zcela bez klinických příznaků
Dermatofytózy tinea manuum postižení dlaně nebo hřbetní části ruky méně častá dermatofytóza infekce antropofilním dermatofytem bývá na ruku přenesena sekundárně z mykózy nohou (Trichophyton rubrum) vzhledem k častému kontaktu ruky se zevním prostředím a nejrůznějšími materiály mohou být původcem infekce i zoofilní či geofilní dermatofyty http://www.dermis.net/dermisroot/en/15625/image.htm
Celkem bylo identifikováno 14 druhů dermatofytů, přičemž nejvýznamnější změnou oproti minulosti bylo vysoké zastoupeni zoofilního druhu Arthroderma benhamiae, který působil velkou část případů t. corporis (22,9 %) a t.capitis (29,2 %). Geofilní druhy působily jen 1,3 % všech infekci, přestože se jednalo o druhově nejpočetnější skupinu, ve které byly odhaleny dva nepopsane druhy a také přehlížené druhy Microsporum persicolor a M. fulvum.
Prim. MUDr. Marián Glasnák Oddělení klinické mikrobiologie, Nemocnice Rudolfa a Stefanie Benešov Povrchové mykózy na Benešovsku kdo je plesnivý? Flekaté dítě aneb kotě a morče za vysvědčení (Microsporum canis) Zápasník (Trichophyton tonsurans) Starší zemědělec nebo kdokoli jiný s hroznými nehty (Trichophyton rubrum, Trichophyton interdigitale) Pozn.: Páchnoucí nohy (Brevibacterium epidermidis) Zápach při tinea pedis plesnivých nohou se nepřipisuje mikroskopickým houbám, ale přemnoženému Brevibacterium epidermidis. Produkuje proteolytické enzymy, které uvolňují L-methionin z bílkovin.
Původci dermatofytóz v ČR v období červenec 2011 až červen 2013
Rod Epidermophyton Epidermophyton floccosum Fungi, Ascomycota, Pezizomycotina, Eurotiomycetes, Eurotiomycetidae, Onygenales, Arthrodermataceae antropofilní napadá kůži a nehty, ne však vlasy může způsobit malou epidemii v uzavřeném kolektivu, používajícím společné hygienické zařízení http://en.wikipedia.org/wiki/epidermophyton_floccosum
Epidermophyton floccosum pomalu rostoucí (3-4 týdny) kolonie žlutohnědé s nazelenalým podtónem paprsčitě rozbíhavé ve starších kulturách vločky bílého pleomorfního mycelia reverz žlutozelený až hnědavě oranžový rod se liší od Trichophyton a Microsporum absencí mikrokonidií
Epidermophyton floccosum kyjovité makrokonidie ve svazcích, hladké, 2-5 buněčné, 10-40 x 6-12 µm chlamydospory a arthrokonidie běžné ve starší kultuře http://www.mycobank.org/biolomics.aspx?table=mycobank&rec=58234&fields=all
Rod Trichophyton Fungi, Ascomycota, Pezizomycotina, Eurotiomycetes, Eurotiomycetidae, Onygenales, Arthrodermataceae v současné době stále více přibývá kožních infekcí zvířat vyvolaných čistě antropofilními druhy (infekce ovčích kopyt či koní vyvolaných T. rubrum) a naopak objevují se drmatofytózy způsobené zoofilními druhy teleomorfa Arthroderma makrokonidie a mikrokonidie rod se liší od Microsporum hladkými a většinou tenkostěnnými makrokonidiemi, od Epidermophyton přítomností mikrokonidií
Trichophyton rubrum nejčastěji nacházený dermatofyt antropofilní středně rychle rostoucí (2 3 týdny) kolonie chmýřité nebo granulární, bílé až narůžovělé (ve stáří) reverz vínově červený až olivový, někdy žlutý u nás nejčastěji původce původce tinea pedis, tinea unguium, tinea corporis http://www.mycology.adelaide.edu.au/virtual/2009/id2-may09.html#top
