Výsledky testování sady 19 glukometrů. Drahomíra Springer. ÚLBLD VFN a 1.LF UK Praha

Transkript

1 Výsledky testování sady 19 glukometrů Drahomíra Springer ÚLBLD VFN a 1.LF UK Praha

2 Konstrukce glukometrů Princip stanovení GOD stabilní, vysoká specifita pro glukózu může být ovlivněna rozpuštěným O 2 PQQ-GDH (pyrrolchinolin chinon) není ovlivněna rozpuštěným O 2, vysoká rychlost reakce širší substrátová specifita NAD + -GDH není ovlivněna rozpuštěným O 2 FAD + -GDH Většinou elektrochemická detekce přenos elektronů prostřednictvím mediátoru Mediátor - malá molekula schopná existovat v oxidované i redukované formě s redox potenciálem blízkým redox potenciálu koenzymu, stabilní. rozpustná ve vodě, redox potenciál nezávislý na ph

3 Přenos elektronů mezi redukovaným koenzymem a elektrodou Přímý přenos vysoká citlivost a selektivita jednoduchá konstrukce problematická vzdálenost koenzymu od elektrody elektroda substrát produkt Použití mediátoru nižší selektivita přenos elektronů z interferujících reakcí např. u GOD kompetice O 2 a mediátoru o elektrony elektroda substrát produkt

4 Osobní glukometry

5 glukometr Princip stanovení 1 One Touche Ultra smart GOD a ferrikyanid draselný. 2 Accu-Chec Performa Nano PQQ-GHD 3 OneTouche VerioPro FAD-GDH a ferrikyanid draselný. 4 SD CodeFree FAD-GDH a ferrikyanid draselný. 5 Bionime BM 100 GOD a ferrikyanid draselný. 6 Glucocard X-mini plus GHD a hexaaminruthenium chlorid 7 Contour TS FAD-GDH a ferrikyanid draselný. 8 One Touche Vita GOD a ferrikyanid draselný. 9 Contour Link FAD-GDH a ferrikyanid draselný. 10 FreeStyle Freedom FAD-GDH 11 Glucocard X-Meter GHD a hexaaminruthenium chlorid 12 One Touche Ultra easy GOD a ferrikyanid draselný 13 Wellion Calla GOD chinoprotein 14 Beurer GL50 FAD-GDH a ferrikyanid draselný. 15 Bionime BM 550 GODa ferrikyanid draselný. 16 Beurer GL44 FAD-GDH a ferrikyanid draselný. 17 Optium Xceed FAD-GDH 18 Bionime BM 300 GOD a ferrikyanid draselný. 19 EasyGluco Biosenzorová technologie. PQQ-GHD NAD-GHD GOD FAD-GDH glucose dehydrogenase with pyrrolchinolin-chinon komplex glucose-1-dehydrogenase with nicotinamidadenindinucleotid coenzym glucose oxidase glucose-1-dehydrogenase with flavinadenindinucleotid coenzym

6 Substrátová specifita enzymů GOD NAD-GHD PQQ-GHD D-glukóza D-galaktóza D-manóza maltóza sacharóza fruktóza laktóza PQQ-GHD NAD-GHD GOD FAD-GDH glucose dehydrogenase with pyrrolchinolin-chinon komplex glucose-1-dehydrogenase with nicotinamidadenindinucleotid coenzym glucose oxidase glucose-1-dehydrogenase with flavinadenindinucleotid coenzym

7 Roche

8 Hematokrit Kyslík Interference vysoké hodnoty glukóza, nízké hodnoty glukóza Hct - viskozita krve - zpomalení difúze - ampérometrický proud proužky s GOD: O 2 z erytrocytů soutěží s mediátorem o elektrony ampérometrický proud běžné přístroje: Hct %, glukometry s impedanční korekcí: Hct 0 70 % Zvýšený parciální tlak O 2 glukometry s GOD výsledky glukózy Vliv kyslíku výrazný při po 2 > 13,3 kpa glukóza Kompetice O 2 a mediátoru o elektrony z redukovaného koenzymu FADH 2

9 glukometr HCT % 1 One Touche Ultra smart Accu-Chec Performa Nano OneTouche VerioPro SD CodeFree Bionime BM Glucocard X-mini plus Contour TS One Touche Vita Contour Link FreeStyle Freedom Glucocard X-Meter One Touche Ultra easy Wellion Calla Beurer GL Bionime BM Beurer GL Optium Xceed Bionime BM EasyGluco 30-55

10 Elektrochemické interference Řada látek interferuje při elektrochemické detekci poskytováním elektronů falešné zvýšení hodnoty glukózy s askorbátem reagují všechny komerčně vyráběné proužky interference většiny látek není významná např. bilirubin, TAG, kyselina močová vliv léčiv podávaných v terapeutických dávkách je zanedbatelný při podezření na otravu acetaminofenem (paracetamol) nutno analyzovat glukózu standardní laboratorní technikou

11 ABBOTT

12 Správnost v nízkých a vysokých hladinách mmol/l <3,6 >20,0 1 One Touche Ultra smart Accu-Chec Performa Nano OneTouche VerioPro SD CodeFree Bionime BM Glucocard X-mini plus Contour TS One Touche Vita Contour Link FreeStyle Freedom Glucocard X-Meter One Touche Ultra easy Wellion Calla Beurer GL Bionime BM Beurer GL Optium Xceed Bionime BM EasyGluco 90 70

