Rapid-VIDITEST RSV. (Jednokrokový kazetový test pro in vitro diagnostiku Respiračního syncytiálního viru z nosních výtěrů, výplachů a aspirátů)

Transkript

1 Rapid-VIDITEST RSV (Jednokrokový kazetový test pro in vitro diagnostiku Respiračního syncytiálního viru z nosních výtěrů, výplachů a aspirátů) Návod k použití soupravy Výrobce: VIDIA spol. s r.o., Nad Safinou II 365, Vestec, Tel: , Fax: , objednavky@vidia.cz, Web: POUŽITÍ: Rapid-VIDITEST RSV je jednokrokový barevný imunochromatografický test pro kvalitativní stanovení antigenů Respiračního syncytiálního viru (RSV) ve vzorcích z nosních výtěrů, výplachů a aspirátů. Pouze pro laboratorní použití. ÚVOD: Přestože existuje celá řada virových agens, které jsou schopné způsobit infekci dolních cest dýchacích u dětí a dospělých, influenza typu A a B, respirační syncyciální virus (RSV), viry parainfluenzy 1, 2 a 3 a adenoviry jsou nejčastější. Influenza typu A a B a RSV jsou nejčastější příčinou akutního respiračního onemocnění. Kromě toho, že obě viry mají podobný sezónní výskyt, je důležité si uvědomit, že Influenza typu A a B a RSV mají překrývající se klinické projevy a možnosti infekce pro určité skupiny vysoce rizikových pacientů (např. věkové extrémy, kardiopulmonální onemocnění a imunosuprese). PRINCIP TESTU: Rapid-VIDITEST RSV je jednokrokový barevný imunochromatografický test pro stanovení antigenů RSV ve vzorcích z nosu. Na membráně v testovací zóně jsou navázány monoklonální protilátky proti antigenům RSV. V průběhu testování vzorek reaguje částicemi s navázanými protilátkami proti RSV (konjugát), který byly imobilizovány na membráně. Směs pak kapilárním efektem vzlíná vzhůru po membráně stripu. V případě pozitivního výsledku reagují specifické protilátky s barevným konjugátem a vytváří barevnou linku. V kontrolní zóně se vždy objeví zelená linka, která slouží k ověření, že se použil dostatečný objem vzorku, že došlo ke správné vzlínavosti vzorku a jako interní kontrola reagencií. OBSAH SOUPRAVY: - Testovací kazety (obsahují jednorázové plastové pipety) - Sterilní odběrové tampóny - Diluent (ředicí roztok pro vzorky) - Testovací zkumavky nebo lahvičky - Návod k použití - Certifikát kontroly balení - RSV pozitivní kontrola (tampón) 1

2 POTŘEBNÝ MATERIÁL NEDODÁVANÝ SE SOUPRAVOU: - Jednorázové rukavice - Odběrové nádoby pro vzorky - Stopky - Třepačka nebo vortex SBĚR A PŘÍPRAVA VZORKŮ: Vzorky nosních výtěrů: - Vložte tampon skrz nosní dírku do zadní části nosu - Rotačním pohybem tamponu získejte infikované buňky - Pro získání optimálního vzorku opakujte postup odběru i z druhé nosní dírky Vzorky nosních aspirátů (sací zařízení, sterilní odsávací katétr): - Nakapejte několik kapek fyziologického roztoku do každé nosní dírky - Umístěte katétr přes nosní dírku do zadního nasopharynxu - Jemně odsajte. Rotačním pohybem pomalu odstraňte katetr. - Pro získání optimálního vzorku opakujte postup odběru i z druhé nosní dírky Vzorek odešlete okamžitě do laboratoře (citlivost testování se snižuje v průběhu času) Před testováním mohou být skladovány v lednici při 2-8 C po dobu 8 hodin. PRACOVNÍ POSTUP: Před testováním nechte kazety, vzorky a kontroly vytemperovat na laboratorní teplotu (15-30 C). Neotvírejte obal, dokud nejste připraveni provést test. Postup pro vzorky nosních výplachů a aspirátů (viz obrázek 1): Pro každý vzorek použijte novou pipetu a testovací zkumavku. 1. Do testovací zkumavky nebo lahvičky aplikujte 6 kapek nosního výplachu nebo aspirátu. 2. Přidejte do zkumavky 9 kapek ředícího roztoku pro vzorky. Důkladně promíchejte na třepačce nebo vortexu po dobu 1 minuty. 3. Vyjměte testovací kazetu ze sáčku a okamžitě ji použijte. Pro každý test použijte novou kazetu. Aplikujte 4 kapky roztoku z testovací zkumavky do okénka pro vzorky (S). Spusťte stopky. Po 10 minutách odečtěte výsledek. Obrázek 1: Postup pro nosní aspirát nebo výplach Přidejte 6 kapek nosního aspirátu Přidejte 9 kapek ředícího roztoku pro vzorky Přidejte 4 kapky roztoku Postup pro vzorky nosních výtěrů (viz obrázek 2): 2