Trichophyton rubrum makrokonidie výjimečně, tenkostěnné, málo diferencované, cylindrické až cigárovité 40-55 x 6-7,5 µm mikrokonidie kolíčkovité, hruškovité 3-5,5 x 2-3,5 µm chlamydospory jsou méně časté http://www.mycobank.org/biolomics.aspx?table=mycobank&rec=27864&fields=all
Arthroderma benhamiae zoofilní (morče) původce tinea capitis, tinea corporis (u dětí do 10 let) 2 fenotypy žlutý a bílý reverz žluté odstíny, červené až hnědé menší procento izolátů se morfologií podobá T. interdigitale Trichophyton species of Arthroderma benhamiae- A new infectious agent in dermatology Article(PDF Available) in Journal der Deutschen Dermatologischen Gesellschaft 12(7) July 2014
Arthroderma benhamiae makrokonidie většinou chybí mikrokonidie uspořádané v hustých hroznovitých shlucích chlamydospory Trichophyton species of Arthroderma benhamiae- A new infectious agent in dermatology Article(PDF Available) in Journal der Deutschen Dermatologischen Gesellschaft 12(7) July 2014
Trichophyton interdigitale dříve Trichophyton mentagrophytes var. interdigitale antropofilní, zoofilní (hlodavci, psi kočky) původce tinea pedis, tinea unguium, tinea corporis (zoofilní) rychle rostoucí (7-12 dní) kolonie bílé s žlutým okrajem reverz oranžový pozitivní ureázový test http://www.mycology.adelaide.edu.au/fungal_descriptions/dermatophytes/trichophyton/interdigitale.html
Trichophyton interdigitale Obr. 2. Morfologie Trichophyton interdigitale v současnem pojetí Kolonie různých kmenů T. interdigitale po 14 dnech kultivace ve tmě při 25 C na SGA, spodina kolonii v dolní řadě (a). Morfologie typická pro antropofilní kmeny v levých dvou sloupcích a pro zoofilní v pravých dvou sloupcích. Některé kmeny mohou vykazovat oba typy morfologie naraz (b); (c e) doutníkovité makrokonidie; (f g) konidiofory nesoucí mikrokonidie; (h) mikrokonidie; (i j) spiralní vlákna; všechna měřitka10 µm. Zdroj: Hubka et al. 2014 Soucasny vyvoj taxonomie dermatofytu
Trichophyton interdigitale makrokonidie většinou chybí mikrokonidie kapkovité v nesporulujících kulturách nodulární shluky buněk obklopené žlutým exudátem nodulární - okrouhlá tělíska tvořená masou hyf http://www.mycobank.org/biolomics.aspx?table=mycobank&page=200&viewmode=basic
Trichophyton tonsurans antropofilní druh často původce tinea corporis (zápasníci) zvýšený výskyt u tinea capitis (endotrix) ve městech středně rychle rostoucí (2 3 týdny) kolonie variabilní, většinou semišové, radiálně, nepravidelně zvrásnělé bílé až šedé, žlutavé až hnědé; někdy narůžovělý až olivový střed reverz fialový, žlutý nebo hnědý pozitivní ureázový test za 5 dní http://www.mycology.adelaide.edu.au/fungal_descriptions/dermatophytes/trichophyton/interdigitale.html
Trichophyton tonsurans makrokonidie pokud jsou přítomny, tenkostěnné, 2-6 buněčné, cylindrické až cigárovité mikrokonidie různé velikosti, válcovité, kulovité i hruškovité, uspořádané řídce na myceliu nebo na zesílených terminálních hyfách chlamydosporyhojné, terminální a interkalární http://www.mycobank.org/biolomics.aspx?table=mycobank&rec=27904&fields=all
