Rapid-VIDITEST Influenza A+B

Transkript

1 Rapid-VIDITEST Influenza A+B (Jednokrokový blisterový test pro in vitro diagnostiku viru Influenzy typu A a B z nosních výtěrů, výplachů a aspirátů) Návod k použití soupravy Výrobce: VIDIA spol. s r.o., Nad Safinou II 365, Vestec, Jesenice u Prahy, Tel: , Fax: , objednavky@vidia.cz, Web: POUŽITÍ: Rapid-VIDITEST Influenza A+B je jednokrokový barevný imunochromatografický test pro kvalitativní stanovení antigenů typu A (včetně A/H1N1, A/H3N2, A/H5N1) a B viru influenzy. Je určen ke stanovení antigenu z nosních výtěrů, výplachů a aspirátů. Pouze pro laboratorní použití. ÚVOD: Infekce dolních dýchacích cest u dětí a dospělých způsobuje široká škála virových patogenů, z kterých jsou nejčastější Influenza A a B, Respirační syncitiální virus (RSV), Parainfluenza virus 1, 2 a 3 a Adenovirus. Z vyjmenovaných se v největší míře na vyšetřených akutních respiračních onemocněních podílejí Influenza A a B a RSV. Je důležité myslet na to, že vedle stejné sezónní prevalence, Influenza A a B a RSV mají podobné klinické projevy a infekční potenciál pro dané vysoce rizikové skupiny pacientů (například osoby s extrémně vysokým věkem, skrytým kardiopulmonálním onemocněním a imunosupresí). PRINCIP TESTU: Rapid-VIDITEST Influenza A+B je jednokrokový barevný imunochromatografický test pro kvalitativní stanovení antigenů typu A a B viru influenzy. Na testovacích zónách povrchu stripu jsou navázány monoklonální protilátky proti virovým antigenům. V průběhu testování vzorek reaguje s barevným konjugátem, který byl imobilizovaný na membráně. Směs pak kapilárním efektem vzlíná vzhůru po membráně stripu. V případě pozitivního výsledku je barevný konjugát zachycen specifickými protilátkami, což se ve výsledkové zóně projeví jako jedna nebo dvě barevné linky. Směs pak vzlíná dále po membráně k imobilizovaným protilátkám v kontrolní zóně, kde se vždy objeví zelená linka. Přítomnost zelené linky ověřuje: 1) že se použil dostatečný objem vzorku, 2) že došlo ke správné vzlínavosti vzorku, 3) interní kontrolu reagencií. 1

2 OBSAH SOUPRAVY: - Testovací blistery - Sterilní odběrové tampóny - Ředicí roztok pro vzorky - Testovací zkumavky - Jednorázové plastové pipety - Návod k použití - Certifikát kontroly balení - Influenza A+B pozitivní kontrola POTŘEBNÝ MATERIÁL NEDODÁVANÝ SE SOUPRAVOU: - Nádoba na sběr vzorků - Jednorázové rukavice - Míchadlo nebo vortex - Stopky SBĚR A PŘÍPRAVA VZORKŮ: Vzorky nosních výtěrů: Vzorky odebírejte sterilním vatovým tamponem z jedné nosní dírky. Zasuňte vatový tampon přes nosní dírku do zadního nasopharynxu a rotačním pohybem tamponu setřete stěnu nosní dírky, abyste získali infikované buňky. Pro získání optimálního vzorku opakujte proceduru i pro druhou nosní dírku. Test by měl byt proveden co nejdříve po výtěru. Vzorky nosních výplachů a aspirátů (odsávačka, sterilní odsávací katetr) Nakapejte několik kapek solného (fyziologického) roztoku do každé nosní dírky. Umístěte katetr přes nosní dírku do zadního nasopharynxu. Jemně odsajte. Rotačním pohybem pomalu odstraňte katetr. Pro získání optimálního vzorku opakujte proceduru i pro druhou nosní dírku. Vzorky odešlete co nejdříve do laboratoře, senzitivita testu klesá v čase. Před testováním můžou být vzorky skladovány v chladničce při 2-4 C po dobu 8 hodin. 2

