Ověřování účinku vakcinace při i ozdravování chovů prasat od PRRS MVDr. Ivan Pšikal, CSc.
Charakteristika viru PRRS RNA virus specifický pro daný druh hostitele => infikuje pouze prasata; PRRS není zoonóza, nemá žádný vliv na onemocnění ostatních druhů hospodářských zvířat => nejsou rezervoárem viru; Mimo prase virus přežívá až 6 dní při teplotě 20 C a 1 měsíc při 4 C, více měsíců při -20 C; Slabá rezistence k desinfekci;
Genetická diverzita PRRSV Různá klinická prezentace nemoci; Experimentáln lně potvrzené rozdíly v biologických vlastnostech PRRSV: pneumovirulentní nebo reprodukčně virulentní; Antigenní rozdíly podle reakce s polyklonáln lními a monoklonáln lními protilátkami; tkami; Rozdíly v sekvencích ch RNA => genoskupiny;
LV (ORF5) EU(type I), GP5 NA(type II),GP5 Sid-Lith-b-2002 Sid-Lith-a-2006 Sno4-Bel2006 Lith-a-2002 Lith-b-2006 Bor54-Bel2006 Okt35-Bel2006 I. IV. VD-E1/LV: 97,5% VDA1/VR2332: 89,6% VD-E2/LV: 90,5% VDA1/LV: 60,4% II. HB-2(sh)/2002 HEB1-China2006 VDA1/JX: 92,3% HU21-2006 JKJ26-Korea03 HB-1(sh)/2002 VD-A1 It-1995 VD-E2 IAF-exp91 FJ1-China2004 CZ(V-503) VR-2332(ORF5) 100 DK111-92 Hu17-2005 VR-2385 RespPRRS Primepac NT6-Taiwan2006 95 100 92 92 AV30-Bel2001 VD-E1 Arnsberg-GER2002 Gu992m-Jap2005 MD-001-Taiwan1998 O1UD6-Thailand2004 H2-UK2002 L1-767-DK2001 Porcilis Hu14-2004 Soz6-Bel2006 Bel42-2006 F-1995 Hu8-2005 Hu18-2004 SP-1996 Lek-Pol2002 AMERVAC Pyrsvac VOS49-Bel2006 Obu1-Bel2006 III. Zad1-Bel2006 0.05
Modulace imunity Prezentace antigenů: Down-regulates expresi (MHC)-I v dendritických buňkách a modifikuje produkci cytokinů; Interferony: Inhibice sekrece IFN-α (narušení vývoje Th1 imunitní odpovědi); Cytokiny: Silná indukce IL-10 v PBMC => snižuje frekvenci buněk sekretujících IFN-gama; Humorální imunita: Opožděný vývoj VNT protilátek (mutace, glykosylace);
PRRSV/Ag a RNA v plicích, M.U. PRRSV v semeni Masivní apoptóza Vylučování PRRSV/kontaktní infekce virémie IFNγ ELISA/IPMA-PL VNPL Inf. PRRSV ve tkáních 1 m 2 m 4 m 1 r
Odběr směsných vzorků orální tekutiny k virologickému vyšetření Prickett JR, Kim W, Simer R, et al. J Swine Health Prod. 2008;16(2):86 91.
Průkaz PRRSV v orální tekutině prasat
Další viry prasat PCV2a (%) PCV2b (%) g1-ttv (%) g2-ttv (%) pbo-likev (%) g1-ttv/g1-ttv/ pbo-likev (%) PMWS + 6 100 77 94 88 71 PMWS - 12 50 79 83 46 33 Prasečí bokavirus parvovirus skotu (bovine parvovirus) a canine minute virus (CMV).
