Igor Klimíček, Inovace a diferenciace portfolia infekční diagnostiky Roche Pracovní dny Roche pro centralizovanou diagnostiku

Transkript

1 Igor Klimíček, Inovace a diferenciace portfolia infekční diagnostiky Roche Pracovní dny Roche pro centralizovanou diagnostiku

2 Roche cobas e systémy Modulární koncepce umožňuje postavit řešení dle potřeb a přání zákazníka cobas 8000 Až 4 moduly cobas e 801 Do 1200 výsledků/hod. Výkon systémů cobas e 411 Stolní analyzátor Do 85 výsledků/hod. cobas 6000 Max. 2 moduly cobas e 601 Do 340 výsledků/hod. Červen 2016! Počet modulů v systémech

3 cobas e flow Optimální efektivita provozu Opakování reaktivních výsledků Anti-HCV II HBsAg II Syphilis HTLV I/II Chagas* HIV Duo* HCV Duo* Ředění & Avidita HBsAg II quant II (dil) Toxo IgG avidita CMV IgG avidita Dva výsledky, jedno hodnocení HIV Duo* HCV Duo* * Metody ve vývoji

4 Portfolio ID Nejvíce se rozvíjející a inovující indikační skupina v HIV-Ag současnosti anti-hcv II anti-hav anti-hav-igm HIV combi PT HTLV I/II HIV Duo (2.gen. e 801) Q.1/2017 HBsAg II anti-hbs II anti-hbc II Q3/2016 HBsAg II quant. II CMV IgG CMV IgM Rubella IgG Chagas Q1/2017 Rubella IgM anti-hbc-igm CMV IgG avidity Toxo IgG HBeAg HSV-1 IgG Toxo IgM anti-hbe HSV-2 IgG Toxo IgG avidity Syphilis Elecsys nebo TPLA (c 501/c 502) Syphilis - RPR (c 501/c 502)

5 Syfilis Diagnostika Přímá diagnostika Vhodná jen pro manifestní stádia, nelze v latentní fázi Treponema pallidum přítomna v biologickém materiálu Mikroskopie v zástinu, přímá imunofluorescence, PCR Nepřímá diagnostika - průkaz protilátek v séru, plazmě a v likvoru Treponemové testy (TPLA, TPHA, CLIA, ECLIA, konfirmace Western Blot) Specifická detekce protilátek TPP Netreponemové testy (RPR, VDRL) Principem je průkaz nespecifických anti-kardiolipinových protilátek Většina pacientů asymptomatických!!!

6 Syfilis v ČR Vyhláška o lidské krvi č. 143/2008 Sb klíčový parametr pro skrínink dárců krve: Transfúzní oddělení povinný treponemový test Vyhláška č. 306/2012 Sb. 7 odst. 2 - povinně treponemový a netreponemový Prenatální screening Screening novorozenců Předoperační vyšetření Hospitalizace

7 Kompletní plně automatizovaný Roche panel pro testování Syfilis Treponemové testy Elecsys Syphilis TPLA / TPLA 2 (Sekisui) Netreponemový test RPR / RPR 2 (Sekisui) Netreponemový test RPR / RPR 2 (Sekisui) Treponemové testy Elecsys Syphilis TPLA / TPLA 2 (Sekisui)

8 phase out TPLA/RPR (generace 1) Nádobky pro použití na Modular P phase in TPLA2/RPR2 (generace 2) Kazety výlučně pro cobas c 501/502 Pouze u TPLA je možné převést reagencie do kazety Multipack pro použití na c501/502 Již ne pro Modular P!

9 Mediace RPR / RPR2 26 May 2016 page Roche

10 Netreponemové metody Automatizace pouze Sekisui/Roche Aglutinační metody Manual Manuální Automatizovaná VDRL Oxoid Oxoid RPR RPR card card test test Becton Dickinson RPR Biokit Omega, BioRad, LTA Mediace RPR, Mediace RPR2 Sekisui/Roche

11 Mediace RPR formát metody Imunoturbidimetrický aglutinační test Mediace RPR Latexové částice Y Y Y Positivní sérum RPR card test + Lipidové Antigeny (Cardiolipin, Lecithin) Optické měření Agregace Y Y Y Positivní sérum + Karbonový prášek Visuální odečítání

12 Netreponemové metody Automatizace pouze Sekisui/Roche Metoda Mediace RPR RPR card test VDRL Příprava Ready to use Míchání antigenní suspenze TAT 10 min min 10-12min Výkon Konsistence odečítání výsledků 350 testů/hod. (Roche/Hitachi917) 600 testů/hod.(c50x) Velmi dobrá 60 testů/hod. (expert) 100 testů/hod. (expert) V závislosti na individuáních schopnostech Lidská chyba Minimalizována Vyšší výskyt Riziko infekce Minimální Vyšší výskyt Specializovaný trénink Není nutný Nutný automatizovaná manuální metody

