Jana Fauknerová Matějčková

Transkript

1 Jana Fauknerová Matějčková

2 význam klinické biochemie odběr biologického materiálu vyšetření moče vyšetření krve vyšetření mozkomíšního moku, žaludeční šťávy biochemické sady

3 biochemie analytická chemie fyziologie farmakologie imunologie endokrinologie toxikologie výpočetní technika

4 stanovení diagnózy kontrola choroby terapie prevence - screening

5 základní speciální podrobnější diagnóza, monitorování terapie vysoce speciální vzácné diagnózy, monitoring hladiny speciálních léků, metabolické funkce orientační u lůžka, při návštěvě, v ordinaci akutní pohotovostní, neprodleně statim stanovení do 2 hodin

6 75% chyb je způsobeno špatným odběrem na oddělení: nedodržení zásad správného odběru a přípravy pacienta (před a po jídle, v nesprávné poloze, při podávání léků) hemolýza dlouhé stažení paže, nedokončené srážení krve použití nesprávného antikoagulancia při odběru nesrážlivé krve další chyby jsou způsobeny transportem materiálu: nesprávně uskladněný biologický materiál (nedodržení skladovací teploty, světlo apod.) záměna biologického materiálu kontaminace biologického materiálu Asi 25% chyb připadá na personál, který špatně označí údaje na žádance a na materiálu. Chyby může způsobit i laboratoř např. špatné nastavení fotometrů, znečištěné kyvety, nesprávná teplota při inkubaci apod.

7

8 moč krev stolice likvor mozkomíšní mok žaludeční šťáva výpotek

9 odběr ranní moče sbíraná moč 3, 6, 12, 24 hod. vyšetření: fyzikální objem, barva, zápach, zákal, hustota, ph chemické bílkoviny, Glc, ketolátky, žlučová barviva, urobilinogen, Hb, ery, kreatinin, močový sediment

10 kvantitativní stanovení * proteiny (albumin, ELFO) * glukóza * ionty * urea * kreatinin * kyselina močová * -amyláza * toxikologická vyšetření (léky,kovy) * hormony a jejich metabolity: kortizol, testosteron, pregnandiol, aldosteron, hcg, estriol 17-ketosteroidy, 17-hydroxysteroidy kys. vanilmandlová, kys. homovanilová, kys. 5-hydroxyindoloctová (5-HIO)

11 bílkoviny proteinurie - nad 0,15 g/d důkaz kyselinou sulfosalicylovou další vyšetření po námaze, po prochlazení, premenstruační, onemocnění ledvin, metabolické poruchy, srdeční nedostatečnosti glukóza glykosurie nad 1,4 mmol/l proužky Glukophan, Heptaphan Fehlingovo činidlo diabetes mellitus akutní pankreatitida nádory hypertyreóza

12 ketolátky Lestradetovo činidlo, proužky Heptaphan u stavů, které vedou ke ketoacidóze diabetické kóma, hladovění, zvracení, žlučová barviva bilirubin, urobilinogen, strekobilinogen, urobilin, strekobilin hepatitidy, poškození jater nadměrná tvorba bil z Hb krev hemoglobin testační proužky onemocnění ledvin, močových cest choriogonadotropní hormon těhotentsví

13 orgánový ery, leukocyty, epitelie, válce neorgánový krystaly urátů, šťavelanů, fosforečnanů, uhličitanů a jiných solí patogeny mikroby, plísně, kvasinky, prvoci, parazité

14 kapilární glykémie, ketolátky venózní sérum, plazma arteriální pouze lékařem, stanovení dle Astrupa plazma K 2 EDTA, K 3 EDTA sérum antikoagulancia heparin, EDTA, citrát sodný, šťavelany

15 příprava a zpracování vzorků před analýzou náběr krve sérum z celé krve nebuněčná složka krve vzniká po vysrážení plné krve a následným odstraněním krevního koláče neobsahuje fibrinogen a další srážecí faktory krve jímá do obyčejných zkumavek či stříkaček bez jakýchkoliv protisrážlivých látek plazma z venózní, arteriální, kapilární krve tekutá složka krve jímá do zkumavek či stříkaček s protisrážlivými látkami (heparin, EDTA, citrát)

