Automatizace v hematologii

Rozměr: px

Začít zobrazení ze stránky:

Download "Automatizace v hematologii"

Markéta Kubíčková
před 5 lety
Počet zobrazení:

1 Automatizace v hematologii doc. Mgr. Luděk Slavík PhD. Hemato- onkologická klinika FN Olomouc Lékařská fakulta Univerzity palackého v Olomouci Hemato-onkologická klinika Fakultní nemocnice Olomouc Fakultní nemocnice Olomouc

pacientů - v co nejkratším čase - za vynaložení minima laboratorního času - Hlavní a nevyřčený požadavek je

2 Úvod očekávání a požadavky na vyšetření cytomorfologie - Zajistit přesnou a správnou diagnostiku všech buněčných populací, které se mohou očekávaně ale i neočekávaně vyskytnout - dostupnou pro široké spektrum pacientů - v co nejkratším čase - za vynaložení minima laboratorního času - Hlavní a nevyřčený požadavek je na pozadí identifikovat případnou hematologickou malignitu 2 Slavík L. Automatizace v hematologii LABAUTO

Počítání buněk Počítání na hemocytometru bylo standardní až do roku 1950. rozměr tohoto zařízení byl 3x3x0.

3 Počítání buněk Počítání na hemocytometru bylo standardní až do roku rozměr tohoto zařízení byl 3x3x0.1 mm typicky erytrocyty byly počítány za použití zředění 1: 200 od 1 x 10 6 / mm 3 v plné krvi leukocyty nad 5x10 3 / mm 3 se zředí v poměru 1:10 za pomoci lyzačního činidla a barviva Buňky jsou počítány ručně standardní odchylka by proto bylo 22/500, nebo 4,4% Je nutno přidat chyby pipetování a ředění, a to až o 10% Poloautomatické počítače buněk Automatické počítače buněk 2 Slavík L. Automatizace v hematologii LABAUTO

4 KDY TO VŠECHNO ZAČALO? 3 Slavík L. Automatizace v hematologii LABAUTO

5 KDY TO VŠECHNO ZAČALO? 4 Slavík L. Automatizace v hematologii LABAUTO

6 KDY TO VŠECHNO ZAČALO? 1958 Coulter model A 5 Slavík L. Automatizace v hematologii LABAUTO

7 KDY TO VŠECHNO ZAČALO? 1949 Wallace Coulter objevil Coulter impedenční princip 1953 Patentování Coulter principu 1956 Coulter Model A první hemat. analyzátor na světě 1958 Založení Coulter Electronics Inc Coulter D, DN, Z, ZF 6, Thrombocounter, Industrial Coulter Model S automat. WBC, RBC, HGB, HCT Patentována metoda HF Conductivity Coulter Model S-Plus poprvé automaticky PLT Coulter Model S-PlusII poprvé Ly % a Ly abs Coulter Model S-PlusIV 3-Part.Histogram Diff Ly,Mo,Gr Uzavřený náběrový systém Klinický průtokový cytometr Coulter Profile I 6 Slavík L. Automatizace v hematologii LABAUTO

8 Měření objemu a počtu RBC Metoda objemové analýzy je jediná, která umožňuje přímé měření MCV a HCT 7 Slavík L. Automatizace v hematologii LABAUTO

9 Impedanční metoda počítání PLT Jednoduchá a stabilní metoda spolehlivého měření počtu a objemu trombocytů Patentovaná metoda Sweep Flow umožňuje odstranění rušících recirkulujících částic 8 Slavík L. Automatizace v hematologii LABAUTO

10 Coulter T První stolní, kompaktní automatický hematologický analyzátor 24-hod bezúdržbový pracovní režim Možnost diff LY a MO Souběžná řada přístrojů Onyx, JT a JT 3 s 3-Part diff 10 Slavík L. Automatizace v hematologii LABAUTO

11 Coulter Histogram Differencial Coulter Histogram Differencial byl FDA určen jako referenční metoda pro přístrojový 3-Part diff 9 Slavík L. Automatizace v hematologii LABAUTO

12 Co probíhalo souběžně? 1963 CC-1001 První japonský hematologický analyzátor 1975 PL-100 První japonský analyzátor krevních destiček CL-710 První japonský plně automatizovaný hematologický analyzátor 11 Slavík L. Automatizace v hematologii LABAUTO

