Stanovení specifického IgE proti alergenovým komponentám a jeho význam pro klinickou praxi.

Transkript

1 Stanovení specifického IgE proti alergenovým komponentám a jeho význam pro klinickou praxi. synlab czech s.r.o. MUDr. Stanislava Štěpánová Honzová stanislava.honzova@synlab.cz

2 Alergenové extrakty nebo Alergenové komponenty ( molekulární alergologie ) výhody nevýhody rizika

3 Alergenové extrakty - nevýhody a rizika připravovány z různých biologických materiálu příměs nealergenních proteinů nestabilita některých alergenů - (degradace během přípravy ) některé důležité alergenové komponenty mohou chybět!!!! obsah alergenů může kolísat obtížná standardizace nepřesnost diagnózy

4 Alergenové komponenty ( molekulární alergologie ) genetická informace většiny běžných alergenů je známa rekombinantní ( r ) nebo vysoce purifikované alergeny ( n )

5 Alergenové komponenty ( molekulární alergologie ) hlavní využití rekombinantních a purifikovaných alergenů : přesné určení alergenů, které způsobily onemocnění. identifikace příčinného alergenu na molekulární úrovni.

6 Alergenové komponenty ( molekulární alergologie ) výhoda přesně definované zaručena standardizace

7 Alergenové extrakty výhoda Mohou zachytit specifické IgE proti alergenům ( komponentám ), které zatím nejsou dostupné pro dg.

8 Značení alergenů Hodnoty pro lidi, zvířata a životní prostředí odvozeno z latinských názvů - Arašíd Arachis hypogaea Ara h 1, Ara h 2, Ara h 3. - Broskev Prunus persica Pru p 1, Pru p 2, Pru p 3. - Kočka domácí Felis domesticus Fel d 1..

9 Hlavní rodiny alergenů : Zásobí proteiny semen a ořechů ( storage ) LTP - nespecifické lipid transfer proteiny Proteiny PR- 10 ( Bet v 1 homologie) Profiliny Polcalciny ( calcium - binding proteiny) CCD Lipocaliny Parvalbuminy Tropomyosiny Sérové albuminy

10 Alergenové extrakty - komponenty Ara h 1 Ara h 2 Ara h 3 Ara h 5 Ara h 6 Ara h 8 Ara h 9 Ara h 10 Ara 11??

11 Alergenové extrakty - komponenty Ara h 1 Ara h 2 Ara h 3? Ara h 5 Ara h 6 Ara h 8 Ara h 9?

12 Alergenové extrakty - komponenty Ara h 1 Ara h 2 Ara h 3? Ara h 5 Ara h 6 Ara h 8 Ara h 9 - LTP?

13 Alergenové extrakty - komponenty Ara h 1 Ara h 2 Ara h 3? Ara h 5 - profilin Ara h 6 Ara h 8 - PR-10 Ara h 9?

14 Hlavní využití rekombinantních a purifikovaných alergenů 1. Posouzení rizika u pacientů s potravinovou alergií 2. Odlišení primární alergie a zkříženě reagující 3. Indikace alergenové imunoterapie

15 1) Riziko závažné alergické reakce potravinová alergie labilní proteiny Stabilita proteinu stabilní proteiny.

16 1) Riziko závažné alergické reakce potravinová alergie labilní proteiny stabilní proteiny Stabilita proteinu.

17 1) Riziko závažné alergické reakce potravinová alergie labilní proteiny stabilní proteiny Stabilita proteinu profilin PR - 10 LTP Zásobní proteiny.

18 Burák Arachis hypogaea nestabilní proteiny stabilní proteiny profilin PR - 10 LTP Zásobní proteiny Profilin Ara h 8 Ara h 9 Ara h 1, 2, 3,6 Ara h 5. 18

19 Vlašský ořech Juglans regia nestabilní proteiny stabilní proteiny profilin PR - 10 LTP Zásobní proteiny Jug r 5 Jug r 3 Jug r 1, 2, 4.