16 HEMOLÝZA (K+, LD, AST) CHYLÓZNÍ SÉRUM HYPERBILIRUBINÉMIE (nad 100 mol/l) rozdíly plazma / sérum při koagulaci se z rozpadlých trombocytů uvolňuje K+ častější hemolýza je u séra

17 vyšetření prováděná v séru ionty Na +, K +, Ca 2+, Mg 2+, Fe 2+, Cu 2+, Cl -, PO 4 3- celkový cholesterol, HDL, TAG, elektroforéza proteinů stanovení glykémie, ogtt stanovení žlučových barviv stanovení enzymových aktivit AST, ALT, LDH, CK, ALP, GMT stanovení hormonů thyreoidální hormony, estradiol, testosteron, kortizol

18 Biochemický analyzátor ADVIA 1650

19 celkový protein (64-83 g/l) albumin (32-45 g/l) ~ 60% ELFO C-reaktivní protein (CRP) do 40 mg/l virové nad 60 mg/l bakteriální fibrinogen prealbumin

20 arteriální krev posouzení vnitřního stavu prostředí přímo se měří ph, pco 2, po 2 software vyhodnotí parametry ABR dle Henderson-Haselbachovy rovnice a určí koncentraci HCO 3 - a případně base excess nebo base deficit u metabolické acidózy se počítá anion gap

21 fyzikální vyšetření barva, zápach, množství mikroskopické vyšetření přítomnost tukových kapének a škrobu onemocnění pankreatu velké množství nenatrávených škrobových zrn chemické vyšetření ph, přítomnost okultního krvácení (pomocí hemokultů) a žlučová barviva screening a prevence tumorů rekta --search-html?nxtg=952e0a cd4e49008f7e

22 liquor cerebrospinalis omývá CNS a míchu normální sterilní, ml diagnostika infekcí nervové soustavy odběr lumbální punkcí mezi bederními obratli L3 a L4 u starších a L4 L5 u mladších lidí u malých dětí punkce pod foramen occipitale

23 fyzikální vyšetření barva likvoru norma je čirá tekutina zákal při bakteriální kontaminaci červené zbarvení přítomnost krve chemické vyšetření Glc (45% glykémie),u infekcí se snižuje (bakterie) chloridy, bílkoviny - Ig mikroskopické vyšetření lymfocyty normálně granulocyty, monocyty, plazmatické buňky, erytrocyty, makrofágy, nádorové buňky chorobné

24 onemocnění dvanáctníku a žaludku odběr pomocí sondy fyzikální vyšetření vzhled, barva, zápach normální bezbarvá vyšetření žaludeční acidity - kvantitativně pomocí sondy

25 obecný biochemický soubor screeningový soubor cílené (orgánové) biochemické soubory soubor pro vyšetření ledvin soubory syndromově specializované ověření diagnózy, pro určení metabolického rizika soubor pro odhalení rizika urolithiázy

26 venózní krev koncentrace iontů: Na +, K +, Cl -, HCO 3-, Ca 2+ glykémie krevní obraz a sedimentace jaterní enzymy: ALT, AST koncentrace močoviny (urea) a kreatininu koncentrace lipidů a cholesterolu moč přítomnost bakterií a leukocytů známka zánětu přítomnost bílkovin přítomnost erytrocytů a hemoglobinu známka krvácení v ledvinách nebo močových cestách

27 základní vyšetření ALT, AST, GMT, ALP, bilirubin, U-urobilinogen, U- bilirubin, celkový albumin Speciální vyšetření: ELFO bílkovin, prealbunim, glutamátdehydrogenáza, cholinesteráza, laktátdehydrogenáza, o-gtt, P-Fe Vysoce speciální vyšetření: ceruloplasmin, S-Cu, α1-antitrypsin, amoniak, P- žlučové kyseliny, serologická vyšetření při infekci virem hepatitidy B, stanovení koagulačních faktorů, které jsou syntetizovány v játrech