13 A co následovalo? 1988 R-1000 celosvětově první analyzátor retikulocytů 12 Slavík L. Automatizace v hematologii LABAUTO

Průtoková cytometrie 1969 Phywe AG Göttingen 1970 Lou Kamentsky

cytometr - dále jen "Cytograph" systém s He-Ne laserem měřícím

14 Průtoková cytometrie 1969 Phywe AG Göttingen 1970 Lou Kamentsky - biofyzika Systems Bio / Fyzika Systems komerční cytometr - dále jen "Cytograph" systém s He-Ne laserem měřícím rozptyl při 633 nm - pravděpodobně první komerční přístroj zahrnující laser. Přístroj mohl oddělit živé a mrtvé buňky díky vychytávání trypanové modři Ortho Diagnostics (Johnson a Johnson) Systém Cytofluorograph kapénkový třídič buněk - předchůdce dnešních sorterů 13 Slavík L. Automatizace v hematologii LABAUTO

15 Průtoková cytometrie 1965 LA Kamentsky, MR Melamed & H. Derman: Spektrofotometr Nový analyzátor pro ultrarychlou analýzu buněk Science Slavík L. Automatizace v hematologii LABAUTO

vývoji a řízení imunitního systému a objevení principu pro produkci

16 Monoklonální protilátky 1984 Nobelova cena za medicínu: Niels K. Jerne Georges JF Kohler César Milstein teorie týkající se specifičnosti ve vývoji a řízení imunitního systému a objevení principu pro produkci monoklonálních protilátek. 15 Slavík L. Automatizace v hematologii LABAUTO

17 Elektrooptická průtoková cytometrie 3-D VCS Technologie revoluční metoda analýzy nativních buněk aplikace tří navzájem nezávislých fyzikálních metod. přímá měřicí metoda. všechna měření probíhají vždy na každé buňce současně. 18 Slavík L. Automatizace v hematologii LABAUTO

Elektrooptická průtoková cytometrie 3-D VCS Technologie Tři

každém analyzovaném leukocytu - celkem 8192 buněk Jednotlivé

analýza v reálném čase Barevné rozlišení subpopulací Dokonalá

18 Elektrooptická průtoková cytometrie 3-D VCS Technologie Tři nezávislé parametry (DC, OP & LASER) jsou simultánně měřeny na každém analyzovaném leukocytu - celkem 8192 buněk Jednotlivé hodnoty jsou použity jako souřadnice X, Y, Z v 3-D krychli 3-D analýza v reálném čase Barevné rozlišení subpopulací Dokonalá separace překrývajících se populací 17 Slavík L. Automatizace v hematologii LABAUTO

19 Cytochemické metody TECHNICON měřil aktivitu myeloperoxidázy leukocytů spolu s rozptylem světla pro odlišení leukocytů přesněji Sysmex metodu rozšířil na fluorescenční průtokovou cytometrii v modelech řady X 18 Slavík L. Automatizace v hematologii LABAUTO

20 A co následovalo? 1990 éra automatizace HS-Series HST-Series HST II-Series HST III-Series HST N NE-Alpha SE-Alpha SE-Alpha II SE-Alpha II R XE-Alpha N 19 Slavík L. Automatizace v hematologii LABAUTO

21 1998 A co následovalo? První instalace middleware v hematologické laboratoři Automatizace manuálních pravidel pro hodnocení patologických nálezů Kontrola funkce analyzátoru Kontrola předchozích výsledků trendy Doplnění/přeměření parametru Pravidla pro vytváření poznámek, upozornění operátora, přidat / smazat testy, např. přidat krevní nátěr, manuální rozdíly 20 Slavík L. Automatizace v hematologii LABAUTO

22 Nové parametry 21 Slavík L. Automatizace v hematologii LABAUTO

23 Digitální morfologie CellaVision, Easy Cell 22 Slavík L. Automatizace v hematologii LABAUTO

24 Digitální morfologie Čtyři různé vlnové délky světla se používají k měření barvy, tvaru, velikosti, výšku a optické hustoty. Přístroj poskytuje 28 parametrů 23 Slavík L. Automatizace v hematologii LABAUTO

