METHAMPHETAMINE 008Z112

Transkript

1 Jednostupňový test pro kvalitativní záchyt Methamphetaminu (Pervitinu) v lidské moči In Vitro diagnostikum pro profesionální použití. ÚČEL POUŽITÍ Screeningový test DrugControl METHAMPHETAMINE je rychlý imunochromatografický test pro kvalitativní záchyt d-metamfetaminu a příbuzných sloučenin v lidské moči při koncentracích cut-off, uvedených níže : TEST Sloučenina Ident.č. Cut Off [ng / ml] D-Methamphetamine [-] ,4-Methylenedioxymethamphetamine [-] 2000 Methamphetamine L-Methamphetamine [ ] 8000 p-hydroxymethamphetamine [-] Mephentermine [ ] Tento test poskytuje pouze předběžný analytický výsledek. Pro potvrzení nálezu je jako konfirmační metoda doporučena plynová chromatografie/ hmotová spektrometrie (GC/MS). Každý nález je třeba hodnotit s klinickou zkušeností a profesionálním nadhledem. REAGENCIE DrugControl METHAMPHETAMINE TEST obsahuje částice s navázanou zlatem značenou protilátkou proti d-metamfetaminu a imobilizovaný konjugát metamfetamin-protein. V kontrolním systému je použita kozí protilátka. BEZPEČNOSTNÍ POKYNY Test je určen pouze pro In Vitro Diagnostiku Zabraňte vzájemné kontaminaci vzorků močí, pro každou Nepoužívejte testy po datu expirace, uvedeném na obalu. moč použijte vlastní odběrovou nádobku. Testovací kazeta má být vyňata z obálky až těsně před použitím. Se vzorky moče je třeba zacházet jako s potencionálně infekčním biologickým materiálem. Zabraňte potřísnění chromatografické membrány močí. Aplikujte cca 3-4 kapky (min 180 µl ) do jamky, určené pro vzorek, označené S.. Materiál použitý k testu má být znehodnocen podle předpisů o likvidaci odpadu, platných v každém daném státě. SKLADOVÁNÍ a STABILITA TESTU DrugControl METHAMPHETAMINE TEST může být uložen za pokojové teploty nebo i v chladničce (2 30 C). Test je funkční do data expirace, uvedeného na obalu. Až do použití musí být test uchován v uzavřené originální obálce. Nemrazit! Nepoužívat po datu expirace. ODBĚR A PŘÍPRAVA VZORKU Vzorky močí musí být odebrány do suchých a čistých nádobek. Moč pro toxikologické vyšetření může být odebrána kdykoliv během dne. Vzorky močí s viditelnou precipitací se doporučuje zcentrifugovat, zfiltrovat nebo nechat odstát a pro test použít čirý vzorek. Vzorky močí mohou být použity čerstvé nebo skladované v chladničce při 2-8 C nejdéle 48 hodin. Pro dlouhodobější uložení je třeba vzorek moči zmrazit při -20 C. Před provedením testu je nutno vzorky rozmrazit, promíchat a vytemperovat na pokojovou teplotu. DODANÝ MATERIAL (součást balení) Testovací kazeta Kapátko (pipetka) MATERIAL DOPORUČENÝ ale NEDODANÝ Nádobka na odběr moči Časoměřič (minutky) 1

2 NÁVOD K POUŽITÍ Vzorek moči napipetujte do jamky označené S na kazetě DrugControl METHAMPHETAMINE TEST 1 Před použitím vytemperujte vzorek moči (kontrolní roztok ) na pokojovou teplotu (15 30 C) 2 Vytemperujte na pokojovou teplotu test v uzavřené obálce. 3 Vyjměte kazetu z obálky a test použijte okamžitě. 4 Umístěte test na čistou vodorovnou podložku 5 Aplikujte 3-4 kapky vzorku ( cca 180 ul) do jamky označené S. 6 Vyvarujte se vzniku vzduchových bublin v jamce při pipetování vzorku 7 Umístěte test na rovnou plochu, nastartujte minutky a vyčkejte vzniku barevné linie. 