Trichophyton mentagrophytes zoofilní, široké spektrum zvířecích hostitelů (drobní hlodavci, velbloud) Blízký a Střední východ, Afrika a Austrálie v ČR se přirozeně nevyskytuje! infekční řetězec většinou začíná u hlodavce u infikovaných osob původce tinea corporis, tinea barbae a tinea capitis, nachází se i v nehtech velmi mnohotvárný druh, což vedlo k popisu četných variet, z nichž ne všechny jsou všeobecně uznávány T. interdigitale, T. erinacei rychle rostoucí (7-12 dní) kolonie bílé až béžové, někdy se žlutavým nádechem, hrubě zrnité nebo chmýřité (subkultury), okraj paprsčitě rozbíhavý reverz béžový až črvenohnědý, příležitostně žlutý nebo tmavě hnědý http://www.mycology.adelaide.edu.au/fungal_descriptions/dermatophytes/trichophyton/interdigitale.html
Trichophyton mentagrophytes makrokonidie, hladké, tenkostěnné, 3-8 buněčné, kyjovité až cigárovité, vyskytující se řídce mikrokonidie kulovité, uspořádané v hustých hroznovitých shlucích nebo jednotlivě podél hyf spirálové hyfy chlamydospory méně časté http://www.mycobank.org/biolomics.aspx?table=mycobank&rec=46688&fields=all
Trichophyton mentagrophytes mikrokonidie a makrokonidie mikrokonidie spirálové hyfy http://www.mycology.adelaide.edu.au/fungal_descriptions/dermatophytes/trichophyton/mentagrophytes.html
Trichophyton verrucosum zoofilní, zdrojem infekce je hovězí dobytek u infikovaných osob (u zemědělců onemocnění z povolání) původce infekcí ochlupených částí těla velmi pomalu rostoucí, růst lze urychlit přídavkem thiaminu do média, přesto inkubace může trvat až 6 týdnů 80% vyžaduje pro růst thiamin + inositol kolonie vyvýšené nebo knoflíkovité, voskovité, kompaktní, později plstnaté, bělavé, šedožluté, šedavé reverz krémový nebo lososový http://www.labbce.com.ar/micosis.htm http://www.mycology.adelaide.edu.au/fungal_descriptions/dermatophytes/trichophyton/verrucosum.html
Trichophyton verrucosum sporulace chybí nebo je redukovaná makrokonidie, hladké, tenkostěnné, 4-7 buněčné mikrokonidie hruškovité chlamydospory hojné, terminální, interkalární, v řetízcích vždy přítomná terminální ztluštění vezikuly (4 5 den kultivace) http://www.mycology.adelaide.edu.au/fungal_descriptions/dermatophytes/trichophyton/verrucosum.html http://www.mycobank.org/biolomics.aspx?table=mycobank&rec=46689&fields=all
Trichophyton violaceum antropofilní druh u infikovaných osob původce tinea capitis, tinea corporis, onychomykózy pomalu rostoucí (3 4 týdny) kolonie voskovité, později sametové, žluté až sytě fialové kultury pleomorfní nepigmentované bílé sektory, některé kmeny zcela nepigmentované reverz tmavě žlutý, červenohnědý, fialový produkují hnědý pigment difundující do agaru http://www.fnplzen.cz/mykoatlas/vlaknite/t_violaceum.html
Trichophyton violaceum
Trichophyton violaceum sporulace chybí nebo redukovaná (thiamin podporuje tvorbu konidií) hyfy reflexivně větvené, hustě septované, často se rozpadající v arthrokonidie makrokonidie vzácné mikrokonidie hruškovité http://www.mycobank.org/biolomics.aspx?table=mycobank&rec=46690&fields=all
https://www.studyblue.com/notes/note/n/dermatology/deck/10162924 Trichophyton schoenleinii antropofilní pomalu rostoucí způsobuje onemocnění kštice favus, kdy se v okolí vlasových folikulů tvoří krustózní mističkovité útvary zvané skutula, které splývají a vytvářejí rozsáhlé krusty zapáchající po myší moči sporadicky Blízký a Střední východ, Afrika a Austrálie http://www.gesundheit.de/lexika/medizin-lexikon/favus http://www.mycology.adelaide.edu.au/fungal_descriptions/dermatophytes/trichophyton/schoenlenii.html
