MDNII. ONLINE DAT Methadone II Informace pro objednání. Stanovení drog

Transkript

1 Informace pro objednání (200 testů) Preciset DAT Plus I CAL 1-6 (6 5 ml) C.f.a.s. DAT Qualitative Plus (6 5 ml) C.f.a.s. DAT Qualitative Plus Clinical (3 5 ml) Control Set DAT I PreciPos DAT Set I (2 10 ml) PreciNeg DAT Set I (2 10 ml) Control Set DAT Clinical PreciPos DAT Clinical (2 10 ml) PreciNeg DAT Clinical (2 10 ml) Systémové ID Analyzátory, na kterých lze cobas c pack použít COBAS INTEGRA 400 plus COBAS INTEGRA 800 Česky Systémové informace Test MD3S2, test ID pro semikvantitativní stanovení Test MD3Q2, test ID pro kvalitativní stanovení Test MD3QC, test ID pro kvalitativní stanovení, použitím C.f.a.s. DAT Qualitative Plus Clinical Použití Methadone II () je in vitro diagnostický test pro semikvantitativní a kvalitativní detekci v lidské moči při koncentraci cut-off 300 na systémech COBAS INTEGRA. Tímto stanovením lze získat i semikvantitativní výsledky testu, které umožňují laboratořím posoudit využití stanovení v programu kontroly kvality. Semikvantitativní stanovení slouží k měření vhodného naředění vzorku potvrzením konfirmační metody jako je plynová chromatografie/hmotnostní spektrometrie (GC/MS). Methadone II poskytuje pouze předběžný analytický výsledek. K získání potvrzeného analytického výsledku se musí použít více specifická alternativní chemická metoda. Preferovanou konfirmační metodou je GC/MS. 1 Výsledky testů užívání drog, zvláště jsou-li předběžně pozitivní, je třeba hodnotit s klinickým zřetelem a s odborným úsudkem. Souhrn Metadon je syntetický difenylpropylamin, používaný pro detoxikaci a přechodnou léčbu závislosti na narkotikách, jakož i při léčbě akutní a chronické bolesti. Metadon má mnoho farmakologických vlastností morfinu a jeho analgetický účinek je podobný. Na rozdíl od morfinu má opakované užívání silné sedativní účinky v důsledku jeho akumulace v těle. Abstinenční příznaky má metadon kvalitativně podobné morfinu, rozdíl je v tom, že se rozvíjejí pomaleji s menší intenzitou, ale po delší dobu. 2 Kvůli těmto vlastnostem se metadon užívá při léčbě závislosti na drogách, speciálně při eliminaci závislosti na nezákonných opiátech. Předávkování metadonem se projevuje strnulostí, respirační depresí, studenou a vlhkou pokožkou, hypotenzí, kómatem a cirkulačním kolapsem. 3 Metadon se podává intramuskulárně v případě, že jsou využívány jeho analgetické vlastnosti, a perorálně v případě léčby závislosti. Po požití se metadon dobře absorbuje z gastrointestinálního traktu a distribuuje do jater, plic, ledvin, slinivky, krve a moči. Skutečnost, že se metadon ve velké míře váže na tkáňové proteiny, vysvětluje jeho kumulativní účinky. 4 Metadon je většinou metabolizován mono a di N demetylací. Spontánní cyklizace má za následek vznik nestabilních sloučenin hlavních metabolitů: 2 etyliden-1,5 dimetyl-3,3 difenylpyrolidin (EDDP) a 2 etyl-5 metyl-3,3 difenylpyrolidin (EMDP). Obě jsou hydrolyzované v různém rozsahu s následnou glukuronidací. 5,6 U pacientů s udržovací dávkou může vylučování nezměněného tvořit 5 až 50 % dávky. ph moči má rovněž vliv na množství vyloučeného v nezměněné podobě, stejně jako objem moči, dávka a individuální metabolismus. 