Rapid-VIDITEST RSV. (Jednokrokový kazetový test pro in vitro diagnostiku Respiračního syncytiálního viru z nosních výtěrů, výplachů a aspirátů)

Transkript

1 Rapid-VIDITEST RSV (Jednokrokový kazetový test pro in vitro diagnostiku Respiračního syncytiálního viru z nosních výtěrů, výplachů a aspirátů) Návod k použití soupravy Výrobce: VIDIA spol. s r.o., Nad Safinou II 365, Vestec, Jesenice u Prahy, Tel: , Fax: , objednavky@vidia.cz, Web: POUŽITÍ: Rapid-VIDITEST RSV je jednokrokový barevný imunochromatografický test pro kvalitativní stanovení antigenů Respiračního syncytiálního viru. Je určen ke stanovení antigenu z nosních výtěrů, výplachů a aspirátů. ÚVOD: Respirační syncytiální virus (RSV) je nejčastějším původcem bronchitidy a pneumonie u dětí do 1 roku. Onemocnění obvykle začíná horečkou, rýmou, kašlem a dušností. Závažná infekce dolních cest dýchacích se může objevit v kterémkoliv věku, zvláště mezi staršími lidmi a osobami s oslabeným srdcem, plícemi a imunitním systémem. RSV se šíří kapénkovou infekcí, při blízkém kontaktu s nakaženou osobou nebo s kontaminovanými předměty. PRINCIP TESTU: Rapid-VIDITEST RSV je jednokrokový barevný imunochromatografický test pro kvalitativní stanovení antigenů Respiračního syncytiálního viru. Na testovacích zónách membrány kazety jsou navázány myší monoklonální protilátky proti virovým antigenům. V průběhu testování vzorek reaguje s barevným konjugátem, který byl imobilizovaný na membráně (anti-rsv myší monoklonální protilátky červená mikrosféra). Směs pak kapilárním efektem vzlíná vzhůru po membráně. V případě pozitivního výsledku je barevný konjugát zachycen specifickými protilátkami, což se ve výsledkové zóně projeví jako barevná linka. Směs pak vzlíná dále po membráně k imobilizovaným protilátkám v kontrolní zóně, kde se vždy na konci testu objeví zelená linka. Přítomnost zelené linky ověřuje: 1) že se použil dostatečný objem vzorku, 2) že došlo ke správné vzlínavosti vzorku, 3) interní kontrolu reagencií. 1

2 OBSAH SOUPRAVY: - Testovací kazety (obsahují jednorázové plastové pipety) - Sterilní odběrové tampóny - Roztok B (ředicí roztok pro vzorky) - Testovací zkumavky - Návod k použití - Certifikát kontroly balení POTŘEBNÝ MATERIÁL NEDODÁVANÝ SE SOUPRAVOU: - Jednorázové rukavice - Stopky SBĚR A PŘÍPRAVA VZORKŮ: Vzorky nosních výtěrů: Vzorky odebírejte sterilním vatovým tampónem z jedné nosní dírky. Zasuňte vatový tampón asi 3 cm hluboko a rotačním pohybem tampónu otřete stěnu nosní dírky. Test by měl být proveden co nejdříve po výtěru. Vzorky nosních výplachů a aspirátů Dospělí pacienti: Do nosu vložte irigátor a celou dutinu důkladně propláchněte fyziologickým roztokem (2,5ml). Irigátorem otáčejte tak, aby se tekutina dostala skutečně do všech míst. Předkloňte hlavu pacienta, aby mohl mukózní roztok z dírky dobře vytékat. Vzorek zachyťte do čisté odběrové nádoby. Totéž opakujte i pro druhou nosní dírku. Děti: Fyziologický roztok vleže nakapejte do nosu, odsajte vzorek výplachu a přeneste do čisté odběrové nádoby. Stejný postup opakujte pro obě nosní dírky. Vzorky by měly být zpracovány co nejdříve po odběru. Před testováním mohou být skladovány v lednici při 2-4 C po dobu 8 hodin. PRACOVNÍ POSTUP: Před testováním nechte testovací kazetu, vzorky nosního výtěru nebo výplachu a kontroly vytemperovat na laboratorní teplotu (15-30 C). Neotvírejte obal, dokud nejste připraveni provést test. Postup A: pro vzorky nosních výtěrů 1. Do testovací zkumavky aplikujte 15 kapek roztoku B (1). Vložte do ní odběrový tampon. 2. Krouživým pohybem tamponu důkladně roztok promíchejte. Třete tampon o stěnu zkumavky a nakonec z něj stlačením plastové zkumavky vytlačte co nejvíce tekutiny (2). Kvalita testu závisí na tom, jak dobře bude vzorek z tamponu extrahován. Tampon likvidujte jako infekční odpad. 3. Vyjměte testovací kazetu ze sáčku a položte ji na vodorovnou podložku. Do oválného okénka, které je označeno šipkami, aplikujte 5-6 kapek roztoku z testovací zkumavky (3). 4. Na každý vzorek použijte novou pipetu. 5. Po 10 minutách odečtěte výsledek (objeví se barevné linky). 2

