materiál KONEČNÝ VÝSLEDOK 1. Deň Pt. s predpokladanou infekciou rýchle identifikačné testy biochemické testy testy citlivosti na ATB 3.

Transkript

1

2 Pracovníci v laboratóriu musia disponovať progresívnymi metodickými postupmi, pomocou ktorých môžu zrýchľovať a spresňovať izoláciu a identifikáciu mikroorganizmov vrátane stanovenia ich citlivosti na antibiotiká Sa zaoberá etiológiou, patogenézou, epidemiológiou, terapiou a špecifickou profylaxiou ochorení vyvolaných baktériami Základnou úlohou lekárskej mikrobiológie je identifikovať pôvodcu ochorenia, zaradiť ho do systému a určiť jeho dôležité medicínske vlastnosti, posúdiť jeho patogenitu, citlivosť na antibiotiká a chemoterapeutiká

3 1. Deň Pt. s predpokladanou infekciou materiál mikrobiologické laboratórium mikroskopické vyšetrenie kultivácia sérologické testy predbežné hlásenie 2. Deň vyšetrenie izolovaných bakteriálnych kolónií 3. Deň rýchle identifikačné testy biochemické testy testy citlivosti na ATB Vyhodnotenie identifikačných testov, a testov citlivosti baktérií na ATB /predĺžená inkubácia: anaeróbne baktérie / Interpretácia získaných výsledkov: mikroskopických, kultivačných, identifikačných so zreteľom na druh materiálu, dg., a ďalšie faktory KONEČNÝ VÝSLEDOK

4 Správneho odberu, rešpektovania patogenézy ochorenia, správneho a včasného zaslania materiálu do laboratória, ako aj formulovania požiadaviek na vyšetrenie Klinický pracovník by mal poznať základné vlastnosti jednotlivých mikroorganizmov, pretože musí posúdiť, ktorá z izolovaných a identifikovaných baktérií je pôvodcom ochorenia a aké závery treba vyvodiť z laboratórneho nálezu Posúdenie etiológie ochorenia a patogenity identifikovaných kmeňov je záležitosťou tak klinického pracovníka, ako i klinického mikrobiológa

5 Po interpretácii výsledkov mikroskopického a kultivačného vyšetrenia Sú založené na špecifických chemických vlastnostiach či kultivačných podmienkach Klasické metódy priamej diagnostiky Mikroskopické vyšetrenie Kultivačné vyšetrenie Pokročilé metódy priamej diagnostiky Špecifické testy, biochemické testy, detekcia antigénu, citlivosť na ATB Moderné metódy priamej diagnostiky Detekcia DNA

6 V mikrobiologickej diagnostike sa čoraz častejšie uplatňujú rýchle identifikačné testy, založené na imunochromatografickej metóde

7 Vysokošpecifické testy Vysokocitlivé imunochromatografické testy Jednoduché testy, bez nutnosti použitia špeciálneho prístrojového vybavenia Nutnosť manipulácie so vzorkou (moč, stolica) Cena Rýchle odčítanie výsledku

8 Virusové gastroenteritídy (vracanie, hnačky vodnaté, kŕče... U detí hnačky zapríčinené rotavírusmi A tiež aj u dospelých a starých ľudí NoRotAdeno je jednokrokový farebný imunochrom. test na kvalitatívnu detekciu noro, rota a adenovírusov v stolici Na testovacích zónach membrány kazety sú naviazané špecifické monoklonálne protilátky proti vírusovým antigénom V priebehu testovania vzorky reaguje s konjugátom (anti-noro, antirota alebo anti-adenovirové protilátky), ktoré boli imobilizované na membráne Zmes konjugátu a vzorky sa pohybuje smerom hore kapilárnou vzlínavosťou. Vprípade pozitivity sa na testovacej kazete objavia farebné línie Odber: Detekcia vírusov sa zlepší odberom vzorky na začiatku výskytu symptómov - vzorka stolice do čistej, suchej nádoby Transport: do 6 hodín po odbere, vzorky sa uchovávajú pri teplote 2-8 C Účinnosť testu: Norovirus: senzitivita 96,2%, špecificita 100% Rotavírus: zistená vysoká citlivosť, na detekciu rota- senzitivita 100%, špecificita 98,4% Adenovírus: senzitivita 100%, špecificita 100%

9 Vírus Inkubačný čas (dni) Inf. dávka (počet viriónov) Kontagiozita Vylučovanie vírusu z org. (dni) Infekčnosť pt. (dni) Prežívanie vírusu v prostredí Adeno 5-7 neznáma mierna dní-3m. Rota 1-2 <100 vysoká dní Noro hod vysoká h.-7 dní Max. exkrécia rotavírusov v stolici u pt. s gastroenteritídou je po 3-5 dňoch a pri adenovírusoch po 3-13 dňoch po objavení symptómov Tieto dni sú najvhodnejšie na odber vzorky Skladovanie: 1-2 dni v chladničke potom v mrazničke (-20 C) až 1rok Neskôr množstvo antigénu klesá, nemusí byť pozitivita zachytená