7,8 Princip testu Kinetická interakce mikročástic v roztoku (KIMS) 9,10 měřená změnou intenzity procházejícího světla. V případě absence drogy ve vzorku se volný konjugát drogy váže na protilátku, vázanou na mikročástici, a vytváří agregáty. S probíhající agregací v případě absence léčiva ve vzorku absorbance roste. Jestliže vzorek moči obsahuje příslušnou drogu, probíhá kompetice drogy s konjugátem derivátu drogy o protilátku vázanou na mikročástice. Protilátka vázaná na léčivo ve vzorku není již dostupná pro podporu agregace částic a následný vznik struktury částic je inhibován. Přítomnost léčiva ve vzorku úměrně snižuje nárůst absorbance vůči koncentraci léčiva ve vzorku. Obsah léčiva ve vzorku se měří poměrem ke známé hodnotě cut-off koncentrace léčiva. 11 Reagencie - pracovní roztoky R1 SR Reagencie s konjugátem Konjugovaný derivát v pufru s hovězím sérovým albuminem a 0.09% azidem sodným. Reagencie protilátky/mikročástice Mikročástice s navázanými protilátkami proti (monoklonální myší) v pufru s hovězím sérovým albuminem a 0.09% azidem sodným. R1 je v pozici B a SR je v pozici C. Bezpečnostní opatření a varování Věnujte pozornost všem varováním a bezpečnostním opatřením uvedeným v části 1 / Úvod této Příručky metod. Pro USA: Pouze na předpis. Zacházení s reagenciemi Analyzátor COBAS INTEGRA 400 plus Všechny nové (nepropíchnuté) cobas c packy před použitím v analyzátoru promíchejte po dobu 1 min. v mixéru kazet. Všechny cobas c packy, které jsou již v užívání, musí být na počátku každého týdne (jedenkrát týdně) promíchány stejným způsobem. Analyzátor COBAS INTEGRA 800 Připravena k přímému použití. Analyzátor reagencii automaticky promíchá po dobu 1 minuty po propíchnutí cobas c packu a půl minuty při sekvenci "Begin of Day". Uskladnění a stabilita Doba skladování při 2 8 C: Analyzátor COBAS INTEGRA 400 plus Na palubě při použití při C Analyzátor COBAS INTEGRA 800 Na palubě při použití při 8 C Čtěte datum exspirace na štítku balení cobas c pack 12 týdnů 12 týdnů Reagencie nemrazit. Reagencie, které byly zmrazené, se nesmí použít. Odběr vzorků a příprava Pouze níže uvedené vzorky byly testované a jsou přijatelné. Moč: Vzorky moče odebírejte do čistých skleněných či plastových nádobek. Vzorky čerstvé moče nepotřebují zvláštní předúpravu nebo zacházení, ale měly by být ochráněny před kontaminací při pipetování. Vzorky by měly být v běžném fyziologickém rozmezí ph 5 8. Nejsou potřeba žádná aditiva ani konzervans. Doporučujeme uchovávat vzorky při teplotě 2 8 C a zpracovat je do 5 dnů od odběru. 12 Při delším skladování doporučujeme vzorek zamrazit. 1 / 5

2 Velmi zakalené vzorky před analýzou zcentrifugujte. Příměs či naředění vzorků může způsobit chybný výsledek. Při podezření, že byl vzorek znehodnocen, proveďte nový odběr. Testování validity vzorku se požaduje pouze u vzorků odebíraných podle Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing Programs. 13 Varování: Ředění vzorku by mělo být použito jen při jejich přípravě pro GC/MS ale jinak není vhodné. Postup ředění, je-li použit, by měl být validován. Dodávaný materiál Reagencie jsou uvedeny v části "Reagencie - pracovní roztoky". Stanovení Optimálního využití stanovení dosáhnete, budete-li dodržovat pokyny uvedené v dokumentaci pro příslušný analyzátor. Pokyny ke stanovení specifické pro analyzátor vyhledejte v příslušném návodu k použití. Aplikace pro moč Definice testu COBAS INTEGRA 400 plus Semikvantitativní Kvalitativní Způsob měření Absorbance Absorbance Způsob výpočtu abs. Koncový bod Koncový bod Způsob reakce R1-S-SR R1-S-SR Směr reakce