Proč eliminovat PRRSV z chovů Důvod ekonomický (v USA 560 milionů $ ročně) Pozitivní dopad na snížení rizika přenosu dalších infekčních onemocnění Actinobacillus pleuropneumoniae Mycoplasma hyopneumoniae Prasečí cirkovirus typu 2 Streptokoky, Stafylokoky Snižování spotřeby antibiotik
Rizikové faktory pro vznik a šíření infekcí PRRSV Vnější - rizika zavlečení infekce PRRSV do chovu z vnějšího zdroje: Přísun prasat Transport zvířat Vzduch * Lidé Sperma (< 2x 10 < 2x 10 2 TKID 50 = 0 (i.m. = 10 2,2 TKID 50 = 100%!!!) = 0) a injekční aplikace Pasivní vektory: hmyz, ptáci, hlodavci / škůdci * Hnůj (kejda)
Rizikové faktory pro vznik a šíření infekcí PRRSV Vnitřní rizika šíření PRRSV v chovu - udržování endemické infekce PRRSV: Systém a uspořádání chovu / konstrukce stájí, zamezení kontaktních inf. (ID i.n. = 10 3 až 10 5 ; ID p.o. = 10 4,6 10 5,9 ) ID 50 50 i.n. = 10 Hygienické podmínky chovu Lidé Přítomnost několika kategorií prasat ** Velikost farmy Vakcinace ; ID 50 p.o. = 10
Rizikový faktor-vakcinace proti PRRS Živé, oslabené (MLV): indukují imunitní odezvu, která může ochránit prasata před PRRSV infekcí, ale pouze když cirkulující virus není příliš vzdálen od vakcinačního kmene Ref. 11 ; některé oslabené vakcinační kmeny živých vakcín : působí virémii a mohou být šířeny horizontálně i transplacentálně Ref.2 ; mohou snižovat kvalitu semene a mohou být semenem vylučovány Ref. 47 ; mohou reverzí získat zpět virulentní faktory Ref.18 ; Inaktivované, umrtvené vakcíny (KV): jsou bezpečné a experimentální imunizace inaktiv. PRRSV indukuje VN protilátky Ref. 16 ; komerční KV neindukují VN protilátky a nedostatečně nebo jen částečně ochraňují prasata proti virémii po čelenžní infekci Ref.68 ;
Vnější RF VYSOKÝ Vnější RF NÍZKÝ Vnitřní RF VYSOKÝ Cíl: Stabilizace; Krátkodobý výhled dosažení: NÍZKÝ Dlouhodobý výhled dosažení: NÍZKÝ Cíl: Stabilizace nebo eradikace; Krátkodobý výhled dosažení: STŘEDNÍ až VYSOKÝ Dlouhodobý výhled dosažení: NÍZKÝ Vnitřní RF NÍZKÝ Cíl: Stabilizace; Krátkodobý výhled dosažení: STŘEDNÍ až VYSOKÝ Dlouhodobý výhled dosažení: NÍZKÝ Cíl: Eradikace; Krátkodobý výhled dosažení: VYSOKÝ Dlouhodobý výhled dosažení: VYSOKÝ
Související literatura 1. Metoda testace a eliminace (ISK): (koordiance postupů - Chovservis, SCHPČM.); 3. Metoda depopulace / repopulace (dotace na dochov selat - SCHPČM ) 3. Metoda produkce PRRS negativních selat od sérologicky pozitivních prasnic (NCH): (Ověřování ve 2 NCH Chovservis ;
Strategie k přerušení ení cirkulace viru PRRS v nukleovém m chovu Stabilizace imunity prasnic (vakcinace); Uzavřený systém chovu a přerušení přísunu prasniček do základního stáda minimálně po dobu 120 až160 dnů; Přísně dodržovaný jednosměrný pohyb prasat bez přerušení produkce; Virolog. a sérolog. testování;
2,500 Profil IgG protilátek proti PRRSV - fa. V před vakcinací Suivac PRRS INe. PRRS IgG ELISA (S/ P) 2,000 1,500 1,000 0,500 0,000 1,806 1,635 1,367 0,968 0,288 0,121 0,094 kanci prasničky prasnice 4T 8T 12T 20T věková kategorie (týdny)
Profil IgG protilátek proti PRRSV - fa. V po vakvinaci Suivac PRRS INe. 1,600 1,400 PRRS IgG ELISA (S/ P) 1,200 1,000 0,800 0,600 0,400 1,091 1,234 0,200 0,000 0,105 0,241 0,165 0,188 prasničky prasnice 4T 8T 12T 20T věková kategorie (týdny)
Profil IgG protilátek proti PRRSV-fa. D PRRS IgG ELISA (S/ P) 1,000 0,900 0,800 0,700 0,600 0,500 0,400 0,300 0,200 0,100 0,000 0,507 0,084 0,058 0,117 0,125 4T 8T 12T 16T P+K 24T věková kategorie (týdny)
Rozsah homologie nt mezi 35 PRRSV kmeny, identifikovanými v České Republice v létech l 1995 2010. Number of PRRSV strains 12 10 8 6 4 2 US Suivac/A1 VR2332 Suivac/E2 EU Amervac Suivac/E1 Porcilis 0 56 57 58 59 60 70 80 85 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 % homology with LV strain
Inovace inaktivované vakcíny proti PRRS Multivalence: vakcinační antigeny širokého spektra dominantních a imunogenních variant viru PRRS kombinace EUa x EUb, EU x US; Indukce VNT protilátek: šetrný způsob inaktivace k uchování antigenních domén viru PRRS, které se připojují k membránám permisivních buněk a umožňují internalizaci virových antigenů; rozšířit metody pro kontrolu kvality (QCA) vakcín; Van Gorp H., a kol., J.Gen.Virol. (2008) 89: 2943-2953
1,400 1,200 Suivac PRRS InE 3K Slepá kontrola ELISA IgG(Index S/P) 1,000 0,800 0,600 0,400 0,200 0,000
4 3 Suivac PRRS InE 3K Slepá kontrola VNT (log 2) 2 1 0