pro kvalitativní stanovení Benzodiazepinů v lidské moči. Pouze pro profesionální in vitro diagnostiku. Zamýšlené použití DrugControl Benzodiazepines TEST je rychlý vizuální test pro kvalitativní detekci benzodiazepinů ve vzorcích lidské moči s cut-off koncentrací uvedenou v tabulce : Kalibrátor Cut-off (ng/ml ) 008C078 100 008B102 Oxazepam 200 008A091 300 Úvod Benzodiazepiny jsou léky, které jsou často předepisovány na symptomatickou léčbu úzkosti a poruch spánku. Účinkují prostřednictvím specifických neurochemických receptorů gama amino máselné kyseliny (GABA). Benzodiazepiny nahradily barbituráty při léčbě úzkosti a nespavosti, protože jsou bezpečnější. Benzodiazepiny jsou také používány jako sedativa při některých lékařských, chirurgických úkonech a pro léčbu abstinenčních příznaků při léčbě alkoholizmu. Při pravidelném užívání po delší dobu je riziko fyzické závislosti na benzodiazepinu. Náhlé zastavení užívání může způsobit takové symptomy, jako jsou poruchy spánku, gastrointestinální potíže, pocity nevolnosti, ztráty chuti k jídlu, pocení třes, slabost, úzkost a změny vnímání. Močí je vylučováno pouze minimální, stopové množství benzodiazepinu v nezměněné podobě (méně než 1 % ), jinak se benzodiazepiny vylučují močí ve formě konjugované drogy. Detekční lhůta v moči je 3-7 dní. Princip testu DrugControl Benzodiazepines TEST je imunologický test založený na principu kompetitivní vazby. Drogy, které můžou být přítomny ve vzorku moči, soutěží o vazebná místa na protilátce s konjugátem droga-protein, který je imobilizován v oblasti T testu. Během testování vzorek moči vzlíná vzhůru v důsledku kapilárních sil. Pokud jsou benzodiazepiny přítomny v moči pod hranicí cut-off, nedojde k nasycení vazebních míst značené protilátky v testu. Volné částice konjugátu zlato protilátka budou zachyceny konjugátem droga-protein,který je imobilizován v testovací lince (T) za vzniku viditelné barevné linie v zóně T. Barevná linie se nevytvoří, pokud je benzodiazepinu ve vzorku více než cut-off. Zaplní totiž všechna vazebná místa na protilátce a projde chromatografickou membránou beze změny. Proto pozitivní nález znamená nepřítomnost linie v oblasti T. Pro kontrolu správného provedení testu je systém interní kontroly. Kontrolní červená linie v oblasti, označené C se musí objevit vždy. Potvrzuje správnou funkci testu a dostatečný objem vzorku moče. Reagencie obsahuje vázané částice králičích a kozích protilátek. Množství každého antigenu na reagenčním proužku je do 0,0015 mg. Doporučení pro správné zacházení 1. pouze pro profesionální in vitro diagnostiku 2. nepoužívat po uplynutí doby expirace 3. testovací kazeta musí zůstat v uzavřeném obalu až do doby použití 4. nepoužívat test v případě poškození původního obalu 5. před testováním pozorně prostudovat návod 6. nejíst, nepít, nekouřit v místě, kde se manipuluje se vzorky a testovacími soupravami 7. testovací proužek, který se nachází v plastovém pouzdře obsahuje látky živočišného původu u kterých nelze zcela garantovat úplnou absenci přenosných patogenních činitelů je doporučeno zacházet s testem jako s potencionálně infekčním a dodržovat obvyklá bezpečnostní opatření ( nejíst, nevdechovat...) 8. test nepoužívat opakovaně 9. vlhkost a teplota může nepříznivě ovlivnit výsledky testu 10. nepotřísnit nitrocelulózový proužek testu vzorkami moče 11. použitý test a vzorky likvidovat v souladu s předpisy ( státními, místními,firemními ) pro mikrobiologický, potencionálně infekční materiál 12. zabránit zkřížené kontaminaci vzorků moči pro každý test použít nové odběrové pomůcky 13. zacházet se vzorky jako s infekčními látkami, dodržujte zavedená opatření proti mikrobiologickým rizikům v průběhu celého testování a při likvidaci odpadů postupujte podle standardních postupů, noste ochranný oděv ( laboratorní plášť), jednorázové rukavice a ochranné brýle
Skladování a stabilita DrugControl Benzodiazepines TEST by měl být skladován při teplotě 2-30 C. je stabilní do data expirace uvedeného na obalu. musí zůstat v původním neporušeném obalu až do doby použití. Soupravy byměly být uskladněny mimo dosah přímého slunečního světla. Ochránit soupravy před znečištěním. Nepoužívat v případě, že je podezření na mikrobiální kontaminaci nebo precipitaci, protože může vést k falešným výsledkům. Chraňte před mrazem. Nepoužívejte po datu expirace. Odběr vzorků a skladování DrugControl Benzodiazepines TEST je použitelný pouze pro vzorky lidské moči Moč lze odebrat v kteroukoliv denní dobu Vzorky moče musí být odebrány do čistých, suchých