Nárůst Nárůst Start reakce SR SR Vlnová délka A 651 nm 651 nm Rozmezí testu s následným ředěním Faktor postdiluce Doporučuje se 10 a) Ne Výpočet první/posl. 35/47 35/47 Jednotka a) Pro použití při výpočtu koncentrace při přípravě pro analýzu GC/MS. Pipetovací parametry Diluent (H 2 O) R1 100 µl 10 µl Vzorek 2 µl 8 µl SR 35 µl 2 µl Celkový objem 157 µl Definice testu COBAS INTEGRA 800 Semikvantitativní Kvalitativní Způsob měření Absorbance Absorbance Způsob výpočtu abs. Koncový bod Koncový bod Způsob reakce R1-S-SR R1-S-SR Směr reakce Nárůst Nárůst Start reakce SR SR Vlnová délka A 651 nm 651 nm Rozmezí testu s následným ředěním Faktor postdiluce Doporučuje se 10 b) Ne Výpočet první/posl. 45/78 45/78 Jednotka b) Pro použití při výpočtu koncentrace při přípravě pro analýzu GC/MS. Pipetovací parametry Diluent (H 2 O) R1 100 µl 10 µl Vzorek 2 µl 8 µl SR 35 µl 2 µl Celkový objem 157 µl Kalibrace Kalibrátory Semikvantitativní aplikace MD3S2, Kalibrátory Preciset DAT Plus I, CAL 1 5 0, 150, 300, 600, 2000 d,l metadon (DATS1, systémové ID ) Kvalitativní aplikace MD3Q2, Kalibrátory Preciset DAT Plus I, CAL 1 0 nebo deionizovaná voda a kalibrátory Preciset DAT Plus I, CAL 3 c) nebo C.f.a.s. DAT Qualitative Plus 300 (DATQ1, systémové ID ) MD3QC, Kalibrátory Preciset DAT Plus I nebo II d), CAL 1 0 nebo deionizovaná voda a C.f.a.s. DAT Qualitative Plus Clinical 300 (DATQ5, systémové ID ) Pro kvalitativní aplikace je přiřazená hodnota cut-off c) Při kalibraci stanovení Opiates 300/2000 qualitative 2000 (test OP2QL, test ID 0 410) nepoužívejte Preciset DAT Plus I, CAL 3. d) Preciset DAT Plus II, CAL 1, se obecně nevyžadují pro kalibraci stanovení Methadone II, lze je ovšem použít jako alternativní hladinu 0 pro DATQ5, systémové ID Mód kalibrace Opakování kalibrace Kalibrační interval Semikvantitativní aplikace Logit/Log 4 Kvalitativní aplikace Lineární regrese Doporučen duplikát Analyzátor COBAS INTEGRA 400 plus: Každou šarži, každé 4 týdny a jestliže to vyžaduje proces kontroly kvality. Analyzátor COBAS INTEGRA 800: Každou šarži, každé 4 týdny a jestliže to vyžaduje proces kontroly kvality. Kalibrační křivka je vytvářena použitím kalibrátorů. Kalibrátory musí být umístěny podle hodnot koncentrace od nejvyšší po nejnižší do CAL/QC stojánku. Vytvořená křivka je uložena v paměti systému COBAS INTEGRA a podle potřeby znovu vyvolána. Návaznost: Tato metoda byla standardizovaná dle primární referenční metody (GC/MS). Kontrola kvality Kontrola kvality Control Set DAT I PreciPos DAT Set I (DAT1P, systémové ID ) PreciNeg DAT Set I DAT1N, systémové ID nebo Control Set DAT Clinical PreciPos DAT Clinical (DATCP, systémové ID ) PreciNeg DAT Clinical (DATCN, systémové ID ) 2 / 5

3 Pořadí kontrol Kontrola po kalibraci Určeno uživatelem Doporučena Ke kontrole kvality použijte kontrolní materiály uvedené v části "Informace pro objednání". Navíc lze použít i jiný vhodný kontrolní materiál. Koncentrace léčiv v Control Set DAT I a Clinical byly verifikovány GC/MS. Kontrolní intervaly a meze by měly být uzpůsobeny pro každou laboratoř dle individuálních požadavků. Naměřené hodnoty by se měly pohybovat v definovaných mezích. Každá laboratoř by měla mít vypracovaná nápravná opatření pro případ, že hodnoty překročí definované meze. Sledujte příslušná vládní nařízení a lokální směrnice kontroly kvality. Výsledky Systémy COBAS INTEGRA vykazují výsledky s následujícím