Rapid-VIDITEST. Rota-Adeno Card. (Jednokrokový kazetový test pro in vitro diagnostiku rotavirů a adenovirů) Návod k použití soupravy

Transkript

1 Rapid-VIDITEST Rota-Adeno Card (Jednokrokový kazetový test pro in vitro diagnostiku rotavirů a adenovirů) Návod k použití soupravy Výrobce: VIDIA spol. s r.o., Nad Safinou II č. 365, Vestec, Jesenice u Prahy, ČR, tel: , POUŽITÍ: Rapid-VIDITEST Rota-Adeno Card je jednokrokový barevný imunochromatografický test pro kvalitativní detekci Rotaviru a Adenoviru ve stolici. ÚVOD: Rotavirus a Adenovirus způsobují infekční gastroenteritidu u dětí, dorostu a částečně i u dospělých. Přenáší se fekálně-orální cestou. Hlavní symptomy virové gastroenteritidy jsou průjem a zvracení. Infikované osoby mají bolesti hlavy, horečku a bolesti žaludku. Symptomy začínají 1. až 2. den po infekci virem a mohou přetrvávat 1-10 dní, v závislosti na typu viru (Rotavirus 3 dny, Adenovirus 5-8 dní). PRINCIP TESTU: Rapid-VIDITEST Rota-Adeno Card je kvalitativní imunochromatografický test pro stanovení Rotaviru a Adenoviru ve stolici. Na testovacích zónách membrány kazety jsou navázány myší monoklonální protilátky proti virovým antigenům. V průběhu testování vzorek reaguje s barevným konjugátem, který byl imobilizovaný na membráně (anti-rotavirové myší monoklonální protilátky červená mikrosféra a anti-adenovirové myší monoklonální protilátky modrá mikrosféra). Směs barevného konjugátu a vzorku se pohybuje směrem nahoru přes testovací zóny kapilární vzlínavostí. V případě pozitivního výsledku budou specifické protilátky imobilizované na testovací zóně membrány vázat barevné částice. Objeví se různé barevné linky v závislosti na přítomnosti viru ve vzorku. Pomocí těchto linek se interpretuje výsledek. Směs se pohybuje dále směrem nahoru do kontrolní zóny, kde jsou imobilizované protilátky pro kontrolní zónu. V té by se měla vždy objevit zelená linka. Přítomnost zelené linky ověřuje: 1) že se použil dostatečný objem vzorku 2) že došlo ke správné vzlínavosti vzorku 3) interní kontrolu reagencií. 1

2 OBSAH SOUPRAVY: - Testovací kazety - Odběrové zkumavky s aplikační tyčinkou obsahující ředicí roztok pro vzorky - Návod k použití - Certifikát kontroly balení POTŘEBNÝ MATERIÁL NEDODÁVANÝ SE SOUPRAVOU: - nádoba na sběr vzorků - zkumavky nebo lahvičky - jednorázové rukavice - stopky SBĚR A PŘÍPRAVA VZORKŮ: Vzorky odebírejte do čistých odběrových nádob. Test by měl proběhnout co nejdříve po odebrání vzorku stolice, pokud to není možné, lze vzorky uchovávat 1-2 dny před testováním v chladničce při 2-4 C. V případě delšího skladování, maximálně 1 rok, by se měly vzorky uchovávat zmrazené při -18 až -28 C. Před použitím vzorky nechte vytemperovat na laboratorní teplotu. Příprava vzorků a) Odšroubujte víčko odběrové zkumavky s ředicím roztokem (1) a pomocí aplikační tyčinky na víčku odběrové zkumavky odeberte malé množství vzorku stolice (2). Zašroubováním víčka odběrové zkumavky ponoříte aplikační tyčinku do ředicího roztoku. b) Důkladně promíchejte zkumavku za účelem dobré homogenizace vzorku (3). 2

3 PRACOVNÍ POSTUP: Před testováním nechte testovací kazetu, vzorek stolice a kontroly vytemperovat na laboratorní teplotu (15-30 C). Neotvírejte obal, dokud nejste připraveni provést test. 1. Po vytemperování kazety otevřete obalovou folii v označeném místě. 2. Znova protřepejte odběrovou zkumavku se vzorkem stolice za účelem dobré homogenizace vzorku. Uřízněte nebo ustřihněte konec špičky zkumavky (4). 3. Těsně před použitím vyjměte Rapid-VIDITEST Rota-Adeno Card z obalové folie a položte ho na vodorovnou podložku. Nedotýkejte se membrány v místě testovací zóny a zóny pro aplikaci vzorku. Použijte samostatnou odběrovou zkumavku a kazetu pro každý vzorek a kontrolu zvlášť. 4. Přidejte přesně 5 kapek nebo 150 μl naředěného vzorku z odběrové zkumavky do oválného okénka označeného šipkou a písmenem S (5). 5. Po 10 minutách odečtěte výsledek (objeví se barevné linky). 3