odběrových nádob. Zakalené vzorky musí být centrifugovány, filtrovány nebo sedimentovány, použít pouze čirý supernatant. ování provést ihned po odebrání vzorku. Vzorky nenechávat delší dobu při pokojové teplotě. Vzorky moči mohou být skladovány při teplotě 2 8 C po dobu až 2 dnů. Pro dlouhodobé skladování udržujte vzorky při teplotě -20 C. Před testováním vytemperujte vzorky na pokojovou teplotu. Zmrazené vzorky musí být úplně rozmraženy a dobře promíchány. Vzorky opakovaně nezmrazujte a nerozmrazujte. Pokud mají být vzorky přepravovány, zabalte je v souladu se všemi platnými předpisy pro přepravu etiologických činitelů ( činitel vyvolávající nemoc ) Materiál,který je součástí dodávky v sáčku Jednorázové kapátko na vzorek v sáčku Návod Materiál doporučený, který není součástí dodávky nádobka na odběr vzorků časovač Návod k použití Napipetujte vzorek moče do jamky pro vzorek S DrugControl Benzodiazepines TEST u Provedení testu 1. Před testováním vytemperujte vzorek moči (i kontrolní roztoky ) na pokojovou teplotu (15-30 C). 2. v sáčku vytemperovat na pokojovou teplotu. 3. Vyjmout test a použít během jedné hodiny. 4. Umístit test na čistou vodorovnou plochu. 5.Držet kapátko svisle a kápnout 3 plné kapky vzorku moče do jamky (portu) S a spustit časovač. Zabránit vzniku bublin v portu pro vzorek (S). 6. Výsledek odečtěte po uplynutí 5 minut, neinterpretujte výsledky po uplynutí 8 minut.
Interpretace výsledků Pozitivní Negativní Neplatný pozitivní negativní * Zobrazí se jedna červená linie v oblasti C. V testovací oblasti T se nezobrazí červená linie. Tento pozitivní výsledek znamená, že koncentrace alespoň jedné z látek detekovatelných pomocí tohoto testu překročila mezní koncentraci cut-off ( cut-off koncentrace viz tab. na straně 3) Zobrazí se dvě červené linky - jedna červená linie v oblasti C a další, červená nebo růžová v oblasti T. Tento negativní výsledek znamená, že koncentrace látek zjistitelných pomocí tohoto testu jsou pod cut-off koncentrací, nebo že nejsou přítomny vůbec. ( Cut-off koncentrace viz tab. na straně 3.) neplatný V kontrolní oblasti C se neobjeví červená linka. Pravděpodobně nebylo použito dostatečné množství vzorku, nebo technika provedení testu nebyla v souladu s návodem. Přečtěte si návod a opakujte test s novou testovací soupravou. Pokud problém přetrvává, přestaňte používat příslušnou šarži testů a kontaktujte distributora, příp. výrobce. Poznámka : Intenzita barvy v testovací oblasti T se může lišit v závislosti na koncentraci analytu ve vzorku. Proto každý odstín barvy v testovací oblasti považujte za negativní výsledek. Tento test je testem kvalitativním a nestanovuje koncentraci analytu ve vzorku. Kontrola kvality obsahuje vnitřní procesní kontrolu. Když se v kontrolní oblasti C objeví barevná linka je to považováno za pozitivní vnitřní kontrolu správného postupu - potvrzuje to, že bylo použité dostatečné množství vzorku a správná technika testování. Externí kontroly nejsou dodávány s touto sadou, ale v souladu se správnou laboratorní praxí se doporučuje vykonat pozitivní a negativní kontrolu. Omezení testu 1.DrugControl Benzodiazepines TEST je určen pro profesionální využití v in vitro diagnostice pro kvalitativní detekci benzodiazepinů. 2.Tento test poskytuje pouze předběžný analytický výsledek. Pro potvrzení výsledku musí být použita jiná chemická metoda. Preferovanou metodou je plynová chromatografie/hmotnostní spektrometrie (GC/MS). Výsledky testu musí být posuzovány se zřetelem na klinický stav, zejména jedná li se o pozitivní výsledek. 3.Zfalšování, naředění, příměsi bělících prostředků a/nebo kamence (ledku) ve vzorku moče způsobí chybné výsledky nezávisle na použité analytické metodě. Pokud existuje podezření na zfalšování, doporučuje se provést opakovaný test s nově odebraným vzorkem. 4.Technické nebo procedurální chyby, stejně jako jiné látky a faktory mohou interferovat a způsobit falešné výsledky. 5.Pozitivní výsledek znamená přítomnost morfia, ale nevyjádřuje míru intoxikace. 6. Negativní výsledek znamená, že koncentrace morfia je pod úrovní cut-off, nebo že morfium není přítomno vůbec. 7. Tento test nerozlišuje, zda se jedná o drogu, nebo zda morfin pochází z léků. Charakteristiky Přesnost Přesnost DrugControl Benzodiazepines TEST-u byla porovnána s komerčně dostupnými testy se srovnatelnou cutoff koncentrací. Vzorky moči, které byly odebrány od dobrovolníků, kteří prohlásili, že nejsou uživatelé drog byly testovány pomocí testu od Ultimedu a jiným komerčně dostupným testem a shoda byla ve více než 99.9%.