20 Ovoce Rosaceae nestabilní proteiny stabilní proteiny profilin PR - 10 LTP Zásobní proteiny Profilin Mal d 1 Mal d 3 Mal d 4, Pru p 4 Pru p 1 Pru p 3

21 Alergenové komponenty a riziko anafylaxe zdroj vysoké riziko nízké riziko Burák Ara h 1 Ara h 2 Ara h 3 Ara h 6 Ara h 9 Ara h 8 Profilin CCD Lísk. oříšek Cor a 8 Cor a 9 (Cor a 14) ( Cor a 1 ) Profilin CCD Vlaš.ořech Jug r 1 Jug r 2 Jug r 3 Profilin CCD Sója Gly m 5 Gly m 6 (Gly m 4) Profilin CCD Ovoce - Rosaceae Pru p 3 Mal d 3 Pru p 1 Mal d 1 Profilin CCD Pšenice Tri a 14 Tri a 19 Profilin CCD

22 Hlavní využití rekombinantních a purifikovaných alergenů 2) Odlišení primární alergie (senzibilizace) a zkřížené reakce vysvětlit pacientovy potíže vysvětlit laboratorní nálezy upozornit na možná rizika

23 PR 10 rodina - Bet v 1 homologie - primární senzibilizace - hlavní alergen břízy zkřížená reakce s řadou potravin rostlinného původu ovoce Mal d1 stromové ořechy Cor a 1 zelenina Dau c 1 Hodnoty pro lidi, zvířata a životní prostředí

24 ovoce - Rosaceae jablko Mal d 1 hruška Pyr c 1 třešeň Pru av 1 meruňka Pru ar 1 broskev Pru p 1 kiwi Act c 8 zelenina - Apiaceae celer Api g1 mrkev Dau c 1 petržel Pet c 1 ostatní lískový oříšek Cor a 1 sója Gly m 4 burák Ara h 8 Bet v 1 - homologie

25 Alergeny příbuzné Bet v 1 (PR-10) Stromy Ovoce Ořechy a Luštěniny Zelenina Bříza Jablko Lískový ořech Mrkev Olše Hruška Vlašský ořech Celer (pelyněk) Buk Broskev Mandle Petržel Kaštan Třešně Arašídy Chřest Líska Kiwi Sója Rajče Habr Meruňka Fazole Dub Jahody Hrách

26 Hlavní využití rekombinantních a purifikovaných alergenů 3) Identifikace příčinného alergenu u specifické alergenové imunoterapie - Vhodné pro indikaci alergenové imunoterapie - Odhalení zkřížených reakcí ( cross- reaktivita ) - Určení závažnosti alergické reakce

27 Hlavní využití rekombinantních a purifikovaných alergenů 3) Identifikace příčinného alergenu u specifické alergenové imunoterapie bříza bojínek hmyzí jedy roztoči, kočka..

28 Komponenty pylu břízy a specifická imunoterapie: identifikace pravé alergie na pyl břízy (Bet v 1) křížová reakce (Bet v 2, Bet v 4, Bet v 6) výběr vhodných pacientů pro SIT Bet v 1 SIT úleva od symptomů vedlejší křížově reagující alergeny problematický výsledek SIT

29 Pyl břízy návrh testování 2. 1.

30 Rekombinantní alergeny a pylová alergie - trávy bojínek luční Phleum pratensae Phl p 1.. Phl p 12 Hlavní alergen bojínku reaguje většina pacientů Phl p 1 Phl p 5

31 Rekombinantní alergeny a hmyzí alergie Dostupné alergeny : 1) včela Apis mellifera Api m 1 Api m 10 2) vosa - Vespula vulgaris Ves v 1 Ves v 5

32 Jed včely a vosy/vosíka návrh testování Více než 50 % pacientů má pozitivní testy na extrakty včelího a vosího jedu - primární senzibilizace? Dvojí pozitivita bez klinického významu??? ( např. zkřížená reaktivita cukerné složky ( CCD) v přírodních extraktech