3 Přidejte 5-6 kapek směsi S (1) Přidejte 15 kapek reagencie B (2) Vložte tampón a extrahujte z něj maximum tekutiny Kontrolní zóna C Výsledková zóna T (3) Vyčkejte 10 minut Postup B: pro vzorky nosních výplachů a aspirátů: 1. Do testovací zkumavky aplikujte 6 kapek nosního výplachu (1) nebo aspirátu. 2. Přidejte do zkumavky 3 kapky roztoku B (2). Opakovaným nasáváním roztoku do pipety směs důkladně promíchejte (3). 4. Vyjměte testovací kazetu ze sáčku a položte ji na vodorovnou podložku. 5. Do oválného okénka, které je označeno šipkami, aplikujte 5-6 kapek roztoku z testovací zkumavky (4). Na každý vzorek použijte novou pipetu. 6. Po 10 minutách odečtěte výsledek (objeví se barevné linky). S Přidejte 5-6 kapek (1) Přidejte 6 kapek nosního aspirátu (2) Přidejte 3 kapky reagencie B (3) Pomocí pipety promíchejte vzorek (alespoň 10x) Kontrolní zóna C Výsledková zóna T (4) Vyčkejte 10 minut 3

4 INTERPRETACE VÝSLEDKŮ: Vzorky se aplikují do oválného okénka označeného S (sample vzorek), výsledky se odečítají v obdélníkovém okénku vprostřed kazety označeném C (kontrolní zóna) a T (výsledková zóna). Zelená Červená Červená RSV negativní RSV pozitivní Neplatný Neplatný Negativní: V kontrolní zóně C se objeví pouze jedna zelená linka. Výsledková zóna T zůstane čistá. RSV Pozitivní: Kromě zelené linky v kontrolní zóně C se objeví také červená linka ve výsledkové zóně T. Neplatný: Test je neplatný, pokud se v kontrolní zóně C neobjeví zelená linka bez ohledu na přítomnost červené ve výsledkové zóně T. Nejčastějšími příčinami selhání testu jsou: nedostatečná koncentrace vzorku, nesprávný pracovní postup nebo poškození reagencií. Zkontrolujte pracovní postup a opakujte test s novou testovací sadou. Pokud potíže přetrvávají, kontaktujte svého dodavatele. Poznámka k interpretaci výsledku: Intenzita červené barevné linky v místě označeném T závisí na koncentraci antigenů ve vzorku. Nicméně tímto testem nelze kvantitativně stanovit množství antigenu ani jeho nárůst v průběhu onemocnění. PLATNOST TESTU: Test je platný pouze v případě, když se v kontrolní zóně objeví zelená linka. V testu je použit interní standard. Zelená linka, která se objevuje v kontrolní zóně, je vnitřní kontrolou testu. Potvrzuje dostatečný objem vzorku a správný průběh testu. 4

5 OMEZENÍ TESTU: - Test musí proběhnout do 2 hodin od otevření zataveného obalu. - Tento test slouží pouze k pravděpodobné diagnóze streptokokové infekce. Potvrzení infekce musí být provedeno lékařem poté, co byly vyhodnoceny všechny klinické a laboratorní nálezy. - Rapid-VIDITEST RSV může být použit pouze pro nosní výtěry, výplachy a aspiráty. Výsledky při použití výtěrů z jiných částí těla nebo při použití jiných vzorků, jako jsou sliny, hlen nebo moč, nemohou být uznány platnými. Kvalita testu záleží na kvalitě odebraného vzorku. Vzorky proto odebírejte s náležitou přesností. - Při použití nekvalitních vzorků, nebo vzorků s příliš nízkou koncentrací antigenu může dojít k falešné negativitě výsledku. - Pakliže je vzorek příliš mukózní, nemusí dojít k jeho správné vzlínavosti. V tomto případě přidávejte přímo ke vzorku v oválném okénku (S) na kazetě diluent (roztok B), dokud neuvidíte tekutinu vzlínat po membráně v testovací a kontrolní oblasti kazety. ÚČINNOST TESTU: Citlivost V souladu s instrukcemi k použití této sady byly testovány různé extrakty z virových kultur v různých ředěních. Detekce RSV vykazovala ve srovnání s jinými rychlými komerčními testy >95% citlivost. Specifita Použití myších monoklonálních protilátek Rapid-VIDITEST RSV zaručuje při detekci antigenů RSV vysoký stupeň specifity. SKLADOVÁNÍ A STABILITA: Skladujte v originálním obalu při teplotě 2-30 C. Test je stabilní do data exspirace uvedeného na obalu. Nezmrazujte. BEZPEČNOSTNÍ OPATŘENÍ: - Pouze pro in vitro diagnostiku - Nepoužívejte po uplynutí exspirační doby - Se vzorky manipulujte jako s potenciálně infekčním materiálem. Na každý vzorek musí být použit nový odběrový tampón - Test nepoužívejte, pokud je hliníkový obal porušený - Odpad likvidujte jako biologický infekční odpad v souladu s příslušnými předpisy. 5

6 REFERENCE: 1. ANN R. FALSEY and EDWARD E. WALSH. Respiratory Syncytial Infection in Adults, Clinical Microbiology Reviews, July 2000, Vol. 13, No.3, p DIANE C. HALSTEAD, SANDRA TODD, and GALE FRITCH; Evaluation of Five Methods for Respiratory Syncytial Virus Detection Journal of Clinical Microbiology, May 1990, Vol. 28, No. 5; p POUŽITÉ SYMBOLY: Určeno pro diagnostiku in vitro Datum exspirace Číslo šarže (LOT) Výrobce Poslední revize tohoto návodu: 04/2013 6