3 Pro každý vzorek (výtěr) použijte novou pipetu a testovací zkumavku. 1. Do testovací zkumavky nebo lahvičky přidejte 15 kapek ředícího roztoku pro vzorky a vložte do ní odběrový tampon. 2. Promíchejte roztok a vytlačte z odběrového tamponu co nejvíce tekutiny. Tampon zlikvidujte. 3. Vyjměte testovací kazetu ze sáčku a okamžitě ji použijte. Pro každý test použijte novou kazetu. Aplikujte 4 kapky roztoku z testovací zkumavky do okénka pro vzorky (S). Spusťte stopky. Po 10 minutách odečtěte výsledek. Obrázek 2: Postup pro nosní výtěr Přidejte 15 kapek ředícího roztoku pro vzorky Ponořte odběrový tampon Aplikujte 4 kapky roztoku V případě, že vzorek nevzlíná po membráně, promíchejte plastovou pipetou vzorek v aplikačním okénku pro vzorek (S). Pokud to nepomůže, aplikujte jednu nebo maximálně dvě kapky ředícího roztoku až uvidíte, že tekutina vzlíná přes výsledkovou zónu. INTERPRETACE VÝSLEDKŮ: POZITIVNÍ: Ve výsledkové zóně se objeví dvě linky. Červená testovací linka je označena jako (T) a zelená kontrolní linky jako (C) (viz obrázek 3) NEGATIVNÍ: V kontrolní zóně se objeví pouze jedna zelená linka (označeno jako (C)). NEPLATNÝ: Test je neplatný, pokud se v kontrolní zóně neobjeví zelená linka bez ohledu na přítomnost červené linky ve výsledkové zóně. Pozn.: Nejčastějšími příčinami selhání testu jsou: nedostatečná koncentrace vzorku, nesprávný pracovní postup nebo poškození reagencií. Zkontrolujte pracovní postup a opakujte test s novou testovací sadou. Pokud potíže přetrvávají, kontaktujte svého dodavatele. Obrázek 3: POZITIVNÍ NEGATIVNÍ NEPLATNÝ NEPLATNÝ POZNÁMKA K INTERPRETACI VÝSLEDKU: Intenzita červené linky ve výsledkové zóně (T) závisí na koncentraci antigenů ve vzorku. Nicméně tímto testem nelze kvantitativně stanovit množství antigenu ani jeho nárůst v průběhu onemocnění. 3

4 PLATNOST TESTU: Test obsahuje vnitřní kontrolu testu: V kontrolní zóně (C) se objeví zelená linka. Potvrzuje dostatečný objem vzorku a správný průběh testu. OMEZENÍ TESTU: - RSV test pouze indikuje přítomnost RSV ve vzorku (kvalitativní detekci) a měl by být použit pouze pro detekci antigenů RSV z nosních vzorků (z výtěru, aspirátu nebo výplachu). Tímto testem nemůže být stanovena ani kvantitativní hodnota, ani míra zvýšení koncentrace RSV antigenů. - Pokud je výsledek testu negativní a klinické symptomy přetrvávají, doporučuje se dodatečné testování za použití jiných klinických metod. Negativní výsledek nevylučuje možnost infekce RSV. - Tento test slouží pouze k pravděpodobné diagnóze infekce Respiračním syncytiálním virem. Potvrzení infekce musí být provedeno lékařem poté, co byly vyhodnoceny všechny klinické a laboratorní nálezy. OČEKÁVANÉ HODNOTY: RSV je obecně považován za nejčastější příčinou pneumonií, bronchiolitidy a tracheobronchitidy u kojenců a malých dětí. Způsobuje v % případů pneumonie u starších osob v zimním období. SKLADOVÁNÍ A STABILITA: Skladujte zabalené v neporušeném obalu buď při pokojové teplotě nebo v chladničce (2-30ºC). Test je stabilní do data expirace na obalu. Test musí zůstat v uzavřeném obalu až do doby použití. Nezmrazujte. BEZPEČNOSTNÍ OPATŘENÍ: - Pouze pro in vitro diagnostiku. - Nepoužívejte po uplynutí exspirační doby. - Test by měl zůstat v uzavřeném obalu až do použití. - Test nepoužívejte, pokud je hliníkový obal porušený. - Dodržujte správnou laboratorní praxi, používejte ochranný oděv, ochranné rukavice likvidaci používání nejezte, nepijte a nekuřte v pracovní oblasti. - Všechny vzorky by měly být považovány za potenciálně nebezpečné a zacházejte s nimi stejným způsobem jako s infekčním materiálem. - Odpad likvidujte jako biologický infekční odpad v souladu s příslušnými předpisy. - Test musí být proveden do 2 hodin od otevření zataveného sáčku. ÚČINNOST TESTU: Citlivost a specifita V souladu s instrukcemi k použití této sady byly testovány různé extrakty z virových kultur v různých ředěních. Detekce RSV vykazovala ve srovnání s jinými rychlými komerčními testy 95% citlivostv (BinaxNow RSV, Alere) a specifitu >99%. Cross-reaktivita Bylo provedeno vyhodnocení křížové reaktivity RSV testů. Nebyla zjištěna křížová reaktivita s běžnými respiračními patogeny, organismy a dalšími látkami občasně přítomných v nosních vzorcích: Influenza typu A a B, Adenovirus. REFERENCE: 4

5 1. BARENFANGER et al., Clinical and Financial Benefits of Rapid Detection of Respiratory Viruses: an Outcomes Study. Journal of Clinical Microbiology. August 2000, Vol 38 No 8, p POUŽITÉ SYMBOLY: Určeno pro diagnostiku in vitro Číslo šarže (LOT) Čtěte návod k použití Control+ Pozitivní kontrola Uchovejte v suchu Teplotní omezení Obsahuje dostatečné množství surovin pro <n> testů Výrobce Datum exspirace DIL DILUENT (ředící roztok) Poslední revize tohoto návodu: 10/2014 5