Přístrojové metody používané při rozborech mléka, jejich specifika a přesnost výsledků měření

Rozměr: px

Začít zobrazení ze stránky:

Download "Přístrojové metody používané při rozborech mléka, jejich specifika a přesnost výsledků měření"

Jan Horák
před 8 lety
Počet zobrazení:

1 Přístrojové metody používané při rozborech mléka, jejich specifika a přesnost výsledků měření David Ledvina, Bentley Czech Větrný Jeníkov

2 Metody pro rozbor mléka Metoda IR fotometrie Turbidimetrie Kolorimetrie FIA metoda Kryoskopie Luminometrie RIA metody Denzitometrie Cytometrie Impedance Přímé počítání Stanovení (angl.) F, P, L, TS, SnF, U, C, FFA F U U FPD MRL, HACCP MRL MRL SCC, IBC TBC TBC index (č.)

Denzitometrie Cytometrie Impedance Přímé počítání Stanovení (angl.

3 Referenční metody pro mléčné složky tuk Röse Gottlieb (Gerber) bílkovina Kjeldahl laktóza HPLC, polarimetrie sušina gravimetrie močovina kolorimetrie bod mrznutí kryoskopie T, B, L, S, M, BM

4 Chování záření ve vzorku (reflexe) (absorpce) (transmise) odraz pohlcení prostup dopad vzorek T, B, L, S, M

5 Fyzikální princip fotometrie Absorpce záření odpovídá rotačním a vibračním stavům molekul Lambertův-Beerův zákon A = log (Φ d /Φ v ) = a. l. c kde A absorbance Φ d dopadající svět. tok Φ v a l c vystupující svět. tok absorpční koeficient tlouštka vrstvy koncentrace T, B, L, S, M

a. l. c kde A absorbance Φ d dopadající svět.

6 Filtrová IR fotometrie zrcadlo vzorek zrcadlo zdroj filtry detektor kyveta konduktometr T, B, L, S, M, BM

7 Fourierova IR fotometrie IR zdroj 5 2 zrcadla: 1 4 pevná 5 polopropustné 6 pohyblivé 6 vzorek 4 1 detektor 3 T, B, L, S, M, BM, VMK

8 T, B, L, S, M, BM, VMK

9 T, B, L, S, M, BM, VMK

10 Kolorimetrie & FIA Přesné stanovení močoviny kombinace enzymatické metody, FIA a kolorimetrie 1. močovina rozštěpena ureázou na čpavek a oxid uhličitý 2. přidáno barvivo a aktivátor 3. kolorimetrické měření na 600 nm (transflektančně) 4. diferenční porovnání původního a vzniklého čpavku M

močovina rozštěpena ureázou na čpavek a oxid uhličitý 2.

11 M

12 M

13 Enz. reaktor & impedance Přesné stanovení močoviny kombinace enzymatické metody a měření impedance 1. změna impedance je způsobována hromaděním produktů enzymové hydrolýzy močoviny 2. míra rychlosti změny impedance je přímo úměrná koncentraci močoviny 3. diferenční porovnání impedance trubice s aktivní a inaktivní ureázou M

změna impedance je způsobována hromaděním produktů enzymové hydrolýzy močoviny 2.

14 M

15 M

16 Kryoskopie Stanovení bodu mrznutí mléka (= rovnováha mezi pevnou a kapalnou fází) 1895 Beckman (D), 1920 Hortvet (USA) podchlazení na 3 º C za míchání iniciace nárazem (nebo krystalem) odevzdání skupenské energie (= ohřev) měření teploty 3 různými módy (f, p, m) BM

3 º C za míchání iniciace nárazem (nebo krystalem) odevzdání

17 Princip kryoskopie termistor míchadlo Ωmetr zkumavka chlazení čerpadlo rozlišení 0,0001 C BM

18 BM

19 Průtoková cytometrie původní použití v humánní medicíně 1991 uvedeno v oboru (Bentley Instruments Inc.) DNA buněk obarveno fluorescenčním barvivem, buňky ozářeny zeleným světlem emitují červené záření spočítáno a vytříděno podle velikosti (PHA pulsně šířková analýza) PSB, CPM