13 Mediace RPR klinická sensitivita Vysoká sensitivita 99.5% - pro spolehlivou diagnostiku Syphilis konfirmované positivní vzorky Mediace RPR n Positivní Negativní Cekově 187 pozitivně konfirmovaných vzorků pacientů v různých stadiích onemocnění bylo testováno. Sensitivita v rámci těchto vzorků = 99.5% Osato K et al, Japanese Journal of Sexually Transmitted Diseases 2002; 13(1): Kawai K et al, The Journal of Clinical Laboratory Instruments and Reagents 2003; 26(4):

14 Mediace RPR klinická specifičnost Vysoká specifičnost 99.5% - méně retestování Syphilis negativní vzorky Mediace RPR n Positivní Negativní Celkově testováno 2639 syphilis negativních vzorků. Specifičnost s těmito vzorky = 99.5% Kinjo T et al,. Japanese Journal of Clinical Laboratory Automation (JJCLA), 2005; 30(3):

15 Netreponemové metody Obecné rysy Screening a zejména posouzení aktivity onemocnění a sledování úspěšnosti léčby (vždy spolu s treponemovými testy) 2-10% falešně pozitivních výsledků u pacientů s virovými infekcemi, příušnicemi, infekční mononukleózou, planými neštovicemi, ale také u těhotných, uživatelů drog a po očkování výskyt falešně negativních reakcí v počátku onemocnění před sérokonverzí u pozdní latentní syfilis představuje až 30% případů zonální fenomén u akutní syfilis (1 až 2% případů) Zákoucká, H. (2007). Syfilis - tradiční choroba, současný problém II. Zprávy CEM (SZÚ, Praha).16(10-11):

16 Mediace RPR2 na c 501 Lokální zkušenosti Souprava nevyžaduje manuální zásah uživatele Kalibrace pětibodová na šarži Kalibrační stabilita > 4 měsíce, QC v deklarovaném rozmezí Stanovení vzorků z rutinní praxe 100% shoda s jinými metodami RPR u negativních(61 vzorků) byly zaznamenány jak neshody mezi různými typy metod, tak u hodnocení NRL u pozitivních vzorků = časná nebo latentní fáze onemocnění

17 Mediace RPR2 na c 501 Lokální zkušenosti

18 Organizace EHK v ČR NRL pro diagnostiku Syfilis, SZÚ Praha, EHK č. 876/2015 Výsledek Elecsys Syphilis Výsledek Mediace RPR 2 Vzorek COI Hodnocení Hodnocení Stanovení NRL č.1, R.U. Stanovení č.2, R.U. Hodnocení Hodnocení NRL A B C D E 180,9 170, ,101 reaktivní reaktivní reaktivní reaktivní negativní pozitivní pozitivní pozitivní pozitivní negativní 39,03 35,6 2,71 2,63 2,53 2,55 <0,50 <0,50 0,79 0,73 reaktivní reaktivní reaktivní negativní negativní pozitivní pozitivní pozitivní pozitivní negativní

19 Elecsys HIV combi PT

20 Design metody Elecsys HIV combi PT

21 Elecsys HIV combi PT Pokročilý design metody pro zvýšení bezpečnosti stanovení Pokročilý design metody: 1. Pre-treatment (PT) krok : Lýza viru vedoucí ke zvýšené sensitivitě detekce p24 antigenu 2. Anti-p24 protilátky šité na míru: Včasná detekce infekce, pozdní infekce, a detekce p24 antigenu odvozeného od HIV-1 skupiny M, O a HIV-2 3. Pouze Elecsys HIV combi PT disponuje modulem s antigeny reverzní transkriptázy(rt) 4. Chaperone antigen technologie

22 Bezpečnost Vysoká analytická a sérokonverzní sensitivita Evaluace analytické sensitivity dle p24 WHO referenčního standardu Sensitivita = průměrná hodnota z měření třech různých šarží Elecsys HIV combi PT (COI) Sensitivita 1.05 IU/ml při COI Příbalový leták zajišťuje anal. 8 sensitivitu 2 IU/ml WHO hodnoty standardu (IU/ml) Lepší sensitivita = časnější detekce infekce

23 Elecsys HIV combi PT Pokročilý design metody zvyšuje bezpečnost stanovení 3. Pouze Elecsys HIV combi PT disponuje modulem s antigeny reverzní transkriptázy(rt): RT region genomu je nejodolnější vůči různým mutacím, identický u různých variant virů Detekce všech hlavních skupin genotypů a jejich subtypů, rekombinantních forem, mutantů a HIV-2 Muhlbacher et al. Med Microbiol Immunol 2012