13 Glucocard Arkray

14 CV % Opakovatelnost 8,00 7,00 průměr 12,37 mmol/l průměr 4,74 mmol/l 6,00 5,00 4,00 3,00 2,00 1,00 0, Glukometr

15 BEURER

16 CV % Mezilehlá preciznost 6,00 5,00 průměr 4,31 mmol/l průměr 9,53 mmol/l 4,00 3,00 2,00 1,00 0, Glukometr

17 Bionime

18 Srovnání s výsledkem získaným HK metodou

19 glukóza (mmol/l) Dvě hladiny glukózy kontrolní materiál pro EHK 15,00 13,00 11,00 9,00 7,00 5,00 3,

20 One Touch

21 Hodnocení osobních glukometrů v RL pro klinickou biochemii při ÚLBLD VFN a 1. LF UK

22 Wellion CALLA light Accu-Chek Performa Nano Fora Diamond Prima - DM10 Fora Diamond Mini - DM30 Glukometr Contour TS Glucocard X-meter Glucocard X-mini plus

23 Hodnocení osobních glukometrů s ohledem na normu EN ISO 15197, doporučení NACB: Summary Guidelines and Recommendations for laboratory analysis in the diagnosis and management of diabetes mellitus (2011) a české doporučení Diabetes mellitus - laboratorní diagnostika a sledování stavu pacientů (2012).

24 Hodnocení osobních glukometrů Testování je prováděno akreditovanou metodu Stanovení glukózy systémem glukometr měřící proužek pro ověření funkce glukometru. Srovnání výsledků měření získaných glukometrem a hexokinázovou metodou ve venózní krvi. Metoda testování byla v roce 2013 reakreaditována dle normy ISO Českým institutem pro akreditaci. Testování systémů glukometr-proužek - žadatel o posouzení dodá 2 glukometry a minimálně 400 proužků ze dvou šarží.

25 Metoda pro hodnocení glukometrů v RL Referenční metoda vysoká specifita reakce 1. katalýza hexokinázou: fosfátová skupina z ATP se váže na glukózu 2. katalýza glukóza-6-fosfátdehydrogenázou: oxidace glukóza-6- fosfátu na 6-fosfoglukonát oxidační činidlo NADP + se přitom redukuje na NADPH 2 růst absorbance při 340 nm IFCC doporučení: před analýzou deproteinace HClO 4 stanovení ruší hemolýza a léčiva absorbující v UV

26 BAYER

27 Korelační graf 35 Scatterplot of glucometr against HK method glucometr = 1,2928+0,8794*x glucometr ,00 5,00 10,00 15,00 20,00 25,00 30,00 35,00 HK method:glucometr: r 2 = 0,9624 HK method

28 Rozdílový graf

29 kapilární žilní

30 Hodnocení osobních glukometrů Hodnocení: Závazná úspěšnost 95% výsledků +/- 0,8 mmol/l pro < 5,6 mmol/l +/- 15% pro >5,6 mmol/l Další rozdělení naměřených výsledků: Do ±0,3 mmol/l Do ± 0,55 mmol/l Do ± 0,8 mmol/l 18/40 (45 %) 28/40 (70 %) 38/40 (95 %) Do ±5 % Do ± 10 % Do ± 15 % 36/160 (22 %) 78/160 (49 %) 156/160 (97 %) Celkem: Do ± 0,8 mmol/l a ± 15 % 194/200 (97%)

31 WELLION Calla Luna

32 Srovnání hexokinázové metody s YSI Venózní krev od dobrovolníků Upravená zestárnutím přes noc nízké hladiny Přídavkem glukózy Měření během 60 minut na YSI a spektrofotometru Viva E

33 YSI 2300 Glucose Analyzer Specifický enzym je imobilizován mezi dvě membrány, polykarbonátovou a z acetátcelulózy. Peroxid vodíku jako produkt enzymatické reakce prochází acetátcelulózovou memránou k platinové elektrodě, kde dochází k jeho oxidaci. Výsledek koreluje s původní koncentrací substrátu ve vzorku

34

35 Hexokinase Srovnání C 18 E B 8 6 D D 4 2 B E C YSI

36 Infopia Code Free

37 SEKK Stanovení glukózy (včetně glukometrů) Kontrola je určena pro všechny systémy, které umožňují stanovení glukózy, včetně systémů POCT glukometrů Vzorky : sérum, 1 sada obsahující 2 lyofilizované vzorky po cca 2 ml Zprávy pro účastníky: osvědčení o účasti, certifikát, výsledkový list (kvantitativní výsledky), komplexní statistika Certifikát není vystavován pro systémy POCT. Minimální objednávka: 2 cykly Každý účastník si v rámci tohoto programu může otestovat až 10 glukometrů. Pracoviště, která nedisponují potřebným laboratorním vybavením si mohou objednat jednoduchou soupravu (plastová pipeta 2 ml dělená po 0,2 ml + silikonový dudlík) určenou pro odměření rekonstituentu. Cena jednoho cyklu EHK (včetně jedné sady vzorků) 1200 Kč Pipetovací souprava 190 Kč

38 Výsledky externí kontroly GLC 1/10 A GLC 1/10 B GLC 2/10 A GLC 2/10 B GLC 1/11 A GLC 1/11 B 0

39 SEKK ,0 16,0 14,0 12,0 10,0 8,0 6,0 GLC2/11 A GLC2/11 B GLC 1/12 A GLC 1/12 B 4,0 2,0 0,0 target value Accu chekone Touch UltraOptium Xceed Performa Nano Glucocard X metr Arkray Accu chek Inform Contour Bayer Element Infopia

40 SEKK Accuchek Performa, Nano 1 Accuchek Inform II 2 One Touch Vita 3 One Touch Ultra 4 Nova StatStrip 5 Contour 6 Optium Xceed 7 Glucocard Arkray 8 Element 9 target value 10

41 Děkuji za pozornost Nejsou zdraví lidé, jsou jen nedostatečně vyšetření