označením: Semikvantitativní hodnocení výsledků Označení COBAS INTEGRA Rozmezí hodnot Bez označení Negativní < 300 <TEST RNG Negativní < 0 >TEST RNG Pozitivní > 2000 POS 300 Pozitivní 300 Výše uvedená rozmezí hodnot jsou založená na hladině cut-off 300. Kvalitativní hodnocení výsledků Označení COBAS INTEGRA Rozmezí hodnot Bez označení Negativní < 1000 <TEST RNG Negativní < 0 >TEST RNG Pozitivní > 3000 POS 1000 Pozitivní 1000 Výše uvedená rozmezí hodnot jsou založená na přiřazení hodnoty 1000 cut-off hodnotě 300. Semikvantitativní hodnocení výsledků Semikvantifikaci předběžně pozitivních výsledků by měly laboratoře použít pouze k měření vhodného naředění vzorku pro potvrzení konfirmační metodou jakou je GC/MS. Laboratoři rovněž umožňuje zřídit postupy kontroly kvality a stanovit využití kontroly. Upozornění: Při použití funkce následného ředění (ředění 1:10) zajistěte, aby nedošlo k přílišnému naředění vzorku. Výsledek naředěného vzorku musí mít hodnotu alespoň poloviny hodnoty cut-off krát 10. Jestliže je naředěný výsledek menší než polovina hodnoty cut-off krát 10, zopakujte stanovení s menším ředěním. Ředění, která mají výsledky v blízkosti cutoff, poskytují nejpřesnější stanovení. Chcete-li určit koncentraci předběžně pozitivního vzorku, vynásobte výsledek odpovídajícím faktorem ředění. Ředění by mělo být použito jen při přípravě hodnot pro GC/MS. Omezení - interference Informace o látkách testovaných tímto stanovením jsou uvedeny v kapitole "Specifické údaje o využití" tohoto dokumentu. Možné však je, že mohou interferovat i jiné komponenty nebo faktory, které mohou negativně ovlivnit výsledek (např. technická chyba nebo chyba postupu). Předběžný pozitivní výsledek dosažený tímto stanovením indikuje přítomnost v moči. Nestanovuje však míru intoxikace. Pro diagnostické účely je vždy nezbytné používat výsledky ve spojení s anamnestickými údaji pacienta, klinickým vyšetřením a jinými nálezy. Interferující látky byly přidány do moči bez drog a až s dvojnásobnou koncentrací než je uvedeno. Tyto vzorky byly obohaceny na 300 použitím 600 zásobního roztoku. Vzorky pak byly podrobeny testování s uvedenými výsledky. Látka Testované koncentrace % Výtěžnost Aceton 1 % 98 Kys. askorbová 1.5 % 100 Bilirubin 0.25 mg/ml 86 Látka Testované koncentrace % Výtěžnost Kreatinin 5 mg/ml 100 Etanol 1 % 99 Glukóza 2 % 101 Hemoglobin 0.1 g/l 101 Hemoglobin 1 g/l 98 Hemoglobin 7.5 g/l 100 Lidský albumin % 101 Lidský albumin 0.05 % 103 Lidský albumin 0.5 % 101 Kys. oxalová 2 mg/ml 102 Chlorid sodný 0.5 M 97 Chlorid sodný 1 M 95 Močovina 6 % 103 POTŘEBNÝ KROK Programování speciálního mytí: Při zpracovávání určitých kombinací testů na analyzátorech COBAS INTEGRA je použití speciálních mycích cyklů povinné. Pro další pokyny a pro nejnovější verzi seznamu Extra mycích cyklů čtěte, prosím, metodický list CLEAN. Tam, kde se to vyžaduje, musí být před vykazováním výsledků provedeno programování speciálního mytí/zamezení přenosu mezi vzorky (carry-over). Specifické údaje o využití Reprezentativní údaje o využití pro analyzátory COBAS INTEGRA jsou uvedeny níže. Výsledky získané v různých laboratořích se mohou lišit. Preciznost Preciznost byla stanovena podle interního postupu použitím sérií kalibrátoru a kontrol v 20 replikátech, jednou denně, po dobu 5 dnů. Následující výsledky byly získané analyzátorem COBAS INTEGRA 700. Semikvantitativní preciznost Opakovatelnost