Automatizovaný hematologický systém. sysmex XE 5000 TM

Rozměr: px

Začít zobrazení ze stránky:

Download "Automatizovaný hematologický systém. sysmex XE 5000 TM"

Marcel Pavlík
před 5 lety
Počet zobrazení:

Veronika Vášová Centrální hematologické laboratoře ÚLBLD Materiálně technická základna pro

1 EVROPSKÝ FOND PRO REGIONÁLNÍ ROZVOJ Automatizovaný hematologický systém sysmex XE 5000 TM PRAHA & EU INVESTUJEME DO VAŠÍ BUDOUCNOSTI Mgr. Veronika Vášová Centrální hematologické laboratoře ÚLBLD Materiálně technická základna pro výzkum v oblasti diagnostiky a léčby civilizačních a onkologických onemocnění a jejich závažných rizik ve VFN v Praze, reg. č. CZ.2.16/3.1.00/24012

2 Sysmex XE 5000 TM 2

3 Technické specifikace Automatizovaný hematologický analyzátor Změří až 150 vzorků/hodinu plné krve a 38 vzorků/hodinu tělních tekutin Potřebný objem vzorku 200μL zavřený mód 130μL otevřený mód 40μL kapilární mód Archivace vzorků vč. grafických záznamů Dokáže analyzovat 67 parametrů 37 diagnostických 6 v režimu tělních tekutin 24 předem naředěných vzorků 3

4 Parametry měřené na XE-5000 TM ERYTROCYTY Zkratka Název Jednotky RBC Erytrocyty /l HGB Hemoglobin g/l HCT Hematokrit 1 MCV střední objem Ery fl MCH střední množství hemoglobinu v Ery pg WBC leukocyty + 6 populační diferenciál Zkratka Název Jednotky NEUT Neutrofily %,10 9 /l LYMPH Lymfocyty %,10 9 /l MONO Monocyty %,10 9 /l EO Eozinofily %,10 9 /l BASO Bazofily %,10 9 /l IG nezralé granulocyty %,10 9 /l MCHC střední koncentrace hemoglobinu v Ery g/l RDW-SD RDW-CV šíře distribuce Ery směrodatná odchylka šíře distribuce Ery variační koeficient fl % 4

Nové parametry měřené na XN 5000 TM IG (Immature granulocytes) = nezralé granulocyty Zahrnuje promyelocyty, myelocyty, metamyelocyty tyče NE Normálně může být pouze u

5 Nové parametry měřené na XN 5000 TM IG (Immature granulocytes) = nezralé granulocyty Zahrnuje promyelocyty, myelocyty, metamyelocyty tyče NE Normálně může být pouze u novorozenců a těhotných žen V ostatních případech poukazuje na možnou infekci či zánět Sledování pacientů na JIP V průběhu a po chemoterapii Pacienti s onemocněním HIV/AIDS 5

6 Parametry měřené na XE-5000 TM TROMBOCYTY Zkratka Název Jednotky PLT Trombocyty 10 9 /l MPV střední objem trombocytů PCT destičkový hematokrit % PDW P-LCR šíře distribuce trombocytů poměr velkých trombocytů fl fl % RETIKULOCYTY a NORMOBLASTY Zkratka Název Jednotky RET Retikulocyty, /l LFR MFR HFR IRF Nejméně fluoreskující retikulocyty Středně fluoreskující retikulocyty Vysoce fluoreskující retikulocyty Nezralá forma retikulocytů (zahrnuje MFR, HFR) RET-He Hemoglobin v retikulocytech pg % % % % IPF mladé frakce trombocytů % NRBC Normoblasty %, 10 9 /l IPF (retikulované destičky) nebo-li frakce nezralých trombocytů Normální rozmezí: 1 6% z celkového počtu PLT IPF vzrůstá se tvorbou PLT v KD Přínos ITP typicky vysoké hodnoty IPF v diagnostice - odlišení nemocí př. TTP od útlumu KD Posouzení trombopoetického zotavení při aplastické chemoterapii Posouzení nutnosti transfuze PLT 6

Stanovení Retikulocytů v RET kanálu Rozdělení RET do 3 zón na základě intenzity fluorescenčního světla Výpočet hodnot mladších forem RET v poměru k