28 ALT (alaninaminotransferáza) cytoplasmatický enzym lokalizovaný především v hepatocytu do krve se dostává při poškození buněčné membrány (při malém poškození) katalyzuje přenos aminoskupiny z L-ala na 2- oxoglutarát za vzniku pyruvátu a L-glutamátu reakce volně reverzibilní, uplatňuje se při syntéze, odbourávání a přeměně amk zvýšení specifické pro jaterní postižení (akutní virová hepatitida) norma 0,6 1,0 kat/l

29 AST (aspartátaminotransferáza) nitrobuněčný enzym obsažený především v srdečním svalu, játrech a kosterním svalstvu cytoplazmatický a mitochondriální izoenzym katalyzuje přenost aminoskupiny z L-aspartátu na 2-oxoglutarát za vzniku oxalacetátu a L- glutamátu zvýšení u chorob jater (AST vyšší než ALT svědčí o nekróze buněk) snížení v terminální fázi jaterního selhání norma 0,7 1,0 kat/l

30 GMT (gamaglutamyltransferáza) indikátor hepatobiliárního poškození, zvláště u chronických stavů a při cholestase (nejvyšší hodnoty při obstrukci žlučových cest) katalyzuje přenos g-glutamylu z glutathionu na amk a umožňuje transport amk přes buněčnou membránu do cytosolu nejcitlivějším ukazatelem poškození jater alkoholem, metastatické procesy v játrech u virové hepatitity v rekonvalescenci (hodnocení průběhu) norma do 1,0 kat/l

31 ALP (alkalická fosfatáza) hodnoty: 1-10 let 1,12-6,2 kat/l let 1,35-7,5 kat/l let 0,66-2,2 kat/l celková aktivita 4 enzymů (jaterní, kostní, střevní, placentární) katalyzuje hydrolýzu fosfátových esterů při alkalickém ph hepatobiliární onemocnění (obstrukce, abscesy, metastázy) ACP kyselá foafatáza hodnoty: Muži: nkat/l Ženy: 0-92 nkat/l tkáň prostaty, buňky kostní tkáně = osteoklasty, tkáň ledvin, v erytrocytech a trombocytech aktivita stoupá u karcinomu prostaty, při odbourávání kostní tkáně, onemocnění ledvin (je zadržována v krvi), u hemolytických anémií a trombóz

32 bilirubin je uvolněn do krve hodnoty: celkový 2,0-17,0 mol/l konjugovaný 0,0-5,1 mol/l velmi špatně rozpustný v plazmě transport ve vazbě na albumin ( nekonjugovaný bilirubin = nepřímý ) v játrech bil odstraněn z albuminu a přijat hepatocyty zvýšení rozpustnosti (polarity) kyselinou glukuronovou bilirubindiglukosiduronát COOH rozpustný ve vodě, konjugovaný bilirubin = přímý O OH OH OH OH kyselina glukuronová

33 do jater konjugace s kys. glukuronovou UDP glukuronát + bilirubin bilirubin glukosiduronát bilirubin glukosiduronát žluč střevo redukce na urobilinogen a sterkobilinogen urobilinogen a sterkobilinogen reabsorbovány a zpět do jater (enterohepat. cirkulace) oxidovány na barvivo urobilin (oranžový) a sterkobilin (žlutý) vyloučení stolicí urobilinogen vylučován i močí

34 Hemolytický ikterus = žloutenka zvýšená tvorba při nadměrném rozpadu Hb: převaha nekonjugovaného bilirubinu, chybí bilirubinurie novorozenecký ikterus, hemolytické anémie, hemolysa po transfuzi Hepatocelulární ikterus nedostatečné vychytávání a poruchy transportu v jaterních buňkách: zvýšený konjugovaný i nekonjugovaný bilirubin hepatitidy, toxické poškození jater, jaterní cirhosa, selhání jater, extrahepatální uzávěr, záněty žlučových cest a žlučníku Obstrukční ikterus porucha odtoku žluče z jater funkce jater je normální, konjugovaný bil se vylučuje močí