Trichophyton schoenleinii kolonie voskovité, později sametové, vyvýšené, bělavé, šedobílé až krémové reverz bez pigmentu nebo světle žlutá makrokonidie a mikrokonidie obvykle chybí charakteristická parohovitá, dichotomicky větvená vlákna s rozšířenými konci ( favické svícny ) chlamydospory hojné http://www.mycology.adelaide.edu.au/fungal_descriptions/dermatophytes/trichophyton/schoenlenii.html http://www.mycobank.org/biolomics.aspx?table=mycobank&rec=27880&fields=all
Rod Microsporum Fungi, Ascomycota, Pezizomycotina, Eurotiomycetes, Eurotiomycetidae, Onygenales, Arthrodermataceae rychle rostoucí (Microsporum canis, Microsporum gypseum, Microsporum fulvum, Microsporum persicolor) pomalu rostoucí (Microsporum ferrugineum, Microsporum audouinii) teleomorfa Arthroderma mikrokonidie zřídka rod se liší od Trichophyton a Epidermophytondrsnými a silnostěnnými makrokonidiemi nejčastějším druhem u nás je Microsporum canis způsobující nejčastěji infekci kštice, kde vytvářejí ložiska s vlasy ulámanými 1-3 mm nad povrchem
Microsporum canis zoofilní rychle rostoucí nejčastější původce tinea capitis zdrojem infekce jsou nejčastěji koťata, méně štěňata kolonie zpočátku bílé, později nažloutlé, paprsčitě rozbíhavé reverz žluto-okrový
Microsporum canis makrokonidie bradavčité, silnostěnné, vřetenovité, na obou koncích zašpičatělé, 6-12 buněčné, 35-110 x 12-25 µm mikrokonidie hladkostěnné, hruškovité, klasovitě uspořádané podél hyf http://www.mycobank.org/biolomics.aspx?table=mycobank&rec=15421&fields=all
Microsporum gypseum geofilní infekce lidí (zejména intenzivně pracující s půdou) i zvířat původce tinea corporis nebo tinea capitis rychle rostoucí kolonie okrové s nádechem skořicové, okraj rozbíhavý reverz žlutohnědý, někdy s růžovým nádechem makrokonidie bradavičnaté, tenkostěnné, vřetenovité, ve shlucích mikrokonidie hladké, tenkostěnné http://www.mycology.adelaide.edu.au/fungal_descriptions/dermatophytes/microsporum/microsporum_gypseum.html
Microsporum persicolor geofilní infekce u zvířat (psi), vzácně u lidí, tinea corporis rychle rostoucí makrokonidie, mikrokonidie, spirálové hyfy http://www.mycology.adelaide.edu.au/fungal_descriptions/dermatophytes/microsporum/microsporum_persicolor.html http://www.mycobank.org/biolomics.aspx?table=mycobank&page=200&viewmode=basic
Microsporum fulvum geofilní vzácně u lidí a zvířat rychle rostoucí makrokonidie, mikrokonidie http://www.mycology.adelaide.edu.au/fungal_descriptions/dermatophytes/microsporum/microsporum_fulvum.html http://www.mycobank.org/biolomics.aspx?table=mycobank&page=200&viewmode=basic
Microsporum audouinii antropofilní původce tinea capitis nalézán zejména u dětí endemické oblasti v Africe, východní Asii a Evropě pomalu rostoucí pektinátní hyfy, terminální chlamydospory makrokonidie vzácné, nepravidelně vřetenovité mikrokonidie vzácné http://www.mycology.adelaide.edu.au/fungal_descriptions/dermatophytes/microsporum/microsporum_audouinii.html http://www.mycobank.org/biolomics.aspx?table=mycobank&page=200&viewmode=basic
Microsporum ferrugineum antropofilní původce tinea capitis u dětí pomalu rostoucí endemické oblasti v Africe, východní Asii a Evropě vyvýšené, zvrásněné, krémové až žluté konidie většinou chybí, dlouhé, rovné, široké hyfy s nápadnými přepážkami "bamboo hyphae" http://www.mycology.adelaide.edu.au/fungal_descriptions/dermatophytes/microsporum/microsporum_ferrugineum.html http://www.mold.ph/microsporum-ferrugineum.htm