8 Výsledek testu má být odečten mezi 5. a 10. minutou, ne později. INTERPRETACE VÝSLEDKU Negativní Pozitivní Neplatné (nehodnotitelné) nálezy Negativní Dvě zřetelné narůžovělé linie v testovacím poli, jedna v oblasti T, jedna kontrolní v oblasti C. Negativní nález znamená, že hladina metamfetaminu je nižší, než mez detekce testu ( 1000 ng/ml), Pozitivní: Pouze jedna linie v kontrolní oblast C. V oblasti testu T není zřetelná barevná linie.tento pozitivní nález znamená, že ve vzorku je přítomen metamfetamin v koncentraci vyšší než 1000 ng/ml. Neplatný: Nevytvořila se barevná linie v kontrolní oblasti C. Buď byl zvolen špatný postup, nebo aplikováno malé množství vzorku. Test je třeba opakovat s novou kazetou. Pokud přetrvává problém, kontaktujte dovozce, nebo výrobce. Poznámka: Odstín barevné linie T může být odlišný od kontrolní linie C. 2

3 Jednostupňový test pro kvalitativní záchyt Methamphetaminu (Pervitinu) v lidské moči In Vitro diagnostikum pro profesionální použití. ZAMÝŠLENÉ POUŽITÍ DrugControl METHAMPHETAMINE Test je kvalitativní imunochromatografický test, určený pro detekci d-metamfetaminu v lidské moči s udanou koncentrací cut-off 1000 ng/ml. Tento test dává pouze orientační analytický výsledek, pro ověření je nutno použít specifičtější analytickou metodu. Doporučenou konfirmační metodou je GC/MS ( plynová chromatografie s hmotovou spektrometrií). Výsledek předběžného testu je třeba interpretovat s profesionální klinickou zkušeností a ohledem na podmínky testu. SHRNUTÍ Metamfetamin je stimulační droga která silně aktivuje určitý systém v mozku. Metamfetaminy jsou úzce chemicky příbuzné s amfetaminy, ale působení metamfetaminů na centrální nervový systém je mnohem silnější. Metamfetamin je často připravován v ilegálních laboratořích pod názvem Pervitin. Má velký předpoklad pro zneužívání a vznik závislosti. Droga může být podávána per os, injekčně nebo inhalačně (šňupáním) Akutní vysoká dávka vede k zvýšené stimulaci CNS a vyvolává euforii, čilost,snížení chuti k jídlu a pocit zvýšené energie a síly. Je popsáno zvýšení krevního tlaku a srdeční arytmie. Následně přichází úzkost, paranoia, halucinace, psychotické chování, deprese až vyčerpání. Efekt metamfetaminu obvykle vymizí během 2-4 hodin, poločas v krvi je 9-24 hodin. Metamfetamin je vylučován močí většinou jako amfetamin a oxidované nebo deaminované derivaty. Přibližně 20% -methamphetaminu je vyloučeno beze změny. Proto tedy přítomnost původní drogy v moči dokazuje užití metamfetaminu(pervitinu). Metamfetamin je běžně v moči prokazatelný 3-5 dní ( závisí na ph moče) DrugControl METHAMPHETAMINE-Test je rychlý screeningový test z moče, který lze vyhodnotit i bez použití přístroje pouze vizuálně. Test využívá monoklonální protilátku k selektivní detekci zvýšené hladiny d-metamfetaminu v moči. DrugControl METHAMPHETAMINE- Test dává pozitivní výsledek při koncentraci d-metamfetaminu v moči vyšší než cut-off 1000 ng/ml. PRINCIP DrugControl METHAMPHETAMINE TEST je rychlá imunochromatografická metoda, založená na principu kompetitivní vazby. Droga přítomná ve vzorku moče soutěží (kompetice) o vazebná místa na zlatem značené protilátce s konjugátem droga-protein, imobilizovaným v oblasti T testu. V průběhu testu vzorek moči migruje kapilárními silami vzhůru chromatografickou membránou. Pokud je ve vzorku přítomen d-metamfetamin v množství menším než cut-off (1000 ng/ml), nezaplní všechna vazebná místa na protilátce, která se pak naváže na imobilizovaný konjugát a vytvoří zde barevnou linii.barevná linie se nevytvoří, pokud je drogy ve vzorku více než cut-off. Zaplní totiž všechna vazebná místa na protilátce a ta projde chromatograficou