Interpretace sérologických nálezů v diagnostice herpetických virů. K.Roubalová

Transkript

1 Interpretace sérologických nálezů v diagnostice herpetických virů K.Roubalová

2 Specifické vlastnosti herpetických virů ovlivňují protilátkovou odpověď Latence a celoživotní nosičství Schopnost reaktivace, rekurentní infekce Ubikvitní rozšíření, vysoká hladina promořenosti Vysoká antigenní komplexita více než 100 různých proteinů, mnohé jsou buněčného původu Nízká genetická variabilita, antigenní podobnost Schopnost modulovat imunitní systém hostitele

3 Interakce mezi virem a imunitním systémem Imunitní systém kontroluje infekci: symptomatické infekce: primární inf. nebo reaktivace u imunokompromitovaných pacientů Virus moduluje účinnost imunitního systému: infikuje imunokompetentní buňky, blokuje prezentaci antigenů, ovlivňuje chemotaxi a polarizaci imunitní odpovědi, diferenciaci APC ( virokiny, virové receptory pro cytokiny)

4 Cíle diagnostiky Je pacient infikován nebo vnímavý k primoinfekci? Je infekce latentní nebo aktivní? Jedná se o primární infekci nebo o reaktivaci?

5 Dynamika protilátkové odpovědi

6 IgG protilátky Anamnestické, celoživotní Většinou pozitivní již v akutní fázi infekce Maternální protilátky Přenos transfuzí Reaktivace signifikantní vzestup ( obtížně prokazatelný) Séronegativita = vnímavost k primoinfekci Séropozitivita protekce

7 IgM, IgA - protilátky aktivní fáze IgM Primoinfekce: +++ reaktivace: +/ - Nižší specifita: interference RF, autoprotilátek, přirozených protilátek infekce: IgA Primoinfekce: ++ reaktivace: ++ Mohou dlouhodobě perzistovat Mohou se tvořit i při asymptomatických reaktivacích Pozitivita u 10-20% latentně infikovaných

8 Charakteristické vzorce protilátek u EBV Stádium infekce IgG proti VCA IgM proti VCA Typ protilátek IgG proti EBNA 1 IgM proti EBNA 1 IgG proti EA IgA proti VCA IgM proti EA Latence ++ Avidita vysoká /- (anti R) +/- - Primoinfekce ++ Avidita nízká +/+++ +/ (anti D) reaktivace +++ Avidita vysoká /- +++ (anti D i R) ++ +/- Chronická infekce Nemá charakteristický vzorec protilátek

9 Problémy s interpretací sérologických nálezů Falešné pozitivity: Křížová reaktivita Ag Kaskádová reaktivace HV Polyklonální aktivace Polyspecifické protilátky Autoimunita Falešné negativity: Interakce viru s imunitním systémem Imunodeficience Atypické vzorce protilátek VCA IgG+ IgM-,EBNA- VCA IgG- IgM- EBNA+ VCA IgG- IgM+ EBNA-

10 Křížová reaktivita herpetických virů HSV1 x HSV2: typově specifické testy ( rekombinantní antigen) vs. testy s nativním antigenem HHV6 (A,B) x HHV7 HSV x VZV ( primoinfekce) Problémy se stanovením avidity

11 Kaskádová reaktivace HV Akutní infekce HV imunosuprese Sekundární reaktivace dalších endogenních HV CMV, HHV6, EBV

12 Zánětlivé onemocnění (infekce, autoimunita) Polyklonální aktivace IM, LB, toxoplasmoza, aktivace imunitního systému autoimunitní onemocnění hemoblastozy diferenciace paměťových B- lymfocytů Produkce protilátek proti dalším antigenům

13 Autoprotilátky Molekulární mimikry: identické domény na virových a buněčných proteinech EBNA x kolageny ( RANA u RA, Sjögren. Sy.) Virové Fc-receptory x Fc IgG ( tvorba RF) Virové x buněčné DNA-vazebné proteiny

14 Přirozené polyreaktivní protilátky Tvořeny nezralými B1-lymfocyty (CD5+) IgM, nizkoavidní IgG U pacientů s nezralým imunitním systémem ( malé děti, příjemci HSCT, hematoonkologičtí pacienti) Stimulace superantigeny

15 Atypické vzorce protilátek proti VCA-IgG+,VCA IgM -,EBNA IgG -: U 8-10% vyšetření primoinfekce x dříve prodělaná infekce (imunodeficit, geneticky podmíněná neodpovídavost) EBV Interpretace: klinický obraz, děti vs. dospělí, provedení dalších testů ( IgA,IgG proti EA, stanovení avidity NIF),vyšetření dalšího vzorku VCA IgG-,EBNA IgG+, VCA IgM-: dříve prodělaná infekce x séronegativita VCA IgG- EBNA IgG-, VCA IgM+ : primoinfekce x séronegativita

16 Protilátky v mozkomíšním moku příklad Párový vzorek sérum- likvor IgG anti-hsv v séru IgG anti-hsv v likvoru OD AU/mL OD AU/mL A 0, ,3 0,581 1,37 B 2, ,9 0,979 2,43 Intrathekální syntéza protilátek ( Výpočet Reiberova indexu protilátek pomocí koncentrací specifických IgG, celkových IgG a albuminu v séru a likvoru): A: IP = 5,24 pozitivní B: IP = 0,98 - negativní Nálezy protilátek v mozkomíšním moku lze hodnotit pouze na základě výpočtu intrathekální syntézy.

17 Diagnostika Virologické vyšetření Další laboratorní vyšetření DIAGNÓZA Klinický nález Anamneza