Diagnostika dermatofytóz pouze přímý průkaz mikroskopie kultivace Mikroskopické vyšetření Louhový preparát určen ke znázornění dermatofytů, jiných vláknitých hub a kvasinek v kůži, nehtech, vlasech, vousech a chlupech louh projasní keratin a umožní pozorovat hyfy či konidie nelze identifikovat nevypovídá o životaschopnosti
Diagnostika dermatofytóz Louhový preparát Postup: 1. do 1-2 kapek 10-20% KOH na podložním sklíčku přidejte malé množství vyšetřovaného vzorku a důkladně promíchejte 2. opatrně přiložte a přitlačte na vzorek krycí sklíčko 3. preparát nechte ležet 1-2 hodiny, případně i přes noc ve vlhké komůrce. Doba preparace závisí na hustotě preparátu (louh částečně projasní proteinové složky vzorku) 4. přebytečný louh odsajte a jemným tlakem na krycí sklíčko materiál roztlačte do tenčí vrstvy
Diagnostika dermatofytóz Modifikace louhového preparátu 1. Barvení houbových elementů např. barvivem MycoInk, chlorazolová čerň: barviva se váží na stěnu hub 2. Calcofluor (Rylux BSU) a KOH: 1 kapka 0.1% calcofluoru a 1 kapka 10% KOH se přenesou na podložní sklíčko. Přidáme malé množství vzorku a překryjeme krycím sklíčkem. Po projasnění se preparát prohlíží fluorescenčním mikroskopem (vlnová délka 500 nm). Barvivo se váže na chitin, který je součástí buněčné stěny vláknitých hub a kvasinek, proto jejich struktury v UV světle modrozeleně září
Diagnostika dermatofytóz Louhový preparát kožních šupin vlákna dermatofytů
Diagnostika dermatofytóz Louhový preparát kožních šupin vlákna dermatofytů
Diagnostika dermatofytóz Lohový preparát: Trichophyton- nehet
Diagnostika dermatofytóz konidie vyplňující vlas
Diagnostika dermatofytóz- kultivace Sabouraudův glukózový agar + thiamin (nezbytný pro T. verrucosum) + antibiotika (chloramfenikol s gentamicinem) +cykloheximid potlačí rychle rostoucí saprofytické houby 2 4 (6) týdnů při teplotě 25 30 C kultivace na 3-4 šikmých agarech současně 1x týdně kontrola růstu výrazná makromorfologie kolonií pestrá pigmentace spodní strany kolonií (PDA bramborý agar s dextrózou) Trichophyton violaceum http://www.fnplzen.cz/mykoatlas/vlaknite/t_violaceum.html
Diagnostika dermatofytóz Vlasový perforační test některé druhy mají schopnost perforovat vlas in vitro části mycelia jsou inkubovány ve 25 ml vody obsahující 2-3 kapky kvasničního extraktu a sterilních fragmentů dětských vlasů kultivace při 24 C, 2 4 týdny louhový preparát vlasů pozitivní výsledek: perforační kanálky Trichophyton interdigitale http://www.mycology.adelaide.edu.au/fungal_descriptions/dermatophytes/trichophyton/interdigitale.html
Diagnostika dermatofytóz Fyziologické testy ureázový test Christensenovo médium Trichophyton agar T1 T7 růst v rýžovém substrátu
Diagnostika dermatofytóz Ureázový test produkují řadu exolátek: proteázy, lipázy, elastázu, ureázu atd. využití v diagnostice ureázový test k odlišení Trichophyton rubrum a Trichophyton interdigitale v přítomnosti ureázy se močovina rozkládá za vzniku amoniaku a současné změny ph, kterou indikujeme fenolovou červení jednorázová plastová zkumavka s Christensenovým agarem kultura se naočkuje vpichem a inkubuje se při pokojové teplotě 5 dní T. rubrum ureázový test negativní T. interdigitale ureázový test pozitivní