33 Jed včely a vosy/vosíka návrh testování 1) ImmunoCAP extrakty včela i1 + vosa i3 + ( vosík i77 ) Tryptáza 2) ImmunoCAP komponenty včela : rapi m1 vosa/vosík: rves v1, rves v 5 rapi m10 rpol d5 rapi m1 a/nebo r Api m 10 pozitivní * rapi m1 a/nebo rapi m10 pozitivní rves v1 a/nebo Ves v5 a/nebo Pol d5 pozitivní rves v 1 a/nebo rves v5 a/nebo rpol d5 pozitivní 3) Indikace SIT včela * sensitivita 86,8 % včela + vosa/vosík vosa/vosík

34 Laboratorní stanovení spec. IgE alergenové komponenty 1. Jednotlivě ImmunoCAP, Immulite 2. Multiplex ImmunoCAP ISAC ( 112 alergenových komponent současně )

35 rekombinantní alergeny a roztoči Dematophagoides pteronyssinus Der p 1 Der p 2 Dermatophagoides farinae Der f 1 Der f 2 Tropomyosin Der p 10

36 Kazuistika Ž.F Poslán na vyšetření praktickým lékařem pro celkovou alergickou reakci RA : nevýznamná OA : vážněji nestonal, odborně nikde sledován není, nemocnost běžná pravidelně sportuje, zátěž snáší dobře NO : V únoru 2013 po požití krevet do několika hod. otoky v obličeji, kopřivka po celém těle. Vzal si Zyrtec, stav se začal zlepšovat. Dechové potíže ani trávicí potíže neměl. Při požití krevet před tím nikdy dříve reakci neměl. Řadu let ( asi od 15 ) v letních měsících ( květen-srpen) občasné dušnosti, pohotovostně Berodual - polinosis? Léčen nikde není.

37 Ž.F kožní prick testy ( Stallergenes) neg. kontrola 0 Olše Alnus glutinosa 0 pozit.kontrola 7/20 Jasan Fraxinus excelsior 0 směs peří 0 Bojínek Phleum pratense 3/5 Derm. pteron. 5/15 směs 4 obilniny 2/5 Derm. fariane 5/15 Srha Dactylis glomerata 6/10 Alternaria sp 5/15 Žito Secale cereale 4/10 Aspergilus sp. 0 Pelyněk Artemisia vulgaris 0 Cladosporium sp. 0 Ambrosie Ambrosia elatior 0 Penicilium sp. 0 Kočka 0 Bříza Betula alba 0 Pes 0

38 Ž. F Hodnoty pro lidi, zvířata a životní prostředí

39 Alergenové komponenty a potraviny Tropomyosiny hlavní alergen bezobratlých zkřížená reaktivita mezi roztoči, švábi a korýši, měkkýši, shoda více než 90 % (krab, krevety ) vzhledem ke své struktuře velmi odolný!!!! vaření, trávení

40 Alergenové komponenty a potraviny Tropomyosin roztoči - Der p 10 pacienti s alergií na roztoče domácího prachu Der p 10 negativní - primární senzibilizace Der p 1 a/nebo Der p 2 Der p 10 pozitivní - reakce na jiné alergeny ( Der p 5, Der p 7, Der p 21 ), ale Der p 1 a Der p 2 negativní Der p 10 diagnostický znak pro pacienty s alergií na roztoče domácího prachu senzibilizovaných na jiné roztočové alergeny než Der p 1 a Der p 2 důležité při indikaci alergenové vakciny!!!!

41 Diagnostika pomocí alergenových komponent : Podezření na alergickou reakci I. typu ( IgE ) Předpoklad - přítomnost IgE v periferní krvi Klinické manifestace - astma, alergická rýma, atopický ekzém, potravinová alergie

42 Databáze alergenů : WHO / IUIS (International Union of Immunological Societies ) ImmunoCAP Allergen Information - Allergen Components - ImmunoCAP Molecular Allergology