membránou beze změny. Proto pozitivní nález znamená nepřítomnost linie v oblasti T. Pro kontrolu správného provedení testu a dostatečného množství vzorku se vždy musí objevit barevná linie v oblasti označené C. INTERPRETACE VÝSLEDKU negativní positivní neplatný neplatný Negativní Dvě zřetelné narůžovělé linie v testovacím poli, jedna v oblasti T, jedna v kontrolní v oblasti C. Negativní nález znamená, že hladina metamfetaminu je nižší, než mez detekce testu ( 1000 ng/ml), Pozitivní: Pouze jedna linie v kontrolní oblasti C. V oblasti testu T není zřetelná barevná linie.tento pozitivní nález znamená, že ve vzorku je přítomen metamfetamin v koncentraci vyšší než cut-off 1000 ng/ml. Neplatný: Nevytvořila se barevná linie v kontrolní oblasti C. Buď byl zvolen špatný postup, nebo aplikováno malé množství vzorku. Test je třeba opakovat s novou kazetou. Pokud přetrvává problém, kontaktujte dovozce, nebo výrobce. Poznámka: Odstín barevné linie T může být odlišný od kontrolní linie C. KONTROLA KVALITY Kontrola postupu a funkce je součástí testu. Vytvoření barevné kontrolní linie a oblasti C testovacího pole znamená že funkce testu je v pořádku. Potvrzuje že bylo aplikováno dostatečné množství vzorku, chromatografická membrána má adekvátní nasákavost a postup práce byl správně proveden podle návodu. Kontrolní vzorek standard metamfetaminu není součástí testu, ale doporučuje se použít jako kontrolu pozitivní a negativní vzorek moči, otestovaný v laboratoři konfirmační metodou podle správné laboratorní praxe a tím si ověřit vizuální odečtení. OMEZENÍ 1 DrugControl METHAMPHETAMINE-Test dává pouze kvalitativní orientační výsledek. Pro potvrzení nálezu je třeba použít specifičtější analytickou metodu. Jako konfirmační metoda je doporučena GC/MS. 2 Výsledek testu může být ovlivněn jak chybou postupu, tak interferencí některých látek, přítomných v moči. 3 Falšování vzorku, např. přidáním bělících prostředků nebo kamence mohou způsobit chybnou interpretaci nezávisle na použité analytické metodě. Jestliže je podezření na falšování vzorku, je třeba zopakovat test s novým vzorkem moči. 4 Pozitivní výsledek udává, že je v moči přítomna hledaná droga nebo její metabolit v koncentraci vyšší než cut-off, ale nedává informaci o jejím množství ani způsobu aplikace. 5 Negativní nález nemusí znamenat absolutní nepřítomnost drogy v moči, Negativmí výsledek dostaneme i když je droga v moči přítomna, ovšem v koncentraci nižší, než udává cut-off (1000ng/ml) 6 Test nerozpozná zda droga byla užita v rámci léčení nebo zneužita drogově závislým. 3

4 VLASTNOSTI TESTU Správnost Po s it iv e N e ga t iv e Bylo testováno 300 klinických vzorků močí paralelně DrugControl METAMPHETAMINE testem a RAPID testem, komerčně nejužívanějším. 10% vzorků mělo koncentraci pod cutoff a 10% nad cut-off hodnotou testu 1000ng/ml d-metamfetaminu (75%,resp. 125% cut-off) a výsledky porovnány. Pozitivní vzorky byly ověřeny GC/MS. Shoda DrugControl-testu s Rapid testem byla nalezena 99% Shoda s výsleky referenční metody GC/MS byla 96% MET Tes t R A PID G C / MS Analytická sensitivita Negativ e P ositiv e Ve směsném vzorku moči bez přítomnosti drogy byl rozpuštěn d-metamfetamin v následujících koncentracích: [ng/ml] [% Cut Off] Nalezené výsledky potvrzují >99% správnost 50% pod a 50% nad hodnotou koncentrace cut-off. Methamphetamine [ng/ml] Analytická specificita V tabulce jsou uvedeny sloučeniny, které dávají v moči pozitivní výsledek testem