25 Speciální molekulární vyšetření hematologických malignit 25 Slavík L. Automatizace v hematologii LABAUTO

Koagulace Screening rizika krvácení před invazivními

krvácení On-line monitoring změn koagulace u

nutné v minimálním čase reagovat na změny v

26 Koagulace Screening rizika krvácení před invazivními výkony s precizní diagnostikou zjištění příčin krvácení On-line monitoring změn koagulace u traumatických a velkých operačních výkonů, kde je nutné v minimálním čase reagovat na změny v koagulačních poměrech 26 Slavík L. Automatizace v hematologii LABAUTO

27 KDY TO VŠECHNO ZAČALO? - přelom 20. století - Prof. Dale - Prof. Dawis 26 Slavík L. Historie vývoje laboratorních metod v hematologii v posledních 30 letech

28 Počátky automatizace? 1965 Walace Coulter 1966 Bruce Young 27 Slavík L. Automatizace v hematologii LABAUTO

29 Patentované principy koagulometrů? 1971 Saitz 1976 Girolami 1988 Jean-Luc Martinoli, Behnk Amelung Stago Alain Rousseau, Pascal Vilain 28 Slavík L. Automatizace v hematologii LABAUTO

30 První přístroje? Amelung Schnitger und Gross 29 Slavík L. Automatizace v hematologii LABAUTO

31 Automatické koagulometry ACL 100 Sysmex CA Slavík L. Automatizace v hematologii LABAUTO

32 Automatické koagulometry 31 Slavík L. Historie vývoje laboratorních metod v hematologii v posledních 30 letech

Automatické linky s koagulometry - Výhody - společné využití separačních technik nicméně nelze využít pro krevní destičky - Nevýhody - Ačkoli je koagulace ze své podstaty plně biochemickou analýzou

33 Automatické linky s koagulometry - Výhody - společné využití separačních technik nicméně nelze využít pro krevní destičky - Nevýhody - Ačkoli je koagulace ze své podstaty plně biochemickou analýzou sérinových proteáz v praxi je biochemické stanovení aktivity jednotlivých koagulačních faktorů na základě funkční analýzy značně odlišné od všech enzymových stanovení využívaných v biochemii - Problémy se standardizací metodik - Problémy s interpretací patologií - Zásadní dopady i nejzákladnějších vyšetření na stav pacienta 32 Slavík L. Automatizace v hematologii LABAUTO

34 Vývoj koagulace 2005 Automatizace měření generace trombinu 34 Slavík L. Automatizace v hematologii LABAUTO

35 Vývoj POCT pro vyšetření koagulace 1948 Dr. Hellmut Hartert 34 Slavík L. Automatizace v hematologii LABAUTO

36 Vývoj koagulace využití middleware Implementace vyhodnocení POCT technologií současně s klasickými koagulačními technikami 35 Slavík L. Automatizace v hematologii LABAUTO

37 Přínosy a omezení automatizace v koagulaci Co se změnilo v testování koagulace - a co ne - od příchodu automatizovaných analyzátorů? - podařilo se standardizovat základní koagulační vyšetření bez zjevného vlivu separačních technik na kvalitu vyšetření - otázkou zůstává efektivita integrace koagulačních přístrojů do komplexních řešení s ohledem na rozdílný primární odběrový materiál Jaké typy typy vyšetření zůstávají pro automatizované koagulační analyzátory problematické? - speciální vyšetření, která mohou být ovlivněna uvolněnými fosfolipidy z krevních destiček - globální koagulační testy jsou velmi citlivé na preanalytickou fázi - celá oblast POCT vyšetření, která se bude naopak dále diverzifikovat pod tlakem na časový faktor dostupnosti vyšetření, který je vždy na straně POCT technologie - interpretace vyšetření 36 Slavík L. Automatizace v hematologii LABAUTO

38 Vize 36 Slavík L. Automatizace v hematologii LABAUTO

39 Základní idea Vize - zajistit stejnou kvalitu jako jsme měli před jejím zavedením 36 Slavík L. Automatizace v hematologii LABAUTO

40 Děkuji za pozornost 36 Slavík L. Automatizace v hematologii LABAUTO

Podobné dokumenty

Přístroje v hematologické laboratoři

Přístroje v hematologické laboratoři 1) Koagulometry Dělení podle automatizace Poloautomatické Automatické Dělení dle typu detekce mechanická optická háček kulička plátek optický paprsek Koagulační metody