VYŠETŘENÍ FETOMATERNÁLNÍ HEMORRHAGIE POMOCÍ Zajíc T. 1, Kamenická H. 2, Kuťková D. 2, Veselá I. 2, Bydžovská I. 3, Zemanová D. 3, Gavendová H. 3, Procházková R. 2 Krajská nemocnice Liberec, a.s. 1 Oddělení klinické mikrobiologie a imunologie; 2 Transfuzní oddělení 3 Gynekologicko-porodnické oddělení
Co to je FMH Fetomaternální hemorrhagie = Průnik fetálních erytrocytů (krve) do oběhu matky Příčiny o o o porod instrumentace (amniocentéza, kordocentéza, obrat zevními hmaty, ) úraz, infekce, poruchy placenty o v řadě případů je však příčina nejasná
Co to je FMH Důsledky: - anemie (objem uteroplacentárního řečiště, časový faktor, stáří plodu, ) - možná aloimunizace matky - hemolytické onemocnění novorozence (plodu) u RhD antigenu stačí 0,1ml plné krve k imunizaci Antigeny AB0 systému jsou na fetálních erytrocytech exprimovány velmi slabě AB0 inkompatibilita při RhD inkompatibilitě může být i výhodou destrukce fetálních erytrocytů přirozenými protilátkami matky Klinicky významná (excesivní) FMH 10ml plné krve = 0,25% fetálních erytrocytů
K čemu je vyšetření FMH o Primárně k určení dávky anti-d IvIg ač se standardně neprovádí V ČR paušální doporučení vaginální porod 250µg anti-d, císařský řez 500µg anti-d Přibližně v 1% porodů je dávkování anti-d IgG nedostatečné ve většině ostatních případů naopak dávka zbytečně vysoká Dostatečná dávka anti-d je 10µg na 1ml plné krve o Jinak objektivizace a kvantifikace FMH možnosti dalšího sledování,
Jak se dá vyšetřovat FMH Rozetový test nepřímý antiglobulinový test Kleihauer-Betke test kyselá eluce Průtoková cytometrie PCR, FISH, stanovení AFP, placentární alkalické fosfatázy,
Vyšetření FMH metodou průtokové cytometrie Fluorescenční značení: RhD (RhD inkompatibilita) HbF (fetální hemoglobin) exprese ve fetálních erytrocytech nižší exprese v mateřských erytrocytech = F-cells (poruchy tvorby globinových řetězců) CA (karbonická anhydráza) exprese postnatálně, v malé míře i v pozdní fázi prenatálního vývoje
Studie v KNL a.s. Iniciativa transfuzního oddělení Cíle: Vyšetření FMH identifikace a kvantifikace FMH vyšetření aloimunizace matky Souprava: FetalCellCount Kit (IQ Products) Cytometr: Cytomics FC500 (Beckman Coulter) Protokol: úvodní promytí, fixace, promytí, permeabilizace, promytí, barvení protilátkami, promytí, měření na cytometru Celkový čas přípravy cca 3 h
Nastavení cytometru FSC, SSC - Log
Nastavení cytometru FSC, SSC - Log
Nastavení cytometru FL1 CA nízké zesílení Pupečník Matka Směs
Nastavení cytometru FL1 CA vyšší zesílení
Nastavení cytometru FL2 - HbF Nižší zesílení Vyšší zesílení
Nastavení cytometru Kompenzace FL1 FL2 = 3% FL2 FL1 = 6,3%
Použití směsi mateřská a pupečníková krev
Použití směsi mateřská a pupečníková krev
Použití směsi mateřská a pupečníková krev
FetalTrol Level 1 0 0,07 Level 2 0,1 0,24 Level 3 1,44 1,78
Výsledky vyšetření FMH ZKOUMANÝ SOUBOR 94 ŽEN ZÁKROK Porod 66x Potrat 25x AMC 2x Úmrtí plodu 1x FMH EXCESIVNÍ 5x 2x 0x 1x (VÍCE NEŽ 0,25 %) HODNOTY FMH % 4,9 0,44 0,55 0,72 6,9 0,46 0,26-1,06 TÝDEN GRAVIDITY 40. 38. 41. 41. 39. 8.? 19. 21. 32.
Výsledky vyšetření protilátek Pozitivní protilátky 8x 1. VYŠETŘENÍ PROTILÁTEK Zkoumaný soubor 94 žen anti-e 2x anti-m 1x anti-cw 1x anti-le a 1x nespec. 3x 5 x se jednalo o 1. vyšetření protilátek v současně probíhající graviditě (vyšetření nebyla v graviditě provedena anebo údaje o vyšetření nejsou dostupné) Negativní protilátky 86x - Pozitivní protilátky 11x 2. VYŠETŘENÍ PROTILÁTEK Zkoumaný soubor 62 žen anti-d 8x (IvIg) anti-le a +Le b 1x nespecifická 2x 4x po porodu - 2x FMH < 0,1 %, 1x 0,1 %, 1x 0,44 % 2x po AMC, FMH < 0,1 %, 2x po potratu, FMH < 0,1 % po porodu, FMH 0,1 % po porodu, 2xFMH < 0,1 %, Negativní protilátky 51x -
Výpočet objemu fetální krve při FMH
Kasuistika č.1 Spontánní porod ve 40. tt Vše bez komplikací, včetně poporodního vývoje Porod Týden po porodu 3 týdny po porodu
Kasuistika č.2 Bez barvení FL1 CA FL2 HbF Komplet
Kasuistika č.2 Matka Směs 5%
Kasuistika č.2 o Akutní SC ve 38 + 5 o Matka přestala cítit pohyby plodu, do té doby těhotenství zcela bez komplikací o Dle USG těžká bradykardie plodu opři vybavení plodu již asystolie o Úspěšná resuscitace novorozence, překlad do ÚnL o Hematokrit pupečníkové krve 7%, Hb 20g/l o V Ústí dle Kleihauer-Betke testu masivní FMH (orientačně 7%) o Imunohematologická příčina anemie vyloučena o Příčina FMH neobjasněna
Závěr Objektivizace a kvantifikace FMH možné použít k úpravě dávky anti-d IvIg Vyšetření neobjasní příčinu FMH CA nedostatečné rozlišení mateřských a fetálních erytrocytů Další plán standardizace (FetalTrol), identifikace kritických míst přípravy vzorku
Děkuji za pozornost VYŠETŘENÍ FETOMATERNÁLNÍ HEMORRHAGIE POMOCÍ