Rapid-VIDITEST RSV-Adenovirus Resp.

Transkript

1 Rapid-VIDITEST RSV-Adenovirus Resp. (Jednokrokový kazetový test pro in vitro diagnostiku Respiračního syncytiálního viru a Adenoviru z nosních výtěrů, výplachů a aspirátů) Návod k použití soupravy Výrobce: VIDIA spol. s r.o., Nad Safinou II 365, Vestec, Jesenice u Prahy, Tel: , Fax: , objednavky@vidia.cz, Web: POUŽITÍ: Rapid-VIDITEST RSV-Adenovirus Resp. je jednokrokový barevný imunochromatografický test pro kvalitativní stanovení antigenů Respiračního syncytiálního viru a Adenoviru. Je určen ke stanovení antigenu z nosních výtěrů, výplachů a aspirátů. ÚVOD: Infekce dolních dýchacích cest u dětí a dospělých způsobuje široká škála virových patogenů, z kterých jsou nejčastější Influenza A a B, Respirační syncitiální virus (RSV), Parainfluenza virus 1, 2 a 3 a Adenovirus. Z vyjmenovaných se v největší míře na vyšetřených akutních respiračních onemocněních podílejí Influenza A a B a RSV. Je důležité myslet na to, že vedle stejné sezónní prevalence, Influenza A a B a RSV mají podobné klinické projevy a infekční potenciál pro dané vysoce rizikové skupiny pacientů (například osoby s extrémně vysokým věkem, skrytým kardiopulmonálním onemocněním a imunosupresí). Symptomy respiračního onemocnění způsobeného adenovirovou infekcí jsou různé - od běžného nechlazení až po pneumonii, zánět hrtanu a bronchitidu. PRINCIP TESTU: Rapid-VIDITEST RSV-Adenovirus Resp. je jednokrokový barevný imunochromatografický test pro kvalitativní stanovení antigenů Respiračního syncytiálního viru a Adenoviru z nosních výtěrů. Na testovacích zónách membrány kazety jsou navázány myší monoklonální protilátky proti virovým antigenům. V průběhu testování vzorek reaguje s barevným konjugátem (částice s navázanými anti-rsv a anti-adenovirus protilátkami), který byl imobilizovaný na membráně. Směs pak kapilárním efektem vzlíná vzhůru po membráně. V případě pozitivního výsledku je barevný konjugát zachycen specifickými protilátkami, což se ve výsledkové zóně projeví jako barevná linka. Směs pak vzlíná dále po membráně k imobilizovaným protilátkám v kontrolní zóně, kde se objeví zelená linka. Přítomnost zelené linky ověřuje: 1) že se použil dostatečný objem vzorku, 2) že došlo ke správné vzlínavosti vzorku, 3) interní kontrolu reagencií. 1