3 PRACOVNÍ POSTUP: Před testováním nechte blistery, vzorky nosního výtěru nebo výplachu a kontroly vytemperovat na laboratorní teplotu (15 až 30 C). Neotvírejte obal, dokud nejste připraveni provést test. Postup A: pro vzorky nosních výtěrů 1. Do testovací zkumavky aplikujte 15 kapek roztoku pro ředění vzorků. Vložte do ní odběrový tampon. Pro každý vzorek použijte čistou zkumavku. 2. Krouživým pohybem tampónu důkladně roztok promíchejte. Třete tampon o stěnu zkumavky a nakonec z něj stlačením plastové zkumavky vytlačte co nejvíce tekutiny. Tampón likvidujte jako infekční odpad. 3. Dále můžete zvolit jeden z postupů: Na každý vzorek použijte novou pipetu. a) Odstřihněte z plata jeden zatavený blister a tahem za nezatavený konec horní hliníkové fólie jej otevřete. Blister ponechte na spodní části hliníkové fólie a položte jej na vodorovnou podložku. Na bílý konec blisteru naneste 5 kapek roztoku z testovací zkumavky. nebo b) Odstřihněte z plata jeden zatavený blister a tahem za nezatavený konec horní hliníkové fólie jej otevřete. Vyjměte blister z obalu a ponořte ho vertikálně bílým koncem do testovací zkumavky. Hladina roztoku ve zkumavce nesmí přesáhnout hranici označenou šipkami. 4. Po 10 minutách odečtěte výsledek (objeví se barevné linky). Nakapejte 15 kapek ředícího roztoku na vzorky Vložte tampon, promíchejte a extrahujte vzorek a) přidejte 5 kapek nebo b) vložte strip do zkumavky Počkejte 10 minut. 3

4 Postup B: na vzorky nosních výplachů a aspirátů: 1. Do testovací zkumavky aplikujte pipetou 6 kapek nosního výplachu nebo aspirátu. Pro každý vzorek použijte čistou zkumavku nebo pipetu. 2. Přidejte do zkumavky 9 kapek ředícího roztoku pro vzorky. Opatrně promíchejte na míchadle (1 minutu). 3. Dále můžete zvolit jeden z postupů: Na každý vzorek použijte novou pipetu. a) Odstřihněte z plata jeden zatavený blister a tahem za nezatavený konec horní hliníkové fólie jej otevřete. Blister ponechte na spodní části hliníkové fólie a položte jej na vodorovnou podložku. Na bílý konec blisteru naneste 5 kapek roztoku z testovací zkumavky. nebo b) Odstřihněte z plata jeden zatavený blister a tahem za nezatavený konec horní hliníkové fólie jej otevřete. Vyjměte blister z obalu a ponořte ho vertikálně bílým koncem do testovací zkumavky. Hladina roztoku ve zkumavce nesmí přesáhnout hranici označenou šipkami. 4. Po 10 minutách odečtěte výsledek (objeví se barevné linky). Přidejte 6 kapek nasopharyngeálního vzorku Přidejte 9 kapek ředícího roztoku pro vzorky a zamíchejte b) přidejte 5 kapek nebo b) vložte strip do zkumavky Počkejte 10 minut. INTERPRETACE VÝSLEDKŮ: Aplikační zóna pro vzorek Influenza A Influenza B Influenza A+B Negativní Neplatný Negativní: V kontrolní zóně C se objeví pouze jedna zelená linka. Výsledková zóna T1 a T2 zůstane čistá. 4