7 Stanovení Retikulocytů v RET kanálu Rozdělení RET do 3 zón na základě intenzity fluorescenčního světla Výpočet hodnot mladších forem RET v poměru k celkovému počtu RET europe.com/fileadmin/media/f100/scientific/calender_2015/scattergrams/april/scientificcal2015- Apr_RET-Scattergram.jpg 7

8 Normální hodnoty KO Parametr MUŽI ŽENY Jednotky WBC 4,00-10,00 4,00-10, /l RBC 4,00-5,80 3,80-5, /l HGB g/l HCT 0,40-0,50 0,350-0,470 PLT /l Diferenciál strojový Relativní počty NE 45,0-70,0 45,0-70,0 % LY 20,0-45,0 20,0-45,0 % MO 2,0-12,0 2,0-12,0 % EO 0,0-5,0 0,0-5,0 % BA 0,0-2,0 0,0-2,0 % IG 0,0-0,6 0,0-0,6 % 8

9 Technologie analýzy na XE-5000 TM Měření metodou: RF/DC změna odporu radiofrekvenčního proudu (HPC) a hydrodynamická fokusace (PLT, RBC, HCT) SLS metoda-hgb fluorescenční průtoková cytometrie (WBC-Diff, IG, NRBC, RET, IRF, PLT-O) Kombinace flourescence a hydrodynamické fokusace umožňuje rozlišení normální populace bílých (WBC), červených (RBC) krvinek a destiček (PLT) od populace abnormální snížení počtu manuálních diferenciálů 9

10 Detekce RF/DC Hydrodynamická fokusace (DC) Metoda detekce k určení počtu červených krvinek (RBC) a destiček (PLT) na základě impedanční metody 10

11 Hydrodynamická fokusace Do proudu nosné izotonické kapaliny (diluent) je vstřikován vzorek krve Krvinky jsou diluentem usměrňovány a po jedné procházejí aperturou (měřícím kanálem) Apertura obsahuje 2 elektrody jimiž prochází stejnosměrný proud Projde-li částice aperturou, dojde ke změně el. napětí vznik impulsu, který je zaznamenám do histogramu (distribuční křivka) Hustota krvinek je zaznamenána na základě změny odporu radiofrekvenčního proudu (RF) 11

Abnormality: RBC Abn Distribuce příčiny: trombocytóza, fragmenty,

12 Výstup z impedančního měření RBC a PLT Distribuční křivka velikosti buněk začíná a končí na základní ose mezi hraničními dikriminátory Abnormality: RBC Abn Distribuce příčiny: trombocytóza, fragmenty, mikrocyty, aglutinace, shluky PLT Dimorfní populace Anisocytosa Mikrocytosa Makrocytosa 12

13 Abnormality v histogramech - příklad RBC PLT Možná interference ERY do PLT Křivka je ovlivněna přítomností abnormálních RBC Dimorfní populace RBC Přítomnost fragmentů? 13

14 SLS detekční metoda Hemoglobinu (HGB) Stanovení koncentrace HGB v krvi V minulosti HGB měřen cyanmethemoglobinovou metodou a oxyhemoglobinová metoda toxické kyanidové odpady náročné na zpracování vliv na životní prostředí SLS- metoda využívá sodiumlaurylsulfátu (SLS) bezkyanidová metoda: šetření životního prostředí odpadá starost, jak naložit s toxickým odpadem Analýza HGB: lyzační roztok hemolyzuje RBC a WBC hemoglobin zoxiduje na oxyhemoglobin naváže se SLS vznikne stabilní barevný komplex SLS-HGB, který je detekován fotometricky Reakční čas 10s 14

15 Metoda průtoková cytometrie Analýza fyziologických vlastností krvinek (velikost a struktura buňky) Analýza chemických vlastností krvinek (vnitřní obsah buňky) Krvinky se označí flourescenčním barvivem, které se specificky váže na NK Osvícení vzorku laserovým paprskem dochází k rozdělení krvinek pomocí 3 různých signálů: přední rozptyl FSC (forward scatter light) informace o objemu krvinky boční rozptyl SSC (side scatter light) informace o obsahu buňky boční fluorescence SFL (side flourescent light) informace o množství DNA a RNA v krvince 15

16 Metoda průtokové cytomerie 16

17 Rozdíl v intenzitě fluorescence 17

18 Tělní tekutiny - materiál Mozkomíšní mok Peritoneální výpotky (ascites) Tekutiny z kontinuální ambulantní peritoneální dialýzy (CAPD) Pleurální výpotky Synoviální tekutiny zvýšený objem analyzovaného vzorku vyšší přesnost měření i při nízkých koncentracích analytu Výsledky analýzy během 1 minuty od aspirace vzorku rychlé zjištění případné infekce 18