DrugControl METHAMPHETAMINE TEST po 5 minutách. D-Methamphetamine 1,000 ng / ml (±) 3,4-Methylenedioxymethamphetamine 2,000 ng / ml L-Methamphetamine 8,000 ng / ml HN CH3 p-hydroxymethamphetamine 30,000 ng / ml O O Mephentermine 50,000 ng / ml H 3 C HN HN HO HN CH3 NH CH Site A Site A Site B Site B Site C Site C Methamphetamine [ng/ml] Reprodukovatelnost Byla provedena studie paralelně ve třech lékařských ordinacích předem netrénovanými pracovníky s použitím tří různých šarží testů. Cílem bylo prokázat reprodukovatelnot v sérii, mezi sériemi a mezi pracovišti. Byl zpracováván identický panel vzorků, ověřených GC/MS, bez přítomnosti d-metamfetaminu, s koncentrací 25%pod cut-off, 25% nad cut-off a 50% pod a nad cut-off metody. (1000 ng/ml ). Výsledky jsou znázorněny na grafu. Vliv specifické hmotnosti moče Patnáct vzorků močí(bez obsahu drogy) se specifickou hmotností v rozmezí do bylo upraveno rozpuštěním metamfetaminu na koncentrace 500ng/ml and 1500ng/ml. Vzorky byly testovány DrugControl METAMPHETAMINE-TESTem v duplikátu (současně s 15 neupravenými vzorky). Výsledky prokazují, že kolísání specifické hmotnosti moče v uvedeném rozmezí nemá vliv na výsledek testu. Vliv ph moče Alikvotní podíly drog-negativní směsné moči byly upraveny na ph v rozmezí 5 až 9 ( po 1 ph) a rozpuštěn d-metamfetamin v koncentracích 500ng/ml a 1500ng/ml. Všechny vzorky byly testovány DrugControl METAMPHETAMINE-TESTem v duplikátu. Výsledky prokazují, že různé hodnoty ph v uvedeném rozmezí neovlivňují výsledek testu. 4

5 Zkřížená reaktivita Byla studována možnost zkřížených reakcí níže uvedených sloučenin přidáním do moči bez drogy i do moči s obsahem 500ng/ml a 1500 ng/ml d-metamfetaminu. Níže uvedené sloučeniny nevykazují zkřížené reakce (falešně pozitivní nález) ani v koncentraci 100ug/ml. 4-Acetamidophenol [ ] Codeine [ ] Ketoprofen [ ] Phenobarbital [ ] Acetophenetidin [ ] Cortisone [ ] Labetalol [ ] Phentermine [ ] N-Acetylprocainamide [ ] (-) Cotinine [ ] Levorphanol [ ] L-Phenylephrine [ ] Acetylsalicylic acid [ ] Creatinine [ ] Loperamide [ ] β-phenylethylamine [ ] Alphenal [ ] Cyclopentobarbital [ ] Lorazepam [ ] Phenylpropanolamine [ ] Alprazolam [ ] Delorazepam [ ] Lorazepam Glucuronide[-] Phenytoin [ ] Aminopyrine [ ] Deoxycorticosterone [ ] Maprotiline [ ] Prednisolone [ ] Amitryptyline [ ] Desalkylflurazepam [ ] Mepacrine [ ] Prednisone [ ] Amobarbital [ ] Desipramine [ ] Meperidine [ ] Procaine [ ] Amoxicillin [ ] Dextromethorphan [ ] Meprobamate [ ] Promazine [ ] Ampicillin [ ] Diazepam [ ] Methadone [ ] Promethazine [ ] Aprobarbital [ ] Diclofenac [ ] Methoxyphenamine [ ] D,L-Propanolol [ ] Ascorbic acid [ ] Diflunisal [ ] Methylenedioxyamphetamine [ D-Propoxyphene [ ] D-Amphetamine [ ] Digoxin [ ] Methylenedioxyethylamphetamine [ ] D-Pseudoephedrine [ ] D,L-Amphetamine [ ] Diphenhydramine [ ] Methylphenidate [ ] Quinacrine [ ] L-Amphetamine [ ] Doxepine [ ] Methprylon [ ] Quinidine [ ] Apomorphine [ ] Doxylamine [ ] Midazolam [ ] Quinine [ ] Aspartame [ ] Ecgonine [-] 6-Monoacetylmorphine [-] Ranitidine [ ] Atropine [ ] Ecgonine hydrochloride [ ] Morphine [ ] Salicylic acid [ ] Benzilic acid [ ] Ecgonine methylester [-] Morphine-3-β-D-glucuronide [ ] Secobarbital [ ] Benzoic acid [ ] (1R,2S)-(-)-Ephedrine [ ] Nalidixic acid [ ] Serotonin (5-Hydroxytyramine) [ ] Benzoylecgonine [-] L-Epinephrine [ ] Nalorphine [ ] Sulfamethazine [ ] Benzphetamine [ ] (-) Ψ Ephedrine [ ] Naloxone [ ] Sulindac [ Bilirubin [ ] Erythromycin [ ] Naltrexone [ ] Sustiva [-]] Bromazepam [ ] Estazolam [ ] Naproxen [ ] Temazepam [ ] Brompheniramine [ ] β-estradiol [ ] Niacinamide [ ] Tetracycline [ ] Butabarbital [ ] Estrone-3-sulfate [ ] Nifedipine [ ] Tetrahydrocortisone [ ] Cyclopentobarbital [ ] Ethylmorphine [-] Nimesulide [ ] Tetrahydrozoline [ ] Butalbital [ ] Ethyl-p-aminobenzoate [ ] Nitrazepam [ ] 11-nor- 8 -THC-9-COOH [-] Butethal [ ] Fenfluramine [ ] Norchlordiazepoxide [-] 11-nor- 9 -THC-9-COOH [-] Caffeine [ ] Fenoprofen [ ] Norcodeine [ ] 8 -THC [ ] Cannabidiol [ ] Flunitrazepam [ ] Nordiazepam [-] 9 -THC [ ] Cannabinol [ ] Furosemide [ ] Nordoxepine [-] Thebaine [ ] Chloralhydrate [ ] Gentisic acid [ ] Norethindrone [ ] Thiamine [ ] Chloramphenicol [ ] Hemoglobin [ ] D-Norpropoxyphene [-] Thioridazine [ ] Chorazepate Dipotassium [ ] Hydralazine [ ] Nortriptylene [ ] Thyroxine [ ] Chlordiazepoxide [ ] Hydrochlorothiazide [ ] Noscapine [ ] Tolbutamide [ ] Chlordiazepoxide HCl [ ] Hydrocodone [ ] D,L-Octopamine [ ] Trans-2- phenylcyclopropylamine [ ] Chlorothiazide [ ] Hydrocortisone [ ] Oxalic acid [ ] Trazodone [ ] (±) Chlorpheniramine [ ] Hydromorphone [ ] Oxazepam [ ] Triamterene [ ] Chlorpromazine [ ] α-hydroxyalprazolam [-] Oxolinic acid [ ] Triazolam [ ] Chloroquine [ ] p-hydroxyamphetamine [-] Oxycodone [ ] Trifluoperazine [ ] Cholesterol [ ] O-Hydroxyhippuric acid [-] Oxymetazoline [ ] Trimethoprim [ ] Clobazam [ ] 4-Hydroxyphencyclidine [-] Oxymorphone [ ] Trimipramine [ ] Clomipramine [ ] 3-Hydroxytyramine [ ] Papaverine [ ] Tryptamine [ ] Clonazepam [ ] Ibuprofen [ ] Penicillin-G [ ] D, L-Tryptophan [ ] Clonidine [ ] Imipramine [ ] Pentazocine [ ] Tyramine [ ] Codeine [ ] Iproniazid [ ] Pentobarbital [ ] Tyrosine [ ] Cocaethylene [-] (-) Isoproterenol [ ] Perphenazine [ ] Uric acid [ ] Cocaine [ ] Isoxsuprine [ ] Phencyclidine [ ] Verapamil [ ] Cocaine hydrochloride [ ] Ketamine [ ] Phenelzine [ ] Zomepirac [ ] LITERATURA -M.A.Hayat:Colloidal Gold:Principles,Methods and Applications InM.A.Hayat,Ed.;Vol.1and2(1989) andvol.3 (1991), Academic Press,SanDiego,CA -Scott E. Lukas & Solomon H. Snyder The Encyclopedia of Psychoactive Drugs Amphetamines: Danger in the Fast Lane Chelsea House Publishers (1985) ISBN : NIDA-National Institute OnDrug Abuse Research Report Series Methamphetamine Abuse and AddictionNIH PublicationNumber 98- -Baselt RC. Disposition of Toxic Drugs and Chemicals in Man. 2nd Ed. Biomedical Publ., Davis, CA. (1982) 488 -Hawks RL, CN Chiang. Urine Testing for Drugs of Abuse. National Institute for Drug Abuse (NIDA), Research Monograph 73, (1986) -Hales G, Roth N, Smith D Possible fatal interaction between protease inhibitors and methamphetamine Antivir Ther, Vol 5 (No 1) Mar -O'Dell SJ, Marshall JF Repeated administration of methamphetamine damages cells in the somatosensory cortex: overlap with cytochrome Synapse, Vol 37 (No 1) Jul 2000;32-7 -Puthaviriyakorn V, Siriviriyasomboon N, Phorachata J, Pan-ox W, Sasaki T, Tanaka K Identification of impurities and statistical classification of methamphetamine tablets (Ya-Ba) seized in Thailand Forensic Sci Int, 2002; 126(2): VorheesCV, Inman-WoodSL,MorfordLL,BroeningW,FukumuraM,MoranMS Adult learning deficits after neonatal exposure tod-methamphetamine: selective effects on spatial navigation and memory Journal of Neuroscience, Vol 20 (No 12) Jun 15, 2000; April 2005/D Revize českého textu 02/2014Rj 5

6 6