Diagnostika dermatofytóz Trichophyton Agar (T1 T7) zástupci rodu Trichophyton mají specifické nutriční požadavky sada chemicky definovaných médiích pro diferenciaci a identifikaci izolátů rodu Trichophyton na základě potřeby určitého vitaminu a aminokyselin nutriční požadavky jsou zjišťovány porovnáním růstu na základním médiu s růstem v přítomnosti specifických živin Trichophyton Agar 2, 3 a 4 - požadavek na inositol, thiamin nebo obojí Trichophyton Agar 5 požadavek na kyselinu nikotinovou Trichophyton Agar 6, 7 - požadavek na histidin (T6 základní médium) inkubace 2 týdny při 25-30 C http://www.mycology.adelaide.edu.au/fungal_descriptions/dermatophytes/trichophyton/tonsurans.html
Diagnostika dermatofytóz Trichophyton Agar (T1 a T5) T. tonsurans http://www.mycology.adelaide.edu.au/fungal_descriptions/dermatophytes/trichophyton/equinum.html T. equinum potřeba kyseliny nikotinové
Diagnostika dermatofytóz Růst na rýžovém substrátu inkubace 14 dní při 30 C makrokonidie M. audouinii podobné chudě sporulujícímu M. canis Microsporum audouinii Microsporum canis http://www.mycology.adelaide.edu.au/fungal_descriptions/dermatophytes/microsporum/microsporum_canis.html
Klasifikace mykóz dle lokalizace Kožní mykózy povrchové mykotické infekce kůže a vlasů nebo nehtů dochází k patologickým změnám v hostiteli v důsledku přítomnosti infekčního agens a jeho metabolitů Dermatofytózy Kandidózy Dermatomykózy Dermatofyté (Microsporum, Trichophyton, Epidermophyton) Candida albicans a non-albicans druhy non-dermatofyté
Jiné povrchové mykózy povrchové mykotické infekce kůže a vlasu (kosmetické) nevznikají patologické změny a není buněčná odpověď od hostitele výskyt infekce v tropických a subtropických oblastech Pityriasis (tinea) versicolor Tinea nigra Bílá piedra Černá piedra Malassezia furfur Hortaea werneckii (Exophiala werneckii) Trichosporon asahii Piedraia hortae
Jiné povrchové mykózy Hortaea werneckii Fungi, Ascomycota, Pezizomycotina, Dothideomycetes, Dothideomycetidae, Capnodiales, Teratosphaeriaceae, Hortaea tineanigra tropická kožní mykóza, způsobuje tmavě hnědé až černé skvrny na dlaních a chodidlech PDA http://www.healthhype.com/tinea-nigra-black-fungus-on-palm-or-sole-information-and-pictures.html
Jiné povrchové mykózy Hortaea werneckii Fungi, Ascomycota, Pezizomycotina, Dothideomycetes, Dothideomycetidae, Capnodiales, Teratosphaeriaceae, Hortaea hustě přehrádkované, hnědé hyfy, konidiogenní buňky interkalární či laterální (anelidy anelidická zóna širší jak u rodu Exophiala) konidie 2-buněčné, často pučící, přechází ve shluky chlamydospor kolonie hladké, slizovité, olivově černé PDA http://www.pf.chiba-u.ac.jp/gallery/fungi/h/hortaea_werneckii_colony_pda.htm http://www.pf.chiba-u.ac.jp/gallery/fungi/h/hortaea_werneckii_microscopy-2.htm http://www.mycobank.org/biolomics.aspx?table=mycobank&page=200&viewmode=basic
Jiné povrchové mykózy Piedraia hortae Fungi, Ascomycota, Pezizomycotina, Dothideomycetes, Dothideomycetidae, Piedraiaceae, Piedraia černá piedra - mykotické onemocnění vlasů a kůže vyskytující se zejména v tropických oblastech askostromata na vlasech, černá, velikosti 1 x 0,3 mm aska s 2-8 askosporami, elipsoidní, bitunikátní askospory jednobuněčné, hyalinní, vřetenovité, zahnuté, zužující se na koncích v bičíkaté prodloužení kolonie pomalu rostoucí, tmavě hnědé až černé, většinou sterilní http://www.doctorfungus.org/thefungi/piedraia.php http://www.mycobank.org/biolomics.aspx?link=t&targetkey=14682616000002126&rec=5258