Prům. SD Hladina 1 (225 ) Hladina 2 (300 ) Hladina 3 (375 ) Mezilehlá preciznost Prům. SD Hladina 1 (225 ) Hladina 2 (300 ) Hladina 3 (375 ) Kvalitativní preciznost Cut-off (x) Počet testovaných Správné výsledky VK % VK % Hladina spolehlivosti 0.75x > 95% negativní odečet 1.25x > 95% pozitivní odečet Mez detekce testu 15 Mez detekce představuje nejnižší měřitelnou hladinu analytu, kterou lze odlišit od nuly. Počítá se jako hodnota ležící 2 standardní odchylky nad nulovým kalibrátorem (nulový kalibrátor + 2 SD, opakovatelnost, n = 21). Správnost 100 vzorků moči získaných v klinických laboratořích, které byly stanoveny jako negativní v panelu látek jinou technologií, bylo vyhodnoceno na 3 / 5

4 metadon na analyzátoru COBAS INTEGRA 700. Všech 100 klinických vzorků bylo negativních vůči cut-off vzorků moči získaných v klinických laboratořích, kde byly stanoveny jako předběžně pozitivní komerčně dostupnou enzymoimunoanalýzou a potvrzeny jako pozitivní metodou GC/MS na metadon, bylo rovněž hodnoceno na analyzátoru COBAS INTEGRA 700. Všech 55 vzorků bylo pozitivních stanovením COBAS INTEGRA Methadone II vůči cut-off 300. Navíc 10 vzorků bylo naředěno na koncentraci % hodnoty cut-off a 10 vzorků bylo naředěno na koncentraci % hodnoty cut-off. Údaje ze studie správnosti popsané výše, blízké rozmezí hodnot cut-off, byly doplněny o údaje získané u ředěných pozitivních vzorků moči. Následující výsledky byly získané s Methadone II na analyzátoru COBAS INTEGRA 700 vůči hodnotám GC/MS. Methadone II klinická korelace (cut-off = 300 ) Analyzátor COBAS INTEGRA 700 Negativní vzorky GC/MS hodnoty () Blízké cut-off Analytická specifičnost Specifičnost stanovení COBAS INTEGRA Methadone II se strukturálně podobnými sloučeninami byla zjištěna vytvořením inhibiční křivky pro jednu každou uvedenou sloučeninu a určením přibližného množství každé sloučeniny, která by byla ekvivalentní reaktivitě při hodnotě cutoff 300. Při interpretaci výsledků vzorků pacientů obsahujících strukturálně příbuzné látky s křížovou reaktivitou větší než 0.5 % je potřeba postupovat obezřetně. Sloučenina e) odpovídající 300 procento křížové reaktivity Hydroxymetadon Cyamemazin Metotrimeprazin (Levomepromazin) Vortioxetin Lu AA Thiothixen Chlorpromazin Promazin Clomipramin Thioridazin Chlorprothixen Prometazin l-α-metadol Trimipramin Cyklobenzaprin Orfenadrin I-α-acetylmetadol HCl (LAAM) Difenhydramin Perfenazin Meperidin Imipramin Sloučenina e) odpovídající 300 procento křížové reaktivity Cyproheptadin Doxepin e) Odsazená sloučenina je metabolitem předchozí látky. Následující sloučeniny byly dále testované při koncentraci v poolované lidské moči a zjištěná hodnota křížové reaktivity byla menší než 0.05 %. Amitriptylin Benzfetamin Karbamazepin Chlorfeniramin Desipramin Dextrometorfan Disopyramid Doxylamin EDDP EMDP Fluoxetin Maprotilin Mianserin Nordoxepin Nortriptylin d-propoxyfen Protriptylin d,l-verapamil Vzorky od uživatelů Seroquelu (quetiapin fumarát) byly pozitivní na metadon. Interference léčiv Následující sloučeniny byly přidané k alikvotům poolované normální lidské moči v koncentraci Žádná z těchto sloučenin při testování soupravou nevykázala hodnotu rovnající se nebo větší než 0.2 %. Acetaminofen Kys. acetylsalicylová Aminopyrin Amobarbital d-amfetamin l-amfetamin Ampicilin Kys. askorbová Aspartam Atropin Benzokain Benzoylekgonin (metabolit kokainu) Butabarbital Kofein Chlornan vápenatý Chlordiazepoxid Chlorochin Kokain Kodein Kotinin Diazepam Difenylhydantoin Dopamin Ekgonin Ekgoninmetylester Lidokain LSD MDA MDMA Melanin d-metamfetamin l-metamfetamin Metaqualon Metylfenidat Metyprylon Morfinsulfát Naloxon Naltrexon Naproxen Niacinamid Nikotin Nordiazepam Noretindron l-norpseudoefedrin Oxazepam Penicilin G Pentobarbital β-fenetylamin Fencyklidin Fenobarbital Fenotiazin 4 / 5