5 Pouze Influenza A Pozitivní: Kromě zelené linky v kontrolní zóně C se objeví také červená linka ve výsledkové zóně T1. Pouze Influenza B Pozitivní: Kromě zelené linky v kontrolní zóně C se objeví také červená linka ve výsledkové zóně T2. Influenza A+B Pozitivní: Kromě zelené linky v kontrolní zóně C se objeví obě červené linky ve výsledkové zóně T1 a T2. Neplatný: Test je neplatný, pokud se v kontrolní zóně C neobjeví zelená linka, bez ohledu na přítomnost červených linek ve výsledkové zóně T1 a T2. Nejčastějšími příčinami selhání testu jsou: nedostatečná koncentrace vzorku, nesprávný pracovní postup nebo poškození reagencií. Zkontrolujte pracovní postup a opakujte test s novou testovací sadou. Pokud potíže přetrvávají, kontaktujte svého dodavatele. Poznámka k interpretaci výsledku: Intenzita červených linek v místě označeném T1 a T2 závisí na koncentraci antigenů ve vzorku. Nicméně tímto testem nelze kvantitativně stanovit množství antigenu ani jeho nárůst v průběhu onemocnění. PLATNOST TESTU: Test je platný pouze v případě, když se v kontrolní zóně objeví zelená linka. V testu je použit interní standard. Zelená linka, která se objevuje v kontrolní zóně je vnitřní kontrolou testu. Potvrzuje dostatečný objem vzorku a správný průběh testu. OMEZENÍ TESTU: - Tento test slouží jen na určení přítomnosti Influenza A a B ve vzorku (kvalitativní detekce) a může být použit jen na nosní výtěry, výplachy a aspiráty. Tímto testem nelze kvantitativně stanovit množství antigenu ani jeho nárůst v průběhu onemocnění. - Pokud je test negativní a klinické projevy přetrvávají, doporučujeme použití jiných klinických metod. Negativní výsledek nevylučuje možno infekci. - Tento test slouží jen k pravděpodobné diagnóze infekce a/nebo infekce virem Influenza. Potvrzení infekce musí být provedeno lékařem poté, co byly vyhodnoceny všechny klinické a laboratorní nálezy. OČEKÁVANÉ VÝSLEDKY: Viry influenzy A nebo B způsobují epidemie skoro každou zimu. V USA tyto zimní epidemie mohou způsobit nemocnost 10% až 20 % a souvisí s nimi také v průměru úmrtí a hospitalizací za rok. ÚČINNOST TESTU: Citlivost a specifita: Různá ředění virového extraktu byla testována přímo v ředicím roztoku nebo v negativním vzorku nosního výtěru. Detekce byla provedena podle návodu a 5

6 výsledky byly porovnány s jiným komerčně dostupným testem (BINAXNow Influenza A&B). Citlivost a specifita Influenza A+B byla >99%. Křížová reaktivita: Byla testována křížová reaktivita Rapid-VIDITEST Influenza A+B. Nebyla nalezena žádná křížová reaktivita s běžnými respiračními patogeny, jinými organizmy a látkami nacházejícími se v nasofaryngeálních vzorcích: - Respirační syncytiální virus - Adenovirus SKLADOVÁNÍ A STABILITA: Skladujte v originálním obalu při teplotě 2 až 30 C. Test je stabilní do data exspirace uvedeného na obalu. Nezmrazujte. BEZPEČNOSTNÍ OPATŘENÍ: - Jen pro in vitro diagnostiku - Nepoužívejte po uplynutí expirační doby - Test uchovávejte v uzavřeném obale až do doby použití, po vyjmutí musí být test proveden do dvou hodin. - Se vzorky manipulujte jako s potenciálně infekčním materiálem. - Dodržujte správné laboratorní postupy, používejte ochranný oděv, jednorázové rukavice, nejezte, nepijte a nekuřte. - Test nepoužívejte, pokud je hliníkový obal porušený. - Odpad likvidujte jako biologický infekční odpad v souladu s příslušnými předpisy. REFERENCE: - BARENFANGER et al., Clinical and Financial Benefits of Rapid Detection of Respiratory Viruses: an Outcomes Study. Journal of Clinical Microbiology. August 2000, Vol 38 No 8, p POUŽITÉ SYMBOLY: Určeno pro diagnostiku in vitro Čtěte návod k použití Uchovejte v suchu Teplotní omezení Datum exspirace Číslo šarže (LOT) Katalogové číslo Obsahuje dostatečné množství surovin pro <n> testů Výrobce Pouze pro ověření Poslední revize tohoto návodu: 08/2014 6