24 Elecsys HIV combi PT Pokročilý design metody zvyšuje bezpečnost stanovení Chaperone molekula Virový antigen 4. Chaperone antigen technologie Optimalizovaný design nativních 3-D struktur a vystavění epitopů gp41 a gp36 pro zvýšení sensitivity. Target Chaperone Target Chaperone Chaperone Target Chaperone Carrier Concept published in Scholz et al., J. Mol. Biol. (2005) 345, & Scholz et al., Biochemistry (2006) 45, 20-33;

25 Rekombinantní antigeny HIV v nativní konformační struktuře 26

26 Spolehlivost a bezpečnost Detekce všech důležitých skupin a jejich subtypů Elecsys HIV combi PT (reaktivní/positivní) HIV-1 skupina M, subtypy 629/629 A, A1, A2, A/B, A/C, A/E/C, CRF02_AG B, B/A, B/C, CRF14_BG C, C/A, C/B, C/E D E, E/A/C, E/C, E/D, CRF01_AE (=E) F F1 G H J CRF06_cpx CRF11_cpx CRF13_cpx 72/72 262/ /168 16/16 59/59 7/7 2/2 16/16 1/1 1/1 1/1 1/1 3/3 HIV-1 skupina O 8/8 HIV-2 472/472 Data z CE evaluační studie Elecsys HIV combi PT

27 Spolehlivost a efektivita Vysoká klinická specifičnost u dárců a pacientů Centrum evaluace Bangkok Dolo Innsbruck Santiago Lausanne Lisbon Mönchengladbach Munich Sydney Průměrná specifičnost (95% CI) Dárci krve 99.93% (n=1500) 99.87% (n=1485) 99.86% (n=2834) 99.87% (n=1524) 99.88% ( ) Data z CE evaluační studie Elecsys HIV combi PT Neselektované rutinní vzorky(dialýza, těhotenství) % (n=305) 99.78% (n=467) 99.80% (n=1000) 99.42% (n=700) % (n=249) 99.74% ( )

28 Elecsys Anti-HBc II

29 Elecsys Anti-HBc II Vylepšená klinická specifičnost Cíl projektu: zvýšit specifičnost Elecsys Anti-HBc(99,7% dárci, pacienti neuvedeno) 100 testů / 200 testů v balení Formát metody: podobný se současnou generací, 27 min. Uvedení plánováno na Q Předběžné výsledky na dalších slidech

30 Elecsys Anti-HBc II Předběžná data Klinická sensitivita Celkem 793 vzorků pacientů. Stupně onemocnění n reactive Chronická nebo akutní HBV infekce (Anti-HBc positive, HBsAg positive) Prodělaná HBV infekce (Anti-HBc positive, HBsAg negative, Anti-HBs positive, Anti-HBe negative) Prodělaná nebo vyléčená HBV infekce (Anti-HBc positive, HBsAg negative, Anti-HBs negative, Anti-HBe positive) 9 9 Prodělaná nebo vyléčená HBV infekce (Anti-HBc positive, HBsAg negative, Anti-HBs positive, Anti-HBe positive) Klinická sensitivita metody Elecsys Anti-HBc II byla v této studii 100%

31 Elecsys Anti-HBc II Předběžná data Klinická specifičnost Celkem vzorků. Kohorta n Klinická specifičnost 95% confidence limit (%) (%) Dárci krve (serum) Dárci krve (EDTA plasma) Rutinní hospitalizovaní pacienti Dialyzovaní pacienti Těhotné ženy Specifičnost Elecsys Anti-HBc II by mohla být signifikantně vylepšena oproti současné první generaci metody(99,6% - iniciačně reaktivní, 99.7% - opakovaně reaktivní u dárců)

32 Portfolio ID Nejvíce se rozvíjející a inovující indikační skupina v HIV-Ag současnosti anti-hcv II anti-hav anti-hav-igm HIV combi PT HTLV I/II HIV Duo (2.gen. e 801) Q.1/2017 HBsAg II anti-hbs II anti-hbc II Q3/2016 HBsAg II quant. II CMV IgG CMV IgM Rubella IgG Chagas Q1/2017 Rubella IgM anti-hbc-igm CMV IgG avidity Toxo IgG HBeAg HSV-1 IgG Toxo IgM anti-hbe HSV-2 IgG Toxo IgG avidity Syphilis Elecsys nebo TPLA (c 501/c 502) Syphilis - RPR (c 501/c 502)

33 Doing now what patients need next