2 OBSAH SOUPRAVY: - Testovací kazety - Sterilní odběrové tampony - Roztok (ředící roztok pro vzorky) - Testovací zkumavky - Jednorázové plastové pipety - Návod na použití - Certifikát kontroly balení - Pozitivní kontrola RSV a Adenovirus POTREBNÝ MATERIÁL NEDODÁVANÝ SO SÚPRAVOU: - Odběrová nádobka - Jednorázové rukavice - Stopky - Míchadlo nebo vortex SBĚR A PŘÍPRAVA VZORKŮ: Vzorky nosních výtěrů: Vzorky odebírejte sterilním vatovým tamponem z jedné nosní dírky. Zasuňte vatový tampon přes nosní dírku do zadního nasopharynxu a rotačním pohybem tamponu setřete stěnu nosní dírky, abyste získali infikované buňky. Pro získání optimálního vzorku opakujte proceduru i pro druhou nosní dírku. Test by měl byt proveden co nejdříve po výtěru. Vzorky nosních výplachů a aspirátů (odsávačka, sterilní odsávací katetr) Nakapejte několik kapek solného (fyziologického) roztoku do každé nosní dírky. Umístěte katetr přes nosní dírku do zadního nasopharynxu. Jemně odsajte. Rotačním pohybem pomalu odstraňte katetr. Pro získání optimálního vzorku opakujte proceduru i pro druhou nosní dírku. Vzorky odešlete co nejdříve do laboratoře, senzitivita testu klesá v čase. Před testováním můžou být vzorky skladovány v chladničce při 2-4 C po dobu 8 hodin. PRACOVNÍ POSTUP: Před testováním nechejte kazety, vzorky nosního výtěru nebo výplachu a kontroly vytemperovat na laboratorní teplotu (15-30 C). Neotvírejte obal, dokud nejste připraveni provést test. Postup A: pro vzorky nosních výtěrů 1. Do testovací zkumavky aplikujte 15 kapek roztoku pro ředění vzorků. Vložte do ní odběrový tampon. Pro každý vzorek použijte čistou zkumavku. 2. Krouživým pohybem tampónu důkladně roztok promíchejte. Třete tampon o stěnu zkumavky a nakonec z něj stlačením plastové zkumavky vytlačte co nejvíce tekutiny. Tampón likvidujte jako infekční odpad. 3. Vyjměte testovací kazetu ze sáčku a položte ji na vodorovnou podložku. Do oválného okénka aplikujte 4 kapky roztoku z testovací zkumavky. Na každý vzorek použijte novou pipetu. 5. Po 10 minutách odečtěte výsledek (objeví se barevné linky). 2

3 Nakapejte 15 kapek ředícího roztoku na vzorky Vložte tampon a promíchejte Nakapejte 4 kapky Postup B: na vzorky nosních výplachů a aspirátů: 1. Do testovací zkumavky aplikujte pipetou 6 kapek nosního výplachu nebo aspirátu. Pro každý vzorek použijte čistou zkumavku nebo pipetu. 2. Přidejte do zkumavky 9 kapek ředícího roztoku pro vzorky. Opatrně promíchejte na míchadle. 3. Dále postupujte dle předchozích instrukcí (postup pro vzorky z nosních výtěrů) Přidejte 6 kapek nasopharyngeálního vzorku Přidejte 9 kapek ředícího roztoku pro vzorky a zamíchejte Nakapejte 4 kapky INTERPRETACE VÝSLEDKŮ: NEGATÍVNÍ NEPLATNÝ Negatívní: V kontrolní zóně C se objeví jen jeden zelený proužek. Výsledková zóna zůstane čistá. Jen RSV Pozitivní: Kromě zeleného proužku v kontrolní zóně C se objeví též červený proužek ve výsledkové zóně T1. 3