10 Je špirálovitá baktéria, ktorá býva nájdená na žalúdočnej sliznici alebo adheruje k epitelu žalúdka. H. pylori je príčinou viac ako 90% vredov duodena a viac než 80% žaludočných vredov H. pylori je jednokrokový farebný imunochrom. test na kvalitatívnu detekciu Helicobacter pylori v stolici Účinnosť testu: Senzitivita: 95% Špecificita: 99% * Vzorky (nie vodnaté alebo odobrané pri hnačke) do čistej suchej odberovej nádoby * Test musí prebehnúť čo najskôr po odobratí vzorky stolice (ak to nie je možné, dajú sa vzorky stolice uchovať 1-2 dni pred testovaním v chladničke pri 2-4 C * V prípade dlhšieho skladovania, max. 1 rok zmrazené pri -20 C

11 Clostridium difficile je grampozitívna sporulujúca anaeróbna palička,ktorá sa vyskytuje v čreve v približne 5% u dospelých, u detí a dojčiat je výskyt C.d. vyšší Baktéria produkuje toxíny, ktoré sú schopné spôsobiť postihnutie čreva, vyvolať až život ohrozujúcu pseudomembanóznu enterokolitídu Tieto ochorenia často vznikajú ako nozokomiálne infekcie Clostridium difficile Toxin A&B Test je imunochromatografický rýchlotest na kvalitatívny dôkaz antigénov Clostridium difficile toxín A a B vo vzorkách stolice Odber: Vzorky stolice musia byť odobrané čo najskôr po prepuknutí príznakov Účinnosť testu v porovnaní s testom cytotoxicity: Senzitivita: 76,7% Špecificita: 94,8%

12 Giardia a Cryptosporidium sú paraziti nachádzajúce sa vo vode Spôsobujú črevné ochorenie giardiózu a kryptosporidiózu (hnačkovité ochorenie, kŕče žalúdka a nevoľnosť Tieto infekcie sú najčastejšou príčinou ochorenia z vody (sú v pitnej vode a vo vode na rekreačné účely) u človeka Giardia- Crypto je kvalitatívny imunochrom. test na stanovenie antigénov parazitov Cryptosporidium Parvum a Giardia lamblia v stolici Odber: Vzorky stolice musia byť odobrané čo najskôr...ak to nie je možné, vzorky sa uchovávajú 1-2 dni pred testovaním v chladničke 2-10 C Citlivosť a špecificita: Boli testované vzorky stolice (Giardia a Cryptosporidium pozitívnych a negatívnych testovaných mikroskopicky) senzitivita pre Giardia >99%, pre Cryptosporidium >99% senzitivita 93,8%, špecificita pre Giardia >99%, pre Cryptosporidium >99%

13 Legionella pneumophila Legionella pneumophila je gramnegatívna palička, ktorá je pôvodcom ochorenia legionelóza Sú prítomné príznaky pneumónie a zároveň gastrointestinálne symptómy Je zodpovedná za 80-90% nahlásených prípadov legionálnych infekcií Legionella pneumophila sérotyp 1 Spôsobuje viac než 70% týchto legionelóz Účinnosť testu v porovnaní s testom cytotoxicity: Senzitivita: 95% Špecificita: 95% Legionella Test poskytuje rýchlu diagnózu Legionella pneumophila sérotyp 1 Deteguje špecifický rozpustný antigén vylučovaný v moči pt. Test je rýchly a poskytuje výsledky do 15 minút Výhodou je, že používa ako vzorku moč, ktorá je ľahko dosiahnuteľným a transportovaným materiálom Odber: Moč v štandardnej odberovej nádobe, môže byť skladovaný 24 hod. pri lab. teplote

14 Text in here Chrípka A/B je nákazlivá vírusová infekcia Táto infekcia napáda predovšetkým oblasť krku, nosa, priedušiek, ojedinele pľúca pričom spôsobuje horúčku a kašeľ Účinnosť testu v porovnaní s ostatnými testami: On Site Influenza A: senzitivita 95,7%, špecificita: 100% On Site Influenza B: senzitivita 93,8%, špecificita 98,1% Z dôvodu viacerých svetových epidemických ohnísk chrípky A/B a rýchleho šírenia ochorenia je naliehavá potreba rýchlej diagnostiky a skríningu pt. Test Influenza A/B je rýchly imunochrom. test, ktorý poskytuje okamžitý výsledok testu na špecifický antigén chrípky bez použitia špeciálneho prístrojového vybavenia Odber: Sterilné odberové tampóny určené len pre tento test (Po telefonickom dohodnutí pre pt. takýto tampón poskytneme, hlavne pre ťažký stav a hospitalizovaných pt.). Testovanie by malo byť uskutočnené hneď po odobratí vzorky. Vzorky odobraté z nosa môžu byť skladované pri teplote 1-8 C po dobu jedného dňa.

15 V mikrobiologickej diagnostike sa čoraz častejšie uplatňujú rýchle identifikačné testy, založené na imunochromatografickej metóde Cieľom prednášky Vás bolo oboznámiť s testami, ktoré máme k dispozícii na našom oddelení

16