35 AST kreatinkináza CK myoglobin troponin LDH

36 kreatinkináza cytoplazmatický enzym katalyzuje fosforylaci kreatinu na kreatinfosfát pomocí ATP obsažena v kosterním svalstvu, v myokardu a v mozkové tkáni dvě podjednotky M (muscle) a B (brain) tři izoenzymy CK-BB (CK-1, mozkový izoenzym) CK-MB (CK-2, myokardiální izoenzym) CK-MM (CK-3, svalový izoenzym)

37 kardiomyocyt pracuje za aerobních podmínek, zdrojem energie jsou MK a ketolátky ischemie myokardu angina pectoris při poškození po infarktu myokardu vyplavování kreatinkinázy izoenzym se stanovuje 4-5 hod. po IM CK se vylévá i při poškození hladkého svalstva

38 troponin bílkovina, obsahuje 3 podjednotky Tn-I, Tn-T, Tn-C troponin T se váže k molekule tropomyosinu troponin C váže kalciové ionty (bez kterých by neprobíhala kontrakce troponin I inhibuje vazbu aktinu a myosin. Tn-I a Tn-c - jedinečné aminokyselinové složení, specifické pro myokard kardiální izoformy TnT a TnI obsaženy v kontraktilním aparátu nekróza kardiomyocytů zvýšení Tn-I a Tn-T sérové hladiny Tn-I stoupají 4 hod. po IM u dospělého jsou 2 izoformy Tn-T: Tn-T1 a Tn-T2 sérové hladiny Tn-T2 stoupají během 4 hod. po IM a zůstávají vysoké asi 14 dní

39 myoglobin vysoce nespecifický marker pro srdeční sval ve tkáni svalů uchovává kyslík při nedostatku O 2 je uvolňován a využíván mitochondriemi svalu k syntéze ATP váže kyslík pevněji než Hb, nedokáže ale uvolnit O 2 a transportovat ho do periferních tkání, uvolní ho až ve svalu (nižší po 2 ) jeho koncentrace se zvyšuje při jakémkoliv hematomu nebo při i.v. podání myorelaxancií

40 exokrinní činnost pankreatu - -amyláza při akutní pankreatitidě rychle stoupá a pak rychle klesá katalytická aktivita v séru při chronické pankreatitidě přetrvává vysoká aktivita -amylázy v séru -amyláza Mr = prochází přes glomeruly v ledvinách aktivita se měří i v moči

41 analyt P-amoniak S-amyláza ALP bilirubin S-bílkovina S-ferritin S-glukóza S-cholesterol patologie selhání jaterní funkce, Reyův syndrom, metabolické defekty enzymů v cyklu tvorby močoviny onemocnění pankreatu, choroby jater, chronické onemocnění ledvin choroby jater a žlučových cest, choroby kostí, choroby trávicího ústrojí ikterus, hepatitidy dehydratace, cirhóza, zvýšené ztráty, snížená syntéza (především albuminu) ženy g/l, muži mg/l diabetes mellitus, onemocnění nadledvin nebo hypofýzy, hypertyreóza, onemocnění pankreatu do 6,5 mmol/l, nefropatie, hepatopatie,pankreatopatie

42 analyt CK M (kosterní sval), B (mozek), MB - myokard S-kreatinin kyselina močová LDH 5 frakcí S-myoglobin S-železo patologie onemocnění kosterního svalstva, onemocnění myokardu, IM snížené vylučování ledvinou, prerenální příčiny, zvýšená produkce kreatininu, úbytek svalové hmoty, preeklampsie, eklampsie DNA, nedostatečné vylučování ledvinami krevní choroby, mononukleóza, onemocnění myokardu, IM, hepatopatie, svalové onemocnění poškození myokardu nebo kosterního svalstva nedostatek Fe, nedostatečnost resorpce Fe, poruchy transportu Fe, poruchy vestavby Fe do Hb, akutní a chronická infekce, excesivní příjem Fe, poškození jater, hepatitidy, zvýšené odbourávání Fe