4 Jen Adenovirus Pozitivní: Kromě zeleného proužku v kontrolní zóně C se objeví též červený proužek ve výsledkové zóně T2. RSV-Adenovirus Pozitivní: Kromě zeleného proužku v kontrolní zóně C se objeví oba červené proužky ve výsledkové zóně T1 a T2. Neplatný: Test je neplatný, pokud se v kontrolní zóně C neobjeví zelená linka bez ohledu na přítomnost červených linek ve výsledkové zóně T1 a T2. Nejčastějšími příčinami selhání testu jsou: nedostatečná koncentrace vzorku, nesprávný pracovní postup nebo poškození reagencií. Zkontrolujte pracovní postup a opakujte test s novou testovací sadou. Pokud potíže přetrvávají, kontaktujte svého dodavatele. Poznámka k interpretaci výsledku: Intenzita červených proužků ve výsledkové zóně T1 a T2 závisí na koncentraci antigenů ve vzorku. Nicméně, tímto testem nelze kvantitativně stanovit množství antigenu, ani jeho nárůst v průběhu onemocnění. PLATNOST TESTU: Test je platný pouze v případě, když se v kontrolní zóně objeví zelená linka. V testu je použit interní standard. Zelená linka, která se objevuje v kontrolní zóně je vnitřní kontrolou testu. Potvrzuje dostatečný objem vzorku a správný průběh testu. OMEZENÍ TESTU: - Tento test slouží jen na určení přítomnosti Adenovirů a/nebo RSV ve vzorku. Rapid- VIDITEST RSV-Adenovirus Resp. může být použit jen na nosní výtěry, výplachy a aspiráty. Tímto testem nelze kvantitativně stanovit množství antigenu ani jeho nárůst v průběhu onemocnění. - Pokud je test negativní a klinické projevy přetrvávají, doporučujeme použití jiných klinických metod. - Tento test slouží jen k pravděpodobné diagnóze Adenovirové infekce a/nebo infekce Respiračním syncytiálním virem. Potvrzení infekce musí být provedeno lékařem poté, co boly vyhodnoceny všechny klinické a laboratorní nálezy. OČEKÁVANÉ VÝSLEDKY: RSV je obecně považován za nejčastějšího původce pneumonií, bronchiolitid a tracheobronchitid u malých a mladších dětí. U seniorů v průběhu zimního období způsobuje 14-27% případů pneumonií. Adenovirová infekce je rizikem pro každou osobu, ale nejrizikovější je pro pacienty s oslabeným imunitním systémem nebo skrytým respiračním nebo srdečním onemocněním, kde by mohlo dojít k závažným komplikacím vlivem jakékoliv respirační infekce, včetně Adenovirové. ÚČINNOST TESTU: Citlivost a specifita V souladu s návodem na použití této soupravy byly testovány různé extrakty z virových kultur v různých ředěních v ředícím roztoku nebo spikované do negativních vzorků. 4

5 Detekce RSV vykazovala ve srovnání s jinými rychlými komerčními testy 95% citlivost (BinaxNOW RSV, Alere) a >99% specifitu. Detekce Adenoviru vykazovala >99% citlivost i specifitu ve srovnání s jinými rychlými komerčními testy (Adenovirus Respi, CorisBioConcept) a s imunofluorescenčními testy PathoDx Adenovirus (Remel). Křížová reaktivita Nebyla zjištěna žádná křížová reaktivita s běžnými respiračními patogény, jinými organizmy a látkami nacházejícími se v nasofaryngeálních vzorcích: - Influenza A - Influenza B SKLADOVÁNÍ A STABILITA: Skladujte v originálním obale při teplotě 2-30 C. Test je stabilní do data exspirace uvedeného na obale. Test uchovávejte v uzavřeném obalu až do doby použití. Nezmrazujte. BEZPEČNOSTNÍ OPATŘENÍ: - Jen pro in vitro diagnostiku - Nepoužívejte po uplynutí expirační doby - Test uchovávejte v uzavřeném obale až do doby použití, po vyjmutí musí být test proveden do dvou hodin. - Se vzorky manipulujte jako s potenciálně infekčním materiálem. Pro každý vzorek musí být použit nový odběrový tampon. - Dodržujte správné laboratorní postupy, používejte ochranný oděv, jednorázové rukavice, nejezte, nepijte a nekuřte. - Test nepoužívejte, pokud je hliníkový obal porušený. - Odpad likvidujte jako biologický infekční odpad v souladu s příslušnými předpisy. REFERENCE: - BARENFANGER et al., Clinical and Financial Benefits of Rapid Detection of Respiratory Viruses: an Outcomes Study. Journal of Clinical Microbiology. August 2000, Vol 38 No 8, p POUŽITÉ SYMBOLY: Určeno pro diagnostiku in vitro Čtěte návod k použití Uchovejte v suchu Teplotní omezení Datum expirace Číslo šarže (LOT) Katalogové číslo Obsahuje dostatečné množství surovin pro <n> testů Výrobce Pouze pro ověření Poslední revize tohoto návodu: 08/2014 5