) DNA buněk obarveno fluorescenčním barvivem, buňky ozářeny zeleným

20 Princip cytometrie stabilní průtok 4 ml/min (laminární proudění) nízkovýkonný laser na pevné fázi detekce fluorescence fotonásobičem PSB, CPM

21 PSB

22 PSB

23 CPM

24 CPM

25 Přímé počítání kolonií vyšší rozlišení barevná kamera nastavení filtrů nastavení citlivosti přepočet na spirálu archivace snímků CPM

26 CPM

27 Kontrola správnosti měření kalibrace na sadě změřené referenčními hodnotami a následná kontrola sady nulování, kontrola slepým vzorkem kontrola/nastavení oficiálními standardy kontrola pilotními vzorky (i vlastními) kruhový test národní i mezinárodní průběžné srovnávací měření mezi přístroji i mezi jednotlivými laboratořemi vše

28 Parametry přístrojů rychlost / výkon měřicí rozsah rozlišení citlivost přesnost opakovatelnost reprodukovatelnost chyba z přenosu pracovní faktor vše

29 Ilustrační příklad kryoskopie rychlost / výkon < 30 vz/h měřicí rozsah 0 až 1,5 ºC rozlišení 0,0001 ºC citlivost n/a přesnost n/a opakovatelnost n/a reprodukovatelnost ± 0,002 ºC chyba z přenosu neměřitelná BM

30 Ilustrační příklad mléčné složky rychlost / výkon 500 vz/h měřicí rozsah 2 až 15 % rozlišení 0,01 % citlivost 0,01 % přesnost c v < 1 % opakovatelnost c v < 0,5 % reprodukovatelnost n/a chyba z přenosu < 1 % T, B, L, S, M

31 Ilustrační příklad počítač PSB rychlost / výkon 500 vz/h měřicí rozsah 0 až 10 M rozlišení 1 k citlivost n/a přesnost c v < 10 % (př.m.) opakovatelnost c v < 4 % (< 500k) reprodukovatelnost n/a chyba z přenosu < 1 % PSB

32 Ilustrační příklad počítač CPM rychlost / výkon < 50 vz/h měřicí rozsah 2 k až 10 M rozlišení 1 k citlivost < 1 k přesnost s y,x < 0,30 log opakovatelnost s r < 0,03 log ( 300k) reprodukovatelnost s R < 0,06 log ( 300k) chyba z přenosu < 1 % CPM

33 T c c v S y S x S r S R Vysvětlení statistických zkratek chyba z přenosu variační koeficient směrodatná odchylka referenčních hodnot směrodatná odchylka měření směrodatná odchylka opakovatelnosti směrodatná odchylka reprodukovatelnosti S d směrodatná odchylka průměrné chyby predikce S xy kovariance * ρ x,y S y,x koeficient korelace směrodatná reziduální chyba regrese * střední hodnota součinu odchylek veličin X,Y od jejich středních hodnot vše

34 Nejistoty měření kombinovaná nejistota u c jako výsledek: nejistoty typu A (z var. koeficientů měření) nejistoty typu B (přístroj: z opakovatelnosti, chyby z přenosu; reference: z kalibrace atd.) rozšířená nejistota u roz = 2 * u c (95% měření se nachází uvnitř uvedeného intervalu nejistoty měření) vše

Podobné dokumenty

Vzorky byly ve standardním chladovém režimu transportovány do tří laboratoří a tam v běžném termínu analyzovány.

Vzorky byly ve standardním chladovém režimu transportovány do tří laboratoří a tam v běžném termínu analyzovány. Výsledky pravidelného srovnávání rozborů bazénových vzorků mléka Od roku 2011 provádíme ve spolupráci s družstvem VIAMILK CZ, jednou ročně zpravidla ve dvou po sobě následujících termínech (letos ve dnech