5 Efedrin d-efedrin l-efedrin Epinefrin Erytromycin Estriol Fenoprofen Furosemid Kys. gentisová Glutetimid Guajakol glyceroléter Haloperidol Fentermin Fenylbutazon Fenylpropanolamin d-fenylpropanolamin Prokain d-pseudoefedrin l-pseudoefedrin Chinidin Chinin Sekobarbital Sulindak Tetracyklin Hydrochlorotiazid Δ 9 THC-9-karboxylová k. Ibuprofen Izoproterenol Ketamin Tetrahydrozolin Trifluoperazin Tyramin Křížová reaktivita na Tramadol je při koncentraci %. Křížová reaktivita na Ofloxacin byla testovaná Methadonem II při koncentraci Dosažený výsledek byl 0.2 %. Symboly Roche Diagnostics používá kromě symbolů a znaků uvedených v normě ISO následující znaky: GTIN Obsah soupravy Objem po rekonstituci nebo promíchání Globální číslo obchodní položky Doplnění, odstranění nebo změny textu jsou označeny pruhem podél textu. 2016, Roche Diagnostics Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D Mannheim Distribuce v USA: Roche Diagnostics, Indianpolis, IN Zákaznická podpora v Jakákoliv modifikace přístroje, jak je zde uvedeno, vyžaduje validaci laboratoří. Odkazy 1 Karch SB, ed. Drug Abuse Handbook. Boca Raton, FL: CRC Press LLC Council Reports: Treatment of morphine-type dependence by withdrawal methods. JAMA 1972;219(12): Smialek JE, Monforte JR, Aronow R, et al. Methadone deaths in children: A continuing problem JAMA 1977;238(23): Garriott JC, Sterner WQ, Mason MF. Toxicologic findings in six fatalities involving methadone. Clin Toxicol 1973;6: Sullivan HR, Due SL, McMahon RE. The identification of three new metabolites of methadone in man and in the rat. J Am Chem Soc 1972;94(11): Baselt RC, Bickelt MH. Biliary excretion of methadone by the rat: identification of a para-hydroxylated major metabolite. Biochem Pharm 1973;22: Baselt RC, Casarett LJ. Urinary excretion of methadone in man. Clin Pharmacol Ther 1972 Jan-Feb;13(1): Bellward GD, Warren PM, Howald W, et al. Methadone maintenance: Effect of urinary ph on renal clearance in chronic high and low doses. Clin Pharmacol Ther 1977;22(1): Armbruster DA, Schwarzhoff RH, Pierce BL, et al. Method comparison of EMIT II and ONLINE with RIA for drug screening. J Forensic Sci 1993;38: Armbruster DA, Schwarzhoff RH, Hubster EC, et al. Enzyme immunoassay, kinetic microparticle immunoassay, radioimmunoassay, and fluorescence polarization immunoassay compared for drugs-ofabuse screening. Clin Chem 1993;39: Bates M, Brandle J, Casaretto E, et al. An Abuscreen immunoassay for opiates in urine on the COBAS MIRA automated analyzer. Amer Acad Forensic Sci. Abstract 1991;37(6): Toxicology and Drug Testing in the Clinical Laboratory; Approved Guideline. 2nd ed. (C52-A2). Clinical and Laboratory Standards Institute 2007;27: Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing Programs. Fed Regist 2008 Nov 25;73: Tečka se v tomto metodickém listu vždy používá jako desetinný oddělovač k označení hranice mezi celými a desetinnými místy desetinného čísla. Oddělení tisíců se nepoužívá. 5 / 5