Reprodukovatelnost Reprodukovatelnost DrugControl Benzodiazepines TEST - u byla ověřena na slepých testech provedených na 4 různých místech. Vzorky s koncentrací 50% cut-off byly určeny jako negativní, zatímco vzorky s koncentrací 200% cut-off byly všechny určeny jako pozitivní. Přesnost Přesnost testu byla posouzena pomocí slepých testů s kontrolními roztoky. Kontrolní roztoky s koncentrací 50% cut-off přinesly negativní výsledky, a kontroly s koncentrací 150% cut-off přinesly pozitivní výsledky. Specificita Sloučeniny, uvedené v následující tabulce dávaly pozitivní výsledek DrugControl BENZODIAZEPINES testem za 5 minut po aplikaci : Calibrator/ Related Compounds Cuf off / Limit Value [ng / ml] 008C078 008B102 008A091 Oxazepam 100 200 300 Alprazolam 42 83 250 Bromazepam 208 417 625 Chlordiazepoxide 833 1,667 2,500 Clobazam 21 42 63 Clonazepam 833 1,667 2,500 Clorazepate 1,110 2,220 3,330 Delorazepam - - 2,500 Desalkflurazepam 83 167 250 Diazepam 83 167 250 Estazolam 1,667 3,333 5,000 Fentanyl >100,000 >100,000 - Flunitrazepam 125 250 375 Flurazepam >100,000 >100,000 - Lorazepam 417 833 1,250 Lormetazepam 417 833 1,250 Medazepam >100,000 >100,000 - Midazolam >100,000 >100,000 >100,000 Nitrazepam 8,333 16,667 25,000 Norchlordiazepoxide 83 167 250 Nordiazepam 167 333 500 Prazepam >100,000 >100,000 - Sulindac - - 100,000 Temazepam 21 42 125 Triazolam 1,667 3,332 5,000 Zkřížená reaktivita Žádná z uvedených sloučenin nevykazovala zkříženou reakci při použití DrugControl BENZODIAZEPINES testu ani při koncentraci 100 µg/ml Acetone Chlorpheniramine Hemoglobin Procaine Albumin Creatine Ibuprofen Protonix Amitriptyline Dextromethorphan Imipramine Pseudoephedrine Ampicillin Dextrorphan tartrate Isoproterenol Quinidine Aspartame 4-Dimethyllaminoantiyrine Lidocaine Ranitidine Aspirin Dopamine Methadone Sertraline Benzocaine Erythromycin (+)-Naproxen Trimeprazine Bilirubin Ethanol Oxalic Acid Tyramine
b-phenylethyl-amine Furosemide Penicillin-G Venlafaxine Caffeine Glucose Pheniramine Vitamin C (Ascorbic Acid) Chloroquine Guaiacol Glyceryl Ether Phenothiazine Omezení Není možné ověřit interference všech běžných sloučenin, které by mohly ovlivnit výsledek testu. Zejména pokud pacient užívá dosud neznámou drogu nebo kokteil drog, může se stát, že dojde k zkřížené reakci, která zde nebyla zachycena a ovlivnění výsledku testu. Literatura 1. Baselt RC. Disposition of Toxic Drugs and Chemicals in Man. 2nd ed. Davis: Biomedical Publications; 1982. 2. Hawks RL, Chiang CN, eds. Urine ing for Drugs of Abuse. Rockville: Department of Health and Human Services, National Institute on Drug Abuse; 1986. 3. Substance Abuse and Mental Health Services Administration. Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug ing Programs. 53 Federal Register; 1988. 4. McBay AJ. Drug-analysis technology--pitfalls and problems of drug testing. Clin Chem. 1987 Oct; 33 (11 Suppl): 33B-40B. 5. Gilman AG, Goodman LS, Gilman A, eds. Goodman and Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics. 6th ed. New York: Macmillan; 1980 Tento návod k obsluze je v souladu s nejnovějšími technologiemi. Změny vyhrazeny bez předchozího upozornění! Výrobce : ulti med Products (Deutschland) GmbH Reeshoop 1 22926 Ahrensburg Germany Telefon: +49-4102 80090 Fax: +49-4102 50082 e-mail: info@ultimed.de Distributor: ulti med Products (Belgium) BVBA Honzebroekstraat 137 8800 Roeselare Phone: +32 +51 200 425 Fax: +32 +51 200 449 e-mail: belgium@ultimed.o Distributor ČR : JK-Trading spol.s.r.o., Křivatcová 421/5,150 21 Praha5, tel.: +420 257 220 760 Distributor SK : JK-Trading spol.s.r.o., Mečíkova 30, 841 07 Bratislava, tel.: + 421 264 774 591 Revize českého překladu : 08/2015