19 Měřené parametry v režimu Tělních tekutin WBC-BF Počet bílých krvinek obsažených ve vzorku měřených průtokovou fluorescenční cytometrií MN (%,#) mononukleární buňky = lymfocyty +monocyty PMN (%,#) polymorfonukleární buňky = neutrofilní segmenty + eozinofily + basofily RBC-BF Počet erytrocytů RBC v tělních tekutinách měřený impedanční metodou 19

20 Scattergram tělních tekutin 20

21 Reagencie v Sysmex XE-5000 TM Činidlo Objem Počet analýz Použití CELLPACK 20 L 660 Diluent pro DC analýzu při stanovení RBC a PLT CELLSHEATH 20 L 9500 DC analýza při stanovení RBC a PLT STROMATOLYSER-FB 5 L 2750 Analýza bazofilů a WBC metodou PC STROMATOLYSER-4DL 5 L 2750 Roztřídění WBC metodou PC STROMATOLYSER-4DS 42 ml 2000 Roztřídění WBC metodou PC STROMATOLYSER-NR(L), NR(S) 1 L + 12 ml 550 Analýza počtu a poměru NRBR metodou PC SULFOLYSER 5 L Lyzační činidlo k analýze hemoglobinu SLS- metodou STROMATOLYSER-IM 10 L 3200 Činidlo pro analýzu nezralých buněk metodou RF/DC 1 L + 12 ml 550 Činidla k analýze retikulocytů a opticky analyzovaných trombocytů metodou PC RET SEARCH (II) (diluent) RET SEARCH (II) (barvicí roztok) CELLCLEAN Silný alkalický detergent k odstraňování lyzačních činidel, zbytků buněk a krevních proteinů zůstávajících v hydraulickém systému 21

22 Hlavní obrazovka 22

23 Obrazovka Graf 23

24 Záložka Q-Flags 24

25 Flagové hlášky pro krevní řady Blasty (Blasts?) Suspektní hlášky Q-Flags WBC RBC/RET PLT Nezralé granulocyty (Immature Gran?) Aglutinace RBC (RBC Agglutination?) Zákal HGB (Turbidity/HGB Interf?) PLT shluky (PLT Clumps?) Posun vlevo (Left Shift?) Nedostatek Fe (Iron Deficiency?) Atypické lymfocyty (Atypical Lympho?) HGB defekt (HGB Defect?) Abnormální lymfocyty/blasty (Abn Lympho/L_Blasts?) Fragmenty RBC (Fragments?) Rezistence k RBC lýze (RBC Lyse Resistance?) 25

26 Kontrola kvality Obrazovka s pavučinovým grafem Zobrazení hladiny kontroly, čísla šarže, datum a čas měření X-barM analýza 26

27 Shewhartovy regulační diagramy Používání 3 hladin firemních kontrol Statistické zhodnocení měřených parametrů KO Číselné a grafické zobrazení střední hodnoty, UL a LL regulačních mezí 27

28 Závěr Změření velkého množství vzorků plné krve včetně vybraných vzorků tělních tekutin v krátkém čase Analýza bez přímého kontaktu s krví pacienta Přehledné výstupy výsledků analýzy jak po stránce číselné tak grafické rychlejší vyhodnocení Upozornění na nesrovnalosti ve vzorku pomocí suspektních Flagových hlášek (Q-Flags) včetně jejich grafického znázornění Kompletní záznamy až o 5000 pacientech, včetně grafických Přehledné záznamy kontrol kvality - jejich vyhodnocení Významný přínos nově měřených parametrů pro potřeby kliniků Technologie analýzy XE 5000 TM poskytuje důkladné vyšetření vzorku plné krve 28

29 DĚKUJI ZA POZORNOST

Podobné dokumenty

Nemocnice Na Bulovce Laboratorní příručka

Nemocnice Na Bulovce Laboratorní příručka Strana 1 z 8 Příloha 2: Referenční meze u vyšetření krevního obrazu, retikulocytů, normoblastů a diferenciálního rozpočtu leukocytů Není-li uvedeno jinak, vycházíme z Doporučení ČHS ČLP JEP Referenční