4 INTERPRETACE VÝSLEDKŮ: Vzorky se aplikují do oválného okénka označeného S (sample vzorek), výsledky se odečítají v obdélníkovém okénku vprostřed kazety označeném C (kontrolní zóna) a T (výsledková zóna). Zelená Červená Modrá Zelená Červená Modrá Červená Modrá Negativní ROTA-ADENO ADENOVIRUS ROTAVIRUS Neplatný Neplatný Neplatný Pozitivní Pozitivní Pozitivní NEGATIVNÍ: Objeví se pouze ZELENÁ linka (kontrolní) v místě označené C. ROTAVIRUS POZITIVNÍ: Kromě kontrolní ZELENÉ linky se objeví ČERVENÁ linka v místě označeném T. ADENOVIRUS POZITIVNÍ: Kromě kontrolní ZELENÉ linky se objeví MODRÁ linka v místě označeném T. ROTAVIRUS-ADENOVIRUS POZITIVNÍ: Ve stejnou dobu se objeví všechny výše uvedené linky (ZELENÁ linka v místě označeném C, ČERVENÁ a MODRÁ v místě označeném T), které svědčí o současné infekci Rotaviry a Adenoviry. NEPLATNÝ: Test je neplatný, pokud se v kontrolní zóně neobjeví ZELENÁ linka bez ohledu na to, zda se v zóně výsledku objeví červená (případně modrá) linka. Důvodem nepřítomnosti kontrolní linky může být nedostatečný objem vzorku nebo nesprávné provedení testu. Zkontrolujte pracovní postup a opakujte test s novou testovací sadou. Pokud se problém opakuje, kontaktujte distributora. Poznámka k interpretaci výsledku: Intenzita červené nebo modré barevné linky v místě označeném T závisí na koncentraci antigenů ve vzorku. Nicméně tímto testem nelze kvantitativně stanovit množství antigenu ani jeho nárůst v průběhu onemocnění. 4

5 PLATNOST TESTU: Test je platný pouze v případě, když se v kontrolní zóně objeví zelená linka. V testu je použit interní standard. Zelená linka, která se objevuje v kontrolní zóně je vnitřní kontrolou testu. Potvrzuje dostatečný objem vzorku a správný průběh testu. OMEZENÍ TESTU: 1. Test musí být proveden do 2 hodin po otevření vzduchotěsného obalu kazety. 2. Nadbytečné množství vzorku stolice může vést k nesprávnému výsledku (objevují se hnědé linky). V tomto případě je nutné opakovat přípravu vzorku a test. 3. Týden od počátku infekce začne množství viru ve stolici klesat, vzorek se stává méně reaktivní. 4. Výsledky tohoto testu pouze naznačují přítomnost rotavirové a adenovirové infekce. Lékař by měl diagnózu stanovit až po laboratorním a klinickém potvrzení infekce. 5. Výrobce nezaručuje funkčnost testu po uplynutí expirační doby. OČEKÁVANÉ VÝSLEDKY: U zdravých jedinců očekáváme negativní výsledky. ÚČINNOST TESTU: Hodnocení účinnosti tohoto testu bylo provedené tak, že výsledky získané Rapid-VIDITEST Rota Adeno Card testem byly porovnány s výsledky na jiném komerčně dostupném Rota-Adeno membránovém testu. Z tohoto porovnání byla stanovena citlivost a specificita testu. Citlivost: Citlivost detekce Rotaviru vykazovala >99% shodu výsledků. Citlivost detekce Adenoviru vykazovala 90% shodu výsledků. Specificita: Specificita detekce Rotaviru vykazovala 98% shodu výsledků. Specificita detekce Adenoviru vykazovala >99% shodu výsledků. Použití myší monoklonální protilátky v Rapid-VIDITEST Rota-Adeno Card zaručuje vysoký stupeň specificity pro detekci těchto virů. SKLADOVÁNÍ A STABILITA: Skladujte v originálním obalu při teplotě 2-30 C. Test je stabilní do data expirace uvedeného na obalu. Nezmrazujte. 5

6 BEZPEČNOSTNÍ OPATŘENÍ: - Pouze pro in vitro diagnostiku - Nepoužívejte po uplynutí expirační doby - Se vzorky manipulujte jako s potenciálně infekčním materiálem - Odpad likvidujte v souladu jako biologický infekční odpad v souladu s příslušnými předpisy. REFERENCE: 1. CUKOR G., and BLACKLOW N. R.: Human Viral Gastroenteritis, Micribiological Reviews, Vol. 48 No 2, June 1984, pp ESTES M. K. and COHEN J.: Rotavirus Gene Structure and Function, Microbiological Reviews, Vol. 53 No 4, Dec. 1989, pp PAI C. H., SHAHRABADI M. S., and INCE B.: Rapid Diagnosis of Rotavirus Gastroenteritis by a Commercial Latex Agglutination Test, Journal of Clinical Microbiology, Vol. 22 No 5, Nov. 1985, pp CUKOR G., PERRON D. M., and BLACKLOW N. R.: Detection of Rotavirus in Human Stools by Using Monoclonal Antibody, Journal of Clinical Microbiology, Vol, 19, POUŽITÉ SYMBOLY: Určeno pro diagnostiku in vitro Datum expirace Číslo šarže (LOT) Výrobce Poslední revize tohoto návodu: 11/2010 6